本發(fā)明屬于高分子生物醫(yī)用材料領(lǐng)域，涉及一種孔壁上接枝有阿霉素的超支化聚苯乙烯多孔膜的制備方法。
背景技術(shù)：
：：多孔膜材料含有大量規(guī)整的微納米孔洞序列，它是一種高度有序并具有規(guī)整微相結(jié)構(gòu)的材料。聚合物多孔膜憑借其良好的機(jī)械強(qiáng)度、化學(xué)穩(wěn)定性、安全性和優(yōu)異的可加工性，被廣泛應(yīng)用于藥物控釋領(lǐng)域。超支化聚合物憑借其特殊的類球形分子結(jié)構(gòu)、多官能性端基、以及易改性的結(jié)構(gòu)特性在多孔膜的制備上具有獨(dú)特之處，尤其是可以通過端基改性來控制超支化聚合物多孔膜的形態(tài)結(jié)構(gòu)；同時(shí)超支化分子結(jié)構(gòu)對膜的性能(如小分子吸附性能、藥物控釋等)也有增強(qiáng)作用。此外，癌細(xì)胞或者組織的ph值一般是酸性的，酰腙鍵又是一類ph響應(yīng)的動(dòng)態(tài)共價(jià)鍵，其能夠在酸性條件下可逆的斷裂，將其引入到聚合物多孔膜藥物釋放體系中，用來直接連接抗癌藥物，有望實(shí)現(xiàn)聚合物多孔膜對抗癌藥物的ph開關(guān)控釋的效果。文獻(xiàn)1“l(fā)okh,chenmc,horm,etal.pore-fillingnanoporoustemplatesfromdegradableblockcopolymersfornanoscaledrugdelivery.acsnano,2009,3(9):2660-2666”公開了一種以ps-plla嵌段共聚物為原料，利用刻蝕法制備納米孔膜，并研究了孔徑大小和孔形狀對藥物釋放速率的影響。然而，該類聚合物多孔膜一旦被制備后，其孔形貌就固定了，無法滿足人們對智能多孔膜藥物釋放載體的需求。文獻(xiàn)2“cait,lim,zhangb,etal.hyperbranchedpolycaprolactone-click-poly(n-vinylcaprolactam)amphiphiliccopolymersandtheirapplicationsastemperature-responsivemembranes.journalofmaterialschemistryb,2014,2(7):814-825”公開了一種基于超支化聚合物的溫度響應(yīng)的微米孔膜的制備方法。他們將可逆加成-斷裂鏈轉(zhuǎn)移聚合方法(raft)與點(diǎn)擊反應(yīng)相結(jié)合先合成超支化-線型聚合物，然后利用無溶劑法制備溫度響應(yīng)的微米孔膜，最后研究其對阿霉素的溫度響應(yīng)控釋。這種方法制備的聚合物多孔膜具有豐富的孔結(jié)構(gòu)，并且能夠?qū)崿F(xiàn)對阿霉素溫度響應(yīng)的釋放，但是這種多孔膜藥物釋放體系的可控性和靈敏度不好。文獻(xiàn)3“jeong,yangsy,byunj,etal.electricallyactuatablesmartnanoporousmembraneforpulsatiledrugrelease.nanoletters,2011,11(3):1284-1288”公開了一種基于聚吡咯的電響應(yīng)納米孔膜的制備方法，通過電場控制納米孔膜對藥物的釋放。首先他們通過電聚合，在金沉積aao膜的上表面制備聚吡咯納米孔膜。聚吡咯是一種常用的電場響應(yīng)的聚合物，其體積可由其化學(xué)狀態(tài)決定，因而多孔膜的孔徑可由電場控制。當(dāng)聚吡咯處于氧化狀態(tài)時(shí)，其鏈段收縮，多孔膜處于開孔狀態(tài)，此時(shí)藥物釋放速率較快；而當(dāng)其處于還原狀態(tài)時(shí)，其鏈段體積膨脹，導(dǎo)致閉孔結(jié)構(gòu)，藥物釋放停止。然而，這種調(diào)控方式僅僅從聚合物多孔膜自身考慮，而不是直接從聚合物多孔膜與藥物分子的相互作用關(guān)系入手，因此該類聚合物多孔膜對藥物釋放的調(diào)控也存在靈敏度不高、可控性不好等問題。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：要解決的技術(shù)問題為了避免現(xiàn)有技術(shù)的不足之處，本發(fā)明提出一種孔壁上接枝有阿霉素的超支化聚苯乙烯多孔膜的制備方法，克服現(xiàn)有聚合物多孔膜對藥物釋放的調(diào)控方式存在的靈敏度不高、可控性不好等問題。技術(shù)方案一種孔壁上接枝有阿霉素的超支化聚苯乙烯多孔膜的制備方法，其特征在于步驟如下：步驟1：將摩爾比為19:152～228:1的2-溴代丁二酸、丙炔醇和對甲苯磺酸混合,再加入與丙炔醇體積比為10:2～4的干燥甲苯作為溶劑，然后在85～95℃下反應(yīng)30～40h；待反應(yīng)結(jié)束后，減壓蒸餾除去甲苯后將其溶解在3～30ml二氯甲烷中，用與二氯甲烷等體積的naoh溶液洗3～5遍；然后用與二氯甲烷等體積蒸餾水洗3～5遍后得到黃色液體；加入與黃色液體體積比為2:1～2的無水mgso4干燥，磁力攪拌4～8h，然后使用減壓蒸餾除掉二氯甲烷得到黃色粘性液體；最后，產(chǎn)物經(jīng)長度為10～20cm硅膠柱層析洗脫，使用減壓蒸餾除掉洗脫劑得到黃色粘性液體即為2-溴代丁二酸二丙炔醇酯bpbs；所述洗脫液為乙酸乙酯：二氯甲烷＝3:1；步驟2：在schlenk管中按摩爾比95～105:1:1:3依次加入苯乙烯、bpbs、二聯(lián)吡啶以及溴化亞銅，溶解后利用schlenk技術(shù)除去反應(yīng)管中的溶解氧；隨后在105～115℃反應(yīng)至液體變粘，降至室溫；用四氫呋喃稀釋產(chǎn)物，然后經(jīng)長度為5～15cm的中性氧化鋁柱子除去金屬銅鹽，得到的聚合物溶液旋蒸后在冷甲醇中沉淀并過濾2～3次，最后于室溫下真空干燥至恒重，得到白色固體即線型聚苯乙烯；步驟3：按摩爾比15～20:1混合疊氮化鈉和線型聚苯乙烯，并加入干燥的n,n-二甲基甲酰胺dmf作為溶劑溶解后，在35～45℃反應(yīng)24～48h；反應(yīng)結(jié)束后，產(chǎn)物經(jīng)長度為5～15cm中性氧化鋁柱子除去鈉鹽；得到的聚合物溶液旋蒸后在冷甲醇中沉淀并過濾2～3次，最后于室溫下真空干燥至恒重，得到白色固體即為疊氮基取代的聚苯乙烯；步驟4：在schlenk管中按摩爾比1:1:1依次加入疊氮基取代的聚苯乙烯、n,n,n,n,n-五甲基二亞乙基三胺pmdeta和溴化亞銅，以dmf作為溶劑，完全溶解后利用schlenk技術(shù)除去反應(yīng)管中的溶解氧，隨后于55～65℃反應(yīng)1～3h；反應(yīng)結(jié)束后，產(chǎn)物經(jīng)長度為5～15cm中性氧化鋁柱子除去金屬銅鹽，得到的聚合物溶液旋蒸后在冷甲醇中沉淀并過濾2～3次，最后于室溫下真空干燥至恒重，得到棕色固體即為超支化聚苯乙烯hps；步驟5：在schlenk管中按摩爾比85～170:1:17:17依次加入疊氮乙酸、超支化聚苯乙烯hps、pmdeta和溴化亞銅，以dmf為溶劑，完全溶解后利用schlenk技術(shù)除去反應(yīng)管中的溶解氧；隨后在55～65℃反應(yīng)24～60h，反應(yīng)結(jié)束后，產(chǎn)物經(jīng)長度為5～15cm中性氧化鋁柱子除去銅鹽，得到的聚合物溶液旋蒸后在冷甲醇中沉淀并過濾2～3次，最后于室溫下真空干燥至恒重，得到棕色固體即為外端基為羧基的超支化聚苯乙烯[hps-(cooh)n]步驟6：按摩爾比250～300:1:20:20:25～40混合叔丁基咔唑boc-nh-nh2、外端基為羧基的超支化聚苯乙烯[hps-(cooh)n]、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽edc·hcl、4-二甲氨基吡啶dmap和三乙胺tea，以dmf為溶劑；投料順序：先加hps-(cooh)n，然后加干燥的dmf溶解，加入edc·hcl，加入dmap，隨后加入tea，冰浴3～5h，再加入boc-nh-nh2，將容器密封，然后在25～35℃下反應(yīng)36～60h；得到的聚合物溶液旋蒸后在冷甲醇中沉淀并過濾2～3次，室溫下真空干燥至恒重；得到固體產(chǎn)物即為外端基為叔丁氧羰基的超支化聚苯乙烯[hps-(conhnhboc)n]；步驟7：混合外端基為叔丁氧羰基的超支化聚苯乙烯[hps-(conhnhboc)n]、三氟乙酸，以及干燥的氯仿作為溶劑；投料順序：先加hps-(conhnhboc)n，然后加氯仿溶解，再加入三氟乙酸，體系在20～30℃下避光反應(yīng)10～15h；然后將反應(yīng)后得到的溶液旋蒸，以除去未反應(yīng)完的三氟乙酸和溶劑，得到的聚合物溶液在冷甲醇中沉淀并過濾2～3次，最后室溫下真空干燥至恒重；得到固體產(chǎn)物即為外端基為酰肼鍵的超支化聚苯乙烯hps-(conhnh2)n；步驟8：配制dmf與thf質(zhì)量比為53:20～30的混合溶液，然后加入hps-(conhnh2)n配制質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10～15wt％的聚合物溶液，在空氣濕度為70～90％、空氣流速為1.5～2.5l/min的手套箱中，將溶解好的聚合物溶液涂抹在硅片上，靜置1～3min后將其放入100～400ml去離子水浴中，10～15h后，膜自動(dòng)脫離硅片表面，取出多孔膜，真空干燥24～48h。所得到的白色的薄膜狀物即為外端基為酰肼鍵的超支化聚苯乙烯[hps-(conhnh2)n]的多孔膜；步驟9：在錐形瓶中加入5～7mg/ml的鹽酸阿霉素醋酸銨溶液，然后將去離子水潤濕過的外端基為酰肼鍵的超支化聚苯乙烯[hps-(conhnh2)n]多孔膜放入錐形瓶中，使其浸潤在溶液中；然后用鋁箔密封錐形瓶，放在恒溫振蕩器中，振速110～130r/min，在35～40℃條件下避光反應(yīng)36～60h；反應(yīng)后用去離子水沖洗多孔膜表面8～15次，使其表面和孔中未反應(yīng)的鹽酸阿霉素完全洗掉；最后放入真空干燥箱，室溫真空干燥24～48h，如此便得到一種孔壁上接枝有阿霉素的超支化聚苯乙烯多孔膜。所述步驟1中采用naoh溶液洗是指：配3～8wt％的naoh溶液，然后將溶于二氯甲烷的產(chǎn)物和naoh溶液在分液漏斗中混合均勻，待其分層后，除去水相。所述步驟2～7中的在冷甲醇中沉淀是指：將反應(yīng)所得產(chǎn)物用冷甲醇沉淀后再用g5砂芯漏斗過濾，將所得白色固體粉末用少量四氫呋喃溶解，然后再次在冷甲醇中沉淀后用g5砂芯漏斗過濾。所述步驟2～7中的冷甲醇，是指：將甲醇置入2～6℃冰箱冷藏室放置30～60min后所得。所述步驟2、步驟4和步驟5中schlenk技術(shù)，是指：將反應(yīng)物先用液氮冷凍以后，在氮?dú)鈿夥障?，抽真空，再通入氮?dú)?，然后再次液氮冷凍，這樣反復(fù)冷凍-解凍-冷凍操作3～4次。所述步驟1～7中所有的干燥的溶劑均是加5a分子篩干燥的溶劑。所述閉光條件是指用鋁箔將反應(yīng)容器包裹閉光。所述醋酸銨溶液指的是ph＝5～6的醋酸銨緩沖液，離子強(qiáng)度為1m。有益效果本發(fā)明提出的一種孔壁上接枝有阿霉素的超支化聚苯乙烯多孔膜的制備方法，將原子轉(zhuǎn)移自由基聚合法、點(diǎn)擊反應(yīng)和外端基改性相結(jié)合，合成端基為酰肼鍵的超支化聚苯乙烯[hps-(conhnh2)n]，再采用通過無溶劑誘導(dǎo)相分離法制備出超支化聚苯乙烯多孔膜并將阿霉素接枝到其孔壁上。首先，因?yàn)槌Щ酆衔锞哂胸S富可改性的末端基團(tuán)便于提高阿霉素分子的接枝量，提高其載藥率，同時(shí)超支化結(jié)構(gòu)有利于制備有序的聚合物多孔膜。其次，多孔膜豐富的孔結(jié)構(gòu)使其具有極大的比表面積，既利于接枝上更多的阿霉素分子，又有利于阿霉素的釋放。再者，酰腙鍵引入到聚合物多孔膜藥物釋放體系中，有望實(shí)現(xiàn)對抗癌藥物的ph開關(guān)控釋的效果。同時(shí)，動(dòng)態(tài)共價(jià)鍵是一類相對更加穩(wěn)定的超分子作用，通過可逆酰腙鍵直接連接藥物分子，有望進(jìn)一步提高聚合物多孔膜藥物釋放體系的穩(wěn)定性、靈敏度和控制性。這種聚合物多孔膜有望在藥物傳輸、生物醫(yī)用材料等領(lǐng)域獲得廣泛的應(yīng)用。附圖說明圖1是本發(fā)明方法實(shí)施例1所制備的外端基為酰肼鍵的超支化聚苯乙烯[hps-(conhnh2)n]的分子結(jié)構(gòu)示意圖。圖2是本發(fā)明方法實(shí)施例1所制備的超支化聚苯乙烯多孔膜(膜表面具有大量的酰肼鍵)的掃描電子顯微鏡圖。具體實(shí)施方式現(xiàn)結(jié)合實(shí)施例、附圖對本發(fā)明作進(jìn)一步描述：實(shí)施例一：在10ml圓底燒瓶中加入2-溴代丁二酸210.2mg(1.067mmol)，丙炔醇501.8mg(8.96mmol)和對甲苯磺酸10.7mg(0.056mmol)，然后加入1.5ml干燥的甲苯作為溶劑，待其完全溶解后，在87℃下反應(yīng)30h。反應(yīng)結(jié)束后，將其冷卻至室溫，在60℃下，減壓旋蒸，除去甲苯，加入3mlch2cl2重新溶解旋蒸后的產(chǎn)物，用等體積的naoh溶液4wt％洗3遍，再用等體積的去離子水洗3遍后，加入與黃色液體體積比為2:1的無水mgso4在磁力攪拌下干燥4h,然后抽濾，收集濾液。在35℃減壓旋蒸，除去ch2cl2，產(chǎn)物過經(jīng)長度為12cm的硅膠柱子(洗脫劑為乙酸乙酯：二氯甲烷＝3:1)。取得產(chǎn)物溶液后在50℃下旋蒸，除去洗脫劑，最后于室溫下真空干燥至恒重，得到黃色粘性液體即為2-溴代丁二酸二丙炔醇酯(bpbs)。在25ml的schlenk管中依次加入bpbs25.7mg(0.0941mmol)，bpy44.0mg(3×0.0941mmol)，st931.0mg(95×0.0941mmol)和cubr13.5mg(0.0941mmol)。將其用生膠帶密封，完全溶解后利用schlenk技術(shù)除去反應(yīng)管中的溶解氧，在105℃條件下反應(yīng)80min，然后將其迅速冷卻至室溫并打開塞子通空氣。后處理：首先在產(chǎn)物中加入一定量的thf稀釋，然后經(jīng)長度為8cm中性氧化鋁柱子除去銅鹽。過柱子后得到的聚合物溶液首先旋蒸，除去溶劑，然后在冷甲醇中沉淀并過濾3次，最后于室溫下真空干燥至恒重，得到白色固體即線型聚苯乙烯。在10ml圓底燒瓶中加入線性聚苯乙烯ps-br371.2mg(0.11974mmol，mn,nmr＝3100)，nan3132.3mg(17×0.11974mmol)，2ml干燥的dmf，磁力攪拌使其充分溶解后，在35℃下反應(yīng)27h。首先在產(chǎn)物中加入一定量的thf稀釋，然后經(jīng)長度為7cm中性氧化鋁的柱子除去鈉鹽。再旋蒸，除去溶劑，然后在冷甲醇中沉淀并過濾3次，最后于室溫下真空干燥至恒重，得到白色固體即為疊氮基取代的聚苯乙烯。在25ml的schlenk管中依次加入ps-n3287.1mg(0.0926mmol，mn,nmr＝3100)，cubr13.3mg(0.0926mmol)和pmdeta16.0mg(0.0926mmol)和1.4ml干燥的dmf，磁力攪拌使其完全溶解。再利用schlenk技術(shù)除去反應(yīng)管中的溶解氧，在57℃條件下反應(yīng)60min，然后將其迅速冷卻至室溫并打開塞子通空氣。后處理：產(chǎn)物首先經(jīng)長度為7cm的中性氧化鋁柱子除去銅鹽，再旋蒸，除去溶劑，然后在冷甲醇中沉淀并過濾3次，最后于室溫下真空干燥至恒重，得到棕色固體即為超支化聚苯乙烯(hps)。在25mlschlenk管中加入超支化聚苯乙烯(hps)219.2mg(0.004474mmol，mn,nmr＝49000),疊氮乙酸53.8mg(7×17×0.004474mmol)，pmdeta13.2mg(17×0.004474mmol)和cubr10.9mg(17×0.004474mmol)。加入0.9ml干燥的dmf，磁力攪拌情況下使其完全溶解，利用schlenk技術(shù)除去反應(yīng)管中的溶解氧，然后在57℃下反應(yīng)36h。反應(yīng)結(jié)束后，聚合物溶液經(jīng)長度為7cm中性氧化鋁柱子除去銅鹽，再旋蒸，除去溶劑，然后在冷甲醇中沉淀并過濾3次，最后于室溫下真空干燥至恒重，得到棕色固體即為外端基為羧基的超支化聚苯乙烯[hps-(cooh)n]。在5ml燒瓶中加入hps-(cooh)n200.9mg(0.004101mmol，mn,nmr＝49000)，加入0.6ml干燥的dmf攪拌溶解，放入冰浴中0.5h，加入edc·hcl16.0mg(1.2×17×0.004101mmol)，攪拌0.5h，再加入dmap10.2mg(1.2×17×0.004101mmol)，充分溶解后加入三乙胺10.6mg(1.5×17×0.004101mmol)，冰浴3h，加入boc-nh-nh2184.3mg(20×17×0.004101mmol)，在25℃下反應(yīng)40h。得到的聚合物溶液在冷甲醇中沉淀并過濾3次，室溫下真空干燥至恒重。得到固體產(chǎn)物即為外端基為叔丁氧羰基的超支化聚苯乙烯[hps-(conhnhboc)n]。取20mghps-(conhnhboc)n，將其溶于0.3ml干燥的氯仿(chcl3)中，再加入0.2ml三氟乙酸，體系在20℃下避光反應(yīng)10h。反應(yīng)后得到的聚合物溶液首先進(jìn)行旋蒸，除去未反應(yīng)完的三氟乙酸和溶劑，然后在冷甲醇中沉淀并過濾3次，最后室溫下真空干燥至恒重。得到固體產(chǎn)物即為外端基為酰肼鍵的超支化聚苯乙烯hps-(conhnh2)n。稱取dmf5.3mg，thf2.0mg加入到小玻璃瓶中混合均勻，稱取1mg聚合物[hps-(conhnh2)n]加入到混合溶劑中，振蕩使其充分溶解。在空氣濕度為70％、空氣流速為1.5l/min手套箱中，將溶解好的聚合物溶液涂抹在硅片上，靜置1min后將其放入20ml去離子水浴中，10h后取出多孔膜，真空干燥36h。所得到的白色的薄膜狀物即為外端基為酰肼鍵的超支化聚苯乙烯[hps-(conhnh2)n]的聚合物多孔膜。稱取5mg鹽酸阿霉素置于錐形瓶中，加入1mlph＝5.5醋酸銨溶液使鹽酸阿霉素充分溶解。首先用去離子水沖洗多孔膜3次，后將其浸沒在12ml去離子水中2h,使其表面完全潤濕。然后將處理過的多孔膜放入錐形瓶中，使多孔膜完全浸沒在鹽酸阿霉素的醋酸銨溶液中。再用鋁箔密封錐形瓶，把它放入恒溫振蕩器中(振速110r/min)，在35℃條件下避光反應(yīng)36h。反應(yīng)后用去離子水沖洗多孔膜表面10次，使其表面和孔中未反應(yīng)的鹽酸阿霉素完全洗掉。最后室溫下真空干燥36h，如此便得到一種孔壁上接枝有阿霉素的超支化聚苯乙烯多孔膜。實(shí)施例二：在50ml圓底燒瓶中加入2-溴代丁二酸1052.0mg(5.34mmol)，丙炔醇3136.0mg(56.0mmol)和對甲苯磺酸53.2mg(0.28mmol)，然后加入10ml干燥的甲苯作為溶劑，待其完全溶解后，在92℃下反應(yīng)40h。反應(yīng)結(jié)束后，將其冷卻至室溫，在60℃下，減壓旋蒸，除去甲苯，加入15mlch2cl2重新溶解旋蒸后的產(chǎn)物，用naoh溶液(7wt％)洗5遍，用去離子水洗5遍后，加入與黃色液體體積比為2:2的無水mgso4在磁力攪拌下干燥8h。然后抽濾，收集濾液。在35℃下減壓旋蒸，除去ch2cl2，產(chǎn)物經(jīng)長度為18cm的硅膠柱子(洗脫液為乙酸乙酯：二氯甲烷＝3:1)。取得產(chǎn)物溶液后在50℃下旋蒸，除去洗脫劑，室溫下于真空干燥箱中干燥至恒重，得到黃色粘性液體即為2-溴代丁二酸二丙炔醇酯(bpbs)。在25ml的schlenk管中依次加入bpbs128.6mg(0.471mmol)，bpy220.4mg(3×0.471mmol)，st5150.2mg(105×0.471mmol)和cubr67.6mg(0.471mmol)。完全溶解后利用schlenk技術(shù)除去反應(yīng)管中的溶解氧。在115℃條件下反應(yīng)80min后，將其迅速冷卻至室溫并打開塞子通空氣。后處理：首先在產(chǎn)物中加入一定量的thf稀釋，然后經(jīng)長度為8cm中性氧化鋁的柱子除去銅鹽。過柱子后得到的聚合物溶液首先旋蒸，除去溶劑，然后在冷甲醇中沉淀并過濾2次，最后于室溫下真空干燥至恒重，得到白色固體即線型聚苯乙烯。在25ml圓底燒瓶中加入線性聚苯乙烯ps-br1856.3mg(0.5988mmol，mn,nmr＝3100)，nan3778.4mg(20×0.5988mmol)，加入10ml干燥的dmf，磁力攪拌使其充分溶解后，在45℃下反應(yīng)48h。首先在產(chǎn)物中加入一定量的thf稀釋，然后經(jīng)長度為12cm中性氧化鋁的柱子除去鈉鹽。旋蒸，除去溶劑，然后在冷甲醇中沉淀并過濾2次，最后于室溫下真空干燥至恒重，得到白色固體即為疊氮基取代的聚苯乙烯。在25ml的schlenk管中依次加入ps-n31435.3mg(0.463mmol，mn,nmr＝3100)，cubr66.4mg(0.463mmol)和pmdeta80.2mg(0.463mmol)和7ml干燥的dmf，磁力攪拌使其完全溶解。完全溶解后利用schlenk技術(shù)除去反應(yīng)管中的溶解氧。在62℃條件下反應(yīng)150min后，將其迅速冷卻至室溫并打開塞子通空氣。后處理：產(chǎn)物首先經(jīng)長度12cm的中性氧化鋁柱子除去銅鹽。再旋蒸，除去溶劑，然后在冷甲醇中沉淀并過濾2次，最后于室溫下真空干燥至恒重，得到棕色固體即為超支化聚苯乙烯(hps)。在25mlschlenk管中加入超支化聚苯乙烯(hps)1096.1mg(0.02237mmol,mn,nmr＝49000),疊氮乙酸307.3mg(8×17×0.02237mmol)，pmdeta65.9mg(17×0.02237mmol)和cubr54.6mg(17×0.02237mmol)。加入4.5ml干燥的dmf，磁力攪拌下使其完全溶解，利用schlenk技術(shù)除去反應(yīng)管中的溶解氧，然后在62℃下反應(yīng)54h。反應(yīng)結(jié)束后，產(chǎn)物經(jīng)長度12cm的中性氧化鋁層析柱除去銅鹽，旋蒸，除去溶劑，然后在冷甲醇中沉淀并過濾2次，最后于室溫下真空干燥至恒重，得到棕色固體即為外端基為羧基的超支化聚苯乙烯[hps-(cooh)n]。在10ml燒瓶中加入hps-(cooh)n1005.0mg(0.02051mmol，mn,nmr＝49000),加入3ml無水dmf攪拌溶解，放入冰浴中0.5h，加入edc·hcl80.2mg(1.2×17×0.02051mmol)，攪拌0.5h，再加入dmap51.0mg(1.2×17×0.02051mmol)，充分溶解后加入三乙胺77.6mg(2.2×17×0.02051mmol)，冰浴5h，加入boc-nh-nh2691.04mg(15×17×0.02051mmol)，將其密封，然后在35℃下反應(yīng)54h。得到的聚合物溶液在冷甲醇中沉淀并過濾2次，室溫下真空干燥至恒重。得到固體產(chǎn)物即為外端基為叔丁氧羰基的超支化聚苯乙烯[hps-(conhnhboc)n]。取110mghps-(conhnhboc)n，將聚合物溶于1.5ml干燥的氯仿(chcl3)中，再加入1ml三氟乙酸，體系在30℃下避光反應(yīng)15h。首先對反應(yīng)后得到的聚合物溶液進(jìn)行旋蒸，除去未反應(yīng)完的三氟乙酸和溶劑，得到的聚合物溶液在冷甲醇中沉淀并過濾2次，最后室溫下真空干燥至恒重。得到固體產(chǎn)物即為外端基為酰肼鍵的超支化聚苯乙烯hps-(conhnh2)n。稱取dmf26.5mg，thf12.0mg加入到小玻璃瓶中混合均勻，再稱取6mg聚合物[hps-(conhnh2)n]加入到混合溶劑中，振蕩使其充分溶解。在空氣濕度為90％、氮?dú)饬魉贋?.5l/min手套箱中，將溶解好的聚合物溶液涂抹在硅片上，靜置3min后將其放入160ml去離子水浴中，15h后取出多孔膜，真空干燥48h。所得到的白色的薄膜狀物即為外端基為酰肼鍵的超支化聚苯乙烯[hps-(conhnh2)n]的聚合物多孔膜。稱取35mg鹽酸阿霉素于錐形瓶中，加入5mlph＝5.4醋酸銨溶液使鹽酸阿霉素充分溶解。首先用去離子水沖洗多孔膜3次，后將其浸沒在60ml去離子水中5h,使其表面完全潤濕。然后將處理過的多孔膜放入錐形瓶中，使其完全浸潤在溶液中。然后用鋁箔密封錐形瓶，再把它放在恒溫振蕩器中(振速125r/min)，在40℃條件下避光反應(yīng)48h。反應(yīng)后用去離子水沖洗多孔膜表面10次，使其表面和孔中未反應(yīng)的鹽酸阿霉素完全洗掉。最后室溫下真空干燥24h，如此便得到一種孔壁上接枝有阿霉素的超支化聚苯乙烯多孔膜。實(shí)施例三：在100ml圓底燒瓶中加入2-溴代丁二酸2102.0mg(10.67mmol)，丙炔醇6053.6mg(108.10mmol)和對甲苯磺酸106.4mg(0.56mmol)，然后加入20ml干燥的甲苯作為溶劑，待其完全溶解后，在90℃下反應(yīng)36h。反應(yīng)結(jié)束后，將其冷卻至室溫，在60℃下減壓旋蒸除去甲苯，加入30mlch2cl2重新溶解旋蒸后的產(chǎn)物，用naoh溶液(5wt％)洗4遍，用去離子水洗4遍后，加入與黃色液體體積比為2:1的無水mgso4在磁力攪拌下干燥6h。然后抽濾，收集濾液。在35℃減壓旋蒸，除去ch2cl2，產(chǎn)物經(jīng)長度為20cm的硅膠柱子(洗脫液為乙酸乙酯：二氯甲烷＝3:1)。取得產(chǎn)物溶液后在50℃下旋蒸，除去洗脫劑，室溫下真空干燥至恒重，得到黃色粘性液體即為2-溴代丁二酸二丙炔醇酯(bpbs)。在25ml的schlenk管中依次加入bpbs256.9mg(0.941mmol)，bpy440.4mg(3×0.941mmol)，st9799.6mg(100×0.941mmol)和cubr(135.0mg,0.941mmol)。完全溶解后利用schlenk技術(shù)除去反應(yīng)管中的溶解氧。在110℃條件下反應(yīng)80min后，將其迅速冷卻至室溫并打開塞子通空氣。后處理：首先在產(chǎn)物中加入一定量的thf稀釋，然后經(jīng)長度10cm的中性氧化鋁的柱子除去銅鹽。過柱子后得到的聚合物溶液首先旋蒸，除去溶劑，然后在冷甲醇中沉淀并過濾2次，最后于室溫下真空干燥至恒重，得到白色固體即線型聚苯乙烯。在50ml圓底燒瓶中加入線性聚苯乙烯ps-br3711.9mg(1.1974mmol,mn,sec＝3100)，nan31167.5mg(15×1.1974mmol)，加入20ml干燥的dmf，磁力攪拌使其充分溶解后，在40℃下反應(yīng)24h。首先在產(chǎn)物中加入一定量的thf稀釋，然后經(jīng)長度10cm的中性氧化鋁的柱子除去鈉鹽。旋蒸，除去溶劑，然后在冷甲醇中沉淀并過濾兩次，最后于室溫下真空干燥至恒重，得到白色固體即為疊氮基取代的聚苯乙烯。在25ml的schlenk管中依次加入ps-n32870.6mg(0.926mmol，mn,sec＝3100)，cubr132.9mg(0.926mmol)和pmdeta160.5mg(0.926mmol)和14ml干燥的dmf，磁力攪拌使其完全溶解。再利用schlenk技術(shù)除去反應(yīng)管中的溶解氧。在60℃條件下反應(yīng)80min后，將其迅速冷卻至室溫并打開塞子通空氣。后處理：產(chǎn)物首先經(jīng)長度10cm的中性氧化鋁柱子除去銅，再旋蒸，除去溶劑，然后在冷甲醇中沉淀并過濾2次，最后于室溫下真空干燥至恒重，得到棕色固體即為超支化聚苯乙烯(hps)。在25mlschlenk管中加入超支化聚苯乙烯(hps)2192.3mg(0.04474mmol,mn,sec＝49000),疊氮乙酸384.1mg(5×17×0.04474mmol)，pmdeta131.8mg(17×0.04474mmol)和cubr109.1mg(17×0.04474mmol)。加入9ml干燥的dmf，磁力攪拌下使其完全溶解，利用schlenk技術(shù)除去反應(yīng)管中的溶解氧，然后在60℃下反應(yīng)48h。反應(yīng)結(jié)束后，產(chǎn)物經(jīng)長度10cm的中性氧化鋁柱子除去銅鹽，再旋蒸，除去溶劑，然后在冷甲醇中沉淀并過濾2次，最后于室溫下真空干燥至恒重，得到棕色固體即為外端基為羧基的超支化聚苯乙烯[hps-(cooh)n]。在10ml燒瓶中加入hps-(cooh)n2009.5mg(0.04101mmol，mn,sec＝49000),加入6ml干燥的dmf攪拌溶解，放入冰浴中0.5h，加入edc·hcl160.4mg(1.2×17×0.04101mmol)，攪拌0.5h，再加入dmap102.1mg(1.2×17×0.04101mmol)，充分溶解后加入三乙胺141.1mg(2×17×0.04101mmol)，冰浴4h，加入boc-nh-nh21382.1mg(15×17×0.04101mmol)，將其密封，然后在30℃下反應(yīng)48h。得到的聚合物溶液在冷甲醇中沉淀并過濾2次，室溫下真空干燥至恒重。得到固體產(chǎn)物即為外端基為叔丁氧羰基的超支化聚苯乙烯[hps-(conhnhboc)n]。取200mghps-(conhnhboc)n，將聚合物溶于3ml干燥的氯仿(chcl3)中，再加入2ml三氟乙酸，體系在25℃下避光反應(yīng)12h。然后將反應(yīng)后得到的溶液旋蒸，除去未反應(yīng)完的三氟乙酸和溶劑，然后在冷甲醇中沉淀并過濾2次，最后室溫下真空干燥至恒重。得到固體產(chǎn)物即為外端基為酰肼鍵的超支化聚苯乙烯hps-(conhnh2)n。稱取dmf53.00mg，thf23.00mg加入到小玻璃瓶中混合均勻，之后稱取10mg聚合物[hps-(conhnh2)n]加入到混合溶劑中，振蕩使其充分溶解。在空氣濕度為80％、氮?dú)饬魉贋?l/min手套箱中，將溶解好的聚合物溶液涂抹在硅片上，靜置2min后將其放入150ml去離子水浴中，12h后取出多孔膜，真空干燥24h。所得到的白色的薄膜狀物即為外端基為酰肼鍵的超支化聚苯乙烯[hps-(conhnh2)n]的多孔膜。稱取60mg鹽酸阿霉素于錐形瓶中，加入10mlph＝5.4醋酸銨溶液使鹽酸阿霉素充分溶解。首先用去離子水沖洗多孔膜3次，后將其浸沒在100ml去離子水中3h,使其表面完全潤濕。然后將處理過的多孔膜放入錐形瓶中，使其完全浸沒在溶液中。然后用鋁箔密封錐形瓶，再把它放在恒溫振蕩器中(振速120r/min)，在37℃條件下避光反應(yīng)48h。反應(yīng)后用去離子水沖洗多孔膜表面10次，使其表面和孔中未反應(yīng)的鹽酸阿霉素完全洗掉。最后室溫下真空干燥24h，如此便得到一種孔壁上接枝有阿霉素的超支化聚苯乙烯多孔膜。上述實(shí)施例中參與反映的器皿均為干燥的器皿。當(dāng)前第1頁12當(dāng)前第1頁12