本發(fā)明涉及II型糖尿病治療的藥物領(lǐng)域。更具體地講，本發(fā)明涉及對II型糖尿病具有治療作用的一類含煙酸酰胺和哌啶結(jié)構(gòu)的PTP1B抑制劑、其制備方法，以及在制藥上的用途。
背景技術(shù)：
：II型糖尿病是一種常見的代謝紊亂疾病，其特征是外周對膜島素產(chǎn)生抵抗作用，在分子水平表現(xiàn)為胰島素與胰島素受體結(jié)合后信號轉(zhuǎn)導(dǎo)缺失。蛋白酶氨酸的磷酸化水平是細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的重要調(diào)節(jié)因素，它由蛋白酶氨酸激酶(proteintyrosinekinase,PTK)和蛋白酶氨酸磷酸酶(proteintyrosinephosphatase,PTP)共同調(diào)控。近年研究發(fā)現(xiàn)，蛋白酶氨酸磷酸酶1B可以去磷酸化蛋白酶氨酸，在胰島素信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中起著重要的負(fù)調(diào)控作用。敲除PTPIB基因，或運用反義核昔酸(ASO)抑制體內(nèi)PTP1B蛋白及mRNA的表達(dá)，不僅可以顯著提高受試小鼠對胰島素的敏感性，而且能明顯降低肥胖癥的患病幾率。這些研究表明，PTP1B有可能成為治療II型糖尿病的新靶點。本發(fā)明公開了一類結(jié)構(gòu)新穎的含煙酸酰胺和哌啶結(jié)構(gòu)的PTP1B抑制劑，這些化合物可用于制備治療II型糖尿病的藥物。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明的一個目的是提供一種具有通式I的良好活性的PTP1B抑制劑。本發(fā)明的另一個目的是提供制備具有通式I的化合物的方法。本發(fā)明的再一個目的是提供含有通式I的化合物作為有效成分在治療II型糖尿病方面的應(yīng)用?，F(xiàn)結(jié)合本發(fā)明的目的對本
發(fā)明內(nèi)容進(jìn)行具體描述。本發(fā)明具有通式I的化合物具有下述結(jié)構(gòu)式：其中，R選自C1-C3的烷基。更優(yōu)選通式I的化合物具有以下結(jié)構(gòu)，本發(fā)明所述通式I化合物通過以下路線合成：化合物II在堿存在下與化合物III發(fā)生取代反應(yīng)，得到化合物IV；化合物IV在DCC(N,N'-二環(huán)己基碳化二亞胺)存在下與化合物V反應(yīng)，得到VI；化合物VI被氧化劑氧化，得到化合物I；其中，R的定義如前所述?；衔颕I可以按照文獻(xiàn)方法制備(LeonKatz；etal,JournalofOrganicChemistry,1954,19,711)。本發(fā)明所述通式I化合物具有PTP1B的抑制作用，可作為有效成分用于制備II型糖尿病治療藥物。本發(fā)明所述通式I化合物的活性是通過受體結(jié)合試驗來驗證的。本發(fā)明的通式I化合物在相當(dāng)寬的劑量范圍內(nèi)是有效的。例如每天服用的劑量約在1mg-1000mg/人范圍內(nèi)，分為一次或數(shù)次給藥。實際服用本發(fā)明通式I化合物的劑量可由醫(yī)生根據(jù)有關(guān)的情況來決定。具體實施方式下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步的說明。需要說明的是，下述實施例僅是用于說明，而并非用于限制本發(fā)明。本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)本發(fā)明的教導(dǎo)所做出的各種變化均應(yīng)在本申請權(quán)利要求所要求的保護(hù)范圍之內(nèi)。實施例1化合物I-1的合成A.化合物IV-1的合成化合物II(1.55g,10mmol)、化合物III-1(1.86g,10mmol)和固體K2CO3(5.53g,40mmol)加入30mL干燥的DMF中，室溫下攪拌過夜，TLC跟蹤發(fā)現(xiàn)反應(yīng)完成。反應(yīng)混合物傾倒入200mL冰水中，攪拌，用濃鹽酸調(diào)節(jié)pH＝4-5，用CH2Cl2(60mL×3)萃取，合并萃取相，用鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥。抽濾除去干燥劑，濾液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸干，得到的殘余物使用柱層析純化，得到化合物IV-1，黃白色固體。ESI-MS,m/z＝259([M-H]-)。B.化合物VI-1的合成化合物IV-1(1.30g,5mmol)、化合物V-1(0.50g,5mmol)、DCC(1.24g,6mmol)和4-二甲氨基吡啶(DMAP,0.3g)溶于干燥的20mLTHF中，室溫下攪拌過夜，TLC跟蹤發(fā)現(xiàn)反應(yīng)完成。反應(yīng)混合物傾倒入200mL冰水中，攪拌，用CH2Cl2(60mL×3)萃取，合并萃取相，依次用2％稀鹽酸和鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥。抽濾除去干燥劑，濾液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸干，得到的殘余物使用柱層析純化，得到化合物VI-1，白色固體。ESI-MS,m/z＝342([M+H]+)。C.化合物I-1的合成化合物VI-1(0.68g,2mmol)溶于10mLCH2Cl2中，室溫下攪拌，加入間氯過氧苯甲酸(mCPBA,1.72g,10mmol)，反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1小時，而后升溫回流3小時，TLC檢測反應(yīng)完成。反應(yīng)混合物傾倒入200mL冰水中，攪拌，用CH2Cl2(60mL×3)萃取，合并萃取相，依次用飽和NaHCO3溶液和鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥。抽濾除去干燥劑，濾液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸干，得到的殘余物使用柱層析純化，得到化合物I-1，白色固體。ESI-MS，m/z＝390([M+H]+)。實施例2化合物I-2的合成A.化合物IV-1的合成化合物II(1.55g,10mmol)、化合物III-1(1.86g,10mmol)和固體K2CO3(5.53g,40mmol)加入30mL干燥的DMF中，室溫下攪拌過夜，TLC跟蹤發(fā)現(xiàn)反應(yīng)完成。反應(yīng)混合物傾倒入200mL冰水中，攪拌，用濃鹽酸調(diào)節(jié)pH＝4-5，用CH2Cl2(60mL×3)萃取，合并萃取相，用鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥。抽濾除去干燥劑，濾液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸干，得到的殘余物使用柱層析純化，得到化合物IV-1，白色固體。ESI-MS,m/z＝259([M-H]-)。B.化合物VI-2的合成化合物IV-1(1.30g,5mmol)、化合物V-2(0.57g,5mmol)、DCC(1.24g,6mmol)和4-二甲氨基吡啶(DMAP,0.3g)溶于干燥的20mLTHF中，室溫下攪拌過夜，TLC跟蹤發(fā)現(xiàn)反應(yīng)完成。反應(yīng)混合物傾倒入200mL冰水中，攪拌，用CH2Cl2(60mL×3)萃取，合并萃取相，依次用2％稀鹽酸和鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥。抽濾除去干燥劑，濾液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸干，得到的殘余物使用柱層析純化，得到化合物VI-2，白色固體。ESI-MS,m/z＝356([M+H]+)。C.化合物I-2的合成化合物VI-2(0.71g,2mmol)溶于10mLCH2Cl2中，室溫下攪拌，加入間氯過氧苯甲酸(mCPBA,1.72g,10mmol)，反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1小時，而后升溫回流3小時，TLC檢測反應(yīng)完成。反應(yīng)混合物傾倒入200mL冰水中，攪拌，用CH2Cl2(60mL×3)萃取，合并萃取相，依次用飽和NaHCO3溶液和鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥。抽濾除去干燥劑，濾液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸干，得到的殘余物使用柱層析純化，得到化合物I-2，白色固體。ESI-MS，m/z＝404([M+H]+)。實施例3參比化合物R-1的合成為了進(jìn)一步比較本發(fā)明的藥理效果，申請人在本申請中記載了同為申請人發(fā)明的未知化合物R-1(尚未公開)。A.化合物IV-3的合成化合物II(1.55g,10mmol)、化合物III-3(1.71g,10mmol)和固體K2CO3(5.53g,40mmol)加入30mL干燥的DMF中，室溫下攪拌過夜，TLC跟蹤發(fā)現(xiàn)反應(yīng)完成。反應(yīng)混合物傾倒入200mL冰水中，攪拌，用濃鹽酸調(diào)節(jié)pH＝4-5，用CH2Cl2(60mL×3)萃取，合并萃取相，用鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥。抽濾除去干燥劑，濾液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸干，得到的殘余物使用柱層析純化，得到化合物IV-3，白色固體。ESI-MS,m/z＝244([M-H]-)。B.化合物VI-3的合成化合物IV-3(1.23g,5mmol)、化合物V-3(0.43g,5mmol)、DCC(1.24g,6mmol)和4-二甲氨基吡啶(DMAP,0.3g)溶于干燥的20mLTHF中，室溫下攪拌過夜，TLC跟蹤發(fā)現(xiàn)反應(yīng)完成。反應(yīng)混合物傾倒入200mL冰水中，攪拌，用CH2Cl2(60mL×3)萃取，合并萃取相，依次用2％稀鹽酸和鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥。抽濾除去干燥劑，濾液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸干，得到的殘余物使用柱層析純化，得到化合物VI-3，白色固體。ESI-MS,m/z＝313([M+H]+)。C.化合物R-1的合成化合物VI-3(0.62g,2mmol)溶于10mLCH2Cl2中，室溫下攪拌，加入間氯過氧苯甲酸(mCPBA,1.72g,10mmol)，反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1小時，而后升溫回流3小時，TLC檢測反應(yīng)完成。反應(yīng)混合物傾倒入200mL冰水中，攪拌，用CH2Cl2(60mL×3)萃取，合并萃取相，依次用飽和NaHCO3溶液和鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥。抽濾除去干燥劑，濾液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸干，得到的殘余物使用柱層析純化，得到化合物R-1，白色固體。ESI-MS，m/z＝361([M+H]+)。實施例4化合物體外對PTP1B的抑制試驗將原始濃度為50mM的化合物溶液用95％DMSO進(jìn)行1/2梯度稀釋，共稀釋11個濃度梯度。酶活反應(yīng)體系共計102μL，其中化合物加入體積為2μL。首先，在96孔板中依次加入50μLPTP1B蛋白，2μL不同濃度的待測化合物，震蕩1min，30℃孵育30min，然后加入50μLpNPP(對硝基苯磷酸鹽)，震蕩10s。測定405nm波長下吸光度隨反應(yīng)時間的變化，6秒測一次，測60個點，平行測定三次，并繪制出反應(yīng)過程曲線，從而計算不同濃度下各個化合物對酶的抑制活性，利用軟件GraphPadPrism5軟件進(jìn)行非線性擬合分析，以剩余活性值為縱坐標(biāo)，化合物濃度對數(shù)值為橫坐標(biāo)繪制曲線，計算該化合物的IC50值。測試結(jié)果見下表?；衔颕C50(nM)參比化合物R-118.6I-18.8I-28.3從上表結(jié)果可以看出，本發(fā)明的化合物對PTP1B具有很強的抑制作用，可以作為制備治療II型糖尿病的的藥物。當(dāng)前第1頁1 2 3