本發(fā)明涉及一種分離蛋白質與淀粉的工藝，具體涉及一種酶法分離紫米蛋白質與淀粉的工藝。

背景技術：

紫米，又名紫糯米，紫珍珠，是較珍貴的水稻品種，分紫粳、紫糯兩種。紫米顆粒均勻，顏色紫黑，營養(yǎng)價值和藥用價值都比較高，紫米中富含蛋白質、賴氨酸、硫胺素、核黃素、葉酸、脂肪等多種營養(yǎng)成分，以及鈣、鐵、鋅、硒、磷等人體所需微量元素，食味香甜，甜而不膩，性溫，有補血益氣、暖胃健脾、滋補肝腎、縮小便、止咳喘等作用。此外，糯性紫米還具有理中及治療神經(jīng)衰弱等功效，現(xiàn)已成為廣大消費者的餐中佳肴，被推崇為養(yǎng)生米、補血米、接骨米和做月子米等，是一種天然的佳品。

大米蛋白的分離提取方法包括堿法提取、酶法提取、分步水解、溶劑提取和物理分離等。傳統(tǒng)是以堿法分離大米蛋白，堿法提取的大米蛋白具有良好的持水性和吸油性，但是溶解性很差，溶解度低時大米蛋白不能充分分散于溶液中，導致起泡性和起泡穩(wěn)定性都較差。楊為華利用堿法提取碎米中大米蛋白，大米蛋白的提取率為67％。李娟，魏春紅采用堿提酸沉法提取碎粳米中蛋白質，碎粳米蛋白質提取率可達77.30％。郭梅等人利用堿法對天津小站稻中大米蛋白提取，大米蛋白提取率可達88.87％。

傳統(tǒng)的堿法不能滿足人們對無污染，無毒性，高營養(yǎng)價值的蛋白與淀粉產品開發(fā)的需求。因此，隨著生物技術的發(fā)展，深入對提取紫米中蛋白的工藝研究具有重大意義。

技術實現(xiàn)要素：

針對現(xiàn)有技術存在的不足，本發(fā)明提供了一種酶法分離紫米蛋白質與淀粉的工藝。

為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明是通過如下的技術方案來實現(xiàn)：

一種酶法分離紫米蛋白質與淀粉的工藝，包括以下幾個步驟：

(1)原料的預處理：將紫米粉碎并過篩，加水調漿后再離心，得到上清液和紫米粉；

(2)分離：將步驟(1)中的得到的紫米粉，加入蒸餾水，用NaOH調節(jié)pH值到至9.5，加入堿性蛋白酶后進行酶解4h，待酶解結束后，迅速升溫至90℃保持10s對酶進行滅活處理，對酶解液進行離心，取上清液噴霧干燥后得成品紫米蛋白，下層沉淀經(jīng)50℃干燥箱內烘干10h，經(jīng)粉碎后得到淀粉成品。

所述的一種酶法分離紫米蛋白質與淀粉的工藝，所述紫米粉碎后過80目篩。

所述的一種酶法分離紫米蛋白質與淀粉的工藝，步驟(1)中得到的紫米粉在進行步驟(2)之前，進行脫色處理，其步驟為：加入液料比15:1(mL/g)的85％乙醇溶液，在40℃的恒溫水浴鍋內水浴40min。

所述的一種酶法分離紫米蛋白質與淀粉的工藝，所述步驟(2)中，紫米粉與蒸餾水的重量比為1:20。

所述的一種酶法分離紫米蛋白質與淀粉的工藝，所述步驟(2)中堿性蛋白酶的活力單位為270U/g。

本發(fā)明的有益效果：本發(fā)明的分離方法簡單，整個過程無污染、無毒性，蛋白的提取率到，提取得到的蛋白純度較高。紫米作為大米中的優(yōu)品種，其主要營養(yǎng)成分淀粉與蛋白得以分離出來，將比自身作為飲食創(chuàng)造出更多的附加值，紫米特殊功能將得到更廣泛的應用，本發(fā)明為墨江紫米蛋白與淀粉的分離提供科學依據(jù)，也為紫米的開發(fā)利用提供新思路。

本發(fā)明以蛋白提取率為指標，不僅獲得紫米蛋白質，同時，還能夠分離得到紫米淀粉。從除去上清蛋白的沉淀經(jīng)50℃干燥箱內烘干10h，粉碎后得到淀粉成品。其紫米淀粉可在常溫下長期保存，可作為食品、藥品的開發(fā)研究原料。

具體實施方式

為使本發(fā)明實現(xiàn)的技術手段、創(chuàng)作特征、達成目的與功效易于明白了解，下面結合具體實施方式，進一步闡述本發(fā)明。

一種酶法分離紫米蛋白質與淀粉的工藝，包括以下幾個步驟：

(1)原料的預處理：將紫米粉碎并過80目篩，加入液料比25:1(mL/g)的蒸餾水進行浸泡，在溫度為30℃的條件下保持1h，然后置于離心機中，在4000r/min的條件下離心10min)，除去可溶性糖得到紫米粉；加入液料比15:1(mL/g)的85％乙醇溶液，在40℃的恒溫水浴鍋內水浴40min進行脫色處理；

(2)分離：取紫米粉，加入液料比20：1(mL/g)的蒸餾水，充分攪拌，水浴加熱至40℃，同時用2.0mol/L的NaOH調節(jié)漿液pH值至9.5，加入活力單位為270U/g的堿性蛋白酶后進行酶解4h，酶解溫度為30℃，待酶解結束后，迅速升溫至90℃保持10s對酶進行滅活處理，對酶解液進行離心，取上清液噴霧干燥后得成品紫米蛋白，噴霧干燥條件為：進風溫度150℃，壓力為0.2Mpa，出口溫度為60～70℃；將所取上清液噴霧干燥得到紫米蛋白成品下層沉淀經(jīng)50℃干燥箱內烘干10h，經(jīng)粉碎后得到淀粉成品。

米原料中蛋白質含量的測定：準確稱取1g紫米粉，在催化加熱條件下被分解，產生的氨與硫酸結合生成硫酸銨，堿化蒸餾使氨游離，用硼酸吸收后以0.0500mol/L的鹽酸標準滴定溶液滴定，根據(jù)酸的消耗量乘以大米換算系數(shù)5.95，即為蛋白質的含量。

計算公式：

式中：

X:粗蛋白含量(g/100g)

V2:滴定試樣時所需標準酸溶液體積(mL)

V1:滴定空白時所需標準酸溶液體積(mL)

C:鹽酸標準溶液濃度(mol/L)

m:試樣質量(g)

V:試樣分解液總體積(mL)

V3:試樣分解液蒸餾用體積(mL)

0.0140:每毫升鹽酸標準溶液[c HCl)＝1.0000mol/L]相當?shù)?、以克表示的氮的質量

5.95:氮換算成蛋白質的平均系數(shù)。

經(jīng)測定：紫米中蛋白質含量為8.31％±0.42％。

分離得到的蛋白質含量的測定：

取7支干燥干凈的試管，標號為0、1、2、3、4、5、6，分別加入0、0.2、0.4、0.6、0.8，1.0mL標準蛋白溶液(質量濃度為0.1mg/mL)，用蒸餾水補足至1.00mL。按次序向各管加入4.0mL考馬斯亮藍染液，混勻后室溫下靜置5min，以0號管調整儀器零點，于分光光度計上595nm波長處測光吸收值，以標準蛋白質濃度為橫坐標，以吸光度值為縱坐標，繪制的標準曲線為y＝7.9329x-0.0188。

取樣品液0.1mL，按上述的方法測定樣品中蛋白質含量。

紫米蛋白提取率％＝成品中測得的蛋白質含量/原料大米中測得的蛋白質含量x100％。

紫米蛋白純度(％)＝制品中蛋白的克數(shù)/制品克數(shù)(干基)x100％。

最后計算所得：蛋白的提取率為76％，蛋白純度為80％，淀粉的得率是85.90％。

以上顯示和描述了本發(fā)明的基本原理和主要特征和本發(fā)明的優(yōu)點。本行業(yè)的技術人員應該了解，本發(fā)明不受上述實施例的限制，上述實施例和說明書中描述的只是說明本發(fā)明的原理，在不脫離本發(fā)明精神和范圍的前提下，本發(fā)明還會有各種變化和改進，這些變化和改進都落入要求保護的本發(fā)明范圍內。本發(fā)明要求保護范圍由所附的權利要求書及其等效物界定。