技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開一種免疫缺陷大鼠模型的構(gòu)建方法，包括以下步驟：將針對大鼠DNA的Prkdc和IL2Rγ基因敲除的gRNA分別進(jìn)行體外轉(zhuǎn)錄，再分別與體外轉(zhuǎn)錄的CAS9蛋白mRNA混合，凍存于無RNA酶的超純水中，得到相應(yīng)的注射液A及B；將人SIRPa基因組DNA擴(kuò)增，純化，凍存于無RNA酶的超純水中，得注射液C；采用顯微注射法將注射液A和B分別注射進(jìn)不同的大鼠受精卵的胞質(zhì)中，將注射液C注射進(jìn)另一大鼠受精卵的原核中，將三種受精卵移植入不同假孕雌鼠體內(nèi)，培育分別得到第二代大鼠A，B和C；將第二代大鼠A、B和C進(jìn)行雜交，繁殖F1代；再將F1代進(jìn)行雜交，得到敲除了IL2Rγ和Prkdc基因并轉(zhuǎn)入了人SIRPa基因的免疫缺陷大鼠模型。該大鼠模型可以讓人類細(xì)胞高效植入，符合試驗(yàn)指標(biāo)，品系背景純正。

技術(shù)研發(fā)人員：徐洋
受保護(hù)的技術(shù)使用者：南方醫(yī)科大學(xué);廣東圣賽生物科技有限公司
文檔號(hào)碼：201710065515
技術(shù)研發(fā)日：2017.02.06
技術(shù)公布日：2017.05.31