本發(fā)明涉及食品技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及一種牡丹籽油的制備方法。

背景技術(shù)：

由牡丹籽提取的植物油是中國特有的木本堅(jiān)果油，因其營養(yǎng)豐富而獨(dú)特，又有醫(yī)療保健作用，被有關(guān)專家稱為“世界上最好的油”，是植物油中的珍品，也是中國獨(dú)有的健康保健食用油脂。與草本植物油不同，牡丹籽油具有很高的不飽和脂肪酸含量，其中不飽和脂肪酸含量達(dá)90％以上，主要為亞麻酸、亞油酸，油酸，其中亞麻酸(c18：3)和亞油酸(c18：2)為多不飽和脂肪酸，油酸(c18：1)為單不飽和脂肪酸。亞油酸有強(qiáng)化新陳代謝，增強(qiáng)細(xì)胞活力的功能。亞油酸是細(xì)胞的組成成分特別是參與線粒體及細(xì)胞膜磷質(zhì)的合成。缺乏亞油酸可能導(dǎo)致線粒體腫脹細(xì)胞膜機(jī)構(gòu)、功能的改變膜透性、脆性增加。亞油酸與脂質(zhì)代謝關(guān)系密切。體內(nèi)的膽固醇要與脂肪酸結(jié)合才能在體內(nèi)轉(zhuǎn)送進(jìn)行正常代謝。亞油酸缺乏后膽固醇轉(zhuǎn)送受阻不能進(jìn)行正常代謝就會(huì)在體內(nèi)沉積最終導(dǎo)致疾病。

對(duì)牡丹籽油的提取和開發(fā)具有較好的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益，cn2008102467164公開了一種超臨界co2的提取方法，提取率達(dá)27％；cn2009103101431提供了一種牡丹籽油的冷榨制備方法。步驟是將曬干并精選的牡丹籽經(jīng)剝殼、篩選、分揀、壓榨、過濾、堿煉水化、脫色、過濾、脫臭得到成品牡丹籽油，實(shí)現(xiàn)牡丹籽油的工業(yè)化生產(chǎn)，采取上述步驟可有效的提取牡丹籽油，牡丹籽油的出油率高達(dá)26～27％。cn102277229a提供一種牡丹籽油的加工方法，包括：a)將牡丹籽置于-15℃～-2℃低溫冷凍30天～60天，然后常溫儲(chǔ)藏10天～20天；b)將經(jīng)過低溫冷凍和常溫儲(chǔ)藏后的牡丹果實(shí)脫殼除雜，在110℃～125℃進(jìn)行焙炒；c)將焙炒后的牡丹籽進(jìn)行壓榨，得到牡丹籽油，出油率較高達(dá)20％。

閆曉雨等概述了牡丹籽油的制備工藝(牡丹籽油制備工藝研究綜述，安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2016，44(15)：62-64)，關(guān)于牡丹籽油的提取方法主要有機(jī)械壓榨法、溶劑浸出法、超聲波輔助浸提法、超臨界co2流體萃取技術(shù)(scf-co2)、微波輔助提取法、水代法和水酶法提取等。超聲波輔助提取技術(shù)的料液比為1∶8g/ml，溫度40℃，時(shí)間30min，提取次數(shù)3次，使用石油醚為溶劑，超聲波功率350w，此條件下的牡丹籽油出油率為24.89％；微波輔助提取技術(shù)的料液比為1∶9g/ml，時(shí)間8min，提取次數(shù)1次，微波功率800w，此條件下的牡丹籽油出油率為27.70％，不飽和脂肪酸含量94.20％；超臨界co2流體萃取溫度40℃，時(shí)間150min，壓力30mpa，提取次數(shù)1次，co2流量25kg/h，此條件下的牡丹籽油出油率為30.70％，不飽和脂肪酸含量70.81％；水酶法提取的料液比為1∶5g/ml，溫度-20～50℃，時(shí)間120～315min，此條件下的牡丹籽油的不飽和脂肪酸含量92.77％；亞臨界萃取技術(shù)的溫度50℃，時(shí)間30min，壓力0.50mpa，提取次數(shù)3次，此條件下的牡丹籽油出油率為24.16％，不飽和脂肪酸含量84.54％。

由于機(jī)械壓榨法提油率低，副產(chǎn)物利用率低，溶劑浸出法工藝較復(fù)雜且存在有毒溶劑殘留等安全問題，單用超臨界co2流體萃取所得不飽和脂肪酸含量較低等問題。后續(xù)還采用上述方法的組合進(jìn)行牡丹籽油的提取，超聲波輔助水代法提取技術(shù)的料液比為1∶8.5g/ml，溫度45℃，時(shí)間54min，提取次數(shù)1次，超聲波功率960w，此條件下的牡丹籽油出油率為28.85％，不飽和脂肪酸含量大于85％；微波預(yù)處理-超臨界co2萃取技術(shù)的時(shí)間40～100s，壓力33mpa，提取次數(shù)1次，co2流量25kg/h，微波功率800w；外加磁場(chǎng)-溶劑浸提法的料液比為1∶7g/ml，溫度55℃，時(shí)間60min，提取次數(shù)1次，使用石油醚為溶劑，外加磁場(chǎng)720t，此條件下的牡丹籽油出油率為27.50％。

現(xiàn)有技術(shù)的上述方法僅僅關(guān)注了牡丹籽油的出油率和不飽和脂肪酸的含量，而在牡丹籽油加工過程中還面臨著如下諸多問題：

牡丹籽仁油性大，常溫下呈韌性、粉碎過程中導(dǎo)致溫度升高，易粘連在一起，難以繼續(xù)粉碎；會(huì)出現(xiàn)發(fā)熱、氧化甚至出現(xiàn)碳化現(xiàn)象，進(jìn)而影響牡丹籽油的品質(zhì)。其次，黃曲霉毒素是主要由黃曲霉(aspergillusflavus)寄生曲霉(a.parasiticus)產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物，是一類化學(xué)結(jié)構(gòu)類似的化合物，均為二氫呋喃香豆素的衍生物。它們存在于土壤、動(dòng)植物、各種堅(jiān)果中，特別是容易污染花生、玉米、稻米、大豆、小麥等糧油產(chǎn)品，是霉菌毒素中毒性最大、對(duì)人類健康危害極為突出的一類霉菌毒素。在牡丹籽油制備過程中也需要重點(diǎn)考慮如何降低其含量。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是克服現(xiàn)有技術(shù)之缺陷，提供一種牡丹籽油的制備方法，該技術(shù)可提高牡丹籽油的出油率，并且保持較高的不飽和脂肪酸含量，同時(shí)，能夠最大限度的降低黃曲霉毒素的含量。

本發(fā)明的技術(shù)方案如下：

(1)牡丹籽脫殼，得牡丹籽仁；

(2)將步驟(1)所得牡丹籽仁進(jìn)行低溫粉碎，得牡丹籽仁粉；

(3)將步驟(2)所得牡丹籽仁粉進(jìn)行微波輻照；

(4)將步驟(3)所得牡丹籽仁粉低溫粉碎；

(5)將步驟(4)所得牡丹籽仁粉進(jìn)行微波輻照；

(6)將步驟(5)的牡丹籽仁粉進(jìn)行超臨界二氧化碳萃取，得牡丹籽油。

其中，優(yōu)選的，

步驟(2)中低溫粉碎時(shí)設(shè)定低溫粉碎機(jī)的溫度為0～-35℃，粉碎粒度為過10～30目篩；

步驟(3)微波輻照劑量為5～10kw/kg，時(shí)間30～90秒；

步驟(4)低溫粉碎時(shí)設(shè)定低溫粉碎機(jī)溫度為0～-35℃，粉碎粒度為過40～80目篩；

步驟(5)中微波輻照劑量為0.5～1.0kw/kg，采用微波30～60秒，間歇15～30秒的方式，微波總時(shí)間10～30分鐘；

步驟(6)中超臨界二氧化碳萃取壓力為20～40mpa，分離器1的壓力為10～15kpa，溫度40～50℃，分離器2的壓力為3-5mpa，溫度30～40℃，萃取時(shí)間1～3小時(shí)。

步驟(2)或步驟(4)粉碎時(shí)還可以加入山蒼子油，其中山蒼子油占牡丹籽仁干燥粉重量百分比0.5％～1％w/w，進(jìn)一步優(yōu)選為，在步驟(4)加入山蒼子油。

本發(fā)明在前處理過程中采用兩次粉碎，兩次微波輻照，與傳統(tǒng)的微波輔助提取不同，傳統(tǒng)的微波輔助提取是在超臨界二氧化碳萃取過程中實(shí)施微波，是萃取過程更快，同時(shí)也需要特殊的設(shè)備裝置。本發(fā)明無需特殊裝置，更適合大生產(chǎn)，同時(shí)比傳統(tǒng)的微波輔助提取提高了收率。

其次，在實(shí)驗(yàn)中偶然發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明的兩次粉碎和兩次微波之間的順序本發(fā)明的粉碎-微波-二次粉碎-二次微波，比微波-粉碎-二次微波-二次粉碎的收率相比有所提高，更重要的是多不飽和脂肪酸的含量有了明顯提高。更進(jìn)一步，本發(fā)明兩次微波的輻照強(qiáng)度是通過多次的實(shí)驗(yàn)優(yōu)選而得的，首次高強(qiáng)度微波-二次低強(qiáng)度微波比兩次均低強(qiáng)度微波、兩次均高強(qiáng)度微波以及首次低強(qiáng)度微波-二次高強(qiáng)度微波的提取效果均好。

最后，山蒼子油的加入步驟也是經(jīng)過優(yōu)選而得到的，在第二次粉碎時(shí)加入山蒼子油比第一次粉碎時(shí)加入能更容易降低黃曲霉毒素的含量。

綜上所述，本發(fā)明的制備方法是在多個(gè)影響因素交互影響的前提下，經(jīng)過大量的實(shí)驗(yàn)以及實(shí)驗(yàn)中的偶然發(fā)現(xiàn)而獲得的，其不僅具有較高的收率，而且具有較高的多不飽和脂肪酸含量，更進(jìn)一步，其能夠顯著降低黃曲霉毒素的含量。該方法不需要特殊的設(shè)備裝置，適合批量大生產(chǎn)，而且能夠保證批次間產(chǎn)品的質(zhì)量保持高度的一致性。

具體實(shí)施例

對(duì)比例1單次粉碎，單次微波

(1)牡丹籽脫殼，得牡丹籽仁；

(2)將步驟(1)所得牡丹籽仁進(jìn)行低溫粉碎，低溫粉碎機(jī)溫度設(shè)定為-35℃，所得牡丹籽仁粉過60目篩；

(3)將步驟(2)所得牡丹籽仁粉進(jìn)行微波輻照，5kw/kg，時(shí)間90秒；

(4)將步驟(3)牡丹籽仁粉進(jìn)行超臨界二氧化碳萃取，超臨界二氧化碳萃取壓力為30mpa，二氧化碳流量20l/h，分離器1的壓力為10kpa，溫度40℃，分離器2的壓力為3mpa，溫度30℃，萃取時(shí)間3小時(shí)，得牡丹籽油。

對(duì)比例2微波(低強(qiáng)度)-粉碎-微波(高強(qiáng)度)-粉碎

(1)牡丹籽脫殼，得牡丹籽仁；

(2)將步驟(1)所得牡丹籽仁進(jìn)行微波輻照，0.5kw/kg，微波60秒，間歇30秒，總持續(xù)時(shí)間30分鐘；

(3)將步驟(2)所得牡丹籽仁進(jìn)行低溫粉碎，低溫粉碎機(jī)溫度設(shè)定為-35℃，所得牡丹籽仁粉過20目篩；

(4)將步驟(3)所得牡丹籽仁粉進(jìn)行微波輻照，5kw/kg，時(shí)間90秒；

(5)將步驟(4)所得牡丹籽仁粉低溫粉碎，低溫粉碎機(jī)溫度設(shè)定為-35℃，所得牡丹籽仁粉過60目篩；

(6)將步驟(5)的牡丹籽仁粉進(jìn)行超臨界二氧化碳萃取，超臨界二氧化碳萃取壓力為30mpa，二氧化碳流量20l/h，分離器1的壓力為10kpa，溫度40℃，分離器2的壓力為3mpa，溫度30℃，萃取時(shí)間3小時(shí)，得牡丹籽油。

實(shí)施例1粉碎-微波(低強(qiáng)度)-粉碎-微波(高強(qiáng)度)

(1)牡丹籽脫殼，得牡丹籽仁；

(2)將步驟(1)所得牡丹籽仁進(jìn)行低溫粉碎，低溫粉碎機(jī)溫度設(shè)定為-35℃，得牡丹籽仁粉，過20目篩；；

(3)將步驟(2)所得牡丹籽仁粉進(jìn)行微波輻照，0.5kw/kg，微波60秒，間歇30秒，總持續(xù)時(shí)間30分鐘；

(4)將步驟(3)所得牡丹籽仁干燥粉低溫粉碎，低溫粉碎機(jī)溫度設(shè)定為-35℃，所得牡丹籽仁粉過60目篩；

(5)將步驟(4)所得牡丹籽仁粉進(jìn)行微波輻照，5kw/kg，時(shí)間90秒；

(6)將步驟(5)的牡丹籽仁粉進(jìn)行超臨界二氧化碳萃取，超臨界二氧化碳萃取壓力為30mpa，二氧化碳流量20l/h，分離器1的壓力為10kpa，溫度40℃，分離器2的壓力為3mpa，溫度30℃，萃取時(shí)間3小時(shí)，得牡丹籽油。

實(shí)施例2粉碎-微波(高強(qiáng)度)-粉碎-微波(高強(qiáng)度)

(1)牡丹籽脫殼，得牡丹籽仁；

(2)將步驟(1)所得牡丹籽仁進(jìn)行低溫粉碎，低溫粉碎機(jī)溫度設(shè)定為-35℃，得牡丹籽仁粉，過20目篩；；

(3)將步驟(2)所得牡丹籽仁粉進(jìn)行微波輻照，5kw/kg，時(shí)間90秒；

(4)將步驟(3)所得牡丹籽仁干燥粉低溫粉碎，低溫粉碎機(jī)溫度設(shè)定為-35℃，所得牡丹籽仁粉過60目篩；

(5)將步驟(4)所得牡丹籽仁粉進(jìn)行微波輻照，5kw/kg，時(shí)間90秒；

(6)將步驟(5)的牡丹籽仁粉進(jìn)行超臨界二氧化碳萃取，超臨界二氧化碳萃取壓力為30mpa，二氧化碳流量20l/h，分離器1的壓力為10kpa，溫度40℃，分離器2的壓力為3mpa，溫度30℃，萃取時(shí)間3小時(shí)，得牡丹籽油。

實(shí)施例3粉碎-微波(低強(qiáng)度)-粉碎-微波(低強(qiáng)度)

(1)牡丹籽脫殼，得牡丹籽仁；

(2)將步驟(1)所得牡丹籽仁進(jìn)行低溫粉碎，低溫粉碎機(jī)溫度設(shè)定為-35℃，得牡丹籽仁粉，過20目篩；；

(3)將步驟(2)所得牡丹籽仁粉進(jìn)行微波輻照，0.5kw/kg，微波60秒，間歇30秒，總持續(xù)時(shí)間30分鐘；

(4)將步驟(3)所得牡丹籽仁干燥粉低溫粉碎，低溫粉碎機(jī)溫度設(shè)定為-35℃，所得牡丹籽仁粉過60目篩；

(5)將步驟(4)所得牡丹籽仁粉進(jìn)行微波輻照，0.5kw/kg，微波60秒，間歇30秒，總持續(xù)時(shí)間30分鐘；

(6)將步驟(5)的牡丹籽仁粉進(jìn)行超臨界二氧化碳萃取，超臨界二氧化碳萃取壓力為30mpa，二氧化碳流量20l/h，分離器1的壓力為10kpa，溫度40℃，分離器2的壓力為3mpa，溫度30℃，萃取時(shí)間3小時(shí)，得牡丹籽油。

實(shí)施例4粉碎-微波(高強(qiáng)度)-粉碎-微波(低強(qiáng)度)

(1)牡丹籽脫殼，得牡丹籽仁；

(2)將步驟(1)所得牡丹籽仁進(jìn)行低溫粉碎，低溫粉碎機(jī)溫度設(shè)定為-35℃，得牡丹籽仁粉，過20目篩；；

(3)將步驟(2)所得牡丹籽仁粉進(jìn)行微波輻照，5kw/kg，時(shí)間90秒；

(4)將步驟(3)所得牡丹籽仁干燥粉低溫粉碎，低溫粉碎機(jī)溫度設(shè)定為-35℃，所得牡丹籽仁粉過60目篩；

(5)將步驟(4)所得牡丹籽仁粉進(jìn)行微波輻照，0.5kw/kg，微波60秒，間歇30秒，總持續(xù)時(shí)間30分鐘；

(6)將步驟(5)的牡丹籽仁粉進(jìn)行超臨界二氧化碳萃取，超臨界二氧化碳萃取壓力為30mpa，二氧化碳流量20l/h，分離器1的壓力為10kpa，溫度40℃，分離器2的壓力為3mpa，溫度30℃，萃取時(shí)間3小時(shí)，得牡丹籽油。

測(cè)試?yán)?不同牡丹籽油質(zhì)量比較

將對(duì)比例1、2和實(shí)施例1-4所得的牡丹籽油進(jìn)行質(zhì)量測(cè)定，參照gb/t5525-1985植物油脂檢驗(yàn)透明度、色澤、氣味、滋味鑒定法檢測(cè)透明度，氣味，滋味，采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)測(cè)定牡丹籽油中不飽和脂肪酸的含量(連蘋，唐紅，李莉莉.氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)分析紫斑牡丹籽油脂肪酸成分，北方園藝，2016(13)125-127)，結(jié)果如下表所示。

由表可以看出，與對(duì)比例1相比，實(shí)施例1～4的出油率明顯增加，而且亞麻酸和亞油酸的之和高于對(duì)比例1；與對(duì)比例2相比，實(shí)施例1-4的出油率略有增加，亞麻酸的量均高于對(duì)比例2，亞麻酸和亞油酸之和顯著高于對(duì)比例2。實(shí)施例4所得牡丹籽油中，亞麻酸組分的比例最高。

測(cè)試?yán)?山蒼子油加入方式對(duì)黃曲霉菌的影響

(1)牡丹籽脫殼，得牡丹籽仁，平均分成兩份，按如下步驟操作，其中一份在步驟(2)粉碎時(shí)加入0.5％w/w山蒼子油，另一份在步驟(4)粉碎時(shí)加入0.5％w/w山蒼子油；

(2)將步驟(1)所得牡丹籽仁進(jìn)行低溫粉碎，低溫粉碎機(jī)溫度設(shè)定為-35℃，得牡丹籽仁粉，過20目篩；；

(3)將步驟(2)所得牡丹籽仁粉進(jìn)行微波輻照，5kw/kg，時(shí)間60秒；

(4)將步驟(3)所得牡丹籽仁干燥粉低溫粉碎，低溫粉碎機(jī)溫度設(shè)定為-35℃，所得牡丹籽仁粉過60目篩；

(5)將步驟(4)所得牡丹籽仁粉進(jìn)行微波輻照，0.5kw/kg，微波30秒，間歇30秒，總持續(xù)時(shí)間10分鐘；

(6)將步驟(5)的牡丹籽仁粉進(jìn)行超臨界二氧化碳萃取，超臨界二氧化碳萃取壓力為30mpa，二氧化碳流量20l/h，分離器1的壓力為10kpa，溫度40℃，分離器2的壓力為3mpa，溫度30℃，萃取時(shí)間3小時(shí)，得牡丹籽油。

按照gb/t5009.22-2003檢測(cè)黃曲霉毒素b1(aft)的含量(單位μg/kg)，結(jié)果表明，在步驟(2)中加入山蒼子油所制備的最終產(chǎn)品中aft的含量為13μg/kg，而在步驟(4)中加入山蒼子油所制備的最終產(chǎn)品中aft的含量為4μg/kg，兩者具有顯著差異。

實(shí)施例5

(1)牡丹籽脫殼，得牡丹籽仁；

(2)將步驟(1)所得牡丹籽仁進(jìn)行低溫粉碎，低溫粉碎機(jī)溫度設(shè)定為-35℃，得牡丹籽仁粉，過30目篩；；

(3)將步驟(2)所得牡丹籽仁粉進(jìn)行微波輻照，10kw/kg，時(shí)間30秒；

(4)將步驟(3)所得牡丹籽仁干燥粉低溫粉碎，低溫粉碎機(jī)溫度設(shè)定為-35℃，所得牡丹籽仁粉過80目篩；

(5)將步驟(4)所得牡丹籽仁粉進(jìn)行微波輻照，1.0kw/kg，微波30秒，間歇15秒，總持續(xù)時(shí)間20分鐘；

(6)將步驟(5)的牡丹籽仁粉進(jìn)行超臨界二氧化碳萃取，超臨界二氧化碳萃取壓力為40mpa，二氧化碳流量30l/h，分離器1的壓力為15kpa，溫度50℃，分離器2的壓力為5mpa，溫度40℃，萃取時(shí)間1小時(shí)，得牡丹籽油。

實(shí)施例6

(1)牡丹籽脫殼，得牡丹籽仁；

(2)將步驟(1)所得牡丹籽仁進(jìn)行低溫粉碎，低溫粉碎機(jī)溫度設(shè)定為0℃，得牡丹籽仁粉，過10目篩；；

(3)將步驟(2)所得牡丹籽仁粉進(jìn)行微波輻照，10kw/kg，時(shí)間60秒；

(4)將步驟(3)所得牡丹籽仁干燥粉低溫粉碎，低溫粉碎機(jī)溫度設(shè)定為0℃，所得牡丹籽仁粉過40目篩；

(5)將步驟(4)所得牡丹籽仁粉進(jìn)行微波輻照，1.0kw/kg，微波45秒，間歇15秒，總持續(xù)時(shí)間20分鐘；

(6)將步驟(5)的牡丹籽仁粉進(jìn)行超臨界二氧化碳萃取，超臨界二氧化碳萃取壓力為20mpa，二氧化碳流量40l/h，分離器1的壓力為15kpa，溫度45℃，分離器2的壓力為5mpa，溫度35℃，萃取時(shí)間2小時(shí)，得牡丹籽油。

以上詳細(xì)描述了本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，但是，本發(fā)明并不限于上述實(shí)施方式中的具體細(xì)節(jié)，在本發(fā)明的技術(shù)構(gòu)思范圍內(nèi)，可以對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行多種簡(jiǎn)單變型，這些簡(jiǎn)單變型均屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。

另外需要說明的是，在上述具體實(shí)施方式中所描述的各個(gè)具體技術(shù)特征，在不矛盾的情況下，可以通過任何合適的方式進(jìn)行組合，為了避免不必要的重復(fù)，本發(fā)明對(duì)各種可能的組合方式不再另行說明。

此外，本發(fā)明的各種不同的實(shí)施方式之間也可以進(jìn)行任意組合，只要其不違背本發(fā)明的思想，其同樣應(yīng)當(dāng)視為本發(fā)明所公開的內(nèi)容。