本發(fā)明屬于食用菌人工馴化技術領域，具體地說是一種耐高溫野生香菇菌種人工馴化方法。

背景技術：

香菇(lentinulaedodes)產量在世界人工栽培食用菌中居第二位。隨著生活品質的提高，人們開始逐漸認識到香菇的營養(yǎng)價值，由于其獨特的風味和增強人體免疫功能的作用,成為人們最喜愛的健康食品之一。

近年來，由于野生香菇市場的供應不求，因此將香菇從野外自然生長逐步變?yōu)槿斯ゑZ化栽培，因此香菇的產量大幅度的提高，為了更加滿足日益增長的市場需求，則越來越多的種植戶為了提高產量應用各種化肥以及農藥，使得香菇產量雖然增加但是香菇風味與野生香菇相比相差較遠，隨著人們不斷追求健康生活理念，廣大的消費者更加青睞于野生香菇，因此野生香菇資源大范圍的遭到嚴重破壞。

由于野生香菇在自然條件下純天然生長，無任何化學物質污染，食用更加安全，另一方面野生香菇在自然環(huán)境下的樹干上，其含有的氨基酸更加豐富，香菇特有的風味也更加濃郁。專利申請?zhí)枮?01610715136x公開了“一種野生香菇的繁育方法”該發(fā)明在仿野生環(huán)境下進行繁育，無任何化學物質，繁育出的野生香菇營養(yǎng)價值更高。但是自然條件下野生香菇子實體主要在秋天至春天發(fā)生,屬于中低溫型食用菌，自然條件下其子實體發(fā)生溫度為5-24℃，最適溫度為8-20℃而大部分的香菇主產區(qū)夏季溫度遠遠高于25℃，導致夏季鮮香菇供應不足，并且這種高溫會對香薛造成嚴重傷害，對菌絲和子實體生長都有限制作用。主要表現(xiàn)有：燒菌現(xiàn)象，高溫下菌絲發(fā)黃甚至停止生長；菌棒污染率高爛棒，嚴重影響香菇產量；香菇子實體的農藝性狀變差，菇小、菌蓋薄、不易幵傘，該發(fā)明雖然解決了野生香菇人工馴化的問題，但是對于不耐高溫，夏季供應量不足的問題尚未得到解決。

技術實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于針對現(xiàn)有技術存在的不足或缺陷，提供一種耐高溫野生香菇菌種人工馴化方法。

實現(xiàn)本發(fā)明的目的通過以下技術方案實現(xiàn)：

一種耐高溫野生香菇菌種人工馴化方法，包括以下具體步驟：

①培養(yǎng)母種：采集自然野外生長在甘肅省海拔2500-2800米黃土高原地區(qū)的朵大蓋厚、柄短、八九成熟且未開傘的野生香菇作為種菇，然后采用組織分離法制作母種，按重量份數(shù)選取原料：桉木屑15-30份、板栗苞殼10-20份、葡萄糖5-10份、維生素b21.5-4.5份、維生素b62.5-4.5份、維生素e2-4份、維生素c1-3份、尿素3-6份、玉米麩皮6-11份、骨粉7-12份、馬鈴薯廢渣5-7份、豆渣12-15份、茉莉酸0.5-1.5份、料水重量比為1:1.2；將所述原料混合制備成斜面培養(yǎng)基，然后在無菌條件下接種野生香菇母種，先經25℃恒溫下培養(yǎng)5天，然后熱激培養(yǎng)1-1.5小時，再紫外處理30-60min，處理完成后重新置于25℃恢復培養(yǎng)，培養(yǎng)至長滿斜面即可；

②培養(yǎng)原種：按重量份數(shù)選取原料：玉米渣30-50份、冠菌素3-5份、海藻糖1-2份、殼聚糖1.5-2.5份、脯氨酸4.5-9.8份、褪黑素2.4-5.2份，料水重量比為1∶1.2；將所述原料混合制備成原種培養(yǎng)基，在無菌條件下，接入一級母種，每只一級母種轉接5-7瓶原種，經22℃恒溫黑暗中培養(yǎng)5天，然后變溫培養(yǎng)，直至長滿瓶即為二級種；

③培養(yǎng)栽培種：按重量份數(shù)選取原料：植物乳桿菌0.5-1.5份、葡萄糖酸鈣2-5份、草酸1-3份、石膏3-9份、甜菜堿1.5-2.5份、棉籽殼8-10份、α-淀粉酶0.5-1份，料水重量比為1∶1.2，將所述原料混合制備成栽培種培養(yǎng)基，在無菌條件下接入二級種，每只二級母種轉接5-7瓶栽培種，經25-30℃恒定溫度和光照下培養(yǎng)直至長滿瓶即為栽培種。

所述的步驟③中恒定的溫度和光照分別為28℃和4000lux。

所述的變溫培養(yǎng)將黑暗培養(yǎng)溫度從28℃以2℃/h遞增到44℃,并在44℃維持1-1.5h,處理完成后重新置于22℃恢復培養(yǎng)。

所述的熱激培養(yǎng)的溫度范圍為47-50℃。

所述的紫外處理時培養(yǎng)溫度恒定范圍為30-32℃。

本發(fā)明的有益效果在于：本發(fā)明利用培養(yǎng)香菇母種、原種及栽培種時香菇的各種生理特性配制不同的培養(yǎng)基，而且充分利用紫外光并結合變溫和關照處理，使得最終得到的野生香菇菌株耐熱性好，在高溫環(huán)境中生長速度加快，發(fā)菌良好，提高了野生香菇的產量，打破了香菇上市特定季節(jié)的障礙，使得夏季供應量大幅度提高。

具體實施方式

以下通過實施例來進一步描述本發(fā)明，應該理解的是，這些實施例僅用于例證的目的，絕不限于本發(fā)明。

實施例1

一種耐高溫野生香菇菌種人工馴化方法，包括以下具體步驟：

①培養(yǎng)母種：采集自然野外生長在甘肅省海拔2500米黃土高原地區(qū)的朵大蓋厚、柄短、八九成熟且未開傘的野生香菇作為種菇，然后采用組織分離法制作母種，按重量份數(shù)選取原料：桉木屑15-30份、板栗苞殼10-20份、葡萄糖5份、維生素b21.5份、維生素b62.5份、維生素e2份、維生素c1份、尿素3份、玉米麩皮6份、骨粉7份、馬鈴薯廢渣5份、豆渣12份、茉莉酸0.5份、料水重量比為1:1.2；將所述原料混合制備成斜面培養(yǎng)基，然后在無菌條件下接種野生香菇母種，先經25℃恒溫下培養(yǎng)5天，然后熱激培養(yǎng)1-1.5小時，再在溫度為30℃環(huán)境中紫外處理30min，處理完成后重新置于25℃恢復培養(yǎng)，培養(yǎng)至長滿斜面即可；

②培養(yǎng)原種：按重量份數(shù)選取原料：玉米渣30份、冠菌素3份、海藻糖1份、殼聚糖1.5份、脯氨酸4.5份、褪黑素2.4份，料水重量比為1∶1.2；將所述原料混合制備成原種培養(yǎng)基，在無菌條件下，接入一級母種，每只一級母種轉接5-7瓶原種，經22℃恒溫黑暗中培養(yǎng)5天，然后變溫培養(yǎng)，直至長滿瓶即為二級種；所述的變溫培養(yǎng)將黑暗培養(yǎng)溫度從以2℃h^-1遞增到44℃,并在44℃維持1h,處理完成后重新置于22℃恢復培養(yǎng)。

③培養(yǎng)栽培種：按重量份數(shù)選取原料：植物乳桿菌0.5份、葡萄糖酸鈣2份、草酸1份、石膏3份、甜菜堿1.5份、棉籽殼8份、α-淀粉酶0.5份，料水重量比為1∶1.2，將所述原料混合制備成栽培種培養(yǎng)基，在無菌條件下接入二級種，每只二級母種轉接5-7瓶栽培種，經25℃恒定溫度和光照下培養(yǎng)直至長滿瓶即為栽培種，所述的恒定的溫度和光照分別為28℃和4000lux。

實施例2

一種耐高溫野生香菇菌種人工馴化方法，包括以下具體步驟：

①培養(yǎng)母種：采集自然野外生長在甘肅省海拔2800米黃土高原地區(qū)的朵大蓋厚、柄短、八九成熟且未開傘的野生香菇作為種菇，然后采用組織分離法制作母種，按重量份數(shù)選取原料：桉木屑30份、板栗苞殼20份、葡萄糖10份、維生素b24.5份、維生素b64.5份、維生素e4份、維生素c3份、尿素6份、玉米麩皮11份、骨粉12份、馬鈴薯廢渣7份、豆渣15份、茉莉酸1.5份、料水重量比為1:1.2；將所述原料混合制備成斜面培養(yǎng)基，然后在無菌條件下接種野生香菇母種，先經25℃恒溫下培養(yǎng)5天，然后熱激培養(yǎng)1.5小時，再紫外處理60min，處理完成后重新置于25℃恢復培養(yǎng)，培養(yǎng)至長滿斜面即可；所述的熱激培養(yǎng)的溫度為50℃；所述的紫外處理時培養(yǎng)溫度為32℃。

②培養(yǎng)原種：按重量份數(shù)選取原料：玉米渣50份、冠菌素5份、海藻糖2份、殼聚糖2.5份、脯氨酸9.8份、褪黑素5.2份，料水重量比為1∶1.2；將所述原料混合制備成原種培養(yǎng)基，在無菌條件下，接入一級母種，每只一級母種轉接7瓶原種，經22℃恒溫黑暗中培養(yǎng)5天，然后變溫培養(yǎng)，直至長滿瓶即為二級種；所述的變溫培養(yǎng)將黑暗培養(yǎng)溫度從以2℃h^-1遞增到44℃,并在44℃維持1.5h,處理完成后重新置于22℃恢復培養(yǎng)。

③培養(yǎng)栽培種：按重量份數(shù)選取原料：植物乳桿菌1.5份、葡萄糖酸鈣5份、草酸3份、石膏9份、甜菜堿2.5份、棉籽殼10份、α-淀粉酶1份，料水重量比為1∶1.2，將所述原料混合制備成栽培種培養(yǎng)基，在無菌條件下接入二級種，每只二級母種轉接7瓶栽培種，經30℃恒定溫度和光照下培養(yǎng)直至長滿瓶即為栽培種；所述的恒定的溫度和光照分別為28℃和4000lux。

實施例3

一種耐高溫野生香菇菌種人工馴化方法，包括以下具體步驟：

①培養(yǎng)母種：采集自然野外生長在甘肅省海拔2650米黃土高原地區(qū)的朵大蓋厚、柄短、八九成熟且未開傘的野生香菇作為種菇，然后采用組織分離法制作母種，按重量份數(shù)選取原料：桉木屑22.5份、板栗苞殼15份、葡萄糖7.5份、維生素b23份、維生素b63.5份、維生素e3份、維生素c2份、尿素4.5份、玉米麩皮8.5份、骨粉9.5份、馬鈴薯廢渣6份、豆渣13.5份、茉莉酸1份、料水重量比為1:1.2；將所述原料混合制備成斜面培養(yǎng)基，然后在無菌條件下接種野生香菇母種，先經25℃恒溫下培養(yǎng)5天，然后熱激培養(yǎng)75min，再紫外處理45min，處理完成后重新置于25℃恢復培養(yǎng)，培養(yǎng)至長滿斜面即可；所述的熱激培養(yǎng)的溫度為48.5℃；所述的紫外處理時培養(yǎng)溫度為31℃。

②培養(yǎng)原種：按重量份數(shù)選取原料：玉米渣40份、冠菌素4份、海藻糖1.5份、殼聚糖2份、脯氨酸7.2份、褪黑素3.8份，料水重量比為1∶1.2；將所述原料混合制備成原種培養(yǎng)基，在無菌條件下，接入一級母種，每只一級母種轉接6瓶原種，經22℃恒溫黑暗中培養(yǎng)5天，然后變溫培養(yǎng)，直至長滿瓶即為二級種；所述的變溫培養(yǎng)將黑暗培養(yǎng)溫度從以2℃h^-1遞增到44℃,并在44℃維持75min,處理完成后重新置于22℃恢復培養(yǎng)。

③培養(yǎng)栽培種：按重量份數(shù)選取原料：植物乳桿菌0.5-1.5份、葡萄糖酸鈣2-5份、草酸1-3份、石膏3-9份、甜菜堿1.5-2.5份、棉籽殼8-10份、α-淀粉酶0.5-1份，料水重量比為1∶1.2，將所述原料混合制備成栽培種培養(yǎng)基，在無菌條件下接入二級種，每只二級母種轉接6瓶栽培種，經27.5℃恒定溫度和光照下培養(yǎng)直至長滿瓶即為栽培種；所述的恒定的溫度和光照分別為28℃和4000lux。

試驗例

高溫環(huán)境下野生香菇栽培種的菌絲生長速度測定試驗

選取傳統(tǒng)培養(yǎng)的野生香菇栽培種作為對照組，本發(fā)明實施例3培養(yǎng)的野生香菇栽培種作為試驗組，分別將對照組和試驗組的栽培種菌株分別接種于pda平板培養(yǎng)基上,3次重復，接種量相同同時置于40℃環(huán)境中培養(yǎng)，培養(yǎng)時間為10天，并測定菌絲生長速度。所述的菌絲生長速度測定方法應當為本領域技術人員所熟知的技術。

菌絲生長速度(cm/d)＝菌落半徑(cm)/菌絲生長天數(shù)(d)

兩組菌株菌絲生長速度的測定結果見表1

表1高溫條件下兩組菌絲生長速度

由表1明顯可知，與傳統(tǒng)培養(yǎng)的野生香菇栽培種菌株相比，本發(fā)明馴化培養(yǎng)的野生香菇栽培種在高溫環(huán)境中(40℃)發(fā)菌良好，菌絲生長速度沒有減慢，耐熱性好，因此可知在高溫條件下，栽培本發(fā)明馴化的野生香菇栽培種能夠獲得高產，從而打破了香菇的的生產季節(jié)。