本發(fā)明涉及藥物化學(xué)領(lǐng)域、具體涉及膽酸類衍生物。本發(fā)明還公開了它們的制備方法和藥理活性、含有這些化合物的藥用組合物以及它們的醫(yī)藥用途特別是作為預(yù)防或治療高脂血癥、肥胖癥、II型糖尿病藥物的用途。

背景技術(shù)：
：

心血管病目前居全球死因前列，嚴(yán)重危害人類健康。血脂異常是引起動(dòng)脈粥樣硬化、導(dǎo)致血栓形成的主要因素，調(diào)血脂藥物在心血管疾病防治中具有突出地位，對(duì)于維持心血管系統(tǒng)的健康十分重要。

血脂異常是指血漿中的總膽固醇(Total cholesterol，TC)、甘油三酯(Triglyceride，TG)和低密度脂蛋白膽固醇(Low-density lipid cholesterol，LDL-C)增多，高密度脂蛋白膽固醇(High-density lipid cholesterol，HDL-C)減少。LDL可被氧化成oxLDL，過多的oxLDL在巨噬細(xì)胞內(nèi)堆積變成泡沫細(xì)胞，同時(shí)引起血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡，引起炎性反應(yīng)，共同促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形成；新生的小顆粒HDL接受從血管壁巨噬細(xì)胞中流出的膽固醇，經(jīng)酯化后轉(zhuǎn)運(yùn)到肝臟并代謝成膽酸鹽清除出體外，完成膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)(Reverse cholesterol transport，RCT)。高TG引起過度脂交換，會(huì)形成含膽固醇少、TG多的大顆粒HDL，使RCT能力強(qiáng)的小顆粒HDL-C水平下降，膽固醇在血管內(nèi)壁沉積，增加了動(dòng)脈粥樣硬化性心血管病的危險(xiǎn)。

肥胖癥是一種最常見的慢性內(nèi)分泌代謝疾病，在當(dāng)今世界人群中發(fā)病率呈逐年上升趨勢，已成為全球性的公共健康難題。肥胖癥能引發(fā)許多健康問題，不僅會(huì)增大高脂血癥、高血壓、冠心病、II型糖尿病的發(fā)病率和死亡率，還易引起呼吸系統(tǒng)并發(fā)癥、骨關(guān)節(jié)炎癥以及精神方面的疾病。各種實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示適度的體重減輕(5-10％)可明顯降低糖尿病、腫瘤和心血管系統(tǒng)的危險(xiǎn)系數(shù)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
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本發(fā)明公開了通式I的一類膽酸類衍生物，經(jīng)初步生物活性研究顯示，本發(fā)明化合物對(duì)3T3-L1細(xì)胞的增殖均有抑制活性。本發(fā)明化合物具有潛在的治療高脂血癥、肥胖癥、II型糖尿病藥物的用途。

其中R₁代表OH、二甲氨基、二乙氨基、吡咯烷基、哌啶基。

R₂代表OH、NH₂、羧酸基、磺酸基、羧酸酯基、磺酸酯基。

n代表0、1、2、3、4、5、6。

其中R₁優(yōu)選代表二甲氨基、二乙氨基、吡咯烷基、哌啶基。

其中R₂優(yōu)選代表甲酸酯基。

其中n優(yōu)選代表0、1、2。

本發(fā)明化合物結(jié)構(gòu)如下：

下面藥理實(shí)驗(yàn)及實(shí)施例中化合物的代號(hào)等同于此處的代號(hào)所對(duì)應(yīng)的化合物結(jié)構(gòu)。

本發(fā)明通式的化合物可以由以下方法制備：

(a)EDCI，HOBt，CHCl₂，rt，10h；(b)TsCl，DMAP，rt，12h；(c)NaN₃，DMF，75℃，48h；(d)PPh₃，THF，H₂O，rt，24h；(e)H₂SO₄，CH₃OH，rt，2h；(f)K₂CO₃，KI，DMF，80℃，5h；(g)K₂CO₃，KI，DMF，60℃，8h.

下面是本發(fā)明的部分化合物的藥理活性檢測：

我們對(duì)合成的目標(biāo)化合物進(jìn)行了初步生物活性篩選，測試了化合物對(duì)前脂肪細(xì)胞增殖的影響。

1實(shí)驗(yàn)材料

吡格列酮、阿托伐他汀鈣購自南京生利德生物技術(shù)有限公司；T0901317購自上海浩然生物技術(shù)有限公司；青霉素，小牛血清(FBS)購自Gibco BRL of Invitrogen Corporation(Carlsbad，CA)；胰蛋白酶，四甲基偶氮唑鹽(MTT)購自Sigama(St.Louis，MO)；其他試劑均為國產(chǎn)分析純。

2實(shí)驗(yàn)方法

2.1細(xì)胞培養(yǎng)

3T3-L1細(xì)胞分別用DMEM培養(yǎng)基(含10％小牛血清、100U/mL的青霉素和100μg/mL的鏈霉素)于5％CO2、37℃孵育箱中培養(yǎng)。待細(xì)胞長至匯合度為80％左右時(shí)傳代。傳代細(xì)胞時(shí)，倒掉舊培養(yǎng)基，PBS(磷酸鹽緩沖液)洗兩次。加入少量0.25％胰蛋白酶，鋪平瓶底，37℃下消化約1-2min，倒置顯微鏡下觀察到細(xì)胞變圓，倒掉胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，吹打混勻，植入新的培養(yǎng)瓶中，繼續(xù)培養(yǎng)。細(xì)胞計(jì)數(shù)，取少量細(xì)胞混懸液與0.4％臺(tái)盼藍(lán)溶液等體積混合，用吸管吹打混勻，取少許混合液滴入計(jì)數(shù)板與蓋玻片的上方空隙中，注意不要產(chǎn)生氣泡，于100倍低倍顯微鏡下觀察，死細(xì)胞可被臺(tái)盼藍(lán)染色，而活細(xì)胞不會(huì)，移動(dòng)計(jì)數(shù)板至看到計(jì)數(shù)方格，數(shù)出四個(gè)大格的未染色細(xì)胞數(shù)，記錄包括壓右線和上線的細(xì)胞，左線和下線不計(jì)，細(xì)胞數(shù)/mL＝四大格細(xì)胞總數(shù)/4×10⁴。

凍存細(xì)胞時(shí)，收獲對(duì)數(shù)生長期細(xì)胞(收集細(xì)胞前24h換液)，凍存液(5％DMSO、95％DMEM)重懸細(xì)胞，調(diào)細(xì)胞密度為5×10⁶～1×10⁷個(gè)/mL，分裝入無菌凍存管中，每管加1.5mL細(xì)胞懸液，做好標(biāo)記和記錄，凍存管在4℃放置20min，-20℃放置20min，在-70℃超低溫冰箱過夜后移入液氮容器中。細(xì)胞復(fù)蘇，從液氮容器中取出凍存管，迅速放入盛有40℃水的燒杯中，不時(shí)搖動(dòng)，使之盡快融化，用酒精棉球消毒凍存管表面，吸出細(xì)胞懸液，移入離心管中，補(bǔ)加細(xì)胞培養(yǎng)液至10mL，繼續(xù)培養(yǎng)。

2.2細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)

將3T3-L1細(xì)胞接種于96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中。常規(guī)培養(yǎng)1天后，換成含1×10^-4mol/L的目標(biāo)化合物和OF的DMEM培養(yǎng)液，對(duì)照組為含0.1％(V/V)的DMSO的培養(yǎng)液，每組設(shè)3復(fù)孔，處理2天。棄去孔中培養(yǎng)液，每孔加20μL MTT液(5mg/mL)，37℃培養(yǎng)4h，棄孔中液體，每孔加入150μL DMSO，充分振搖，立即在酶聯(lián)免疫檢測儀上測定吸光度(Optical density，OD)，測定波長為570nm。抑制率按下式計(jì)算：

3實(shí)驗(yàn)結(jié)果

化合物及陽性藥對(duì)3T3-L1細(xì)胞增殖的影響如下：

4結(jié)果討論

本發(fā)明化合物的活性結(jié)果可以看出，本課題合成的化合物在100μM下對(duì)3T3-L1細(xì)胞均有抑制活性。

本發(fā)明化合物用于調(diào)血脂、降低心血管疾病的作用機(jī)制、作用強(qiáng)度和作用時(shí)間還需要再進(jìn)一步的研究中闡明。

本發(fā)明進(jìn)一步涉及通式的化合物與藥學(xué)上可接受的載體組成的藥用組合物。

本發(fā)明化合物可以單獨(dú)或與一種或一種以上的藥學(xué)上可以接受的載體組合制成制劑以供給藥?？梢杂每诜┬徒o藥，如普通片劑和膠囊、緩釋片劑和膠囊、控釋片劑和膠囊、滴丸、可分散粉末、顆粒劑等；也可制備成注射制劑。這些藥用制劑中可以含有與載體組合的例如0.05％至90％總量的活性成分，更常見約15％至60％之間重量的活性成分。本發(fā)明化合物劑量可以是0.001～100mg/kg/天，也可以根據(jù)疾病程度的不同或劑型的不同偏離此劑量范圍。

具體實(shí)施方式

部分化合物的制備實(shí)施如下：

熔點(diǎn)用XRC-1顯微熔點(diǎn)儀測定(溫度計(jì)未經(jīng)校正)，IR用Nicolet iS10型傅立葉變換紅外光譜儀測定(KBr壓片)，¹H-NMR核磁共振由Bruker AV300型(300MHz)核磁共振儀測定(TMS為內(nèi)標(biāo)物)，質(zhì)譜分別由島津GC/MS-QP2010型質(zhì)譜儀(EI-MS)、Agilent1100LC-MSD-Trap/SL型質(zhì)譜儀(ESI-MS)測定。

柱層析用硅膠為100-200目、200-300目或300-400目硅膠(青島海洋化工廠)，洗脫劑為石油醚-乙酸乙酯體系或氯仿-甲醇體系。薄層層析(TLC)用GF254薄層層析板(煙臺(tái)江友硅膠開發(fā)有限公司)；TLC展開體系為石油醚-乙酸乙酯系統(tǒng)或乙酸乙酯-甲醇系統(tǒng)；TLC在ZF7型三用紫外分析儀(河南鞏義予華儀器有限公司)下照射顯示。部分化合物純度使用島津HPLC在254nm下檢測，流動(dòng)相為甲醇/水系統(tǒng)。

實(shí)施例1

3α，7α，12α-三羥基膽甾-24-N，N-二甲基酰胺(1a)的制備

向反應(yīng)瓶中加入膽酸(5g，12.25mmol)、EDCI(4.68g，24.51mmol)、HOBt(1.65g，12.25mmol)、鹽酸二甲胺(2.98g，36.75mmol)、三乙胺(5ml)、二氯甲烷(50ml)，室溫反應(yīng)10h。反應(yīng)結(jié)束，水洗，分液，旋干。柱層析(乙酸乙酯/甲醇：8/1，V/V)得白色固體3.9g，收率74.2％。MS(ESI)：m/z＝436[M+H]⁺。

實(shí)施例2

3α，7α，12α-三羥基-膽甾-24-N，N-二乙基酰胺(1b)的制備

采用(1a)的制備方法，得白色固體4.1g，收率72.1％。MS(ESI)：m/z＝464[M+H]⁺。

實(shí)施例3

3α，7α，12α-三羥基-膽甾-24-吡咯烷基酰胺(1c)的制備

采用(1a)的制備方法，得白色固體3.8g，收率67.1％。MS(ESI)：m/z＝462[M+H]⁺。

實(shí)施例4

3α，7α，12α-三羥基-膽甾-24-哌啶基酰胺(1d)的制備

采用(1a)的制備方法，得白色固體4.0g，收率68.6％。MS(ESI)：m/z＝476[M+H]⁺。

實(shí)施例5

3α-對(duì)甲苯磺酸酯基-7α，12α-二羥基-膽甾-24-N，N-二甲基酰胺(2a)的制備

向反應(yīng)瓶中加入1a(2g，4.6mmol)、對(duì)甲苯磺酰氯(2.76g，14.64mmol)、DMAP(0.28g，2.44mmol)、三乙胺4ml、二氯甲烷100ml，室溫反應(yīng)12h。反應(yīng)結(jié)束，水洗，分液，旋干得到白色固體，直接下投。MS(ESI)：m/z＝590[M+H]⁺。

實(shí)施例6

3α-對(duì)甲苯磺酸酯基-7α，12α-二羥基-膽甾-24-N，N-二乙基酰胺(2b)的制備

采用(2a)的制備方法，得白色固體。MS(ESI)：m/z＝618[M+H]⁺。

實(shí)施例7

3α-對(duì)甲苯磺酸酯基-7α，12α-二羥基-膽甾-24-吡咯烷基酰胺(2c)的制備

采用(2a)的制備方法，得白色固體。MS(ESI)：m/z＝616[M+H]⁺。

實(shí)施例8

3α-對(duì)甲苯磺酸酯基-7α，12α-二羥基-膽甾-24-哌啶基酰胺(2d)的制備

采用(2a)的制備方法，得白色固體。MS(ESI)：m/z＝630[M+H]⁺。

實(shí)施例9

3β-疊氮基-7α，12α-二羥基-膽甾-24-N，N-二甲基酰胺(3a)的制備

向反應(yīng)瓶中加上一部產(chǎn)物3a(0.68，1.22mmol)、疊氮化鈉(0.16g，2.44mmol)、DMF(10ml)，75℃反應(yīng)48h。反應(yīng)結(jié)束，將反應(yīng)液倒入水中水析，析出白色固體，抽濾，直接下投。MS(ESI)：m/z＝461[M+H]⁺。

實(shí)施例10

3β-疊氮基-7α，12α-二羥基-膽甾-24-N，N-二乙基酰胺(3b)的制備

采用(3a)的制備方法，得白色固體。MS(ESI)：m/z＝489[M+H]⁺。

實(shí)施例11

3β-疊氮基-7α，12α-二羥基-膽甾-24-吡咯烷基酰胺(3c)的制備

采用(3a)的制備方法，得白色固體。MS(ESI)：m/z＝487[M+H]⁺。

實(shí)施例12

3β-疊氮基-7α，12α-二羥基-膽甾-24-哌啶基酰胺(3d)的制備

采用(3a)的制備方法，得白色固體。MS(ESI)：m/z＝501[M+H]⁺。

實(shí)施例13

3β-氨基-7α，12α-二羥基-膽甾-24-N，N-二甲基酰胺(4a)的制備

向反應(yīng)瓶中加入上部產(chǎn)物3a(0.6g，1.22mmol)、三苯基膦(0.63g，2.44mmol)、水(0.5ml)、四氫呋喃(10ml)，室溫反應(yīng)24h。反應(yīng)結(jié)束，旋干反應(yīng)液，得白色固體。柱層析(乙酸乙酯/甲醇/三乙胺：100/100/1，V/V/V)，得白色固體0.41g，收率72.4％。MS(ESI)：m/z＝435[M+H]⁺。

實(shí)施例14

3β-氨基-7α，12α-二羥基-膽甾-24-N，N-二乙基酰胺(4b)的制備

采用(4a)的制備方法，得白色固體0.42g，收率71.9％。MS(ESI)：m/z＝463[M+H]⁺。

實(shí)施例15

3β-氨基-7α，12α-二羥基-膽甾-24-吡咯烷基酰胺(4c)的制備

采用(4a)的制備方法，得白色固體0.39g，收率70.6％。MS(ESI)：m/z＝461[M+H]⁺。

實(shí)施例16

3β-氨基-7α，12α-二羥基-膽甾-24-哌啶基酰胺(4d)的制備

采用(4a)的制備方法，得白色固體0.48g，收率84.3％。MS(ESI)：m/z＝475[M+H]⁺。

實(shí)施例17

對(duì)羥基苯甲酸甲酯(5a)的制備

向反應(yīng)瓶中加入對(duì)羥基苯甲酸(4.0g，28.9mmol)、加入甲醇20ml攪拌溶解，滴加濃H₂SO₄2滴，室溫反應(yīng)2h。反應(yīng)完成后，用乙酸乙酯萃取(100ml×3)，合并乙酸乙酯層用飽和食鹽水洗滌(100ml×3)，無水硫酸鈉干燥，濃縮后得白色固體，重結(jié)晶得白色固體4.10g，收率93.1％。MS(ESI)：m/z＝151[M-H]^-。

實(shí)施例18

對(duì)羥基苯乙酸甲酯(5b)的制備

采用(5a)的制備方法，得白色固體4.04g，收率92.5％。MS(ESI)：m/z＝165[M-H]^-。

實(shí)施例19

對(duì)羥基苯丙酸甲酯(5c)的制備

采用(5a)的制備方法，得白色固體4.14g，收率95.4％。MS(ESI)：m/z＝179[M-H]^-。

實(shí)施例20

4-(3-溴丙氧基)苯甲酸甲酯(6a)的制備

向反應(yīng)瓶中加入對(duì)羥基苯甲酸甲酯(4.0g，26.3mmol)、K₂CO₃(10.9g，78.9mmol)、KI(0.44g，2.63mmol)，加入DMF溶解，反應(yīng)30min后慢慢滴加1，3-二溴丙烷(4.0ml，39.5mmol)，升溫至80℃，反應(yīng)5h。反應(yīng)完成后倒入100ml水中，用乙酸乙酯萃取(100ml×3)，合并乙酸乙酯層用飽和食鹽水洗滌(100ml×3)，無水硫酸鈉干燥，濃縮后粗品。柱層析(石油醚/乙酸乙酯：15/1，V/V)，得白色固體5.19g，收率72.5％。MS(ESI)：m/z＝273[M+H]⁺。

實(shí)施例21

4-(3-溴丙氧基)苯乙酸甲酯(6b)的制備

采用(6a)的制備方法，得無色透明液體5.44g，收率78.9％。MS(ESI)：m/z＝287[M+H]⁺。

實(shí)施例22

4-(3-溴丙氧基)苯丙酸甲酯(6c)的制備

采用(6a)的制備方法，得白色固體5.19g，收率72.5％。MS(ESI)：m/z＝301[M+H]⁺。

實(shí)施例23

3β-(4-苯甲酸甲酯)氧丙氨基-7α，12α-二羥基-膽甾-24-N，N-二甲基酰胺(QZY-A1)的制備

向反應(yīng)瓶中加入3β-氨基-7α，12α-二羥基-膽甾-24-N，N-二甲基酰胺(0.2g，0.49mmol)、K₂CO₃(0.3g，2.2mmol)、KI(0.01g，0.071mmol)，加入DMF溶解，反應(yīng)30min后加4-(3-溴丙氧基)苯甲酸甲酯(0.23g，0.85mmo1)，升溫至60℃，反應(yīng)8h。反應(yīng)完成后倒入100ml水中，用二氯甲烷萃取(100ml×3)，合并二氯甲烷層用飽和食鹽水洗滌(100ml×3)，無水硫酸鈉干燥，濃縮后粗品。柱層析(乙酸乙酯/甲醇：3/1，V/V)，得白色固體0.18g，收率68.8％。¹H-NMR(DMSO，300MHz)：δ7.92(d，2H，J＝6.6Hz，H-2’，H-6’)，7.05(d，2H，J＝8.4Hz，H-3’，H-5’)，4.06(t，2H，J＝5.91Hz，-OCH₂-)，3.89(s，3H，-OCH₃)，3.47(s，6H，-NCH₃)，3.16(m，2H，H-7，H-12)，2.58(m，2H，J＝7.2Hz，-CH₂CO-)，0.95(d，3H，H-21)，0.88(s，6H，H-18，H-19)；MS(ESI)：m/z＝627[M+H]⁺。

實(shí)施例24

3β-(4-苯乙酸甲酯)氧丙氨基-7α，12α-二羥基-膽甾-24-N，N-二甲基酰胺(QZY-A2)的制備

采用(QZY-A1)的制備方法，得白色固體0.16g，收率60.1％。¹H-NMR(DMSO，300MHz)：δ7.12(d，2H，J＝7.27Hz，H-2’，H-6’)，6.87(d，2H，J＝8.4Hz，H-3’，H-5’)，4.10(t，2H，J＝5.91Hz，-OCH₂-)，3.80(s，3H，-OCH₃)，3.76(s，2H，-CO-CH₂-Ar-)，3.51(s，6H，-NCH₃)，3.16(m，2H，H-7，H-12)，2.58(m，2H，J＝7.2Hz，-CH₂CO-)，1.02(d，3H，H-21)，0.89(s，6H，H-18，H-19)；MS(ESI)：m/z＝641[M+H]⁺。

實(shí)施例25

3β-(4-苯丙酸甲酯)氧丙氨基-7α，12α-二羥基-膽甾-24-N，N-二甲基酰胺(QZY-A3)的制備

采用(QZY-A1)的制備方法，得白色固體0.19g，收率52.7％。¹H-NMR(DMSO，300MHz)：δ7.19(d，2H，J＝8.64Hz，H-2’，H-6’)，6.95(d，2H，J＝8.23Hz，H-3’，H-5’)，4.09(t，2H，-OCH₂-)，3.69(s，3H，-OCH₃)，3.49(s，6H，-NCH₃)，3.18(m，2H，H-7，H-12)，2.97(t，2H，-ArCH₂-)，2.76(t，2H，-CO-CH₂-)，2.55(m，2H，-CH₂NH-)，1.02(d，3H，H-21)，0.96(s，6H，H-18，H-19)；MS(ESI)：m/z＝655[M+H]⁺。

實(shí)施例26

3β-(4-苯甲酸甲酯)氧丙氨基-7α，12α-二羥基-膽甾-24-N，N-二乙基酰胺(QZY-B1)的制備

采用(QZY-A1)的制備方法，得白色固體0.22g，收率65.4％。¹H-NMR(DMSO，300MHz)：δ7.15(d，2H，J＝6.31Hz，H-2’，H-6’)，6.80(d，2H，J＝7.04Hz，H-3’，H-5’)，4.07(t，2H，J＝5.88Hz，-OCH₂-)，3.80(s，3H，-OCH₃)，3.34(q，4H，-NCH₂-)，3.15(m，2H，H-7，H-12)，2.05(m，2H，J＝7.16Hz，-CH₂CO-)，1.08(t，6H，-CH₂CH₃)，0.95(d，3H，H-21)，0.88(s，6H，H-18，H-19)；MS(ESI)：m/z＝655[M+H]⁺。

實(shí)施例27

3β-(4-苯乙酸甲酯)氧丙氨基-7α，12α-二羥基-膽甾-24-N，N-二乙基酰胺(QZY-B2)的制備

采用(QZY-A1)的制備方法，得白色固體0.24g，收率68.4％。¹H-NMR(DMSO，300MHz)：δ7.19(d，2H，J＝8.19Hz，H-2’，H-6’)，6.87(d，2H，J＝8.04Hz，H-3’，H-5’)，4.10(t，2H，J＝5.97Hz，-OCH₂-)，3.69(s，3H，-OCH₃)，3.75(s，2H，-CO-CH₂-Ar-)，3.32(q，4H，-NCH₂-)，3.15(m，2H，H-7，H-12)，2.05(m，2H，J＝7.24Hz，-CH₂CO-)，1.08(t，6H，-CH₂CH₃)，0.96(d，3H，H-21)，0.85(s，6H，H-18，H-19)；MS(ESI)：m/z＝669[M+H]⁺。

實(shí)施例28

3β-(4-苯丙酸甲酯)氧丙氨基-7α，12α-二羥基-膽甾-24-N，N-二乙基酰胺(QZY-B3)的制備

采用(QZY-A1)的制備方法，得白色固體0.25g，收率71.1％。¹H-NMR(DMSO，300MHz)：δ7.18(d，2H，J＝8.64Hz，H-2’，H-6’)，6.95(d，2H，J＝8.64Hz，H-3’，H-5’)，4.05(t，2H，-OCH₂-)，3.55(s，3H，-OCH₃)，3.34(q，4H，-NCH₂-)，3.18(m，2H，H-7，H-12)，2.91(t，2H，-ArCH₂-)，2.96(t，2H，-CO-CH₂-)，2.56(t，2H，-CO-CH₂-)，2.57(m，2H，-CH₂NH-)，1.08(t，6H，-CH₂CH₃)，1.02(d，3H，H-21)，0.96(s，6H，H-18，H-19)；MS(ESI)：m/z＝683[M+H]⁺。

實(shí)施例29

3β-(4-苯甲酸甲酯)氧丙氨基-7α，12α-二羥基-膽甾-24-吡咯烷基酰胺(QZY-C1)的制備

采用(QZY-A1)的制備方法，得白色固體0.22g，收率63.4％。¹H-NMR(DMSO，300MHz)：δ7.12(d，2H，J＝7.84Hz，H-2’，H-6’)，6.80(d，2H，J＝7.64Hz，H-3’，H-5’)，4.06(m，4H，2-OCH₂-)，3.16(m，1H，H-7)，3.15(m，1H，H-12)，3.09(t，4H，-NCH₂CH₂)，2.57(m，1H，H-3)，2.55(m，2H，-NHCH₂-)，1.04(s，6H，H-18，H-19)；MS(ESI)：m/z＝653[M+H]⁺。

實(shí)施例30

3β-(4-苯乙酸甲酯)氧丙氨基-7α，12α-二羥基-膽甾-24-吡咯烷基酰胺(QZY-C2)的制備

采用(QZY-A1)的制備方法，得白色固體0.26g，收率72.1％。¹H-NMR(DMSO，300MHz)：δ7.12(d，2H，J＝8.10Hz，H-2’，H-6’)，6.87(d，2H，J＝8.02Hz，H-3’，H-5’)，4.03(t，2H，J＝6.18Hz，-OCH₂-)，3.81(s，2H，-CO-CH₂-Ar-)，3.69(s，3H，-OCH₃)，2.55(m，2H，-NHCH₂-)，0.98(d，3H，H-21)；MS(ESI)：m/z＝667[M+H]⁺。

實(shí)施例31

3β-(4-苯丙酸甲酯)氧丙氨基-7α，12α-二羥基-膽甾-24-吡咯烷基酰胺(QZY-C3)的制備

采用(QZY-A1)的制備方法，得白色固體0.26g，收率68.9％。¹H-NMR(DMSO，300MHz)：δ7.18(d，2H，J＝8.44Hz，H-2’，H-6’)，6.94(d，2H，J＝8.16Hz，H-3’，H-5’)，4.16(t，2H，-OCH₂-)，3.68(s，3H，-OCH₃)，3.09(t，4H，-NCH₂CH₂)，2.78(t，2H，-CH₂-Ar-)，2.53(t，2H，-COCH₂-)，2.52(m，2H，-NHCH₂-)，0.96(d，3H，H-21)；MS(ESI)：m/z＝681[M+H]⁺。

實(shí)施例32

3β-(4-苯甲酸甲酯)氧丙氨基-7α，12α-二羥基-膽甾-24-哌啶基酰胺(QZY-D1)的制備

采用(QZY-A1)的制備方法，得白色固體0.26g，收率68.9％。¹H-NMR(DMSO，300MHz)：δ7.08(d，2H，J＝7.84Hz，H-2’，H-6’)，6.72(d，2H，J＝7.55Hz，H-3’，H-5’)，4.07(t，2H，-OCH₂-)，3.69(s，3H，-OCH₃)，3.42(t，4H，-NCH₂CH₂-)，1.02(d，3H，H-21)；MS(ESI)：m/z＝667[M+H]⁺。

實(shí)施例33

3β-(4-苯乙酸甲酯)氧丙氨基-7α，12α-二羥基-膽甾-24-哌啶基酰胺(QZY-D2)的制備

采用(QZY-A1)的制備方法，得白色固體0.18g，收率91.4％。¹H-NMR(DMSO，300MHz)：δ7.12(d，2H，J＝8.10Hz，H-2’，H-6’)，6.87(d，2H，J＝8.02Hz，H-3’，H-5’)，4.07(t，2H，-OCH₂-)，3.76(s，3H，-OCH₃)，3.74(s，2H，-CO-CH₂-Ar-)，3.44(t，4H，-NCH₂CH₂-)，3.15(m，2H，H-7，H-12)，1.04(d，3H，H-21)；MS(ESI)：m/z＝681[M+H]⁺。

實(shí)施例34

3β-(4-苯丙酸甲酯)氧丙氨基-7α，12α-二羥基-膽甾-24-哌啶基酰胺(QZY-D3)的制備

采用(QZY-A1)的制備方法，得白色固體0.17g，收率89.5％。¹H-NMR(DMSO，300MHz)：δ7.19(d，2H，J＝8.34Hz，H-2’，H-6’)，6.96(d，2H，J＝8.22Hz，H-3’，H-5’)，4.06(t，2H，-OCH₂-)，3.69(s，3H，-OCH₃)，3.42(t，4H，-NCH₂CH₂-)，3.16(m，2H，H-7，H-12)，2.53(m，1H，H-3)，2.91(t，2H，-CH₂Ar-)，2.53(t，2H，-COCH₂-)，1.06(s，6H，H-18，H-19)；MS(ESI)：m/z＝695[M+H]⁺。