1.一種利用木質(zhì)纖維素發(fā)酵生產(chǎn)L-乳酸的方法,其特征在于,包括以下步驟:
(1)凝結(jié)芽孢桿菌發(fā)酵種子培養(yǎng):將凝結(jié)芽孢桿菌接種于培養(yǎng)基平板,置于45℃-55℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)12 h -24h,將長(zhǎng)好的凝結(jié)芽孢桿菌接到液體培養(yǎng)基中,培養(yǎng)條件為溫度45℃-55℃,轉(zhuǎn)速150rpm-250rpm,培養(yǎng)時(shí)間12 h -24h,通氣速率 1vvm;
(2)農(nóng)作物秸稈或能源植物預(yù)處理:將農(nóng)作物秸稈或能源植物粗粉碎,與自來(lái)水混合,攪拌均勻后加入到蒸汽爆破罐中,通飽和蒸汽加熱到180℃-210℃,維持2 min -30min,泄壓,收集蒸汽爆破后的物料,烘干備用;
(3)同步糖化發(fā)酵產(chǎn)L-乳酸:在發(fā)酵罐中加入發(fā)酵培養(yǎng)基成分,加入步驟(1)培養(yǎng)的凝結(jié)芽孢桿菌發(fā)酵種子液和步驟(2)中經(jīng)過(guò)蒸汽爆破預(yù)處理后的農(nóng)作物秸稈或能源植物,每克預(yù)處理底物添加20FPU的纖維素酶,然后在45℃-55℃,100rpm-200rpm轉(zhuǎn)速條件下糖化發(fā)酵48 h -72h,發(fā)酵過(guò)程中利用氫氧化鈣調(diào)節(jié)pH,定時(shí)取樣測(cè)定發(fā)酵液中乳酸濃度。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用木質(zhì)纖維素發(fā)酵生產(chǎn)L-乳酸的方法,其特征在于,步驟(1)中使用的液體培養(yǎng)基組成為:葡萄糖 20g/L,酵母粉10 g/L,氯化鈉 2 g/L,磷酸二氫鉀 2 g/L,七水合硫酸鎂0.2 g/L,一水合硫酸錳0.05 g/L,七水合硫酸亞鐵0.01 g/L。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用木質(zhì)纖維素發(fā)酵生產(chǎn)L-乳酸的方法,其特征在于,步驟(2)中使用的農(nóng)作物秸稈包括玉米秸稈或油菜秸稈,能源植物為芒草。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用木質(zhì)纖維素發(fā)酵生產(chǎn)L-乳酸的方法,其特征在于,步驟(3)中預(yù)處理后農(nóng)作物秸稈添加量為150g/L-200g/L,凝結(jié)芽孢桿菌發(fā)酵種子液接種量為10%(v/v)。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用木質(zhì)纖維素發(fā)酵生產(chǎn)L-乳酸的方法,其特征在于,步驟(3)中發(fā)酵培養(yǎng)基成分為:玉米漿10 g/L,硫酸銨 2g/L,磷酸二氫鉀 2 g/L,七水合硫酸鎂0.2 g/L,一水合硫酸錳0.05 g/L,七水合硫酸亞鐵0.01 g/L。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用木質(zhì)纖維素發(fā)酵生產(chǎn)L-乳酸的方法,其特征在于,步驟(3)中乳酸濃度的測(cè)定方法是取發(fā)酵液離心,離心后的上清液稀釋后用微孔濾膜過(guò)濾,濾液進(jìn)高效液相色譜檢測(cè)。