本發(fā)明涉及一種促進(jìn)茶藨子葉狀層菌中活性物質(zhì)積累的方法，具體涉及一種利用植物源煙水促進(jìn)茶藨子葉狀層菌中活性物質(zhì)—甾醇類物質(zhì)積累的方法。

背景技術(shù)：

茶藨子葉狀層菌（phylloporiaribis（schumach:fr.）ryvarden）為銹革孔菌科葉狀層菌屬真菌，該菌主產(chǎn)于山東平邑，寄生于忍冬植株老干或裸露的根部，當(dāng)?shù)厝朔Q之為“銀花蛾子”，用藥歷史悠久，可用于消炎、解毒、止痛，當(dāng)?shù)鼐用裼闷渲委熝恃住⒑硌?、肝炎及癌癥。茶藨子葉狀層菌中含有三萜類、甾醇類、多糖類和苯乙烯基吡喃酮類等有效成分，具有清熱解毒、消腫利咽、降血糖和抗腫瘤等作用。麥角甾醇又稱麥角固醇，是真菌類的特征甾醇，廣泛存在于藥用真菌子實(shí)體和發(fā)酵菌絲體中，茶藨子葉狀層菌中也含有該類物質(zhì)。以麥角甾醇為代表的甾醇類化學(xué)成分經(jīng)藥理試驗(yàn)證明具有抗炎、促免疫、抗癌等藥理作用，是一種重要的藥物活性成分。

隨著茶藨子葉狀層菌的開發(fā)利用，市場(chǎng)需求量非常大，野生資源遠(yuǎn)遠(yuǎn)滿足不了工業(yè)化生產(chǎn)，人工發(fā)酵培養(yǎng)技術(shù)已取得突破，在人工發(fā)酵培養(yǎng)過程中采取有效措施提高茶藨子葉狀層菌中麥角甾醇類成分的含量，將有利于該類菌的開發(fā)利用。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是提供一種利用植物源煙水促進(jìn)茶藨子葉狀層菌中甾醇類有效成分積累的方法，該方法在茶藨子葉狀層菌發(fā)酵培養(yǎng)過程中加入適量的植物源煙水，提高了茶藨子葉狀層菌中甾醇類物質(zhì)的含量，該方法對(duì)提高茶藨子葉狀層菌的品質(zhì)具有重要意義。

植物源煙水是指植物材料燜燒產(chǎn)生的煙溶于水中形成的水溶液，植物源煙水的生理生態(tài)作用已成為國(guó)際生態(tài)學(xué)界研究的熱點(diǎn)，它能有效提高作物種子萌發(fā)率，提高幼苗活力，以及提高藥用植物體內(nèi)藥物活性物質(zhì)的積累，在提高作物和中藥材品質(zhì)方面表現(xiàn)出巨大的潛力，然而其對(duì)真菌體內(nèi)活性物質(zhì)的積累尚未有研究報(bào)道。發(fā)明人經(jīng)過研究發(fā)現(xiàn)，在人工培養(yǎng)茶藨子葉狀層菌的特定發(fā)酵時(shí)期加入適量的植物源煙水進(jìn)行培養(yǎng)，該種培養(yǎng)方式大幅度的提高了茶藨子葉狀層菌中甾醇類活性物質(zhì)的含量，發(fā)現(xiàn)了煙水的又一新用途，同時(shí)為高品質(zhì)茶藨子葉狀層菌的培養(yǎng)提供了新的思路。

本發(fā)明具體技術(shù)方案如下：

一種利用植物源煙水促進(jìn)茶藨子葉狀層菌中甾醇類有效成分積累的方法，該方法是將茶藨子葉狀層菌phylloporiaribis(schumach.:fr.)ryvarden進(jìn)行斜面培養(yǎng)，斜面培養(yǎng)后，將所得菌絲體接種到液體培養(yǎng)基中進(jìn)行液體培養(yǎng)，液體培養(yǎng)過程如下：將斜面培養(yǎng)后生長(zhǎng)的較好的茶藨子葉狀層菌菌絲團(tuán)接種到液體培養(yǎng)基中，每1l液體培養(yǎng)基接種7-8個(gè)菌絲團(tuán)，在液體培養(yǎng)第3天向液體培養(yǎng)體系中加入植物源煙水，每1l液體體系中加入0.5-1.5ml植物源煙水，在液體培養(yǎng)第7天再次向液體培養(yǎng)體系中加入植物源煙水，每1l液體體系中加入0.15-0.25ml植物源煙水，液體培養(yǎng)共9-10天。

本發(fā)明方法中，所述茶藨子葉狀層菌以野生狀態(tài)下忍冬植株上生長(zhǎng)的茶藨子葉狀層菌phylloporiaribis(schumach.:fr.)ryvarden子實(shí)體為菌種，或者以保藏號(hào)為cgmccno1195的茶藨子葉狀層菌phylloporiaribis(schumach.:fr.)ryvarden為菌種。

本發(fā)明方法中，所述植物源煙水是將6-7kg的植物源燜燒50-60min所產(chǎn)生的煙通入500ml冷水中得到的水溶液，所述植物源是質(zhì)量比為1:3:3的紫荊枝干、一球懸鈴木落葉、臭椿枝干。

進(jìn)一步的，植物源煙水的制備方法還包括以下具體步驟：將紫荊枝干、一球懸鈴木落葉、臭椿枝干晾干，堆放在黑屋中，用紫外光照射24h，然后用80-90℃的熱氣流處理7-8h；處理后，將紫荊枝干、一球懸鈴木落葉、臭椿枝干按照1:3:3的質(zhì)量比混合，取6-7kg的混合物作為植物源，將6-7kg的植物源燜燒50-60min所產(chǎn)生的煙通入500ml冷水中，所得的水溶液即為植物源煙水。其中，熱氣流為熱空氣或熱富氧空氣。一般的，制得的植物源煙水在4℃避光保存?zhèn)溆谩?/p>

本發(fā)明方法中，在液體培養(yǎng)時(shí)共加入2次植物源煙水，第一次是第3天的時(shí)候，第二次是第7天的時(shí)候，植物源煙水均一次性加入。

本發(fā)明方法中，液體培養(yǎng)時(shí)所用的液體培養(yǎng)基由以下重量百分含量的組分組成：麥芽糖1.5-2.5%，味精0.8-1.2%，kh2po40.03-0.06%，mgso4?7h2o0.02-0.04%，葡萄糖0.8-1.2%，酵母膏0.2-0.4%，玉米漿0.05-0.15%，甘露醇1.8-2.5%，caco31.8-2.5%，水余量；ph為6.5-7.0。

本發(fā)明方法中，液體培養(yǎng)時(shí)，在第1次加入植物源煙水前（即第3天的時(shí)候），在光照強(qiáng)度300-350lux、27-29℃、140-160rpm的條件下進(jìn)行培養(yǎng)，在第1次加入植物源煙水后，在黑暗、24-25℃、140-160rpm的條件下培養(yǎng)12-14h，然后轉(zhuǎn)至光照強(qiáng)度300-350lux、27-28℃、140-160rpm的條件下培養(yǎng)，直至第2次加入植物源煙水。在第2次加入植物源煙水后，在黑暗、24-25℃、140-160rpm的條件下培養(yǎng)12-14h，然后轉(zhuǎn)至光照強(qiáng)度300-350lux、27-28℃、140-160rpm的條件下培養(yǎng)，直至液體培養(yǎng)結(jié)束。

本發(fā)明方法中，整個(gè)液體培養(yǎng)過程中，保持液體培養(yǎng)體系的ph為6.5-7.0。尤其是加入植物源煙水后，因?yàn)闊熕旧韕h值低，為了防止加入之后整個(gè)培養(yǎng)基的ph過低影響菌的生長(zhǎng)，需要同時(shí)調(diào)整ph。

本發(fā)明方法中，為了避免植物源煙水中帶入不利于菌種生長(zhǎng)的成分，先對(duì)植物源煙水進(jìn)行以下處理后，再加入液體培養(yǎng)基中：先將植物源煙水在121℃下進(jìn)行高壓滅菌20min，然后將植物源煙水煮沸30min，放涼后再加入液體培養(yǎng)基中。

本發(fā)明方法中，斜面培養(yǎng)時(shí)，將茶藨子葉狀層菌菌種加入斜面培養(yǎng)基中，在29℃培養(yǎng)7天。所用的斜面培養(yǎng)基由以下重量百分含量的組分組成：土豆20%、瓊脂1.5%、葡萄糖2%、磷酸二氫鉀0.2%、硫酸鎂0.05%、維生素1×10^-3%，水余量，ph為6.5。

本發(fā)明在茶藨子葉狀層菌發(fā)酵培養(yǎng)過程中加入植物源煙水，本發(fā)明植物源煙水由紫荊枝干、一球懸鈴木落葉、臭椿枝干制成，該植物源煙水中含有多種微量的酚類和酯類活性物質(zhì)等成分。當(dāng)植物源煙水濃度低時(shí)，其中的部分成分對(duì)茶藨子葉狀層菌的生長(zhǎng)形成“微逆境”，成為“啟動(dòng)”茶藨子葉狀層菌中活性物質(zhì)——甾醇類物質(zhì)生物合成程序的“誘導(dǎo)子”。甾醇類物質(zhì)在茶藨子葉狀層菌體內(nèi)擔(dān)任“抗逆分子”，植物源煙水的存在促使茶藨子葉狀層菌提高體內(nèi)甾醇類物質(zhì)的合成來抵御“微逆境”，因此我們的目標(biāo)藥物活性物質(zhì)甾醇類物質(zhì)的含量會(huì)增加，從而提高了作為藥用的茶藨子葉狀層菌的質(zhì)量。本發(fā)明首次提出植物源煙水對(duì)茶藨子葉狀層菌活性物質(zhì)積累的作用，該方法原料來源廣泛、操作方便，易于實(shí)施，對(duì)提高茶藨子葉狀層菌質(zhì)量具有重要意義。

附圖說明

圖1本發(fā)明煙水制取裝置的結(jié)構(gòu)示意圖。

圖中，1、桶狀鐵質(zhì)容器，2、蓋子，3、橫向隔板，4、點(diǎn)火口，5、遮煙蓋，6、緩沖瓶，7、接收瓶，8、真空抽濾裝置。

具體實(shí)施方式

下面通過具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步說明，下述說明僅是為了解釋本發(fā)明，并不對(duì)其內(nèi)容進(jìn)行限制。

實(shí)施例1

本發(fā)明植物源煙水可以采用專利zl.201310631035.0中記載的裝置進(jìn)行植物源煙水的制備，也可以采用圖1中所示的裝置進(jìn)行植物源煙水的制備。圖1中煙水制取裝置包括桶狀鐵質(zhì)容器1，其上端開口并帶有蓋子2，用于盛放植物材料，蓋子上帶有把手，桶狀鐵質(zhì)容器1的空腔下部?jī)?nèi)設(shè)有放置植物源的橫向隔板3，橫向隔板上帶有通氣的孔，桶狀鐵質(zhì)容器1還具有點(diǎn)火口4，點(diǎn)火口4位于橫向隔板3的下面，點(diǎn)火口上設(shè)有可自動(dòng)調(diào)節(jié)供氧量的點(diǎn)火口閥門，點(diǎn)火口上帶有遮煙蓋5，桶狀鐵質(zhì)容器1的上部設(shè)有出煙口，出煙口與緩沖瓶6相連，從出煙口排出的煙經(jīng)緩沖瓶6進(jìn)入多個(gè)串聯(lián)的接收瓶7，接收瓶7中裝有冷水，最右端的接收瓶與真空抽濾裝置8連接。

植物源煙水的制備方法如下：取紫荊枝干、一球懸鈴木落葉、臭椿枝干，晾干，晾干后按照1:3:3的質(zhì)量比混合，然后將混合物堆放在黑屋中，用紫外光照射24h，然后用80-90℃的熱空氣處理8h；處理后，取6kg的混合物作為植物源，將6kg的植物源放入煙水制取裝置中，蓋好蓋子，從點(diǎn)火口點(diǎn)火，點(diǎn)燃植物源，點(diǎn)火后用遮煙蓋將點(diǎn)火口蓋上，控制供氧量，防止煙從點(diǎn)火口溢出。點(diǎn)燃的植物源因?yàn)檠鯕獠蛔悖圆荒艹浞值娜紵?，火很快?huì)熄滅，僅留火星，植物源僅能靠火星進(jìn)行燃燒，此時(shí)會(huì)產(chǎn)生大量的煙，在真空抽濾裝置的作用下，燃燒過程產(chǎn)生的煙通入接收瓶。將燜燒60min所產(chǎn)生的煙通入500ml冷水中進(jìn)行吸收，所得的水溶液即為植物源煙水，將其在4℃避光保存，備用。

實(shí)施例2

按照實(shí)施例1的方法制備植物源煙水，不同的是：植物源是6kg的質(zhì)量比為3:1:1的紫荊枝干、玉蘭枝干、垂柳枝干。

實(shí)施例3

發(fā)酵培養(yǎng)茶藨子葉狀層菌，方法如下：

1、培養(yǎng)基的制備

斜面培養(yǎng)基的制備：在市場(chǎng)上購(gòu)買土豆，削去外皮，切成1cm見方小塊，將土豆塊加入水中，121℃滅菌后煮沸30min（注意火力的控制，可適當(dāng)補(bǔ)水），用紗布過濾取濾液。在濾液中加入瓊脂、葡萄糖、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、維生素，用玻璃棒不斷攪拌，加熱溶解，補(bǔ)足水分，調(diào)整ph值至6.5，裝入試管，滅菌后冷卻，制成斜面培養(yǎng)基；斜面培養(yǎng)基配方為（wt%）：土豆20%、瓊脂1.5%、葡萄糖2%、磷酸二氫鉀0.2%、硫酸鎂0.05%、維生素1×10^-3%，水余量。

液體培養(yǎng)基配方為（wt%）：麥芽糖2%，味精1%，kh2po40.05%，mgso4?7h2o0.03%，葡萄糖1%，酵母膏0.3%，玉米漿0.1%，甘露醇2%，caco32%，水余量；ph為6.5-7.0。

、發(fā)酵培養(yǎng)茶藨子葉狀層菌

2.1：接種工作在凈化工作臺(tái)上進(jìn)行。當(dāng)以野生狀態(tài)下忍冬植株上生長(zhǎng)的茶藨子葉狀層菌phylloporiaribis(schumach.:fr.)ryvarden子實(shí)體為菌種時(shí)，接種前先用紫外燈對(duì)子實(shí)體消毒40min，在無菌狀態(tài)下將子實(shí)體邊緣正在生長(zhǎng)的部分組織接種于含斜面培養(yǎng)基的試管中，在29℃培養(yǎng)7天。當(dāng)以保藏號(hào)為cgmccno1195的茶藨子葉狀層菌phylloporiaribis(schumach.:fr.)ryvarden為菌種時(shí)，直接將該菌種接種于含斜面培養(yǎng)基的試管中，在29℃培養(yǎng)7天。

2.2：取實(shí)施例1的植物源煙水，在121℃高壓滅菌20min，然后煮沸30min，放涼后備用；

2.3：取上述斜面試管中固體培養(yǎng)生長(zhǎng)情況較好的茶藨子葉狀層菌菌絲團(tuán)進(jìn)行接種，接種到液體培養(yǎng)基中，注意剔除底部含有瓊脂的斜面培養(yǎng)基，菌絲團(tuán)的直徑大約為1-2mm，盡量使所取菌絲團(tuán)的大小保持一致，每1l液體培養(yǎng)基接種8個(gè)菌絲團(tuán)，接種后，在光照強(qiáng)度320lux、28℃、轉(zhuǎn)速150rpm的條件下先培養(yǎng)2天，第3天將上述滅菌處理后的植物源煙水加入液體培養(yǎng)基中，每1l液體培養(yǎng)基中加入1ml植物源煙水，第7天第2次加入上述滅菌處理后的植物源煙水，每1l液體培養(yǎng)基中加入0.2ml植物源煙水，在第1次加入植物源煙水后，在黑暗、24-25℃、150rpm的條件下培養(yǎng)12h，然后轉(zhuǎn)至光照強(qiáng)度320lux、28℃、150rpm的條件下培養(yǎng)，直至第2次加入植物源煙水。在第2次加入植物源煙水后，在黑暗、24-25℃、150rpm的條件下培養(yǎng)12h，然后轉(zhuǎn)至光照強(qiáng)度320lux、28℃、150rpm的條件下培養(yǎng)，直至液體培養(yǎng)結(jié)束，整個(gè)液體培養(yǎng)過程保持ph為6.5-7.0，整個(gè)液體培養(yǎng)的時(shí)間為10天。

2.4：液體培養(yǎng)后，將所得的發(fā)酵液進(jìn)行抽濾，所得濾餅在60℃下進(jìn)行干燥，直至全干，即得茶藨子葉狀層菌。

實(shí)施例4

按照實(shí)施例3的方法發(fā)酵培養(yǎng)茶藨子葉狀層菌，不同的是：所用植物源煙水為實(shí)施例2制備的植物源煙水。

實(shí)施例5

按照實(shí)施例3的方法發(fā)酵培養(yǎng)茶藨子葉狀層菌，不同的是：液體培養(yǎng)基為：麥芽糖1.5%，味精1.2%，kh2po40.03%，mgso4?7h2o0.04%，葡萄糖0.8%，酵母膏0.4%，玉米漿0.05%，甘露醇2.5%，caco31.8%，水余量；ph為7.0。

實(shí)施例6

按照實(shí)施例3的方法發(fā)酵培養(yǎng)茶藨子葉狀層菌，不同的是：液體培養(yǎng)基為：麥芽糖2.5%，味精0.8%，kh2po40.06%，mgso4?7h2o0.02%，葡萄糖1.2%，酵母膏0.2%，玉米漿0.15%，甘露醇1.8%，caco32.5%，水余量；ph為6.5。

實(shí)施例7

按照實(shí)施例3的方法發(fā)酵培養(yǎng)茶藨子葉狀層菌，不同的是：液體培養(yǎng)的過程為：取斜面試管中固體培養(yǎng)生長(zhǎng)情況較好的茶藨子葉狀層菌菌絲團(tuán)進(jìn)行接種，接種到液體培養(yǎng)基中，注意剔除底部含有瓊脂的斜面培養(yǎng)基，菌絲團(tuán)的直徑大約為1-2mm，盡量使所取菌絲團(tuán)的大小保持一致，每1l液體培養(yǎng)基接種8個(gè)菌絲團(tuán)，接種后，在光照強(qiáng)度350lux、27℃、轉(zhuǎn)速140rpm的條件下先培養(yǎng)2天，第3天將上述滅菌處理后的植物源煙水加入液體培養(yǎng)基中，每1l液體培養(yǎng)基中加入0.5ml植物源煙水，第7天第2次加入上述滅菌處理后的植物源煙水，每1l液體培養(yǎng)基中加入0.25ml植物源煙水，在第1次加入植物源煙水后，在黑暗、24-25℃、140rpm的條件下培養(yǎng)14h，然后轉(zhuǎn)至光照強(qiáng)度350lux、27℃、140rpm的條件下培養(yǎng)，直至第2次加入植物源煙水。在第2次加入植物源煙水后，在黑暗、24-25℃、140rpm的條件下培養(yǎng)14h，然后轉(zhuǎn)至光照強(qiáng)度350lux、27℃、140rpm的條件下培養(yǎng)，直至液體培養(yǎng)結(jié)束，整個(gè)液體培養(yǎng)過程保持ph為6.5-7.0，整個(gè)液體培養(yǎng)的時(shí)間為10天。

實(shí)施例8

按照實(shí)施例3的方法發(fā)酵培養(yǎng)茶藨子葉狀層菌，不同的是：液體培養(yǎng)的過程為：取斜面試管中固體培養(yǎng)生長(zhǎng)情況較好的茶藨子葉狀層菌菌絲團(tuán)進(jìn)行接種，接種到液體培養(yǎng)基中，注意剔除底部含有瓊脂的斜面培養(yǎng)基，菌絲團(tuán)的直徑大約為1-2mm，盡量使所取菌絲團(tuán)的大小保持一致，每1l液體培養(yǎng)基接種8個(gè)菌絲團(tuán)，接種后，在光照強(qiáng)度300lux、29℃、轉(zhuǎn)速160rpm的條件下先培養(yǎng)2天，第3天將上述滅菌處理后的植物源煙水加入液體培養(yǎng)基中，每1l液體培養(yǎng)基中加入1.5ml植物源煙水，第7天第2次加入上述滅菌處理后的植物源煙水，每1l液體培養(yǎng)基中加入0.15ml植物源煙水，在第1次加入植物源煙水后，在黑暗、24-25℃、160rpm的條件下培養(yǎng)12h，然后轉(zhuǎn)至光照強(qiáng)度300lux、29℃、160rpm的條件下培養(yǎng)，直至第2次加入植物源煙水。在第2次加入植物源煙水后，在黑暗、24-25℃、160rpm的條件下培養(yǎng)12h，然后轉(zhuǎn)至光照強(qiáng)度300lux、29℃、160rpm的條件下培養(yǎng)，直至液體培養(yǎng)結(jié)束，整個(gè)液體培養(yǎng)過程保持ph為6.5-7.0，整個(gè)液體培養(yǎng)的時(shí)間為10天。

對(duì)比例1

按照實(shí)施例3的方法發(fā)酵培養(yǎng)茶藨子葉狀層菌，不同的是：液體培養(yǎng)時(shí)不使用植物源煙水，液體培養(yǎng)的過程為：取斜面試管中固體培養(yǎng)生長(zhǎng)情況較好的茶藨子葉狀層菌菌絲團(tuán)進(jìn)行接種，接種到液體培養(yǎng)基中，注意剔除底部含有瓊脂的斜面培養(yǎng)基，菌絲團(tuán)的直徑大約為1-2mm，盡量使所取菌絲團(tuán)的大小保持一致，每1l液體培養(yǎng)基接種8個(gè)菌絲團(tuán)，接種后，在有光（320lux）、28℃、轉(zhuǎn)速150rpm的條件下培養(yǎng)10天。

對(duì)比例2

按照實(shí)施例3的方法發(fā)酵培養(yǎng)茶藨子葉狀層菌，不同的是：液體培養(yǎng)的過程為：取斜面試管中固體培養(yǎng)生長(zhǎng)情況較好的茶藨子葉狀層菌菌絲團(tuán)進(jìn)行接種，接種到液體培養(yǎng)基中，注意剔除底部含有瓊脂的斜面培養(yǎng)基，菌絲團(tuán)的直徑大約為1-2mm，盡量使所取菌絲團(tuán)的大小保持一致，每1l液體培養(yǎng)基接種8個(gè)菌絲團(tuán)，接種后，在光照（320lux）、28℃、轉(zhuǎn)速150rpm的條件下先培養(yǎng)2天，第3天將實(shí)施例1滅菌處理后的植物源煙水加入液體培養(yǎng)基中，每1l液體培養(yǎng)基中加入1.5ml植物源煙水，加入后繼續(xù)在光照（320lux）、28℃、轉(zhuǎn)速150rpm的條件下培養(yǎng)，直至液體培養(yǎng)結(jié)束，整個(gè)液體培養(yǎng)過程保持ph為6.5-7.0，整個(gè)液體培養(yǎng)的時(shí)間為10天。

對(duì)比例3

按照實(shí)施例3的方法發(fā)酵培養(yǎng)茶藨子葉狀層菌，不同的是：液體培養(yǎng)時(shí)，植物源煙水用量為：第1次加入植物源煙水的量為每1l液體培養(yǎng)基中加入4.5ml植物源煙水，第2次加入植物源煙水的量為每1l液體培養(yǎng)基中加入2.5ml植物源煙水。

下面，對(duì)上述實(shí)施例和對(duì)比例發(fā)酵培養(yǎng)得到的茶藨子葉狀層菌甾醇類物質(zhì)含量進(jìn)行檢測(cè)，以驗(yàn)證本發(fā)明方法對(duì)甾醇類物質(zhì)含量提升的促進(jìn)作用。其中，甾醇類物質(zhì)以麥角甾醇為代表。

茶藨子葉狀層菌菌絲中麥角甾醇的含量檢測(cè)方法如下：

取各實(shí)施例和對(duì)比例得到的干燥茶藨子葉狀層菌菌絲，分別精密稱定0.5g，用石油醚索氏提取6h，所得提取物水浴蒸干，剩余物用無水乙醇溶解，并定容至5.0ml，即得樣品溶液，將樣品溶液用（0.22μm）微孔濾膜過濾，采用高效液相色譜法檢測(cè)茶藨子葉狀層菌中麥角甾醇的含量，色譜條件如下：

色譜柱：zorbaxeclipsxdbc8(150mm×4.6mm)；流動(dòng)相：甲醇；流速：1.0ml·min^-1；檢測(cè)波長(zhǎng)：282nm；柱溫：30℃；進(jìn)樣量：20μl。在上述條件下，注入樣品溶液，理論塔板數(shù)以麥角甾醇計(jì)大于10000。

液相色譜檢測(cè)得到的各樣品溶液中麥角甾醇的含量如下表1所示。