一種從威靈仙中提取苷元的方法及應(yīng)用與流程

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本發(fā)明涉及天然藥物提取技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種從威靈仙中提取苷元的方法及應(yīng)用。

背景技術(shù)：

威靈仙為常用中藥之一，具有祛風(fēng)除濕，通絡(luò)止痛之功效?！吨袊?guó)藥典》2015年版收載的威靈仙為毛茛科植物威靈仙Clematis chinensis Osbeck.、棉團(tuán)鐵線(xiàn)蓮Clematis hexapetala Pall.或東北鐵線(xiàn)蓮Clematis manshurica Rupr.的干燥根及根莖。

威靈仙別名有鐵腳威靈仙、鐵掃帚、風(fēng)車(chē)等，味辛，咸，性溫，歸膀胱經(jīng)，作為傳統(tǒng)中藥，在我國(guó)本草著作中記載其具有祛風(fēng)濕、通經(jīng)絡(luò)、止痹痛、消骨鯁等功效，主要用于治療風(fēng)濕痹痛，肢體麻木，筋脈拘攣，關(guān)節(jié)屈伸不利，以及諸骨鯁咽，是中醫(yī)治療風(fēng)濕痹癥的最常用中藥，而以威靈仙為原料的多個(gè)中成藥也已相繼被成功研發(fā)上市，如“頸復(fù)康膠囊”等。

威靈仙和東北鐵線(xiàn)蓮主要含皂苷類(lèi)成分，而棉團(tuán)鐵線(xiàn)蓮主要含黃酮類(lèi)成分，與前兩者差別很大，同時(shí)威靈仙和東北鐵線(xiàn)蓮所含的皂苷也存在差別，根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道及我們前期研究發(fā)現(xiàn)，威靈仙及東北鐵線(xiàn)蓮中含有大量的三萜皂苷，其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)為：1.苷元為常春藤皂苷元型及齊頓果酸型；2.大部分具有雙糖鏈，一條糖鏈以酯鍵的方式連接在苷元28位；另一條糖鏈連在苷元的3位；3.3位糖鏈上常連接異阿魏?；瑢?duì)苷元的活性有較大影響。

研究表明，常春藤皂苷元具有降低NO、PGE2、TNF-α、IL-1β以及IL-6等炎癥信號(hào)因子表達(dá)的作用，從而抑制炎癥信號(hào)傳導(dǎo)，達(dá)到對(duì)炎癥反應(yīng)的抑制及調(diào)控作用；而齊墩果酸在臨床上常用于治療傳染性急性黃疸型肝炎，具有明顯的降低谷丙轉(zhuǎn)氨酶及退黃效果，改善病毒性和慢性遷延性肝炎患者的癥狀，體征和肝功能；還可用于銀屑病、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、腎炎水腫、肝硬化腹水、急慢性肝炎、胃痛淋濁、血崩、跌打損傷、癰腫、腰膝酸軟、胎動(dòng)不安等癥。

通常情況下，齊墩果酸和常春藤皂苷元以糖苷形式存在與多種植物中，這給兩者的開(kāi)發(fā)利用帶來(lái)了不便。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中的上述不足，本發(fā)明提供一種從威靈仙中提取苷元的方法，目的是提供一種便于提取威靈仙中苷元的方法。

為解決上述的技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為：

一種從威靈仙中提取苷元的方法，包括以下步驟：

(1)將威靈仙粉碎，過(guò)60～80目篩，向粉末中加入70％～95％乙醇，于30～50℃回流提取1～2h，冷卻過(guò)濾，得總皂苷提取物；其中，威靈仙粉末質(zhì)量與乙醇體積比為1～3:40～50；

(2)向步驟(1)所得總皂苷提取物中加入濃度為1～5mol/L的鹽酸溶液，于60～100℃水解0.5～2.5h，得水解液；其中，酸液與總皂苷提取物體積比為1～5:1～3；

(3)按體積比為1:1的比例向步驟(2)所得水解液中加入石油醚，萃取2～3次，分離石油醚層與水層，再按體積比為1～1.5:1～2的比例向水層中加入乙酸乙酯，萃取2～3次，于60℃以下進(jìn)行濃縮，制得濃縮產(chǎn)物。

(4)向濃縮產(chǎn)物中加入甲醇溶解，再用制備液相進(jìn)行分離，流動(dòng)相為水和甲醇，分段收集流出液，得到苷元。

進(jìn)一步地，步驟(1)中乙醇質(zhì)量濃度為70％乙醇。

進(jìn)一步地，步驟(1)中威靈仙粉末質(zhì)量與乙醇體積比為1:50。

進(jìn)一步地，步驟(2)中酸液為鹽酸、硫酸、草酸或硼酸。

進(jìn)一步地，步驟(2)中水解條件為：于100℃、濃度為2mol/L的酸液中，水解1h。

進(jìn)一步地，步驟(2)中酸液與總皂苷體積比為1.2:1。

進(jìn)一步地，步驟(3)中乙酸乙酯與水層體積比為1:1。

進(jìn)一步地，步驟(4)中制備液相分離梯度為：流動(dòng)相為水和甲醇，柱溫為室溫，0～30min，60％～90％甲醇、40％～10％水；流速5mL/min。

上述方法制備得到的苷元。

上述苷元在類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎藥物制備中的應(yīng)用。

本發(fā)明的有益效果為：

總皂苷提取物經(jīng)水解后產(chǎn)生大量苷元，便于后續(xù)對(duì)苷元進(jìn)行提取分離。

石油醚萃取可除去水解液中的脂類(lèi)雜質(zhì)，然后再采用乙酸乙酯對(duì)水解液進(jìn)行萃取，不僅提高了乙酸乙酯的萃取效率，還提升了苷元的提取純度，有利于提取收集高純度的苷元。

附圖說(shuō)明

圖1為本發(fā)明制備得到的總皂苷提取物的液相圖譜。

具體實(shí)施方式

下面對(duì)本發(fā)明的具體實(shí)施方式進(jìn)行描述，以便于本技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員理解本發(fā)明，但應(yīng)該清楚，本發(fā)明不限于具體實(shí)施方式的范圍，對(duì)本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來(lái)講，只要各種變化在所附的權(quán)利要求限定和確定的本發(fā)明的精神和范圍內(nèi)，這些變化是顯而易見(jiàn)的，一切利用本發(fā)明構(gòu)思的發(fā)明創(chuàng)造均在保護(hù)之列。

實(shí)施例1

一種從威靈仙中提取苷元的方法，包括以下步驟：

(1)將威靈仙粉碎為粉末，過(guò)65目篩，向粉末中加入70％乙醇，于45℃回流提取1h，冷卻過(guò)濾，得總皂苷提取物；其中，威靈仙粉末質(zhì)量與乙醇體積比為1:50；

(2)向步驟(1)所得總皂苷提取物中加入濃度為2mol/L的鹽酸溶液，于100℃水解1h，得水解液；其中，酸液與總皂苷提取物體積比為1.2:1；

(3)按體積比為1:1的比例向步驟(2)所得水解液中加入石油醚，萃取2次，分離石油醚層與水層，再按體積比為1:1的比例向水層中加入乙酸乙酯，萃取2次，于60℃以下進(jìn)行濃縮；