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一種杠柳苷元的生物轉(zhuǎn)化制備方法與流程

文檔序號(hào):12697527閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種杠柳苷元的生物轉(zhuǎn)化制備方法,其特征在于所述方法是以黑曲霉(Aspergillusniger)HC306發(fā)酵培養(yǎng)獲得的發(fā)酵液經(jīng)抽濾后的濾液為催化劑,以香加皮為原料構(gòu)成轉(zhuǎn)化體系,在30~35℃、150~250r/min恒溫振蕩條件下進(jìn)行轉(zhuǎn)化反應(yīng),反應(yīng)結(jié)束后,將反應(yīng)液過濾,濾餅干燥后分離純化,獲得杠柳苷元。

2.如權(quán)利要求1所述杠柳苷元的生物轉(zhuǎn)化制備方法,其特征在于所述轉(zhuǎn)化體系中,香加皮的終濃度為50~100g/L轉(zhuǎn)化體系,所述催化劑用量以抽濾前發(fā)酵液中干菌體重量計(jì)為6~8g/L轉(zhuǎn)化體系。

3.如權(quán)利要求1所述杠柳苷元的生物轉(zhuǎn)化制備方法,其特征在于所述香加皮在加入轉(zhuǎn)化體系前先烘干粉碎過60目篩。

4.如權(quán)利要求1所述杠柳苷元的生物轉(zhuǎn)化制備方法,其特征在于所述轉(zhuǎn)化反應(yīng)時(shí)間為8~12h。

5.如權(quán)利要求1所述杠柳苷元的生物轉(zhuǎn)化制備方法,其特征在于所述黑曲霉HC306發(fā)酵培養(yǎng)方法為:

(1)活化培養(yǎng):將黑曲霉HC306菌種孢子接種于PDA培養(yǎng)基,于28~30℃恒溫培養(yǎng)2~3d,獲得平板孢子,所述的PDA培養(yǎng)基組成為:馬鈴薯100~200g/L,蔗糖10~20g/L,瓊脂15~20g/L,溶劑為水,pH自然;

(2)種子擴(kuò)大培養(yǎng):挑取步驟(1)活化培養(yǎng)后黑曲霉HC306孢子接種至種子培養(yǎng)基中,于28~30℃、200~250r/min恒溫振蕩條件下培養(yǎng)2~3d,得種子液;所述種子培養(yǎng)基組成為:蔗糖10~20g/L,(NH4)2SO4 3~5g/L,酵母浸出粉2~3g/L,KH2PO4 1g/L,MgSO4 0.5g/L,CaCl2 0.1g/L,溶劑為自來水,pH 5~6;

(3)發(fā)酵培養(yǎng):將步驟(2)制備的種子液以體積濃度5~10%的接種量接種至發(fā)酵培養(yǎng)基中,于28~30℃、200~250r/min恒溫振蕩條件下培養(yǎng)2~3d,獲得發(fā)酵液,將發(fā)酵液用4層紗布過濾,濾液即為催化劑;所述發(fā)酵培養(yǎng)基組成同種子培養(yǎng)基。

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