本實用新型涉及醫(yī)療器械技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種基于多級透析法去除細(xì)胞低溫保護(hù)劑的微裝置，其可用于細(xì)胞低溫保護(hù)劑清除，也可拓展用于紅細(xì)胞載藥或細(xì)胞標(biāo)記。

背景技術(shù)：

低溫保存是用于生殖醫(yī)學(xué)、組織再生和細(xì)胞治療等領(lǐng)域珍貴細(xì)胞保存的重要技術(shù)。低溫保護(hù)劑能夠使細(xì)胞在低溫保存過程中避免低溫?fù)p傷，但是因其負(fù)面效應(yīng)，使用前需將其清除。一些臨床治療(如：干細(xì)胞/免疫細(xì)胞治療等)和基礎(chǔ)研究(如片上細(xì)胞實驗室、組織工程等)過程中所需細(xì)胞樣品大部分為冷凍細(xì)胞液且細(xì)胞樣品量較少，如果使用樣品前不將其中的低溫保護(hù)劑去除則會影響臨床治療效果和基礎(chǔ)研究的結(jié)果。因此，有效地去除低溫保存的微量珍貴細(xì)胞樣品中的低溫保護(hù)劑對于臨床治療和基礎(chǔ)研究極為重要。

目前，主要通過離心的方法去除細(xì)胞懸浮液中的低溫保護(hù)劑。雖然此方法能在一定程度上去除低溫保護(hù)劑，但其過程中滲透壓的變化、機(jī)械應(yīng)力、細(xì)胞聚集以及去除甘油時間不可控性均會對細(xì)胞造成損傷，同時其開放環(huán)境會造成細(xì)胞污染?；谥锌绽w維的透析和過濾法無法實現(xiàn)低溫保護(hù)劑的自動清除。更為重要的是，這些方法僅用于大體積細(xì)胞懸液，并不適用于微量細(xì)胞樣品。因此，發(fā)展快速、有效、安全的去除微量細(xì)胞中低溫保護(hù)劑的方法非常必要。

近年來，隨著微流控技術(shù)、軟刻蝕技術(shù)和光刻技術(shù)的發(fā)展，可以實現(xiàn)對細(xì)胞以及其周圍的微環(huán)境可控精準(zhǔn)操作，如細(xì)胞分離、細(xì)胞分析以及細(xì)胞載體介質(zhì)的交換等。因此，微流控芯片能用于有效的控制去除低溫保護(hù)劑過程中細(xì)胞的行為以及細(xì)胞所處的溶液環(huán)境，從而可解決傳統(tǒng)法去除低溫保護(hù)劑過程中所遇到的問題。目前雖已有微流控技術(shù)用于低溫保護(hù)劑的去除，但是現(xiàn)有低溫保護(hù)劑清除微裝置清除效率低、細(xì)胞損傷大、細(xì)胞回收率低以及流體條件的不可控性依然限制其推廣和應(yīng)用。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

有鑒于此，本實用新型的目的在于提供一種基于透析法連續(xù)性地清除細(xì)胞低溫保護(hù)劑的微裝置，本實用新型提供的微裝置能夠安全、有效地去除低溫保護(hù)劑，減少細(xì)胞的機(jī)械損傷和滲透壓損傷，提高細(xì)胞的存活率和回收率。

本實用新型提供了一種基于透析法連續(xù)地清除細(xì)胞低溫保護(hù)劑的微裝置，其包括：

帶有第一通道的上層芯片，所述第一通道的深度小于上層芯片的厚度，所述第一通道位于上層芯片的下表面；

所述第一通道包括細(xì)胞懸液通道和4個透析單元；

帶有第二通道的下層芯片，所述第二通道的深度小于下層芯片的厚度，所述第二通道位于下層芯片的上表面；

所述第二通道包括透析液產(chǎn)生區(qū)、透析液收集區(qū)和4個透析單元，其中透析液產(chǎn)生區(qū)中設(shè)置4個混合器；

所述上層芯片和下層芯片從上到下依次排列；在改變上層芯片和下層芯片入、出口的情況下，其位置順序相應(yīng)顛倒；

設(shè)置在所述第一通道的透析單元和第二通道的透析單元之間的多孔膜，所述多孔膜的一面覆蓋于所述第一通道的透析單元，另一面覆蓋所述第二通道的透析單元；

所述第一通道的入口和出口與第二通道的入口和出口相互之間獨(dú)立。

所述第一通道的透析單元、第二通道的透析單元和多孔膜構(gòu)成透析執(zhí)行單元。

優(yōu)選的，所述上層芯片和下層芯片的材質(zhì)獨(dú)立地選自有機(jī)玻璃或者聚二甲基硅氧烷。

優(yōu)選的，所述上層芯片和下層芯片的面積獨(dú)立地在64平方厘米～225平方厘米的范圍內(nèi)，厚度獨(dú)立地在0.5～1cm的范圍內(nèi)。

優(yōu)選的，所述第二通道的設(shè)計方式為級聯(lián)式網(wǎng)絡(luò)。

優(yōu)選的，所述第一通道和第二通道獨(dú)立地為矩形凹槽，所述凹槽的深度可變，寬度可變，裝置尺寸可變。

優(yōu)選的，所述第二通道中設(shè)置有混合器，所述混合器獨(dú)立地為改進(jìn)的特斯拉混合器。

優(yōu)選的，所述第一通道和第二通道的透析單元為嵌有高低交錯排列的微型圓柱陣列的矩形凹槽，所述矩形凹槽的寬度遠(yuǎn)大于凹槽的深度。

優(yōu)選的，所述第一通道和第二通道每一級透析單元中心的壓力相同。

優(yōu)選的，所述多孔膜為聚偏氟乙烯微孔濾膜。

在本實用新型的另一方面，所述基于透析法連續(xù)地清除細(xì)胞低溫保護(hù)劑的微裝置可用于連續(xù)地清除細(xì)胞低溫保護(hù)劑，也可拓展用于紅細(xì)胞載藥和細(xì)胞標(biāo)記。

在本實用新型提供的一種清除細(xì)胞低溫保護(hù)劑的微裝置中，所述第二通道透析液產(chǎn)生區(qū)產(chǎn)生變濃度和變流量的透析液，隨后透析液和細(xì)胞懸浮液流入透析執(zhí)行區(qū)，逐級地在透析執(zhí)行區(qū)中實現(xiàn)低溫保護(hù)劑的清除，這種去除低溫保護(hù)劑的微裝置能安全、有效地去除細(xì)胞懸浮液中的低溫保護(hù)劑，具有較高的細(xì)胞存活率和回收率。

附圖說明

為了更清楚詳細(xì)地說明本實用新型實施例或現(xiàn)有技術(shù)中的技術(shù)方案，下面將對實施例或現(xiàn)有技術(shù)描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹，顯而易見地，下面描述中的附圖僅是本實用新型的實施例，對于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來講，在不付出創(chuàng)造性勞動的前提下，還可以根據(jù)提供的附圖獲得其他的附圖。

圖1為本實用新型實施例中提供的一種清除細(xì)胞低溫保護(hù)劑的微裝置的上下層芯片概念圖與裝置的結(jié)構(gòu)示意圖，其中(a)為帶有第一通道的上層芯片概念圖，(b)為帶有第二通道的下層芯片概念圖，(c)為裝置結(jié)構(gòu)圖，(1)為上層芯片結(jié)構(gòu)圖，(2)為下層芯片結(jié)構(gòu)圖，(3)為中間過濾膜結(jié)構(gòu)圖；

圖2為本實用新型實施例中提供的一種清除細(xì)胞低溫保護(hù)劑的微裝置中透析液產(chǎn)生區(qū)的結(jié)構(gòu)示意圖，其中T為改進(jìn)的特斯拉混合器；

圖3為本實用新型實施例中提供的一種清除細(xì)胞低溫保護(hù)劑的微裝置中透析單元結(jié)構(gòu)示意圖，其中A是透析單元的橫切面示意圖，B是A中沿虛線a的切面，C是A中沿虛線b的切面，D是A中沿虛線c的切面，E是A中沿虛線d的切面，F(xiàn)是A中沿虛線e的切面，f為低柱子，g為高柱子。

具體實施方式

下面將結(jié)合本實用新型實施例中的附圖，對本實用新型實施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例僅是本實用新型一部分實施例，而不是全部的實施例?；诒緦嵱眯滦椭械膶嵤├?，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本實用新型保護(hù)的范圍。

本實用新型提供了一種清除細(xì)胞低溫保護(hù)劑的微裝置，包括：

帶有第一通道的上層芯片，所述第一通道的深度小于上層芯片的厚度，所述第一通道位于上層芯片的下表面；

所述第一通道包括細(xì)胞懸液驅(qū)動單元，其中設(shè)置4個透析單元；

帶有第二通道的下層芯片，所述第二通道的深度小于下層芯片的厚度，所述第二通道位于下層芯片的上表面；

所述第二通道包括透析液產(chǎn)生區(qū)、透析液收集區(qū)和4個透析單元，其中4透析液產(chǎn)生區(qū)中設(shè)置4個混合器；

所述上層芯片和下層芯片從上到下依次排列，如果改變上層芯片和下層芯片入、出口，其位置順序相應(yīng)顛倒；

設(shè)置在所述第一通道和第二通道的透析單元之間的多孔膜，所述多孔膜的一面覆蓋于所述上層芯片的透析單元，另一面覆蓋所述下層芯片的透析單元；

所述第一通道的入口和出口與第二通道的入口和出口相互之間獨(dú)立。

所述第一通道的透析單元、第二通道的透析單元和多孔膜構(gòu)成透析執(zhí)行單元。

以下以清除細(xì)胞低溫保護(hù)劑為例說明本實用新型的裝置。

本實用新型提供的一種清除細(xì)胞低溫保護(hù)劑的微裝置，其包括帶有第一通道的上層芯片和第二通道的下層芯片，所述通道的深度小于芯片的厚度，所述第一通道位于上層芯片的下表面，所述第二通道位于下層芯片的上表面。如圖1所示，圖1為本實用新型實施例提供去除細(xì)胞懸浮液中低溫保護(hù)劑工作平臺的上下層芯片概念圖與裝置的結(jié)構(gòu)示意圖。本實用新型對所述上、下層芯片的形狀、材料沒有特殊的限制，滿足實際操作條件即可。在本實用新型的實施例中，所述上、下層芯片的形狀為正方形，材料為有機(jī)玻璃(PMMA)，長寬高為12.8cm×12.8cm×0.6cm；在其他的實施例中，芯片的形狀可為圓形或方形，材料可為聚二甲基硅氧烷(PDMS)，可通過改變通道深度和寬度調(diào)節(jié)芯片的尺寸大小，芯片的面積可為64～225平方厘米，芯片的厚度可為0.5～1cm。

本實用新型提供的一種清除細(xì)胞低溫保護(hù)劑的微裝置包括帶有第一通道的上層芯片，所述第一通道位于芯片下表面且其深度小于芯片的厚度。所述第一通道包括細(xì)胞懸液通道和4個透析單元，透析單元如圖3所示，圖3為本實用新型實施例提供的連續(xù)性去除細(xì)胞懸浮液中低溫保護(hù)劑工作平臺中透析單元的結(jié)構(gòu)示意圖。在本實用新型的實施例中，所述透析單元的設(shè)計方式為在矩形凹槽中嵌入高低交錯、有序排列的微型圓柱陣列，圓柱陣列高度不同。矩形凹槽的長為5.0cm，寬為1.5cm，深度為0.5㎜。本實用新型中透析單元凹槽的寬度遠(yuǎn)大于深度時，會增強(qiáng)傳輸物質(zhì)的傳質(zhì)面積，減少傳輸物質(zhì)流動的阻力，進(jìn)而有利于細(xì)胞外低溫保護(hù)劑的清除以及較少工作平臺動力損耗。所述微型圓柱陣列(直徑均為1mm)由0.5㎜和0.25㎜兩種高度(或深度)的圓柱組成，高低柱按照垂直于流體流向的波浪式方式分布，一組波浪式的高柱子，一組波浪式的低柱子，圓柱中心間隔為2㎜；采用這種有序高低交錯的方法可以使溶液充分混合和速度均勻分布，實現(xiàn)透析執(zhí)行區(qū)的充分傳質(zhì)，進(jìn)而能夠?qū)崿F(xiàn)快速高效地去除低溫保護(hù)劑；所述圓柱陣列對細(xì)胞阻力較小，大幅度地提高細(xì)胞回收率。微型圓柱高柱高度與矩形凹槽的深度相同，低柱高度小于矩形凹槽的深度0.25㎜。在其他實施例中，圓柱陣列高度可變范圍為0.1～0.5mm，排列方式可變。

本實用新型提供的一種清除細(xì)胞低溫保護(hù)劑的微裝置包括帶有第二通道的下層芯片，所述第二通道位于芯片上表面且其深度小于芯片的厚度。所述第二通道由級聯(lián)式網(wǎng)絡(luò)構(gòu)成，包括透析液產(chǎn)生區(qū)、透析液收集區(qū)和4個透析單元，如圖1所示。所述的透析液產(chǎn)生區(qū)中設(shè)置4個改進(jìn)的特斯拉混合器，去離子水和濃縮的透析液以一定的流量比在透析液產(chǎn)生區(qū)的通道中匯合且在混合器均勻混合，之后產(chǎn)生的稀釋的透析液一條支路進(jìn)入透析執(zhí)行區(qū)進(jìn)行透析，另一支路與去離子水再以一定的流量比進(jìn)行下一級的混合，依次逐級實現(xiàn)四個或更多梯度式濃度和變化流量的透析液，如圖2所示，圖2為本實用新型實施例提供第二通道中的透析液產(chǎn)生區(qū)的結(jié)構(gòu)示意圖，T透析液產(chǎn)生區(qū)中混合器的結(jié)構(gòu)示意圖。所述第一通道和第二通道的透析單元的形狀、尺寸、大小以及其中微圓柱陣列的排布一致，在此不再贅述；所述的透析液廢液經(jīng)透析液收集區(qū)流出去除細(xì)胞懸浮液中低溫保護(hù)劑工作平臺。在本實用新型的實施例中，采用這種逐級實現(xiàn)4個變濃度和流量溶液通過微膜透析洗滌細(xì)胞懸浮液能夠更有效地去除低溫保護(hù)劑，減少細(xì)胞的機(jī)械損傷和滲透壓損傷，提高細(xì)胞的存活率和回收率。在其他實施例中，可采用依次逐級實現(xiàn)更多梯度式濃度和變化流量的透析液。

在本實用新型的實施例中，除透析單元外，所述第一、二通道橫截面的形狀為矩形凹槽，所述凹槽的深度固定，寬度可變。在本實用新型的實施例中，所述矩形凹槽通道的寬度可以為0.3～2mm，深度可以為0.5mm；在其他的實施例中，所述通道的寬度可以為0.1mm～2mm，深度可以為0.1mm～0.5mm。本實用新型中除去透析單元，其他采用尺寸較小通道能夠有利于自驅(qū)動傳質(zhì)，利用細(xì)胞膜內(nèi)外的壓力差作為驅(qū)動力驅(qū)動物質(zhì)進(jìn)行流動，有利于細(xì)胞內(nèi)低溫保護(hù)劑的去除。

在本實用新型的實施例中，所述第一通道的透析單元、第二通道的透析單元和透析單元間的過濾膜構(gòu)成透析執(zhí)行單元；所述下層和上層芯片的透析單元能夠完全重合，進(jìn)而確保高柱子支撐過濾膜且獲得最大的透析面積，使本實用新型提供的去除細(xì)胞懸浮液中低溫保護(hù)劑工作平臺具有較高的清除率；所述第一通道和第二通道每一級透析單元中心的壓力相同，使細(xì)胞懸浮液不被稀釋或濃縮。在本實用新型的實施例中，所述上層芯片中的細(xì)胞懸浮液與四級或更多級透析執(zhí)行單元中梯度式透析液實現(xiàn)連續(xù)性透析，級聯(lián)式變濃度和流量的透析溶液和細(xì)胞懸浮液通過膜透析作用下清除低溫保護(hù)劑，此過程中通過膜透析去除細(xì)胞中的低溫保護(hù)劑，達(dá)到快速、安全、高效地去除低溫保護(hù)劑的效果。

本實用新型提供的一種清除細(xì)胞低溫保護(hù)劑的微裝置包括設(shè)置在所述上層芯片的透析單元和下層芯片的透析單元之間的多孔膜，如圖1c(3)所示。在本實用新型中，所述多孔膜的形狀沒有特殊的限制，采用尺寸略大于透析單元能夠?qū)⑺鐾肝鰡卧采w，可以有效地避免細(xì)胞懸浮液外滲，達(dá)到增加去除低溫保護(hù)劑的效果和減少去除過程中的細(xì)胞損失的目的；所述孔膜可以為親水性的聚醚砜膜(PES)或者聚偏二氟乙烯膜(PVDF)，其中PES多孔膜具有高流率、低溶出物、良好的強(qiáng)度、生物相容性高、可高溫滅菌、抗收縮性能好、穩(wěn)定性好、不吸附蛋白和提取物和無污染的特點，可避免微透析過程中發(fā)生膜撕裂、流速降低和過濾量減少的問題；所述多孔膜的孔徑一般為0.1微米，0.22微米，0.45微米、0.6微米、0.8微米、1.0微米，1.2微米和2微米等，同時也可以根據(jù)要求定制。在本實用新型的優(yōu)選實施例中，所述多孔膜為上海海寧市中立過濾設(shè)備有限公司提供的膜孔徑為1.2微米的親水性PVDF膜。在其他實施例中，常用血液透析膜種類和膜孔徑均可用，來源沒有特殊的限制，可由市場購買獲得即可。

在本實用新型中，所述第一通道的入口和第二通道的入、出口是互相獨(dú)立的，如圖1所示，所述第一通道包括所述細(xì)胞懸浮液的入口(3)和細(xì)胞懸液的出口(5)；所述第二通道中包括低滲透析液的入口(1和7)、高滲透析液的入口(2和6)和廢液出口(4和8)。1、2、3、4和5均是穿透上層芯片的通孔，6、7和8為下層芯片的非通孔且其深度為0.5㎜。去離子水經(jīng)孔1和孔7流進(jìn)第一通道低滲入口，濃縮的透析液經(jīng)孔2和孔6流進(jìn)第一通道高滲入口，去離子水和濃縮的透析液在第二通道的透析液產(chǎn)生區(qū)(圖1)中逐級匯合、混合均勻后產(chǎn)生梯度式濃度和變化流量的透析液，隨后加載低溫保護(hù)劑的細(xì)胞懸液流進(jìn)第一通道的細(xì)胞懸浮液的入口3逐級地實現(xiàn)微透析，最終細(xì)胞懸液經(jīng)細(xì)胞懸液的出口5、廢液經(jīng)廢液出口4和8流出連續(xù)性去除細(xì)胞懸浮液中低溫保護(hù)劑的工作平臺，進(jìn)而實現(xiàn)安全、有效地去除細(xì)胞中的低溫保護(hù)劑。

在本實用新型的另一方面，所述微裝置還可以拓展用于紅細(xì)胞載藥或細(xì)胞標(biāo)記。

在本實用新型的實施例中，微裝置的制備方法可以為：

在本實用新型中，所述帶有第一通道的上層芯片、多孔膜、帶有第二通道的下層芯片和透析執(zhí)行單元與上述技術(shù)方案所述的帶有第一通道的上層芯片、多孔膜、帶有第二通道的下層芯片和透析執(zhí)行單元一致，在此不再贅述。在本實用新型的實施例中，可以通過螺絲釘將所述上層芯片和下層芯片緊固連接。

實施例1

具有圖1所示結(jié)構(gòu)的一種清除細(xì)胞低溫保護(hù)劑的微裝置上、下板芯片概念圖和裝置的結(jié)構(gòu)示意圖，包括：

所述清除細(xì)胞低溫保護(hù)劑的微裝置的上下層芯片的長寬高為12.8cm×12.8cm×0.6cm的正方形上、下層芯片；所述上層和下層芯片的材質(zhì)為有機(jī)玻璃(PMMA)。所述上層芯片下表面的第一通道包括細(xì)胞懸液通道和4個透析單元，其中透析單元是嵌入高低交錯排列的微型圓柱陣列(直徑均為1mm，高柱子高度0.5mm，低柱子高度0.25mm)的矩形凹槽(長寬高為5.0cm×1.5cm×0.5mm)，高低柱按照垂直于流體流向的波浪式方式分布，一組波浪式的高柱子，一組波浪式的低柱子，圓柱中心間隔為2㎜?？?是去離子水的入口，孔2是濃縮透析液的入口，孔3是細(xì)胞懸浮液的入口，孔4是廢液出口，孔5是流經(jīng)所述第一通道清除低溫保護(hù)劑后的細(xì)胞懸浮液的出口，孔1-5均是穿透所述上層芯片的通孔。

所述下層芯片上表面的第二通道包括透析液產(chǎn)生區(qū)、4個透析單元和透析液收集區(qū)。第二通道按照級聯(lián)式分布的方式進(jìn)行，包括連通的兩條垂直的通道，透析液產(chǎn)生區(qū)產(chǎn)生的透析液按分支一條支路進(jìn)入透析執(zhí)行單元，另一條支路進(jìn)入下一級透析液產(chǎn)生區(qū)與去離子水按一定的流量比匯合并進(jìn)入特斯拉混合器(長度均為17.0cm，深度為0.5㎜)混合，依次逐級形成變濃度和流量的透析液；所述透析單元與所述下層芯片的透析單元的形狀、大小、深度和微圓柱陣列的排布是一致的；所述的透析液廢液經(jīng)透析液收集區(qū)流出去除細(xì)胞懸浮液中低溫保護(hù)劑工作平臺?？?是經(jīng)入口2進(jìn)入的濃縮透析液的入口，孔7是經(jīng)入口1進(jìn)入的去離子水的入口，孔8是廢液出口，孔6-8為非通孔，高度為0.5mm。

所述設(shè)置在上下層芯片間的多孔膜為膜孔徑為1.2μm的聚偏二氟乙烯膜(PVDF)，且其尺寸稍大于所述透析單元的尺寸。

所述上層芯片和下層芯片通過螺絲釘緊固。

實施例2

采用實施例1提供的一種清除細(xì)胞低溫保護(hù)劑的微裝置進(jìn)行甘油的去除，具體過程為：

將質(zhì)量體積比為57％的復(fù)方甘油溶液逐滴滴入紅細(xì)胞溶液中，混合均勻，得到含有10～40％甘油的紅細(xì)胞懸浮液，其壓積比為6±5％～24±5％；

將所述細(xì)胞懸浮液從實施例1提供的連續(xù)性去除細(xì)胞懸浮液中低溫保護(hù)劑工作平臺的所述第一通道入口3處通入，細(xì)胞懸浮液沿著第一通道逐次流入所述透析執(zhí)行區(qū)；

將去離子水從所述第一通道的橫向低滲通道入口1處通入，同時將濃度為20％的Nacl溶液(質(zhì)量/體積比)從所述第一通道的橫向高滲通道入口2處灌入，去離子水和Nacl溶液以一定的流量比沿著第二通道的透析液產(chǎn)生區(qū)的通道流動，到達(dá)混合器處時混合均勻，逐級形成變濃度和流量的透析液，并最終流入所述第二通道的透析單元，通過多孔膜對第一通道透析單元的細(xì)胞懸浮液進(jìn)行透析；變濃度透析液能夠減少細(xì)胞的滲透性損傷，確保細(xì)胞體積在安全的范圍內(nèi)變化，同時，第一通道和第二通道透析單元間的透析膜等夠減少流體間剪切力對細(xì)胞的損傷，為細(xì)胞存活和低溫保護(hù)劑的去除提供了安全的微環(huán)境；

流至所述第一通道的末端5處的細(xì)胞懸浮液和4處的透析液通過醫(yī)用橡膠軟管經(jīng)過通孔5和通孔4流出去除低溫保護(hù)劑工作平臺。

將紅細(xì)胞懸浮液在本實用新型實施例1提供的去除低溫保護(hù)劑工作平臺中運(yùn)行穩(wěn)定后，在出口4和5處用EP管取出樣品，用全自動生化分析儀分析血紅蛋白和甘油的濃度，分別測試細(xì)胞的存活率和回收率以及去除甘油的效率；測試結(jié)果為，采用本實用新型實施例1提供的去除低溫保護(hù)劑工作平臺進(jìn)行細(xì)胞懸浮液中低溫保護(hù)劑的去除，細(xì)胞存活率為90％以上，回收率為80％以上和去除甘油的效率為60％以上。

由以上實施例可知，本實用新型提供了一種連續(xù)地去除細(xì)胞懸浮液中低溫保護(hù)劑工作平臺，包括：帶有第一通道的上層芯片，所述上層芯片下表面的第一通道的深度小于上層芯片的厚度，包括細(xì)胞懸液通道和4個透析單元；帶有第二通道的下層芯片，所述下層芯片上表面的第二通道的深度小于下層芯片的厚度，包括透析液產(chǎn)生區(qū)、透析液收集區(qū)和4個透析區(qū)單元，其中透析液產(chǎn)生區(qū)中設(shè)置4個混合器；設(shè)置在所述上層芯片的透析單元和下層芯片的透析單元之間的多孔膜；第一通道的透析單元、第二通道的透析單元和多孔膜都成透析執(zhí)行區(qū)；所述上層芯片用于細(xì)胞懸液通過；所述下層芯片的透析液產(chǎn)生區(qū)產(chǎn)生變濃度和變流量的透析液；所述透析執(zhí)行區(qū)完成低溫保護(hù)劑的清除；所述下層芯片的透析液收集區(qū)收集含低溫保護(hù)劑的透析廢液。本實用新型提供的連續(xù)性清除細(xì)胞低溫保護(hù)劑的微裝置，在所述第二通道的下層芯片中，通過去離子水和濃縮的透析液按一定流量比逐級混合，形成變濃度和流量透析液，之后對所述第一通道細(xì)胞懸浮液進(jìn)行透析，經(jīng)過所述透析區(qū)實現(xiàn)快速去除低溫保護(hù)劑的目的，采用這種逐級變濃度和流量溶液通過微膜透析洗滌細(xì)胞懸浮液能夠更有效地去除低溫保護(hù)劑，減少細(xì)胞的機(jī)械損傷和滲透壓損傷，提高細(xì)胞的存活率和回收率。使這種工作平臺具有去除低溫保護(hù)劑、血漿分離等多種功能，具有較好的便利性。