本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體的是一種天然產(chǎn)物活性成分的用途及其制備方法。

背景技術(shù)：

金花茶Camellia nitidissima是山茶科Theaceae山茶屬Camellia的常綠灌木或小喬木，其花和葉為廣西壯族民間的傳統(tǒng)用藥，據(jù)《廣西中藥材標(biāo)準(zhǔn)》，《現(xiàn)代本草綱目》等記載，可用于防治咽喉炎，腎炎，痢疾，腫瘤，便血，高血壓和月經(jīng)不調(diào)等病癥。2010年已被納入新資源食品(衛(wèi)生部公告2010年第9號)?，F(xiàn)代藥理實驗證明金花茶在抑菌、抗氧化、抗過敏等方面表現(xiàn)出潛在的藥用價值。金花茶含有多種化學(xué)成分，包括黃酮類、茶多酚、茶多糖、皂苷類、多種氨基酸以及多種對人體有益的微量元素和維生素等。但是長期以來對金花茶的開發(fā)利用非常局限，大多就是使用花作為茶飲料或者裝飾工藝品，莖、葉等其他部分的開發(fā)報道得不多，造成整體開發(fā)不足，資源浪費(fèi)。

應(yīng)激(stress)是機(jī)體在各種內(nèi)外環(huán)境因素及社會、心理因素刺激時所出現(xiàn)的全身性或局部性的非特異性適應(yīng)反應(yīng)，又稱為應(yīng)激反應(yīng)。是機(jī)體適應(yīng)、保護(hù)機(jī)制的重要組成部分，有利于在變動的環(huán)境中維持機(jī)體的自穩(wěn)態(tài)，增強(qiáng)機(jī)體的適應(yīng)能力。但是當(dāng)機(jī)體長期處于應(yīng)激狀態(tài)時，其神經(jīng)內(nèi)分泌功能可受到明顯影響，會導(dǎo)致機(jī)體的適應(yīng)力和抵抗力等下降，是人體各種疾病發(fā)生的基礎(chǔ)。近年來，隨著人們生活節(jié)奏的加快以及生活和自然環(huán)境的惡化，應(yīng)激已成為人類健康的重要威脅因素。因此，減緩應(yīng)激的發(fā)生或加速其消除對維持人類的健康有著重要的意義。

抗應(yīng)激藥物是指具有緩解、防治由應(yīng)激源引起的應(yīng)激綜合癥的藥物，可分為應(yīng)激預(yù)防劑、促適應(yīng)劑或應(yīng)激緩解劑。研究和應(yīng)用表明，香菇多糖、靈芝多糖等多糖類化合物具有明顯的抗應(yīng)激和免疫調(diào)節(jié)作用，能夠激活機(jī)體的免疫系統(tǒng)，提高其免疫功能。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題，是提供一種具有抗應(yīng)激作用的金花茶多糖提取物及其制備方法。

本發(fā)明解決上述技術(shù)問題的技術(shù)方案如下：

取金花茶的細(xì)枝或葉，打成粗粉，用10倍重量的85％乙醇室溫滲漉24h后，放出滲漉液，重復(fù)3次，合并滲漉液，減壓濃縮得到醇提物，可另做他用。

藥渣加入10倍重量的水，加熱回流2h，濾過，重復(fù)3次，合并濾液，減壓濃縮到少量體積后，加入95％乙醇，使溶液的乙醇含量達(dá)到80％，靜置24h，3000r/min離心10min，取出沉淀，即為粗多糖。

本發(fā)明的益效如下：

1.提供一種可能的具有抗應(yīng)激性作用的藥物，由于主要成分是植物多糖，不會有西藥的明顯副作用和累積毒性；

2.制備方法簡單易行、成本低廉，使用的是平時基本作為廢棄物的金花茶的細(xì)枝或葉，有利于資源的深入開發(fā)。

具體實施方式

下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步描述。

實施例1

取金花茶的細(xì)枝和葉共2公斤，打成粗粉，用10倍重量的85％乙醇室溫滲漉24h后，放出滲漉液，重復(fù)3次，合并滲漉液，減壓濃縮得到醇提物，可另做他用。

藥渣加入10倍重量的水，加熱回流2h，濾過，重復(fù)3次，合并濾液，減壓濃縮到少量體積后，加入95％乙醇，使溶液的乙醇含量達(dá)到80％，靜置24h，3000r/min離心10min，取出沉淀，即為粗多糖A，凍干后得到60.4g。

實施例2

取金花茶的細(xì)枝2公斤，打成粗粉，用10倍重量的85％乙醇室溫滲漉24h后，放出滲漉液，重復(fù)3次，合并滲漉液，減壓濃縮得到醇提物，可另做他用。

藥渣加入10倍重量的水，加熱回流2h，濾過，重復(fù)3次，合并濾液，減壓濃縮到少量體積后，加入95％乙醇，使溶液的乙醇含量達(dá)到80％，靜置24h，3000r/min離心10min，取出沉淀，即為粗多糖B，凍干后得到67.2g。

實施例3

取金花茶的葉2公斤，打成粗粉，用10倍重量的85％乙醇室溫滲漉24h后，放出滲漉液，重復(fù)3次，合并滲漉液，減壓濃縮得到醇提物，可另做他用。

藥渣加入10倍重量的水，加熱回流2h，濾過，重復(fù)3次，合并濾液，減壓濃縮到少量體積后，加入95％乙醇，使溶液的乙醇含量達(dá)到80％，靜置24h，3000r/min離心10min，取出沉淀，即為粗多糖C，凍干后得到52.0g。

實施例4

對小鼠應(yīng)激能力的影響藥理實驗

方法：

1.對小鼠游泳耐疲勞的影響

取SPF級昆明小鼠70只，隨機(jī)分為粗多糖A、B、C高、低劑量組和對照組，粗多糖A、B、C高、低劑量組分別灌胃給與不同劑量的粗多糖A、B、C，對照組給予等量生理鹽水，連續(xù)7d。所有動物d8進(jìn)行游泳實驗，水溫32±2℃，水深50cm，每次20min。d22小鼠尾根部負(fù)重2g游泳，記錄小鼠力竭時間(從小鼠被投入水中開始計時，到其頭部沉入水中10s不能再次浮出水面為止)。

2.對小鼠常壓耐缺氧的影響

取SPF級昆明小鼠70只，隨機(jī)分為粗多糖A、B、C高、低劑量組和對照組，粗多糖A、B、C高、低劑量組分別灌胃給與不同劑量的粗多糖A、B、C，對照組給予等量生理鹽水，連續(xù)7d。末次給藥后1h進(jìn)行常壓耐缺氧實驗：取1只動物放入裝有20g鈉石灰的500ml廣口瓶內(nèi)密封，記錄每只動物在瓶內(nèi)的存活時間。

3.對小鼠耐寒冷的影響

SPF級昆明小鼠70只，隨機(jī)分為粗多糖A、B、C高、低劑量組和對照組，粗多糖A、B、C高、低劑量組分別灌胃給與不同劑量的粗多糖A、B、C，對照組給予等量生理鹽水，連續(xù)7d。末次給藥后1h將各組小鼠同時置-20℃的冰箱中，直到對照組小鼠半數(shù)以上死亡為止。記錄各組動物死亡數(shù)并計算死亡率。

結(jié)果：

與對照組比較，粗多糖A、B、C高、低劑量組小鼠力竭游泳時間、常壓耐缺氧時間、寒冷條件下死亡率均有顯著差異(P＜0.01或P＜0.05，結(jié)果見表1)，說明粗多糖A、B、C均能劑量依賴性地延長小鼠力竭游泳時間，提高其常壓耐缺氧和耐寒冷能力。其中粗多糖B的作用更為顯著。

表1粗多糖A、B、C的抗應(yīng)激作用

與對照組相比，*P＜0.05，**P＜0.01