本發(fā)明涉及用于預(yù)防和治療肝損傷并且適于口服或注射給藥的新的水溶性藥物，具體地說(shuō)涉及蓑衣蓮?fù)?位羥基衍生化或16位羰基衍生化得到的前藥。

背景技術(shù)：

蓑衣蓮?fù)鳛轭A(yù)防、保護(hù)和治療肝損傷藥物是現(xiàn)有研究中公知的。在已知的多種類型中，一種特別有效的類型為3號(hào)位上含羥基、16號(hào)位上含酮羰基。例如，公開(kāi)的中國(guó)發(fā)明專利，專利號(hào)為：201210065753.1，名稱為：蓑衣蓮?fù)谥苽漕A(yù)防和治療肝損傷藥物中的用途，該專利公開(kāi)了化學(xué)名為3-hydroxy-17α-h,18β-h-28-norolean-12-eme-16-one具有預(yù)防、保護(hù)和治療肝損傷的作用。

但該類型藥物的應(yīng)用受到了其水溶性低的限制，這就妨礙了其開(kāi)發(fā)成適宜的胃腸口服、注射等給藥形式的制劑。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

針對(duì)以上現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種用于預(yù)防和治療肝損傷并且適于口服或注射給藥的新的水溶性藥物或其可藥用鹽。

具體地說(shuō)，本發(fā)明提供了下面通式i的化合物，一種用于預(yù)防、保護(hù)和治療肝損傷的藥物組合物，它包含有治療有效量的通式i的化合物和藥學(xué)上可接受的載體，以及上述化合物在預(yù)防、保護(hù)和治療肝損傷方面提供更多藥物選擇途徑。

本發(fā)明所述的用于預(yù)防和治療肝損傷并且適于口服或注射給藥的新的水溶性藥物或其可藥用鹽下述通式(i)化合物表示：

其中，r1為氨基酸酯、磷酸酯、硫酸酯、磺酸酯、羧酸酯，或這些酯的可藥用鹽；r2為氧原子或式ⅱ所示的基團(tuán)，其中a為羥基或式iii所示的基團(tuán)；r3為質(zhì)子、烷基、苯基或芳烷基；r4為質(zhì)子、烷基、苯基或芳烷基、羧基或帶取代基的羧基、磷酸酯、硫酸酯、磺酸酯或其可藥用鹽

優(yōu)選地，其中r1和r4是氨基酸酯、磷酸酯、硫酸酯、磺酸酯或羧酸酯的鈉、鉀、鈣、銨的可藥用鹽。

優(yōu)選地，其中r1和r4是下述通式(iv)的氨基酸酯部分，其中氨基酸包括脂肪族氨基酸、芳香族氨基酸、雜環(huán)族氨基酸和雜環(huán)亞氨基酸以及它們的衍生物；

優(yōu)選地，所述脂肪族氨基酸包括丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、蛋氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、賴氨酸、精氨酸、甘氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、半胱氨酸、天冬酰胺或谷氨酰胺；所述芳香族氨基酸包括苯丙氨酸或酪氨酸；所述雜環(huán)族氨基酸包括組氨酸或色氨酸；所述雜環(huán)亞氨基酸包括脯氨酸。

優(yōu)選地，其中r1和r4是下述通式(v)硫酸酯的部分結(jié)構(gòu)，其中，r7可為質(zhì)子、烷基、苯基或芳烷基；

優(yōu)選地，r1和r4是下述通式(vi)磷酸酯的部分結(jié)構(gòu)，其中r8、r9可為質(zhì)子或烷基、苯基、芳烷基；

優(yōu)選地，r1和r4是下述通式(vii)磺酸酯的部分結(jié)構(gòu)，其中r10為氫、烷基、苯基或芳烷基；

優(yōu)選地，r1和r4是下述通式(viii)羧酸酯的部分結(jié)構(gòu)，其中r11為氫、烷基、苯基或芳烷基、含有羧基的羧酸酯；

本文中所述的烷基指直鏈或支鏈的飽和脂肪族基團(tuán)，例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、正己基等；所述的苯基指苯環(huán)上的一個(gè)或多個(gè)氫被甲基、乙基、正丙基、異丙基取代的基團(tuán)，例如鄰甲基苯基、對(duì)甲基苯基、間甲基苯基、2，3-二甲基苯基等；所述的芳烷基指苯基取代直鏈或支鏈的飽和脂肪族上的氫的基團(tuán)，例如苯甲基、苯乙基等。

本文中所述的術(shù)語(yǔ)“可藥用鹽”包括銨的磷酸鹽、金屬鹽、與氨基酸形成的鹽、與胺形成的鹽以及與其它堿例如哌啶或嗎啉形成的鹽。術(shù)語(yǔ)“可藥用鹽”包括單鹽或二鹽。具體的實(shí)施方案包括銨、鈉、鈣、鎂、銫、鋰、鉀、鋇、鋅、鋁、賴氨酸、精氨酸、組氨酸、甲胺、乙胺、叔丁基胺、環(huán)己基胺、n-甲基葡糖胺、乙二胺、甘氨酸、普魯卡因、苯乍生(benzathene)、二乙醇胺、三乙醇胺、哌啶和嗎啉。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益技術(shù)效果是：1、本發(fā)明的蓑衣蓮?fù)蛩狨セ蚱淇伤幱名}，該前藥顯示比母體化合物明顯改善了的水溶性，從而使其可用于注射給藥以及口服給藥，該化合物在溶液中是穩(wěn)定的，在體內(nèi)轉(zhuǎn)化成母體藥物；2、本發(fā)明藥物可以單獨(dú)使用或者配制成藥物組合物的形式，所述藥物組合物除活性成分外，還含有可藥用載體、輔劑、緩釋劑或稀釋劑。該化合物可以通過(guò)各種方法給藥，例如通過(guò)口服或注射的途徑給藥。藥物組合物可以是固體的形式例如膠囊、片劑、散劑等，或是液體的形式例如溶液劑、混懸劑或乳劑。注射用組合物可以制成在安瓿或多劑量容器中的單位劑量形式，并可含有添加劑例如助懸劑、穩(wěn)定劑和分散劑。組合物可以是即可使用的形式或是用于在給藥時(shí)用適宜的賦形劑例如無(wú)菌水重建的粉末形式；3、本發(fā)明的藥物在動(dòng)物、包括哺乳動(dòng)物、特別是人中具有藥理學(xué)活性，本發(fā)明的藥物可用于預(yù)防、保護(hù)和治療肝損傷。本發(fā)明的藥物大大增加了蓑衣蓮?fù)A(yù)防、保護(hù)治療肝損傷的母體藥物的溶解度，并且小鼠實(shí)驗(yàn)中證實(shí)，該藥物可以釋放出生物學(xué)活性的母體化合物(即起到前藥的作用)。

具體實(shí)施方式

下面對(duì)本發(fā)明實(shí)施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述。基于本發(fā)明中的實(shí)施例，本領(lǐng)域技術(shù)人員在沒(méi)有做出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其他實(shí)施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。本發(fā)明的具體實(shí)施方式中所用的一些縮寫(xiě)如下：

h＝小時(shí)；peg＝聚乙二醇；mg/ml＝毫克每毫升；mg/kg＝毫克每公斤；apap＝對(duì)乙酰氨基酚；nac＝n-乙酰半胱氨酸；rpm＝轉(zhuǎn)每分鐘；min＝分鐘；alt＝谷丙轉(zhuǎn)氨酶；ast＝谷草轉(zhuǎn)氨酶；iu/l＝國(guó)際單位每升；g＝克；℃＝攝氏度。在以下實(shí)施例中，所有的溫度均為攝氏度。

實(shí)施例1前藥蓑衣蓮?fù)蛩狨?b)的安全性試驗(yàn)

1.1腹腔注射的安全性研究試驗(yàn)

將15只昆明種雄性小鼠隨機(jī)分為3組，每組5只。分別通過(guò)腹腔注射給予50、100、200mg/kgb后觀察小鼠狀態(tài)。

結(jié)果：3天無(wú)小鼠死亡，且小鼠狀態(tài)正常，表明在所給劑量下蓑衣蓮?fù)蛩狨](méi)有明顯的毒副作用。

1.2靜脈注射的安全性研究試驗(yàn)

將15只昆明種雄性小鼠隨機(jī)分為3組，每組5只。分別通過(guò)靜脈注射給予25、5、1mg/kgb后觀察小鼠狀態(tài)。

結(jié)果：3天無(wú)小鼠死亡，且小鼠狀態(tài)正常，表明在所給劑量下蓑衣蓮?fù)蛩狨](méi)有明顯的毒副作用。

實(shí)施例2前藥蓑衣蓮?fù)蛩狨?duì)急性肝損傷的預(yù)防保護(hù)試驗(yàn)

2.1藥品前處理

(1)b：溶解于3％的吐溫80，配制成2.5mg/ml溶液。

(2)apap：溶于30％peg400，配制成15mg/ml溶液

2.2動(dòng)物處理

將每只體重為30g左右的昆明種雄性小鼠40只隨機(jī)分為5組，每組8只。

(1)空白組：不做任何處理。

(2)模型組：300mg/kg的apap。

(3)b對(duì)照組：50mg/kg的b。

(4)b組：先給予mg/kg的b預(yù)處理，一天一次連續(xù)三天，末次給藥后2h給300mg/kg的apap。

(5)1000mg/kg的nac后2h給予300mg/kg的apap。

各組均為腹腔注射給藥。造模24h后通過(guò)眼球取血，然后脫頸處死動(dòng)物取出肝臟備用。血液于4℃、3000rpm下離心10min后分離血清。一部分肝臟用4％甲醛浸泡后用于病理檢查，另一部分制成10％肝勻漿。用試劑盒檢測(cè)肝臟病變的指標(biāo)alt和ast。取肝臟置于4％甲醛溶液中浸泡固定后用于病理組織檢查。

2.3試驗(yàn)結(jié)果

由上表可以得出，給予300mg/kg的apap24h后血清中的alt和ast的水平顯著增加(p＜0.05)，病理切片表明，模型組(b)肝組織的結(jié)構(gòu)已經(jīng)被破壞，提示肝損傷模型復(fù)制成功。預(yù)先給予nac或b處理能對(duì)抗由apap引起的alt和ast的增加(p＜0.05)，且給藥組與正常對(duì)照組無(wú)明顯差異(p>0.05)；病理切片表明，nac或b給藥組肝臟的結(jié)構(gòu)基本正常，與正常對(duì)照組無(wú)明顯差異。說(shuō)明蓑衣蓮?fù)蛩狨タ梢酝耆Ｗo(hù)小鼠免受apap誘導(dǎo)的急性肝損傷。

實(shí)施例3前藥蓑衣蓮?fù)蛩狨?duì)急性肝損傷的治療與預(yù)防保護(hù)試驗(yàn)

3.1藥品前處理

(1)b：溶解于3％的吐溫80，配制成2.5mg/ml溶液。

(2)apap：溶于30％peg400，配制成15mg/ml溶液

2.2動(dòng)物處理

將每只體重在30g左右的昆明種雄性小鼠32隨機(jī)分為4各組，每組8只。

(1)空白組：不做任何處理。

(2)模型組：300mg/kg的apap。

(3)nac組先給予300mg/kgapap造模1h后給予1000mg/kgnac。

(4)b組先給予300mg/kgapap造模1h后給予50mg/kg的b。

各組均為腹腔注射。在造模24h后處理動(dòng)物，然后脫頸處死動(dòng)物取出肝臟備用。血液于4℃、3000rpm下離心10min后分離血清。一部分肝臟用4％甲醛浸泡后用于病理檢查，另一部分制成10％肝勻漿。用試劑盒檢測(cè)肝臟病變的指標(biāo)alt和ast。

2.3試驗(yàn)結(jié)果

由以上試驗(yàn)結(jié)果可以得出，先給予300mg/kg的apap造模后血清中的alt和ast的水平顯著增加(p＜0.05)，病理切片表明，模型組(apap)肝組織的結(jié)構(gòu)已經(jīng)被破壞，提示肝損傷模型復(fù)制成功。鑒于有實(shí)驗(yàn)證實(shí)apap造模1h后已引起肝損傷，而給予1000mg/kg的nac或50mg/kg的b可使血清中alt和ast得水平顯著降低至正常水平(p＜0.05)，說(shuō)明b不僅可以降低由apap急性肝損傷引起的血清中alt和ast增加(p＜0.05)，阻止大劑量apap對(duì)肝臟的繼續(xù)破壞，起到保護(hù)作用，還可以對(duì)由apap誘導(dǎo)的急性肝損傷起到治療作用。

以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例而已，并不用以限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。