本發(fā)明屬于藥物合成領(lǐng)域，涉及野黃芩素衍生物及其制備方法和用途，具體涉及一類A環(huán)具有苯并二氧六環(huán)結(jié)構(gòu)，B環(huán)4’位連接脂溶性基團和水溶性基團的野黃芩素衍生物及其制備方法和應用。

背景技術(shù)：

惡性腫瘤又稱為癌癥，癌癥目前已成為人類生命的第二大殺手，僅位居心血管疾病之后，盡管人類平均壽命延長，惡性腫瘤對人類健康的威脅日益明顯，世界的癌癥發(fā)病率每年都在遞增，全世界每年約760萬人死于癌癥，有1010余萬人患惡性腫瘤，癌癥現(xiàn)已成為人類死亡的常見原因之一。腫瘤的化學預防是降低癌癥發(fā)病率的最直接方法之一。雖然市場上已有很多抗癌藥物，但是許多由于其毒副作用大而限制了在臨床上的使用。因此研發(fā)出活性更高，而且毒副作用更小的抗癌藥物已成為當務之急。

野黃芩苷(Scutellarin)是從菊科飛蓬草屬植物短亭飛蓬[Erigeron breviscapus(vant)Hand Mass]的干燥全草中提取得到的黃酮類化合物。野黃芩苷雖然在臨床應用中取得了良好的效果，但由于野黃芩苷存在溶解性差、生物利用度低、體內(nèi)代謝快等缺陷，使其在制劑及臨床應用上受到限制。對野黃芩苷的體內(nèi)代謝研究發(fā)現(xiàn)，口服野黃芩苷后在體內(nèi)的吸收形式為其苷元野黃芩素，其結(jié)構(gòu)式如式II所示。研究表明野黃芩素可通過抑制腫瘤細胞增殖、抑制腫瘤細胞侵襲和轉(zhuǎn)移以及誘導腫瘤細胞凋亡發(fā)揮抗腫瘤作用?；谝陨媳尘?，本發(fā)明合成了一系列A環(huán)具有苯并二氧六環(huán)結(jié)構(gòu)，B環(huán)4’位連接脂溶性基團和水溶性基團的野黃芩素衍生物，并進行了體外抗腫瘤活性研究。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一系列野黃芩素衍生物，并對這些化合物進行抗腫瘤活性測試，從而提供具有一定藥用價值的野黃芩素衍生物。

本發(fā)明的目的可通過以下措施達到：

如式I所示的野黃芩素衍生物：

其中，R選自

R₁選自苯基、單取代或多取代苯基、含1-2個N的5-6元雜環(huán)基團；

R₂選自含1-2個N的5-6元雜環(huán)基團；

R₃選自C₁-C₆烷基、苯基、單取代或多取代苯基；

R₄、R₅選自C₁-C₆烷基；

含1-2個N的5-6元雜環(huán)基團選自吡咯烷基、嗎啉基、4-羥基哌啶基、取代哌嗪基；

所述的單取代或多取代苯基的取代基選自C₁-C₆烷基、烷氧基、鹵素、硝基、三氟甲基；

所述的取代哌嗪基的取代基選自C₁-C₆烷基、苯基、鹵素取代苯基、吡啶基、嘧啶基。

優(yōu)選的，R₁選自苯基、單取代或多取代苯基、含1-2個N的5-6元雜環(huán)基團；R₂選自含1-2個N的5-6元雜環(huán)基團；

其中，R₃選自C₁-C₅烷基、單取代或多取代苯基；

R₄、R₅選自C₁-C₅烷基；

含1-2個N的5-6元雜環(huán)基團選自吡咯烷基、嗎啉基、4-羥基哌啶基、取代哌嗪基；

所述的單取代或多取代苯基的取代基選自C₁-C₅烷基、甲氧基、氟、氯、溴；

所述的取代哌嗪基的取代基選自C₁-C₅烷基、氟取代苯基、吡啶基、嘧啶基。

進一步優(yōu)選的，R₁選自苯基、單取代或多取代苯基、含1-2個N的5-6元雜環(huán)基團；R₂選自含1-2個N的5-6元雜環(huán)基團；

其中，R₃選自C₁-C₄烷基、單取代或多取代苯基；

R₄、R₅選自C₁-C₄烷基；

含1-2個N的5-6元雜環(huán)基團選自吡咯烷基、嗎啉基、4-羥基哌啶基、取代哌嗪基；

所述的單取代或多取代苯基的取代基選自C₁-C₄烷基、甲氧基、氟、氯、溴；

所述的取代哌嗪基的取代基選自C₁-C₄烷基、氟取代苯基、吡啶基、嘧啶基。

本發(fā)明中，所述的單取代或多取代苯基的取代基選自甲基、乙基、正丙基、異丙基、異丁基、甲氧基、氟、氯、溴；選自乙胺基、丙胺基、異丙胺基、丁胺基、對異丙基苯胺基；選自二乙胺基、乙二醇胺基；含1-2個N的5-6元雜環(huán)基團選自吡咯烷基、嗎啉基、4-羥基哌啶基、N-甲基哌嗪基、N-乙基哌嗪基、N-羥乙基哌嗪基、1-(4-吡啶基)哌嗪基、1-(2-吡啶基)哌嗪基、1-(2-嘧啶基)哌嗪基、1-(4-氟苯基)哌嗪基、1-(2-氟苯基)哌嗪基。

本發(fā)明中所述的野黃芩素衍生物具體選自：10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-對甲氧基苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-對氟苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-對氯苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-對溴苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥-7-(4’-(2-氧代-2-對異丁基苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-對異丙基苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-對甲基苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-鄰氟苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-(3，4-二甲氧基苯基)乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-吡咯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-嗎啉基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-二乙胺基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-(1-(2-吡啶基)哌嗪基)乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-(1-(2-嘧啶基)哌嗪基)乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-(1-(4-氟苯基基)哌嗪基)乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-(1-(2-氟苯基基)哌嗪基)乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-異丙胺基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2正丙胺基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-正丁胺基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-乙胺基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-吡咯基丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-(1-甲基哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-二乙胺基丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-嗎啉基丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-(1-乙基哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-(1-羥乙基哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-(4-羥基哌啶基)丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-(1-(2-吡啶基)哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-(1-(4-吡啶基)哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-(1-(2-嘧啶基)哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-(1-(2-氟苯基)哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-(1-(4-氟苯基)哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-乙二醇胺基丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

本發(fā)明的另一個目的在于提供野黃芩素衍生物的制備方法。

R為時，制備方法為：(1)野黃芩素和碳酸鉀溶于N，N-二甲基甲酰胺中，與1，2-二溴乙烷加熱反應生成10-羥基-7-(4’-羥基苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮；(2)10-羥基-7-(4’-羥基苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮溶于N，N-二甲基甲酰胺中，依次加入碳酸鉀和碘化鉀，充分攪拌30分鐘后加入室溫或加熱反應得到野黃芩素衍生物；其中，步驟(1)中所述的野黃芩素、1，2-二溴乙烷、碳酸鉀的摩爾比為1∶1～2∶1～2，優(yōu)選為1∶1.5∶1.5；步驟(2)中所述的10-羥基-7-(4’-羥基苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮、碳酸鉀、碘化鉀的摩爾比為1∶1～2∶1～2∶1，優(yōu)選為1∶1.2∶2∶1。

R為時，制備方法為：(1)野黃芩素和碳酸鉀溶于N，N-二甲基甲酰胺中，與1，2-二溴乙烷加熱反應生成10-羥基-7-(4’-羥基苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮；(2)10-羥基-7-(4’-羥基苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮溶于N，N-二甲基甲酰胺中，依次加入碳酸鉀、碘化鉀，充分攪拌30分鐘后加入氯代環(huán)氧丙烷，加熱反應得到10-羥基-7-(4’-環(huán)氧丙烷基苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮；(3)10-羥基-7-(4’-環(huán)氧丙烷基苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮和R₁H溶于無水乙醇中，加熱回流反應得到野黃芩素衍生物；其中，步驟(2)中所述的10-羥基-7-(4’-羥基苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮、氯代環(huán)氧丙烷、碳酸鉀、碘化鉀的摩爾比為1∶1～2∶1～2∶1，優(yōu)選為1∶1.2∶2∶1；步驟(3)中所述的10-羥基-7-(4’-環(huán)氧丙烷基苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮、R₁H的摩爾比為1∶1～2，優(yōu)選為1∶1.2。

其中，R₁選自苯基、單取代或多取代苯基、含1-2個N的5-6元雜環(huán)基團；

R₂選自含1-2個N的5-6元雜環(huán)基團；

R₃選自C₁-C₆烷基、苯基、單取代或多取代苯基；

R₄、R₅選自C₁-C₆烷基；

含1-2個N的5-6元雜環(huán)基團選自吡咯烷基、嗎啉基、4-羥基哌啶基、取代哌嗪基；

所述的單取代或多取代苯基的取代基選自C₁-C₆烷基、烷氧基、鹵素、硝基、三氟甲基；

所述的取代哌嗪基的取代基選自C₁-C₆烷基、苯基、鹵素取代苯基、吡啶基、嘧啶基。

發(fā)明人對合成的野黃芩素衍生物進行體外三種癌細胞：肺癌A549細胞、黑色素瘤B16F10細胞和乳腺癌MCF-7細胞的細胞毒實驗測試，與野黃芩素相比，表現(xiàn)出不同程度的細胞毒活性，其中大多數(shù)化合物對黑色素瘤B16F10細胞具有最強的抗腫瘤活性，表明這類化合物具有顯著的抑制腫瘤細胞增殖的作用。因此，本發(fā)明的另一個目的是提供所述的野黃芩素衍生物在制備治療抗腫瘤藥物中的應用。所述的腫瘤為肺癌、黑色素瘤、乳腺癌。

本發(fā)明的有益效果：

本發(fā)明以野黃芩素為起始原料，合成了一系列A環(huán)具有苯并二氧六環(huán)結(jié)構(gòu)，B環(huán)4’位連接脂溶性和水溶性基團的野黃芩素衍生物，該合成方法簡單，具有較好的可操作性和反應收率。這些合成的野黃芩素衍生物在抗腫瘤方面表現(xiàn)出不同程度的活性，對于抗腫瘤藥物的開發(fā)具有重要意義。

具體實施方式

結(jié)合具體實例對本發(fā)明的技術(shù)方案作進一步的說明，但本發(fā)明并不限于以下實例。

實施例1 10-羥基-7-(4’-羥基苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物2)的制備

將野黃芩素(286.24mg，1mmol)溶于5mL無水DMF中，室溫加入碳酸鉀(207.3mg，1.5mmol)和二溴乙烷(129.87μL，1.5mmol)，N₂保護下110℃反應2h。反應結(jié)束后，反應液傾入40mL水中，有大量黃色固體析出，抽濾，濾餅用甲醇重結(jié)晶，得黃色粉末90mg，產(chǎn)率29％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-羥基苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：335.1[M+Na]⁺，313.1[M+H]⁺，311.1[M-H]^-，相對分子質(zhì)量為312。

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ13.03(s，1H，10-OH)，10.39(s，1H，4’-OH)，7.93(d，2H，J＝8.6Hz，2’，6’-OH)，6.91(d，2H，J＝8.6Hz，3’，5’-OH)，6.81(s，1H，11-H)，6.73(s，1H，8-H)，4.34(each t，2×2H，-OCH₂CH₂O-)。

實施例2 10-羥基-7-(4’-環(huán)氧丙烷基苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物3)的制備

化合物2(120.00mg，0.4mmol)溶于4mL DMF中，依次加入碳酸鉀(110.56mg，0.8mmol)，碘化鉀(66.40mg，0.4mmol)，室溫反應30min后加入氯代環(huán)氧丙烷(37.63μL，0.48mmol)，85℃反應5h。反應結(jié)束后冷至室溫，反應液用40mL乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗3次，每次20mL，有機層用無水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物用硅膠柱色譜分離純化，洗脫劑為二氯甲烷，得黃色粉末56.00mg，產(chǎn)率38.00％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-環(huán)氧丙烷基苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：391.1[M+Na]⁺，369.1[M+H]⁺，367.1[M-H]^-，相對分子質(zhì)量為368。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.96(s，1H，10-OH)，7.86(d，2H，J＝8.9Hz，2’，6’-H)，7.06(d，2H，J＝8.9Hz，3’，5’-H)，6.58(s，1H，11-H)，6.56(s，1H，8-H)，4.40(t，4H，-OCH₂CH₂O-)，4.35(d，1H，overlap，J＝2.8Hz，3”a-H)，4.03(dd，1H，J＝11.0，5.8Hz，3”b-H)，3.42(m，1H，2”-H)，2.97(t，1H，J＝4.5Hz，1”α-H)，2.82(dd，1H，J＝4.7，2.6Hz，1”β-H)。

實施例3 10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物4)的制備

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL無水DMF中，依次加入碳酸鉀(70.87mg，0.51mmol)，碘化鉀(43.16mg，0.26mmol)，室溫反應30min后加入2-溴代苯乙酮(61.37mg，0.31mmol)，室溫反應12h。待反應結(jié)束后，反應液用40mL乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗3次，每次20mL，有機層用無水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物用硅膠柱色譜分離純化，洗脫劑為石油醚-二氯甲烷(1∶20)，得淡黃色粉末56.00mg，產(chǎn)率50.45％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：469.1[M+K]⁺，431.1[M+H]⁺，429.1[M-H]^-，相對分子質(zhì)量為430。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.94(s，1H，10-OH)，8.03(d，2H，J＝7.5Hz，2”，6”-H)，7.83(d，2H，J＝8.8Hz，2’，6’-H)，7.67(dd，1H，J＝14.9，7.5Hz，4”-H)，7.55(dd，2H，J＝14.9，7.5Hz，3”，5”-H)，7.05(d，2H，J＝8.8Hz，3’，5’-H)，6.55(s，1H，11-H)，6.53(s，1H，8-H)，5.41(s，2H，-OCH₂CO-)，4.38(m，4H，-OCH₂CH₂O-)。

實施例4 10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-對甲氧基苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物5)的制備

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL無水DMF中，依次加入碳酸鉀(70.87mg，0.51mmol)，碘化鉀(43.16mg，0.26mmol)，室溫反應30min后加入2-溴代對甲氧基苯乙酮(66.31mg，0.31mmol)，室溫反應12h。待反應結(jié)束后，反應液用40mL乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗3次，每次20mL，有機層用無水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物用硅膠柱色譜分離純化，洗脫劑為石油醚-二氯甲烷(1∶5)，得淡黃色粉末59.12mg，產(chǎn)率49.43％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-對甲氧基苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：483.2[M+Na]⁺，461.2[M+H]⁺，459.2[M-H]^-，相對分子質(zhì)量為460。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.95(s，1H，10-OH)，8.02(d，2H，J＝8.6Hz，2”，6”-H)，7.84(d，2H，J＝8.7Hz，2’，6’-H)，7.06(d，2H，J＝8.6Hz，3”，5”-H)，7.03(d，2H，J＝8.7Hz，3’，5’-H)，6.56(s，1H，11-H)，6.54(s，1H，8-H)，5.34(s，2H，OCH₂CO-)，4.38(m，4H，-OCH₂CH₂O-)，3.92(s，3H，-OCH₃)。

實施例5 10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-對氟苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物6)的制備

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL無水DMF中，依次加入碳酸鉀(70.87mg，0.51mmol)，碘化鉀(43.16mg，0.26mmol)，室溫反應30min后加入2-溴代對氟苯乙酮(62.60mg，0.31mmol)，室溫反應12h。待反應結(jié)束后，反應液用40mL乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗3次，每次20mL，有機層用無水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物用硅膠柱色譜分離純化，洗脫劑為石油醚-二氯甲烷(1∶5)，得淡黃色粉末48.70mg，產(chǎn)率41.81％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-對氟苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：449.1[M+H]⁺，相對分子質(zhì)量為448。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.93(s，1H，5-OH)，8.08(dd，2H，J＝18.6，8.6Hz，2”，6”-H)，7.85(d，2H，J＝8.7Hz，2’，6’-H)，7.23(dd，2H，J＝18.6，8.6Hz，3”，5”-H)，7.06(d，2H，J＝8.7Hz，3’，5’-H)，6.57(s，1H，11-H)，6.55(s，1H，8-H)，5.36(s，2H，-OCH₂CO-)，4.39(m，4H，-OCH₂CH₂O-)。

實施例6 10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-對氯苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物7)的制備

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL無水DMF中，依次加入碳酸鉀(70.87mg，0.51mmol)，碘化鉀(43.16mg，0.26mmol)，室溫反應30min后加入2-溴代對氯苯乙酮(67.55mg，0.31mmol)，室溫反應12h。待反應結(jié)束后，反應液用40mL乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗3次，每次20mL，有機層用無水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物用硅膠柱色譜分離純化，洗脫劑為石油醚-二氯甲烷(1∶200)，得淡黃色粉末54.86mg，產(chǎn)率45.47％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-對氯苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：487.9[M+Na]⁺，465.1[M+H]⁺，463.1[M-H]^-，相對分子質(zhì)量為464。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.93(s，1H，10-OH)，7.98(d，2H，J＝8.4Hz，2”，6”-H)，7.85(d，2H，J＝8.8Hz，2’，6’-H)，7.52(d，2H，J＝8.4Hz，3”，5”-H)，7.05(d，2H，J＝8.8Hz，3’，5’-H)，6.57(s，1H，11-H)，6.55(s，1H，8-H)，5.34(s，2H，-OCH₂CO-)，4.39(m，4H，-OCH₂CH₂O-)。

實施例7 10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-對溴苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物8)的制備

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL無水DMF中，依次加入碳酸鉀(70.87mg，0.51mmol)，碘化鉀(43.16mg，0.26mmol)，室溫反應30min后加入2-溴代對溴苯乙酮(81.18mg，0.31mmol)，室溫反應12h。待反應結(jié)束后，反應液用40mL乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗3次，每次20mL，有機層用無水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物用硅膠柱色譜分離純化，洗脫劑為二氯甲烷-甲醇(200∶1)，得淡黃色粉末43.56mg，產(chǎn)率32.92％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-對溴苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：508.0[M-H]^-，相對分子質(zhì)量為509。

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ12.97(s，1H，10-OH)，8.03(d，2H，J＝8.6Hz，2”，6”-H)，7.98(d，2H，J＝8.2Hz，2’，6’-H)，7.82(d，2H，J＝8.2Hz，3”，5”-H)，7.17(d，2H，J＝8.6Hz，3’，5’-H)，6.90(s，1H，11-H)，6.76(s，1H，8-H)，5.72(s，2H，-OCH₂CO-)，4.34(m，4H，-OCH₂CH₂O-)。

實施例8 10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-對異丁基苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物9)的制備

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL無水DMF中，依次加入碳酸鉀(70.87mg，0.51mmol)，碘化鉀(43.16mg，0.26mmol)，室溫反應30min后加入2-溴代對異丁基苯乙酮(74.40mg，0.31mmol)，室溫反應12h。待反應結(jié)束后，反應液用40mL乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗3次，每次20mL，有機層用無水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物用硅膠柱色譜分離純化，洗脫劑為石油醚-二氯甲烷(1∶5)，得淡黃色粉末54.02mg，產(chǎn)率42.75％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-對異丁基苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：509.2[M+Na]⁺，487.2[M+H]⁺，485.2[M-H]^-，相對分子質(zhì)量為486。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.93(s，1H，10-OH)，7.94(d，2H，J＝8.0Hz，2”，6”-H)，7.81(d，2H，J＝8.8Hz，2’，6’-H)，7.31(d，2H，J＝8.0Hz，3”，5”-H)，7.04(d，2H，J＝8.8Hz，3’，5’-H)，6.53(s，1H，11-H)，6.52(s，1H，8-H)，5.39(s，2H，-OCH₂CO-)，4.37(m，4H，-OCH₂CH₂O-)，2.57(d，2H，J＝7.0Hz，-CH₂CH(CH₃)₂)，1.93(m，1H，-CH₂CH(CH₃)₂)，0.93(d，2×3H，-CH₂CH(CH₃)₂)。

實施例9 10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-對異丙基苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物10)的制備

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL無水DMF中，依次加入碳酸鉀(70.87mg，0.51mmol)，碘化鉀(43.16mg，0.26mmol)，室溫反應30min后加入2-溴代對異丙基苯乙酮(70.06mg，0.31mmol)，室溫反應12h。待反應結(jié)束后，反應液用40mL乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗3次，每次20mL，有機層用無水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物用硅膠柱色譜分離純化，洗脫劑為石油醚-二氯甲烷(1∶5)，得淡黃色粉末50.79mg，產(chǎn)率41.19％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-對異丙基苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：473.0[M-H]^-，相對分子質(zhì)量為474。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.95(s，1H，10-OH)，7.97(d，2H，J＝8.7Hz，2”，6”-H)，7.83(d，2H，J＝9.0Hz，2’，6’-H)，7.40(dd，2H，J＝18.6，8.7Hz，3”，5”-H)，7.05(d，2H，J＝9.0Hz，3’，5’-H)，6.56(s，1H，11-H)，6.54(s，1H，8-H)，5.39(s，2H，-OCH₂CO-)，4.38(m，4H，-OCH₂CH₂O-)，3.01(m，1H，4-CH(CH₃)₂)，1.31(d，2×3H，4-CH(CH₃)₂)。

實施例10 10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-對甲基苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物11)的制備

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL無水DMF中，依次加入碳酸鉀(70.87mg，0.51mmol)，碘化鉀(43.16mg，0.26mmol)，室溫反應30min后加入2-溴代對甲基苯乙酮(61.37mg，0.31mmol)，室溫反應12h。待反應結(jié)束后，反應液用40mL乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗3次，每次20mL，有機層用無水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物用硅膠柱色譜分離純化，洗脫劑為石油醚-二氯甲烷(1∶5)，得淡黃色粉末50.21mg，產(chǎn)率43.49％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-對甲基苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：471.0[M+Na]⁺，443.1[M-H]^-，相對分子質(zhì)量為444。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.94(s，1H，10-OH)，7.92(d，2H，J＝7.3Hz，2”，6”-H)，7.82(d，2H，J＝7.9Hz，2’，6’-H)，7.34(d，2H，J＝7.3Hz，3”，5”-H)，7.04(d，2H，J＝7.9Hz，3’，5’-H)，6.54(s，1H，11-H)，6.53(s，1H，8-H)，5.37(s，2H，-OCH₂CO-)，4.38(m，4H，-OCH₂CH₂O-)，2.46(s，3H，-CH₃)。

實施例11 10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-鄰氟苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物12)的制備

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL無水DMF中，依次加入碳酸鉀(70.87mg，0.51mmol)，碘化鉀(43.16mg，0.26mmol)，室溫反應30min后加入2-溴代鄰氟苯乙酮(62.60mg，0.31mmol)，室溫反應12h。待反應結(jié)束后，反應液用40mL乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗3次，每次20mL，有機層用無水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物用硅膠柱色譜分離純化，洗脫劑為石油醚-二氯甲烷(1∶5)，得淡黃色粉末45.01mg，產(chǎn)率為38.64％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-鄰氟苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：471.1[M+Na]⁺，449.1[M+H]⁺，相對分子質(zhì)量為448。

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ12.98(s，1H，10-OH)，8.01(d，2H，J＝8.7Hz，2’，6’-H)，7.95，7.75，7.41(m，4H，3”，4”，5”，6”-H)，7.14(d，2H，J＝8.7Hz，3’，5’-H)，6.88(s，1H，11-H)，6.75(s，1H，8-H)，5.53(s，2H，-OCH₂CO-)，4.35(m，4H，-OCH₂CH₂O-)。

實施例12 10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-(3，4-二甲氧基苯基)乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物13)的制備

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL無水DMF中，依次加入碳酸鉀(70.87mg，0.51mmol)，碘化鉀(43.16mg，0.26mmol)，室溫反應30min后加入2-溴代-3’，4’-二甲氧基苯乙酮(75.63mg，0.31mmol)，室溫反應12h。待反應結(jié)束后，反應液用40mL乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗3次，每次20mL，有機層用無水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物用硅膠柱色譜分離純化，洗脫劑為二氯甲烷-甲醇(200∶1)，得淡黃色粉末49.62mg，產(chǎn)率為38.95％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-(3，4-二甲氧基苯基)乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：513.1[M+Na]⁺，491.1[M+H]⁺，相對分子質(zhì)量為490。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.94(s，1H，10-OH)，7.84(d，2H，J＝8.4Hz，2’，6’-H)，7.67(d，1H，J＝8.1Hz，6”-H)，7.58(s，1H，5”-H)，7.06(d，2H，J＝8.4Hz，3’，5’-H)，6.95(d，1H，J＝8.1Hz，2”-H)，6.56(s，1H，11-H)，6.55(s，1H，8-H)，5.36(s，2H，-OCH₂CO-)，4.38(m，4H，-OCH₂CH₂O-)，3.99(s，3H，-OCH₃)，3.97(s，3H，-OCH₃)。

實施例13 10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-吡咯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物14)的制備

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL無水DMF中，依次加入碳酸鉀(70.87mg，0.51mmol)，碘化鉀(43.16mg，0.26mmol)，室溫反應30min后加入1-(2-氯乙?；?吡咯烷(45.59mg，0.31mmol)，85℃反應6h。反應結(jié)束后冷至室溫，反應液用40mL乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗3次，每次20mL，有機層用無水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物用制備TLC純化得黃色粉末46.07mg，產(chǎn)率41.89％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-吡咯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：462.1[M+Na]⁺，424.1[M+H]⁺，422.1[M-H]^-，相對分子質(zhì)量為423。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.92(s，1H，10-OH)，7.83(d，2H，J＝8.0Hz，2’，6’-H)，7.06(d，2H，J＝8.0Hz，3’，5’-H)，6.53(s，1H，11-H)，6.55(s，1H，8-H)，4.72(s，2H，-OCH₂CO-)，4.38(d，4H，-OCH₂CH₂O-)，3.55(m，4H，-N(CH₂)₂-)，2.01(m，2H，-CH₂-)，1.89(m，2H，-CH₂-)。

實施例14 10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-嗎啉基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物15)的制備

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL無水DMF中，依次加入碳酸鉀(70.87mg，0.51mmol)，碘化鉀(43.16mg，0.26mmol)，室溫反應30min后加入1-(2-氯乙酰基)嗎啉(50.54mg，0.31mmol)，85℃反應6h。反應結(jié)束后冷至室溫，反應液用40mL乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗3次，每次20mL，有機層用無水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物用制備TLC純化得黃色粉末45.73mg，產(chǎn)率40.07％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-嗎啉基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：462.1[M+Na]⁺，440.1[M+H]⁺，438.2[M-H]^-，相對分子質(zhì)量為439。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.92(s，1H，10-OH)，7.84(d，2H，J＝8.0Hz，2’，6’-H)，7.07(d，2H，J＝8.0Hz，3’，5’-H)，6.56(s，1H，11-H)，6.54(s，1H，8-H)，4.80(s，2H，-OCH₂CO-)，4.39(brs，4H，-OCH₂CH₂O-)，3.68(m，8H，-N(CH₂)₂-，-O(CH₂)₂-)。

實施例15 10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-二乙胺基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物16)的制備

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL無水DMF中，依次加入碳酸鉀(70.87mg，0.51mmol)，碘化鉀(43.16mg，0.26mmol)，室溫反應30min后加入N，N-二乙基-2-氯乙酰胺(46.21mg，0.31mmol)，85℃反應6h。反應結(jié)束后冷至室溫，反應液用40mL乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗3次，每次20mL，有機層用無水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物用制備TLC純化得黃色粉末39.23mg，產(chǎn)率35.50％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-二乙胺基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：464.1[M+K]⁺，448.1[M+Na]⁺，426.1[M+H]⁺，424.1[M-H]^-，相對分子質(zhì)量為425。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.93(s，1H，10-OH)，7.82(d，2H，J＝8.0Hz，2’，6’-H)，7.06(d，2H，J＝8.0Hz，3’，5’-H)，6.54(s，1H，11-H)，6.52(s，1H，8-H)，4.78(s，2H，-OCH₂CO-)，4.37(brs，4H，-OCH₂CH₂O-)，3.41(q，4H，-(CH₃CH₂)₂N-)，1.18(t，6H，-(CH₃CH₂)₂N-)。

實施例16 10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-(1-(2-吡啶基)哌嗪基)乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物17)的制備

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL無水DMF中，依次加入碳酸鉀(70.87mg，0.51mmol)，碘化鉀(43.16mg，0.26mmol)，室溫反應30min后加入2-氯-1-(4-(2-吡啶基)-1-哌嗪基)乙酮(74.11mg，0.31mmol)，85℃反應6h。反應結(jié)束后冷至室溫，反應液用40mL乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗3次，每次20mL，有機層用無水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物用制備TLC純化得淡黃色粉末49.65mg，產(chǎn)率37.08％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-(1-(2-吡啶基)哌嗪基)乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：516.2[M+H]⁺，相對分子質(zhì)量為515。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.92(s，1H，10-OH)，8.20(s，1H，3”-H)，7.83(d，2H，J＝7.0Hz，2’，6’-H)，7.52(dd，1H，J＝15.0，7.5Hz，5”-H)，7.09(d，2H，J＝7.0Hz，3’，5’-H)，6.68(dd，2H，J＝15.0，7.5Hz，4”，6”-H)，6.54(s，1H，11-H)，6.53(s，1H，8-H)，4.58(s，2H，-OCH₂CO-)，4.37(brs，4H，-OCH₂CH₂O-)，3.76(m，2H，-NCH₂-)，3.72(m，2H，-NCH₂-)，3.65(m，2H，-NCH₂-)，3.53(m，2H，-NCH₂-)。

實施例17 10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-(1-(2-嘧啶基)哌嗪基)乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物18)的制備

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL無水DMF中，依次加入碳酸鉀(70.87mg，0.51mmol)，碘化鉀(43.16mg，0.26mmol)，室溫反應30min后加入2-氯-1-(4-(2-嘧啶基)-1-哌嗪基)乙酮(74.42mg，0.31mmol)，85℃反應6h。反應結(jié)束后冷至室溫，反應液用40mL乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗3次，每次20mL，有機層用無水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物用制備TLC純化得淡黃色粉末52.89mg，產(chǎn)率39.42％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-(1-(2-嘧啶基)哌嗪基)乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：555.1[M+K]⁺，539.1[M+Na]⁺，517.2[M+H]⁺，515.2[M-H]^-，相對分子質(zhì)量為516。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.93(s，1H，10-OH)，8.35(d，2H，J＝4.7Hz，3”，5”-H)，7.86(d，2H，J＝8.0Hz，2’，6’-H)，7.11(d，2H，J＝8.0Hz，3’，5’-H)，6.59(s，1H，4”-H)，6.57(s，1H，11-H)，6.55(s，1H，8-H)，4.86(s，2H，-OCH₂CO-)，4.38(s，4H，-OCH₂CH₂O-)，3.87(m，2H，-NCH₂-)，3.85(m，2H，-NCH₂-)，3.73(m，2H，-NCH₂-)，3.67(m，2H，-NCH₂-)。

實施例18 10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-(1-(4-氟苯基)哌嗪基)乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物19)的制備

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL無水DMF中，依次加入碳酸鉀(70.87mg，0.51mmol)，碘化鉀(43.16mg，0.26mmol)，室溫反應30min后加入2-氯-1-(4-(4-氟苯基)-1-哌嗪基)乙酮(79.38mg，0.31mmol)，85℃反應6h。反應結(jié)束后冷至室溫，反應液用40mL乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗3次，每次20mL，有機層用無水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物用制備TLC純化得淡黃色粉末51.32mg，產(chǎn)率37.10％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-(1-(4-氟苯基)哌嗪基)乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：531.2[M-H]^-，相對分子質(zhì)量為532。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.92(s，1H，10-OH)，7.84(d，2H，J＝8.0Hz，2’，6’-H)，7.09(d，2H，J＝8.0Hz，3’，5’-H)，7.05(m，4H，3”’，4”’，5”’，6”’-H)，6.55(s，1H，11-H)，6.54(s，1H，8-H)，4.84(s，2H，-OCH₂CO-)，4.37(s，4H，-OCH₂CH₂O-)，3.83(m，4H，2×-NCH₂-)，3.10(m，4H，2×-NCH₂-)。

實施例19 10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-(1-(2-氟苯基基)哌嗪基)乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物20)的制備

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL無水DMF中，依次加入碳酸鉀(70.87mg，0.51mmol)，碘化鉀(43.16mg，0.26mmol)，室溫反應30min后加入2-氯-1-(4-(2-氟苯基)-1-哌嗪基)乙酮(79.38mg，0.31mmol)，85℃反應6h。反應結(jié)束后冷至室溫，反應液用40mL乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗3次，每次20mL，有機層用無水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物用制備TLC純化得淡黃色粉末54.56mg，產(chǎn)率39.44％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-(1-(2-氟苯基基)哌嗪基)乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：531.2[M-H]^-，相對分子質(zhì)量為532。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.92(s，1H，10-OH)，7.84(d，2H，J＝8.0Hz，2’，6’-H)，7.08(m，4H，3”’，4”’，5”’，6”’-H)，6.95(d，2H，J＝8.0Hz，3’，5’-H)，6.56(s，1H，11-H)，6.54(s，1H，8-H)，4.85(s，2H，-OCH₂CO-)，4.38(s，4H，-OCH₂CH₂O-)，3.82(m，4H，2×-NCH₂-)，3.10(m，4H，2×-NCH₂-)。

實施例20 10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-對異丙基苯胺基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并

[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物21)的制備

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL無水DMF中，依次加入碳酸鉀(70.87mg，0.51mmol)，碘化鉀(43.16mg，0.26mmol)，室溫反應30min后加入N-(2-氯乙?；?-4-異丙基苯胺(65.43mg，0.31mmol)，85℃反應6h。反應結(jié)束后冷至室溫，反應液用40mL乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗3次，每次20mL，有機層用無水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物用制備TLC純化得淡黃色粉末58.33mg，產(chǎn)率46.07％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-對異丙基苯胺基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：510.2[M+Na]⁺，m/z 488.2[M+H]⁺，m/z 486.2[M-H]^-，相對分子質(zhì)量為487。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.91(s，1H，10-OH)，8.16(brs，1H，-NH-)，7.92(d，2H，J＝8.0Hz，2’，6’-H)，7.52(d，2H，J＝6.0Hz，2”’，6”’-H)，7.25(d，2H，J＝6.0Hz，3”’，5”’-H)，7.14(d，2H，J＝8.0Hz，3’，5’-H)，6.61(s，1H，11-H)，6.56(s，1H，8-H)，4.71(s，2H，-OCH₂CO-)，4.40(m，4H，-OCH₂CH₂O-)，2.92(m，1H，-CH(CH₃)₂)，1.26(d，6H，-CH(CH₃)₂)。

實施例21 10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-乙胺基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物22)的制備

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL無水DMF中，依次加入碳酸鉀(70.87mg，0.51mmol)，碘化鉀(43.16mg，0.26mmol)，室溫反應30min后加入N-(2-氯乙?；?乙胺(37.52mg，0.31mmol)，85℃反應6h。反應結(jié)束后冷至室溫，反應液用40mL乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗3次，每次20mL，有機層用無水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物用制備TLC純化得淡黃色粉末53.09mg，產(chǎn)率51.43％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-乙胺基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：420.1[M+Na]⁺，398.1[M+H]⁺，396.1[M-H]^-，相對分子質(zhì)量為397。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.90(s，1H，10-OH)，7.87(d，2H，J＝8.0Hz，2’，6’-H)，7.06(d，2H，J＝8.0Hz，3’，5’-H)，6.57(s，1H，11-H)，6.55(s，1H，8-H)，4.56(s，2H，-OCH₂CO-)，4.39(s，4H，-OCH₂CH₂O-)，3.43(q，2H，-NHCH₂CH₃)，1.23(t，3H，-NHCH₂CH₃)。

實施例22 10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-正丙胺基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物23)的制備

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL無水DMF中，依次加入碳酸鉀(70.87mg，0.51mmol)，碘化鉀(43.16mg，0.26mmol)，室溫反應30min后加入N-(2-氯乙?；?正丙胺(41.87mg，0.31mmol)，85℃反應6h。反應結(jié)束后冷至室溫，反應液用40mL乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗3次，每次20mL，有機層用無水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物用制備TLC純化得淡黃色粉末53.14mg，產(chǎn)率49.73％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-正丙胺基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：434.1[M+Na]⁺，412.1[M+H]⁺，410.1[M-H]^-，相對分子質(zhì)量為411。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.91(s，1H，10-OH)，7.89(d，2H，J＝8.0Hz，2’，6’-H)，7.07(d，2H，J＝8.0Hz，3’，5’-H)，6.59(s，1H，11-H)，6.57(s，1H，8-H)，4.59(s，2H，-OCH₂CO-)，4.40(m，4H，-OCH₂CH₂O-)，3.36(m，2H，-NHCH₂CH₂CH₃)，1.60(m，2H，-NHCH₂CH₂CH₃)，0.96(t，3H，-NHCH₂CH₂CH₃)。

實施例23 10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-異丙胺基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物24)的制備

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL無水DMF中，依次加入碳酸鉀(70.87mg，0.51mmol)，碘化鉀(43.16mg，0.26mmol)，室溫反應30min后加入N-(2-氯乙?；?異丙胺(41.87mg，0.31mmol)，85℃反應6h。反應結(jié)束后冷至室溫，反應液用40mL乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗3次，每次20mL，有機層用無水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物用制備TLC純化得淡黃色粉末52.30mg，產(chǎn)率48.94％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-異丙胺基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：434.1[M+Na]⁺，410.1[M-H]^-，相對分子質(zhì)量為411。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.91(s，1H，10-OH)，7.89(d，2H，J＝8.0Hz，2’，6’-H)，7.07(d，2H，J＝8.0Hz，3’，5’-H)，6.58(s，1H，11-H)，6.57(s，1H，8-H)，6.35(brs，1H，-NH-)，4.55(s，2H，-OCH₂CO-)，4.38(s，4H，-OCH₂CH₂O-)，4.24(s，1H，-NHCH(CH₃)₂-)，1.24(d，6H，-NHCH(CH₃)₂)。

實施例24 10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-正丁胺基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物25)的制備

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL無水DMF中，依次加入碳酸鉀(70.87mg，0.51mmol)，碘化鉀(43.16mg，0.26mmol)，室溫反應30min后加入N-(2-氯乙?；?正丁胺(46.21mg，0.31mmol)，85℃反應6h。反應結(jié)束后冷至室溫，反應液用40mL乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗3次，每次20mL，有機層用無水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物用制備TLC純化得淡黃色粉末56.19mg，產(chǎn)率50.85％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-正丁胺基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：448.1[M+Na]⁺，426.2[M+H]⁺，424.2[M-H]^-，相對分子質(zhì)量為425。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.87(s，1H，10-OH)，7.84(d，2H，J＝8.0Hz，2’，6’-H)，7.03(d，2H，J＝8.0Hz，3’，5’-H)，6.59(brs，1H，-NH-)，6.53(s，2H，8，11-H)，4.55(s，2H，-OCH₂CO-)，4.37(s，4H，-OCH₂CH₂O-)，3.37(m，2H，-NHCH₂CH₂CH₂CH₃)，1.54(m，2H，-NHCH₂CH₂CH₂CH₃)，1.36(m，2H，-NHCH₂CH₂CH₂CH₃)，0.94(t，3H，-NHCH₂CH₂CH₂CH₃)。

實施例25 10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-吡咯基丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物26)的制備

化合物3(60mg，0.16mmol)和吡咯烷(15.88μL，0.19mmol)溶于4mL無水乙醇中，100℃反應3h。反應結(jié)束后，反應液冷至室溫，減壓蒸去溶劑，得黃色油狀液體，制備TLC純化得黃色粉末35.00mg，產(chǎn)率49.83％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-吡咯基丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：440.2[M+H]⁺，438.2[M-H]^-，相對分子質(zhì)量為439。

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ12.97(s，1H，10-OH)，8.04(d，2H，J＝8.4Hz，2’，6’-H)，7.13(d，2H，J＝8.4Hz，3’，5’-H)，6.88(s，1H，11-H)，6.75(s，1H，8-H)，5.51(brs，1H，2”-OH)，4.35(d，4H，-OCH₂CH₂O-)，4.11(m，2H，3”-H)，3.04(m，1H，2”-H)，3.10(t，1H，J＝6.85Hz，1”α-H)，2.94(m，5H，1”β-H and-N(CH₂)₂-)，1.82(m，4H，-CH₂CH₂-)。

實施例26 10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-嗎啉基丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物27)的制備

化合物3(60mg，0.16mmol)和嗎啉(16.54μL，0.19mmol)，溶于4mL無水乙醇中，100℃反應3h。反應結(jié)束后，反應液冷至室溫，減壓蒸去溶劑，得黃色油狀液體，制備TLC純化得黃色粉末42.50mg，產(chǎn)率58.38％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-嗎啉基丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：494.2[M+K]⁺，478.2[M+Na]⁺，456.2[M+H]⁺，454.2[M-H]^-，相對分子質(zhì)量為455。

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ12.92(s，1H，10-OH)，8.00(d，2H，J＝8.4Hz，2’，6’-H)，7.10(d，2H，J＝8.4Hz，3’，5’-H)，6.83(s，1H，11-H)，6.70(s，1H，8-H)，5.01(brs，1H，2”-OH)，4.34(d，4H，-OCH₂CH₂O-)，4.08(m，1H，2”-H)，3.97(m，2H，3”-H)，3.57(t，4H，-CH₂OCH₂-)，2.44(m，6H，3×-NCH₂-)。

實施例27 10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-二乙胺基丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物28)的制備

化合物3(60mg，0.16mmol)和二乙胺(13.89μL，0.19mmol)，溶于4mL無水乙醇中，100℃反應3h。反應結(jié)束后，反應液冷至室溫，減壓蒸去溶劑，得黃色油狀液體，制備TLC純化得黃色粉末44.47mg，產(chǎn)率63.02％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-二乙胺基丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：442.2[M+H]⁺，相對分子質(zhì)量為441。

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ8.05(d，2H，J＝8.4Hz，2’，6’-H)，7.12(d，2H，J＝8.4Hz，3’，5’-H)，6.80(s，1H，11-H)，6.78(s，1H，8-H)，4.35(d，4H，-OCH₂CH₂O-)，4.10(m，1H，2”-H)，3.97(m，2H，3”-H)，2.62(s，4H，-N(CH₂CH₃)₂)，0.99(t，6H，-N(CH₂CH₃)₂)。

實施例28 10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-(4-羥基哌啶基)丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物29)的制備

化合物3(60mg，0.16mmol)和4-羥基哌啶(19.21μL，0.19mmol)，溶于4mL無水乙醇中，100℃反應3h。反應結(jié)束后，反應液冷至室溫，減壓蒸去溶劑，得黃色油狀液體，制備TLC純化得黃色粉末43.20mg，產(chǎn)率57.57％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-(4-羥基哌啶基)丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：492.3[M+Na]⁺，470.3[M+H]⁺，468.2[M-H]^-，相對分子質(zhì)量為469。

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ12.97(s，1H，10-OH)，7.99(d，2H，J＝8.4Hz，2’，6’-H)，7.09(d，2H，J＝8.4Hz，3’，5’-H)，6.83(s，1H，11-H)，6.69(s，1H，8-H)，4.94(brs，1H，2”-OH)，4.58(brs，1H，-CHOH)，4.33(d，4H，-OCH₂CH₂O-)，4.06(m，1H，2”-H)，3.96(m，2H，3”-H)，3.42(m，1H，-CH₂CH-)，2.42(m，6H，3×-NCH₂-)，1.58(m，4H，-CH₂CH(OH)CH₂-)。

實施例29 10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-(1-甲基哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物30)的制備

化合物3(60mg，0.16mmol)和N-甲基哌嗪(19.02μL，0.19mmol)，溶于4mL無水乙醇中，100℃反應3h。反應結(jié)束后，反應液冷至室溫，減壓蒸去溶劑，得黃色油狀液體，制備TLC純化得黃色粉末42.82mg，產(chǎn)率56.18％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-(1-甲基哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：491.2[M+Na]⁺，469.2[M+H]⁺，467.2[M-H]^-，相對分子質(zhì)量為468。

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ8.01(d，2H，J＝8.4Hz，2’，6’-H)，7.11(d，2H，J＝8.4Hz，3’，5’-H)，6.84(s，1H，11-H)，6.72(s，1H，8-H)，4.91(brs，1H，2”-OH)，4.34(d，4H，-OCH₂CH₂O-)，4.08(m，1H，2”-H)，3.98(m，2H，3”-H)，2.30(m，10H，5×-NCH₂-)，2.13(s，3H，-NCH₃)。

實施例30 10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-(1-乙基哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物31)的制備

化合物3(60mg，0.16mmol)和N-乙基哌嗪(21.68μL，0.19mmol)，溶于4mL無水乙醇中，100℃反應3h。反應結(jié)束后，反應液冷至室溫，減壓蒸去溶劑，得黃色油狀液體，制備TLC純化得黃色粉末42.21mg，產(chǎn)率54.73％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-(1-乙基哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：483.3[M+H]⁺，481.2[M-H]^-，相對分子質(zhì)量為482。

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ12.97(s，1H，10-OH)，8.01(d，2H，J＝8.4Hz，2’，6’-H)，7.10(d，2H，J＝8.4Hz，3’，5’-H)，6.86(s，1H，11-H)，6.73(s，1H，8-H)，4.34(d，4H，-OCH₂CH₂O-)，4.07(m，1H，2”-H)，3.97(m，2H，3”-H)，2.37(m，10H，5×-NCH₂-)，1.88(q，2H，-CH₂CH₃)，0.97(t，3H，-CH₂CH₃)。

實施例31 10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-(1-羥乙基哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物32)的制備

化合物3(60mg，0.16mmol)和N-羥乙基哌嗪(24.72μL，0.19mmol)，溶于4mL無水乙醇中，100℃反應3h。反應結(jié)束后，反應液冷至室溫，減壓蒸去溶劑，得黃色油狀液體，制備TLC純化得黃色粉末43.25mg，產(chǎn)率54.28％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-(1-羥乙基哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：521.3[M+Na]⁺，499.3[M+H]⁺，497.3[M-H]^-，相對分子質(zhì)量為498。

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ8.00(d，2H，J＝8.4Hz，2’，6’-H)，7.10(d，2H，J＝8.4Hz，3’，5’-H)，6.83(s，1H，11-H)，6.70(s，1H，8-H)，4.93(brs，1H，2”-OH)，4.33(d，4H，-OCH₂CH₂O-)，4.07(m，1H，2”-H)，3.97(m，2H，3”-H)，3.45(m，2H，-CH₂OH)，2.41(m，12H，6×-NCH₂-)。

實施例32 10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-(1-(2-吡啶基)哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物33)的制備

化合物3(60mg，0.16mmol)和1-(2-吡啶基)哌嗪(30.99μL，0.19mmol)，溶于4mL無水乙醇中，100℃反應3h。反應結(jié)束后，反應液冷至室溫，減壓蒸去溶劑，得黃色油狀液體，制備TLC純化得黃色粉末45.72mg，產(chǎn)率53.81％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-(1-(2-吡啶基)哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：532.2[M+H]⁺，530.2[M-H]^-，相對分子質(zhì)量為531。

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ12.97(s，1H，10-OH)，8.09(s，1H，3”’-H)，8.01(d，2H，J＝8.4Hz，2’，6’-H)，7.51(dd，1H，J＝7.5，15.0Hz，5”’-H)，7.13(d，2H，J＝8.4Hz，3’，5’-H)，6.81(m，2H，4”’，6”’-H)，6.71(s，1H，11-H)，6.62(s，1H，8-H)，5.03(brs，1H，2”-OH)，4.33(d，4H，-OCH₂CH₂O-)，4.12(m，1H，2”-H)，4.03(m，2H，3”-H)，3.46(m，4H，2×-NCH₂-)，2.55(m，6H，3×-NCH₂-)。

實施例33 10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-(1-(4-吡啶基)哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物34)的制備

化合物3(60mg，0.16mmol)和1-(4-吡啶基)哌嗪(30.99μL，0.19mmol)，溶于4mL無水乙醇中，100℃反應3h。反應結(jié)束后，反應液冷至室溫，減壓蒸去溶劑，得黃色油狀液體，制備TLC純化得黃色粉末45.62mg，產(chǎn)率53.70％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-(1-(4-吡啶基)哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：532.3[M+H]⁺，530.2[M-H]^-，相對分子質(zhì)量為531。

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ8.14(d，2H，J＝5.6Hz，2”’，6”’-H)，8.01(d，2H，J＝8.4Hz，2’，6’-H)，7.12(d，2H，J＝8.4Hz，3’，5’-H)，6.83(s，1H，11-H)，6.79(d，2H，J＝5.6Hz，3”’，5”’-H)，6.69(s，1H，8-H)，4.33(d，4H，-OCH₂CH₂O-)，4.10(m，1H，2”-H)，4.02(m，2H，3”-H)，3.29(m，4H，2×-NCH₂-)，2.55(m，6H，3×-NCH₂-)。

實施例34 10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-(1-(2-嘧啶基)哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物35)的制備

化合物3(60mg，0.16mmol)和1-(2-嘧啶基)哌嗪(31.18μL，0.19mmol)，溶于4mL無水乙醇中，100℃反應3h。反應結(jié)束后，反應液冷至室溫，減壓蒸去溶劑，得黃色油狀液體，制備TLC純化得黃色粉末45.75mg，產(chǎn)率53.75％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-(1-(2-嘧啶基)哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：555.3[M+Na]⁺，533.3[M+H]⁺，531.2[M-H]^-，相對分子質(zhì)量為532。

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ12.97(s，1H，10-OH)，8.34(d，2H，J＝4.5Hz，3”’，5”’-H)，8.00(d，2H，J＝8.4Hz，2’，6’-H)，7.12(d，2H，J＝8.4Hz，3’，5’-H)，6.84(s，1H，11-H)，6.70(s，1H，8-H)，6.60(dd，1H，J＝8.9，4.5Hz，4”’-H)，5.04(brs，1H，2”-OH)，4.34(d，4H，-OCH₂CH₂O-)，4.11(m，1H，2”-H)，4.03(m，2H，3”-H)，3.71(m，4H，2×-NCH₂-)，2.50(m，6H，3×-NCH₂-)。

實施例35 10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-(1-(2-氟苯基)哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物36)的制備

化合物3(60mg，0.16mmol)和1-(2-氟苯基)哌嗪(34.22μL，0.19mmol)，溶于4mL無水乙醇中，100℃反應3h。反應結(jié)束后，反應液冷至室溫，減壓蒸去溶劑，得黃色油狀液體，制備TLC純化得黃色粉末44.67mg，產(chǎn)率50.95％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-(1-(2-氟苯基)哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：571.3[M+Na]⁺，549.3[M+H]⁺，547.2[M-H]^-，相對分子質(zhì)量為548。

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ12.98(s，1H，10-OH)，8.01(d，2H，J＝8.4Hz，2’，6’-H)，7.13(d，2H，J＝8.4Hz，3’，5’-H)，6.98(m，4H，3”’，4”’，5”’，6”’-H)，6.83(s，1H，11-H)，6.68(s，1H，8-H)，4.97(brs，1H，2”-OH)，4.34(d，4H，-OCH₂CH₂O-)，4.12(m，1H，2”-H)，4.03(m，2H，3”-H)，3.02(m，4H，2×-NCH₂-)，2.64(m，6H，3×-NCH₂-)。

實施例36 10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-(1-(4-氟苯基)哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物37)的制備

化合物3(60mg，0.16mmol)和1-(4-氟苯基)哌嗪(34.22μL，0.19mmol)，溶于4mL無水乙醇中，100℃反應3h。反應結(jié)束后，反應液冷至室溫，減壓蒸去溶劑，得黃色油狀液體，制備TLC純化得黃色粉末45.80mg，產(chǎn)率52.24％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-(1-(4-氟苯基)哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：571.2[M+Na]⁺，549.2[M+H]⁺，547.2[M-H]^-，相對分子質(zhì)量為548。

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ12.98(s，1H，10-OH)，8.00(d，2H，J＝8.4Hz，2’，6’-H)，7.11(d，2H，J＝8.4Hz，3’，5’-H)，7.02(dd，2H，J＝17.4，8.7Hz，2”’，6”’-H)，6.93(d，2H，J＝8.0Hz，3”’，5”’-H)，6.83(s，1H，11-H)，6.69(s，1H，8-H)，5.00(brs，1H，2”-OH)，4.34(d，4H，-OCH₂CH₂O-)，4.10(m，1H，2”-H)，4.02(m，2H，3”-H)，3.06(m，4H，2×-NCH₂-)，2.61(m，6H，3×-NCH₂-)。

實施例37 10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-乙二醇胺基丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物38)的制備

化合物3(60mg，0.16mmol)和乙二醇胺(19.97μL，0.19mmol)，溶于4mL無水乙醇中，100℃反應3h。反應結(jié)束后，反應液冷至室溫，減壓蒸去溶劑，得黃色油狀液體，制備TLC純化得黃色粉末42.00mg，產(chǎn)率55.50％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-乙二醇胺基丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：496.2[M+Na]⁺，474.2[M+H]⁺，472.2[M-H]^-，相對分子質(zhì)量為473。

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ12.97(s，1H，10-OH)，8.01(d，2H，J＝8.4Hz，2’，6’-H)，7.12(d，2H，J＝8.4Hz，3’，5’-H)，6.84(s，1H，11-H)，6.71(s，1H，8-H)，4.92(brs，1H，2”-OH)，4.41(brs，2×1H，-OH)，4.33(d，4H，-OCH₂CH₂O-)，4.11(m，1H，2”-H)，3.99(m，2H，3”-H)，3.44(m，4H，-CH₂CH₂OH)，2.59(m，6H，3×-NCH₂-)。

實施例38 野黃芩素衍生物體外抑制腫瘤細胞增殖實驗(MTT法)

1.細胞培養(yǎng)和給藥

人非小細胞肺癌A549、人黑色素瘤細胞B16F10和乳腺癌細胞MCF-7以適量濃度接種于培養(yǎng)瓶中，用含10％胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液，在濕度為95％空氣并且含有5％CO₂的孵箱中于37℃條件下靜置培養(yǎng)。取對數(shù)生長期的細胞，消化、計數(shù)，配制成濃度為5×10⁴個/ml的細胞懸液接種于96孔細胞培養(yǎng)板，每孔100μL(含5000個腫瘤細胞)。培養(yǎng)24h后吸出培養(yǎng)基，給藥組每孔加入100μL不同濃度的野黃芩素及其衍生物和藤黃酸，濃度分別為0.1、1、5、10、25μM，每組設3個復孔。對照組加入與給藥組等體積的含1％胎牛血清的完全培養(yǎng)基。96孔板置于5％CO₂孵箱中于37℃培養(yǎng)48h。

2.細胞活力檢測

細胞活力通過MTT比色法來進行檢測。在藥物作用結(jié)束后每孔加入10μL MTT(5mg/mL)溶液，在培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)4h，棄去培養(yǎng)液，每孔加入100μL DMSO溶解甲瓚顆粒，輕度震蕩后，用酶標儀于490nm處測定每孔吸光度(OD值)，所得數(shù)據(jù)用于計算藥物對腫瘤細胞的抑制率，結(jié)果見表2。并且對25μM濃度時抑制率高于50％的化合物測定了IC₅₀值，結(jié)果見表3。

細胞抑制率(％)＝(正常組OD值-測試組OD值)/正常組OD值×100％，其中測試組指給藥組或陽性對照組，正常組的細胞存活率為100％。

應用GraphPad Prism 5軟件計算IC₅₀。

3.實驗結(jié)果

表2 化合物1和4-38在25μM時對A549、B16F10、MCF-7的抑制率(％)

表3 部分野黃芩素衍生物對A549、B16F10、MCF-7的IC₅₀(μM)值

注：“-----”表明化合物IC₅₀＞25μM。

對合成的野黃芩素衍生物進行抗腫瘤活性研究發(fā)現(xiàn)，化合物4-38對肺癌A549細胞、黑色素瘤B16F10細胞、乳腺癌MCF-7細胞均有一定程度的抑制作用，大多數(shù)化合物的抗腫瘤作用優(yōu)于野黃芩素，其中化合物21的抗腫瘤作用具有選擇性，對A549抑制作用最為明顯，IC₅₀值為3.36μM，而對MCF-7、B16F10的抑制作用次之，IC₅₀值分別為20.46μM和18.80μM?；衔?0對A549、MCF-7、B16F10的抑制率分別為80.60％、16.57％和83.33％，對B16F10的抑制作用最優(yōu)，IC₅₀值為1.74μM，對MCF-7幾乎無抑制作用?；衔?6，28，29對三種細胞株均具有較好的抑制作用，可能是由于其結(jié)構(gòu)中羥基的引入，極大的提高了化合物的親水性。因此，本發(fā)明提供的野黃芩素衍生物具有一定的抗腫瘤作用，對于抗腫瘤藥物的研究與開發(fā)具有重要意義。