本發(fā)明屬于生物化工與工藝領(lǐng)域，涉及一種生物吸附劑吸附金屬離子的方法，尤其涉及一種中間蒼白桿菌胞外多糖及其應(yīng)用。

背景技術(shù)：

多糖是一類廣泛存在于自然界的生物體產(chǎn)生的獨(dú)特的生物大分子。它具有各種各樣特殊的且在大多數(shù)情況下相當(dāng)復(fù)雜的化學(xué)結(jié)構(gòu)，不同的生理功能和廣泛的(潛在的)應(yīng)用價(jià)值。近些年來微生物多糖作為一種新型發(fā)酵產(chǎn)品，具有獨(dú)特的物化性質(zhì)，已作為乳化劑、增稠劑、穩(wěn)定劑、膠凝劑、懸浮劑和潤(rùn)滑劑等應(yīng)用于石油、化工、食品、制藥、環(huán)保和化妝品等多個(gè)領(lǐng)域。由于多糖同透明質(zhì)酸、黃原膠、熱凝膠、結(jié)冷膠、威蘭膠一樣在一定的濃度范圍內(nèi)表現(xiàn)出很好的流變學(xué)特性，非牛頓流體具有假塑流變性其保濕性和成膜性在化妝品方面也具有廣泛的應(yīng)用前景。目前已報(bào)道的多糖產(chǎn)生菌生產(chǎn)多糖時(shí)，培養(yǎng)基成分營養(yǎng)豐富，通常會(huì)造成產(chǎn)物得率不高，副產(chǎn)物多，產(chǎn)品后續(xù)分離純化過程復(fù)雜等問題，并且多糖生產(chǎn)大多停留在實(shí)驗(yàn)室水平。因此篩選得到一株?duì)I養(yǎng)要求低、多糖產(chǎn)量高又適合工業(yè)化規(guī)模生產(chǎn)多糖的菌株具有十分重要的意義。

中間蒼白桿菌屬的成員包含在變形菌域的α-2亞群中，一般具有對(duì)腈類等含氮基團(tuán)化合物的水解能力，這些細(xì)菌本身不會(huì)造成慢性感染，工藝使用安全，而且中間蒼白桿菌能廣泛利用碳水化合物、有機(jī)酸、氨基酸等為碳源。

另一方面，細(xì)菌及其產(chǎn)物對(duì)溶解態(tài)的金屬離子有很強(qiáng)的配合能力。細(xì)菌細(xì)胞壁帶有負(fù)電荷，使得細(xì)菌表面具有陰離子的性質(zhì)。金屬離子與細(xì)胞表面結(jié)構(gòu)物質(zhì)上的羥基陰離子和磷酸陰離子發(fā)生相互作用而被固定，細(xì)菌細(xì)胞外膜上的結(jié)構(gòu)成分很容易與金屬發(fā)生反應(yīng)，使金屬結(jié)合到細(xì)胞的表面。細(xì)菌多糖由至少十個(gè)以上的單糖脫水縮合而成的，線性結(jié)構(gòu)的多糖可以將土壤顆粒連接起來；龐大的多糖結(jié)構(gòu)中，含有大量的羥基基團(tuán)，可以與土壤顆粒形成氫鍵；也有許多酸性基團(tuán)，可以與土壤顆粒形成離子鍵；多糖結(jié)構(gòu)中存在大量的接觸點(diǎn)是多糖膠結(jié)作用的發(fā)揮是至關(guān)重要的。目前對(duì)細(xì)菌多糖活性的研究主要集中在醫(yī)藥、食品、化工領(lǐng)域，細(xì)菌多糖在農(nóng)業(yè)土壤方面的研究還較少。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種中間蒼白桿菌胞外多糖及其應(yīng)用，中間蒼白桿菌胞外多糖吸附金屬離子的方法，這種方法基于我們發(fā)現(xiàn)并鑒定一株高產(chǎn)多糖的中間蒼白桿菌(Intermediate ochrobactrum)ZY03，并利用該菌株發(fā)酵產(chǎn)生細(xì)菌胞外多糖并有效吸附金屬離子。

為解決本發(fā)明的技術(shù)問題，本發(fā)明的技術(shù)方案是：一種中間蒼白桿菌胞外多糖，通過高產(chǎn)細(xì)菌多糖的菌株ZY03發(fā)酵制備中間蒼白桿菌胞外多糖。

為解決本發(fā)明的技術(shù)問題，本發(fā)明的另一技術(shù)方案是：所述的中間蒼白桿菌胞外多糖吸附金屬離子的方法，包括以下步驟：

步驟(1)：獲得產(chǎn)胞外多糖的中間蒼白桿菌ZY03；

步驟(2)：獲得中間蒼白桿菌胞外多糖；

步驟(3)：中間蒼白桿菌胞外多糖對(duì)金屬離子的吸附；

步驟(4)：中間蒼白桿菌胞外多糖對(duì)金屬離子的解吸附。

優(yōu)選的，所述步驟(1)的獲得產(chǎn)胞外多糖的中間蒼白桿菌ZY03的工藝為：從發(fā)霉中藥藥渣獲得高效產(chǎn)糖菌株，16srDNA進(jìn)行菌種鑒定，獲得一種高產(chǎn)細(xì)菌多糖的菌株，保藏名稱：中間蒼白桿菌ZY03(Intermediate ochrobactrum ZY03)，保藏單位：中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏地址：中國武漢大學(xué)，保藏日期：2016年5月20日；保藏號(hào)為CCTCC M 2016273，以中間蒼白桿菌ZY03為生產(chǎn)菌株，接種于天然培養(yǎng)基中，在溫度30℃、180rpm轉(zhuǎn)速、通風(fēng)比1∶1培養(yǎng)基中培養(yǎng)18-24小時(shí)，獲種子培養(yǎng)液；將所述種子培養(yǎng)液接種于多糖發(fā)酵培養(yǎng)基中，搖床中發(fā)酵3-5天，得到發(fā)酵液。

優(yōu)選的，所述步驟(2)的獲得中間蒼白桿菌胞外多糖工藝為：發(fā)酵液經(jīng)高速離心去除菌體，上清液真空濃縮至原液體積的1/3，用1-3倍體積的無水乙醇沉淀，離心取沉淀，沉淀物采用Sevag法去蛋白，再經(jīng)乙醇沉淀，沉淀物經(jīng)等量的75％乙醇洗滌2～3次，烘干后得中間蒼白桿菌胞外多糖。

優(yōu)選的，所述步驟(3)的中間蒼白桿菌胞外多糖對(duì)金屬離子的吸附工藝為：獲取含金屬離子的溶液，調(diào)整所述溶液的pH值范圍為0-7，向溶液添加中間蒼白桿菌胞外多糖，中間蒼白桿菌胞外多糖的添加量為每升溶液5-10克，攪拌過濾得到富集有金屬離子的中間蒼白桿菌胞外多糖。

優(yōu)選的，所述步驟(4)的中間蒼白桿菌胞外多糖對(duì)金屬離子的解吸附的工藝為：將上述富集有金屬離子的中間蒼白桿菌胞外多糖加入到有機(jī)溶液中進(jìn)行解吸附。

優(yōu)選的，所述天然培養(yǎng)基為馬鈴薯培養(yǎng)基，所述的種子培養(yǎng)液接種于多糖發(fā)酵培養(yǎng)基中，種子培養(yǎng)液接種與多糖發(fā)酵培養(yǎng)基中的質(zhì)量濃度為2％～10％。

優(yōu)選的，所述的多糖發(fā)酵培養(yǎng)基，培養(yǎng)基組分以質(zhì)量百分含量計(jì)組分如下：馬鈴薯汁20％，(NH₄)₂SO₄ 0.8％，葡萄糖2％，CaCl₂ 0.02％，MgSO₄ 0.01％；pH自然。

優(yōu)選的，所述的有機(jī)溶液，是重鉻酸鉀溶液、醋酸鉛溶液、氯化鎘溶液、三氯化鐵溶液或硫酸銅溶液中的一種。

為解決本發(fā)明的技術(shù)問題，本發(fā)明的另一技術(shù)方案是：所述中間蒼白桿菌胞外多糖在保濕性和保水性方面中應(yīng)用。

本發(fā)明有益效果：

1.本發(fā)明所述的中間蒼白桿菌(Intermediate ochrobactrum)ZY03進(jìn)行發(fā)酵的營養(yǎng)要求較低，可以制備得到高產(chǎn)、高純度胞外多糖，在實(shí)驗(yàn)室條件下該菌株產(chǎn)中間蒼白桿菌胞外多糖得率可高達(dá)67％，高于一般報(bào)道桿菌產(chǎn)糖比例(35％～55％)。

2.本發(fā)明所述中間蒼白桿菌胞外多糖吸附金屬離子能力強(qiáng)，對(duì)各類重金屬離子吸附效率>60％，大于一般多糖的金屬離子文獻(xiàn)報(bào)道吸附率。

3.本發(fā)明所述中間蒼白桿菌胞外多糖通過吸附金屬離子可以達(dá)到修復(fù)土壤的功效，同時(shí)，所述中間蒼白桿菌胞外多糖具有保濕與保水作用，在土壤修復(fù)、調(diào)節(jié)領(lǐng)域具有巨大應(yīng)用價(jià)值。

附圖說明

圖1為中間蒼白桿菌ZY03在平面培養(yǎng)基中產(chǎn)糖的照片。

圖2為所述中間蒼白桿菌胞外多糖的分子質(zhì)量凝膠滲透色譜圖。

本發(fā)明提供的中間蒼白桿菌ZY03(Intermediate ochrobactrum ZY03)已經(jīng)于2016年5月20日提交中國典型培養(yǎng)物保藏中心(簡(jiǎn)稱為CCTCC，位于中國武漢大學(xué))進(jìn)行保藏，保藏號(hào)為CCTCC NO：M 2016273。

具體實(shí)施方式

為了進(jìn)一步理解本發(fā)明，下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明優(yōu)選實(shí)施方案進(jìn)行描述，但是應(yīng)當(dāng)理解，這些描述只是為進(jìn)一步說明本發(fā)明的特征和優(yōu)點(diǎn)，而不是對(duì)本發(fā)明權(quán)利要求的限制。

實(shí)施例1

中間蒼白桿菌胞外多糖的菌株的篩選與菌種鑒定

菌種分離碳為來自已經(jīng)發(fā)霉的黃芪藥渣，從黃芪藥渣中篩選分離獲得具有腈類水解酶活力的微生物。液體培養(yǎng)基組成為：蛋白胨8g/L，酵母粉5g/L，氯化鈉10g/L，pH 7.0；平板培養(yǎng)基組成為：蛋白胨8g/L，酵母粉4g/L，氯化鈉10g/L，瓊脂粉15g/L；篩選培養(yǎng)基組成為：甘油3g/L，氯化鎂0.4g/L，硫酸鎂0.5g/L，亞磷酸氫鈉2g/L，亞磷酸氫鉀2g/L，滅菌后加入5mL/L的β-氨基丙腈。在篩選培養(yǎng)基上長(zhǎng)出菌體的培養(yǎng)液稀釋不同梯度，進(jìn)行平板涂布，選取不同單菌落接種到篩選培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)72h，離心得到菌體，取0.5g離心得到菌體，加入10mL磷酸緩沖溶液，震蕩混勻，加入0.04mLβ-氨基丙腈,室溫水浴轉(zhuǎn)化。上清觀察熒光變化，并分別取0，12，24h的樣品進(jìn)行HPLC檢測(cè)。反應(yīng)后，經(jīng)HPLC檢測(cè)，獲得1株具有腈類水解能力的菌株。所述菌株，在天然培養(yǎng)基中生長(zhǎng)24h后，菌落大小直徑為2mm～3.5mm，生長(zhǎng)溫度范圍為20℃～37℃，最適生長(zhǎng)溫度為30℃，生長(zhǎng)pH范圍為7.0～9.0，最適生長(zhǎng)pH為8.0。菌體呈短桿狀具有平行邊及圓端,染色均勻,有鞭毛，具運(yùn)動(dòng)性，專性好氧，嚴(yán)格呼吸代謝，革蘭氏染色表明此菌株為革蘭氏陰性菌。通過16SRNA同源性鑒定及系統(tǒng)發(fā)育分析，鑒定此菌株為中間蒼白桿菌屬，命名為中間蒼白桿菌ZY03。

實(shí)施例2

中間蒼白桿菌ZY03的發(fā)酵及靜息細(xì)胞的制備

將中間蒼白桿菌ZY03接種于土豆培養(yǎng)基中，在溫度30℃、180rpm轉(zhuǎn)速、通風(fēng)比1∶1培養(yǎng)基中培養(yǎng)18-24小時(shí)，獲種子培養(yǎng)液；所述種子培養(yǎng)液接種于多糖發(fā)酵培養(yǎng)基中，多糖發(fā)酵培養(yǎng)基pH自然，組分以質(zhì)量百分含量計(jì)組分如下：馬鈴薯汁20％，(NH₄)₂SO₄ 0.8％，葡萄糖2％，CaCl₂ 0.02％，MgSO₄ 0.01％；10000rpm離心15分鐘后收集菌體細(xì)胞，以生理鹽水洗滌l～2次，得中間蒼白桿菌ZY03的靜息細(xì)胞。

實(shí)施例3

將實(shí)施例2中的菌體細(xì)胞發(fā)酵液過濾，得到濕菌體，分別置于4個(gè)同樣的多糖發(fā)酵培養(yǎng)基中，菌體質(zhì)量濃度為5％，搖床中分別發(fā)酵2、3、4、5天；發(fā)酵液經(jīng)高速離心去除菌體，上清液真空濃縮至原液體積的1/3，用2倍體積的無水乙醇沉淀，離心取沉淀，沉淀物采用Sevag法去蛋白，再經(jīng)乙醇沉淀，沉淀物經(jīng)等量的75％乙醇洗滌2～3次，烘干后得胞外粗多糖產(chǎn)品，苯酚-濃硫酸法測(cè)定多糖含量見表1。

表1發(fā)酵不同天數(shù)后細(xì)菌多糖的含量

實(shí)施例4

將實(shí)施例2中的菌體細(xì)胞發(fā)酵液過濾，得到濕菌體，分別置于4個(gè)同樣的多糖發(fā)酵培養(yǎng)基中，菌體質(zhì)量濃度為5％，搖床中發(fā)酵4天；發(fā)酵液經(jīng)高速離心去除菌體，上清液真空濃縮至原液體積的1/3，分別用1、1.5、2.0、3.0體積倍數(shù)的無水乙醇沉淀，離心取沉淀，沉淀物采用Sevag法去蛋白，再經(jīng)乙醇沉淀，沉淀物經(jīng)等量的75％乙醇洗滌2～3次，烘干后得胞外粗多糖產(chǎn)品，苯酚-濃硫酸法測(cè)定多糖含量見表2。

表2不同體積無水乙醇提取細(xì)菌多糖的含量

實(shí)施例5

步驟(1)種子培養(yǎng)：從碳源獲得高效產(chǎn)糖菌株，16srDNA進(jìn)行菌種鑒定，獲得采用保藏號(hào)為CCTCC M 2016273的中間蒼白桿菌(Intermediate ochrobactrum)ZY03，以中間蒼白桿菌ZY03為生產(chǎn)菌株，接種于馬鈴薯培養(yǎng)基中，在溫度30℃、180rpm轉(zhuǎn)速、通風(fēng)比1∶1培養(yǎng)基中培養(yǎng)18-24小時(shí)，獲種子培養(yǎng)液；

步驟(2)搖床培養(yǎng)：將步驟(1)所述種子培養(yǎng)液接種于多糖發(fā)酵培養(yǎng)基中，搖床中發(fā)酵3-5天；所述步驟(2)的多糖發(fā)酵培養(yǎng)基，培養(yǎng)基組分以質(zhì)量百分含量計(jì)組分如下：馬鈴薯汁20％，(NH₄)₂SO₄ 0.8％，葡萄糖2％，CaCl₂ 0.02％，MgSO₄ 0.01％；pH自然。種子培養(yǎng)液接種與多糖發(fā)酵培養(yǎng)基中的質(zhì)量濃度為2％～10％。

步驟(3)細(xì)菌粗多糖的提?。喊l(fā)酵液經(jīng)高速離心去除菌體，上清液真空濃縮至原液體積的1/3，用1-3倍體積的無水乙醇沉淀，離心取沉淀，沉淀物采用Sevag法去蛋白，再經(jīng)乙醇沉淀，沉淀物經(jīng)等量的75％乙醇洗滌2～3次，烘干后得胞外粗多糖產(chǎn)品。

實(shí)施例6

以上述所制備中間蒼白桿菌胞外多糖進(jìn)行吸附重金屬離子效果的實(shí)驗(yàn)

1)鉻的測(cè)定—二苯氨基脲比色法

重鉻酸鉀110℃加熱2h干燥放冷，精確稱取配成濃度為0.1g/L的鉻標(biāo)準(zhǔn)溶液，臨用時(shí)用水稀至1μg/L。分別移取鉻標(biāo)準(zhǔn)溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL，于瓷坩堝中加20％的碳酸鈉10mL，水浴中除去水分，然后移入灰化爐中灰化完全(大約4h)，將灰分加40mL水溶解于150mL三角瓶中，加入數(shù)滴2％的高錳酸鉀，加熱10min，加95％乙醇2mL，然后加入5M/L的濃硫酸2mL，繼續(xù)加熱至棕色，調(diào)節(jié)pH值至中性，過濾，定容25mL，加入2.5mL二苯氨基脲，于540nm處比色并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

濃度為20-800μg/mL的重鉻酸鉀溶液25mL，加入0.2g中間蒼白桿菌胞外多糖粉末，分別在恒溫振蕩器上震蕩1-8h，加入95％乙醇醇沉至乙醇濃度達(dá)80％，靜置高速離心15min，上清液減壓濃縮回收乙醇后定容25mL待測(cè)。取2mL待測(cè)液，加入20％的碳酸鈉10mL。水浴中加熱蒸發(fā)，灰化爐中灰化完全，余下操作同標(biāo)準(zhǔn)曲線，調(diào)節(jié)pH1-7。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算鉻含量，結(jié)果見表3、表4和表5。

2)鎘、鉛的測(cè)定—原子吸收分光光度法

濃度為20-800μg/mL的硝酸鉛溶液、氯化鎘溶液、溶液25mL，加入0.2g中間蒼白桿菌胞外多糖粉末，分別在恒溫振蕩器上震蕩1-8h，加入95％乙醇醇沉至乙醇濃度達(dá)80％，靜置高速離心15min，上清液減壓濃縮回收乙醇后定容25mL待測(cè)。消化瓶中加入待測(cè)溶液10mL，加入硝酸-高氯酸(4:l)約10mL，通風(fēng)櫥中加熱至棕色，冷卻加約5mL濃硫酸繼續(xù)加熱至淡黃色或無色，定容25mL，用原子吸收分光光度法測(cè)定鎘、鉛的含量，結(jié)果見表3、表4和表5。

3)鐵的測(cè)定—鄰二氮雜菲吸光光度法

分別取0.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL的標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液(100mg/L)于6只50mL容量瓶中，加入10％鹽酸羥胺溶液1mL，0.15％鄰二氮雜菲溶液2mL和1mol/L的醋酸鈉溶液5mL，以水稀釋至刻度搖勻。于510nm處比色并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

濃度為600-4000μg/mL的三氯化鐵溶液25mL，加入0.2g中間蒼白桿菌胞外多糖粉末，分別在恒溫振蕩器上震蕩1-8h，加入95％乙醇醇沉至乙醇濃度達(dá)80％，靜置高速離心15min，上清液減壓濃縮回收乙醇后定容25mL待測(cè)。取待測(cè)液1mL于50mL容量瓶中，余下操作同上，在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得鐵的濃度，結(jié)果見表3、表4和表6。

表3中間蒼白桿菌胞外多糖對(duì)重金屬吸附百分率與吸附時(shí)間的關(guān)系

精確稱取0.2g中間蒼白桿菌胞外多糖加入25mL濃度為10μg/mL的重鉻酸鉀溶液、硝酸鉛溶液、氯化鎘、三氯化鐵溶液，分別在恒溫振蕩器上震蕩1、2、3、4、6、8h，計(jì)算出多糖對(duì)鉻、鉛、鎘、鐵離子的吸附百分率，結(jié)果表明中間蒼白桿菌胞外多糖對(duì)鉻、鉛、鎘離子的吸附在6h時(shí)達(dá)到最大值，對(duì)鐵離子吸附在3h時(shí)達(dá)到最大值。固確定多糖對(duì)鉻、鉛、鎘離子的最佳吸附時(shí)間為6h，對(duì)鐵離子的最佳吸附時(shí)間為3h。

表4中間蒼白桿菌胞外多糖對(duì)重金屬吸附百分率與pH的關(guān)系

精確稱取0.2g中間蒼白桿菌胞外多糖加入25mL濃度為10μg/mL的不同pH重鉻酸鉀溶液、硝酸鉛溶液、氯化鎘、三氯化鐵溶液，分別在恒溫振蕩器上震蕩6h(三氯化鐵振蕩3h)，計(jì)算出多糖對(duì)鉻、鉛、鎘、鐵離子的吸附百分率，結(jié)果表明pH值小于4的酸性條件下，多糖對(duì)金屬離子的吸附較小，弱酸牲至中性溶液中，多糖對(duì)鉻、鉛、鎘、鐵離子的吸附率增加。且同一pH下，中間蒼白桿菌胞外多糖對(duì)重金屬離子吸附能力由大到小為：Fe³⁺、Pb²⁺、Cd²⁺、Cr⁶⁺。

表5中間蒼白桿菌胞外多糖對(duì)重金屬吸附百分率與起始濃度的關(guān)系

精確稱取0.2g中間蒼白桿菌胞外多糖加入25mL濃度為20、40、50、160、240、320、640、800的重鉻酸鉀溶液、硝酸鉛溶液、氯化鎘溶液中，分別在恒溫振蕩器上震蕩6h，計(jì)算出多糖對(duì)鉻、鉛、鎘離子的吸附百分率，結(jié)果表明多糖對(duì)鉻、鉛、鎘離子的吸附率隨著金屬離子起始濃度的增加而增加。

表6中間蒼白桿菌胞外多糖對(duì)對(duì)不同濃度的氯化鐵溶液中Fe離子的吸附率

精確稱取0.2g中間蒼白桿菌胞外多糖加入25mL濃度為600、800、1000、1200、1400、1600、1800、2000、2400的三氯化鐵溶液中，在恒溫振蕩器上震蕩3h，計(jì)算出多糖對(duì)鐵離子的吸附百分率，結(jié)果表明多糖對(duì)鐵離子的吸附能力較強(qiáng)，但隨著鐵離子濃度增加時(shí)其吸附率稍有降低可能是鐵離子吸附達(dá)到飽和時(shí)，隨著振蕩可能有部分Fe³⁺解吸。

實(shí)施例7

以上述所制備中間蒼白桿菌胞外多糖進(jìn)行多糖保濕性和保水性測(cè)定

(1)中間蒼白桿菌胞外多糖保濕性測(cè)定

準(zhǔn)確稱5.0g質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10％的多糖溶液放置直徑6cm的表面皿上，分別置于干硅膠(RH 0％)和飽和Na₂CO₃溶液(RH 43％)的干燥器中，室溫下放置5天，每天稱重，甘油作為對(duì)照，計(jì)算保濕率P，公式如下：

(M為放置后樣品質(zhì)量；M₀為初始樣品質(zhì)量，即5.0g)

表7中間蒼白桿菌胞外多糖在飽和碳酸鈉溶液和干硅膠中的保濕活性

結(jié)果表明，飽和Na₂CO₃和干硅膠中，在測(cè)定的時(shí)間內(nèi)所有樣品的含水量均逐漸的減少，中間蒼白桿菌胞外多糖的保濕率明顯優(yōu)于甘油。

(2)胞外多糖的保水性測(cè)定

采用計(jì)算土壤水分蒸發(fā)速率的方式測(cè)定胞外多糖保水性。取3個(gè)體積1立方米的正方體容器，普通黃土105℃，4小時(shí)烘干至恒重，稱量平均分為三份，份土壤質(zhì)量記為M₁，填入容器中壓實(shí)，連同容器中質(zhì)量為M₂，分別給予相同質(zhì)量的自來水、10^-5g/L的多糖溶液，使土壤充分吸水，所用自來水和多糖溶液的質(zhì)量記為M₃，自來水作為對(duì)照。所有容器于30℃恒溫放置3周，每周測(cè)量容器連同土壤的質(zhì)量記為M₄，計(jì)算出水分蒸發(fā)率K，公式如下：

土壤水分蒸發(fā)率結(jié)果見表8：

表8土壤水分蒸發(fā)率結(jié)果

結(jié)果表明，中間蒼白桿菌胞外多糖對(duì)土壤有一定的保水性，且隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，土壤水分蒸發(fā)速率降低越明顯。

本發(fā)明的不局限于上述實(shí)施例所述的具體技術(shù)方案，凡采用等同替換形成的技術(shù)方案均為本發(fā)明要求的保護(hù)范圍。