本發(fā)明涉及到卡格列凈有關(guān)物質(zhì)的合成方法，屬于藥物有關(guān)物質(zhì)合成領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
：糖尿病是一種嚴(yán)重困擾全球的慢性疾病，據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，全世界已存在21.3億糖尿病患者。預(yù)計(jì)到2025年，全球?qū)?1.5億糖尿病患者。1999年世界衛(wèi)生組織(worldhealthorganization，who)將糖尿病定義為：糖尿病是由多種病因引起的代謝紊亂，其特點(diǎn)是慢性高血糖，伴有胰島素分泌不足和/或胰島素作用障礙，導(dǎo)致碳水化合物、脂肪和蛋白質(zhì)的代謝紊亂，最終造成多種器官的慢性損傷和功能障礙。目前國際對糖尿病的分型主要是基于糖尿病的病因?qū)W，who咨詢報(bào)告(who/ncd/ncs/99.2)和國際糖尿病聯(lián)盟(internationaldiabetesfederation，idf)西太區(qū)委員會于1999年將糖尿病分為四型，即1型糖尿病、2型糖尿病、妊娠期糖尿病和其它特殊類型的糖尿病。因此，對糖尿病藥物的相關(guān)研究和開發(fā)具有重要的理論意義和實(shí)用價值。卡格列凈，英文名：canagliflozin，化學(xué)名：(1s)-1,5-脫氫-1-c-[3-[[5-(4-氟苯基)-2-噻吩基]甲基]-4-甲基苯基]-d-葡萄糖醇半水合物?？ǜ窳袃魹橛商镞吶庵扑幑竞蛷?qiáng)生公司聯(lián)合開發(fā)的首個獲得美國fda批準(zhǔn)的sglt2抑制劑類藥物，以2型鈉葡萄糖共轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(sglt2)為靶標(biāo)的口服降血糖藥。sglt-2的作用靶位和機(jī)制與現(xiàn)有的口服降糖藥和抗糖尿病藥有所不同，創(chuàng)造性開辟了降糖新路徑。其作用機(jī)制不依賴胰島β細(xì)胞，故藥效不受胰島β細(xì)胞功能的影響。并且因其作用機(jī)制不依賴于胰島素，在2型糖尿病的任何階段均可能被應(yīng)用。因此，sglt-2抑制劑用于2型糖尿病的治療具有良好的前景。通過已有的臨床試驗(yàn)證實(shí)了該藥的有效性和安全性。其單用或與二甲雙胍、磺脲類藥物聯(lián)合使用，可以顯著降低2型糖尿病患者的hba1c和空腹血糖，不良反應(yīng)發(fā)生率與安慰劑相似，低血糖風(fēng)險較低，可顯著減輕體量。為了提高原料藥的質(zhì)量，研究合成過程中的有關(guān)物質(zhì)具有重大意義?？ǜ窳袃舻脑泄緸槲涮?，其在國內(nèi)專利cn102264714對卡格列凈的合成路線有過報(bào)道，目前其方法為目前國內(nèi)卡格列凈合成的主要方法如下：其在合成過程中，由于化合物b質(zhì)量可控性不高且步驟一格氏反應(yīng)，反應(yīng)條件比較苛刻需要低溫?zé)o水無氧的環(huán)境中進(jìn)行，所以反應(yīng)過程中，容易引入特殊的有關(guān)物質(zhì)?，F(xiàn)有技術(shù)中，由于雜質(zhì)未知，無法有效控制合成成品的質(zhì)量，本發(fā)明的發(fā)明人通過富集雜質(zhì)、破壞性試驗(yàn)、柱層析純化等方法將其制備，并通過結(jié)構(gòu)確證手段，對其結(jié)構(gòu)進(jìn)行了驗(yàn)證與解析，從而確定了卡格列凈的兩個主要雜質(zhì)分別為卡格列凈雜質(zhì)ⅰ、卡格列凈雜質(zhì)ⅱ?？ǜ窳袃綦s質(zhì)ⅰ分子式為c52h50f2o9s2，分子量921.07?？ǜ窳袃綦s質(zhì)ⅱ分子式為c44h42f2o5s2，分子量752.93。結(jié)構(gòu)式為：本發(fā)明的發(fā)明人通過制備合成卡格列凈的有關(guān)雜質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)品，進(jìn)一步應(yīng)用于卡格列凈原料藥制備的質(zhì)量控制和研究，為提高原料藥提供了新的方向。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明所解決的技術(shù)問題是提供一種卡格列凈有關(guān)物質(zhì)的合成方法，本發(fā)明合成方法制備得到的有關(guān)物質(zhì)為卡格列凈雜質(zhì)ⅰ和卡格列凈雜質(zhì)ⅱ，是主反應(yīng)路線下的副產(chǎn)物，所以此方法仍然以卡格列凈的合成反應(yīng)路線為基礎(chǔ)，調(diào)整一定的反應(yīng)條件，并通過富集以及柱層析的方法對有關(guān)物質(zhì)進(jìn)行純化，得到目標(biāo)化合物卡格列凈雜質(zhì)ⅰ和卡格列凈雜質(zhì)ⅱ。本發(fā)明中：化合物a：d-葡萄糖酸內(nèi)酯，分子式為c6h10o6，分子量為178.14?；衔颾：2,3,4,6-四-o-乙?；?d-葡萄糖酸內(nèi)酯，分子式為c14h18o10，分子量為346.29?；衔颿：卡格列凈雜質(zhì)ⅰ前體，分子式為c52h50f2o10s2，分子量為937.07。本發(fā)明有關(guān)物質(zhì)卡格列凈雜質(zhì)ⅰ和卡格列凈雜質(zhì)ⅱ的合成線路如下：本發(fā)明有關(guān)物質(zhì)卡格列凈雜質(zhì)ⅰ和卡格列凈雜質(zhì)ⅱ的合成方法，是先通過原料a制備得到卡格列凈雜質(zhì)ⅰ，然后再采用卡格列凈雜質(zhì)ⅰ進(jìn)一步制備得到卡格列凈雜質(zhì)ⅱ?？ǜ窳袃綦s質(zhì)ⅰ的合成方法包括如下步驟：步驟一：化合物a溶于溶劑中，加入催化劑，常溫?cái)嚢璺磻?yīng)至反應(yīng)完成得到化合物b。步驟二：碘代物或溴代物溶于反應(yīng)溶劑，低溫下加入格氏試劑或者鋰試劑，反應(yīng)1-3小時(優(yōu)選2小時)將反應(yīng)液加入化合物b的溶液中反應(yīng)，反應(yīng)完成后乙酸溶液淬滅反應(yīng)，直接蒸干得到粗品化合物c直接用于下一步反應(yīng)。步驟三：將粗品化合物c溶于溶劑，低溫下加入還原劑硅烷試劑、路易斯酸，常溫反應(yīng)至反應(yīng)完成，加入碳酸氫鈉溶液淬滅反應(yīng)，萃取分離，有機(jī)相直接蒸干，得到粗品卡格列凈雜質(zhì)ⅰ，柱層析純化，洗脫劑為乙酸乙酯、石油醚，其體積比為1：1，得到純品卡格列凈雜質(zhì)ⅰ?？ǜ窳袃綦s質(zhì)ⅱ的合成方法是采用卡格列凈雜質(zhì)ⅰ制備卡格列凈雜質(zhì)ⅱ：步驟一至三同卡格列凈雜質(zhì)ⅰ的合成方法，區(qū)別在于：步驟四：卡格列凈雜質(zhì)ⅰ溶于反應(yīng)溶劑，加入堿進(jìn)行脫保護(hù)，常溫反應(yīng)至反應(yīng)完成。加入乙酸淬滅反應(yīng)，然后將反應(yīng)液加入水中，析出固體，過濾，得到卡格列凈雜質(zhì)ⅱ。上述技術(shù)方案中，步驟一所述催化劑為三氟乙酸，化合物a與催化劑的摩爾比為1:1～5；優(yōu)選1:2～3當(dāng)量。上述技術(shù)方案中，步驟一所述溶劑為乙酸酐，化合物a與乙酸酐的質(zhì)量比為1:5～1:9；優(yōu)選1:5～1:6當(dāng)量。上述技術(shù)方案中，步驟一所述常溫的溫度為15-35℃。上述技術(shù)方案中，步驟一所述的反應(yīng)時間為2-10h，優(yōu)選2-3h。反應(yīng)終點(diǎn)一般是根據(jù)tlc跟蹤監(jiān)測判斷達(dá)到反應(yīng)終點(diǎn)。上述技術(shù)方案中，步驟二所述反應(yīng)溶劑為甲苯、四氫呋喃、乙醚、正己烷、1，4-二氧六環(huán)；溶劑用量為碘代物與溶劑的質(zhì)量比為1:1～5；優(yōu)選1:2～3。步驟二所述反應(yīng)溶劑優(yōu)選甲苯；甲苯用量為碘代物與甲苯的質(zhì)量比為1:1～5；優(yōu)選1:2～3。上述技術(shù)方案中，步驟二所述反應(yīng)溶劑的含水量低于千分之五。上述技術(shù)方案中，步驟二所述格氏試劑或者鋰試劑采用三甲基硅基鋰、正丁基鋰、異丙基氯化鎂氯化鋰、仲丁基氯化鎂氯化鋰等試劑。上述技術(shù)方案中，步驟二所述碘代物與鋰試劑或格氏試劑的摩爾比為1:1～5；優(yōu)選1:1～2。上述技術(shù)方案中，步驟二所述的起始物料碘代物也可用溴代物替換，則溴代物與鋰試劑或格氏試劑的摩爾比為1:1～5；優(yōu)選1:1～2。碘代物：2-(4-氟苯基)-5-[(5-碘-2-甲基苯基)甲基]噻吩溴代物：2-(4-氟苯基)-5-[(5-溴-2-甲基苯基)甲基]噻吩上述技術(shù)方案中，步驟二所述反應(yīng)在惰性氣氛條件下進(jìn)行。優(yōu)選的，所述惰性氣氛為氮?dú)饣驓鍤?。上述技術(shù)方案中，步驟二所述碘代物或溴代物溶于反應(yīng)溶劑，低溫下加入格氏試劑或者鋰試劑的低溫反應(yīng)條件為：反應(yīng)溫度為-10～10℃，優(yōu)選0～10℃。上述技術(shù)方案中，步驟二所述將化合物b加入反應(yīng)液的反應(yīng)條件為：反應(yīng)溫度為-20～-78℃，優(yōu)選-40～-50℃。上述技術(shù)方案中，步驟二所述用乙酸溶液淬滅反應(yīng)，所述乙酸溶液的濃度為5％-10％，乙酸溶液用量以控制反應(yīng)液的ph值為6～7即可。上述技術(shù)方案中，步驟二反應(yīng)的反應(yīng)時間為3-8h，優(yōu)選為2-3h。由于這步反應(yīng)無法用薄層等手段鑒別反應(yīng)終點(diǎn)，所以用時間范圍規(guī)定，3-8小時完全能夠保證各種劑量的反應(yīng)完全。上述技術(shù)方案中，步驟三所述的溶劑為鹵代烴類試劑，所述鹵代烴類試劑采用二氯甲烷、三氯甲烷、甲苯或乙腈等，粗品化合物c與溶劑的質(zhì)量比為1:1～10；溶劑采用二氯甲烷、三氯甲烷、甲苯優(yōu)選1:6～10；溶劑采用乙腈優(yōu)選1:3～5。上述技術(shù)方案中，步驟三所述還原劑硅烷試劑采用三異丙基硅烷、三乙基硅烷、三甲基硅烷等，優(yōu)選采用三異丙基硅烷；化合物c與硅烷試劑的摩爾比為1:1～10；優(yōu)選1:2～3。上述技術(shù)方案中，步驟三所述路易斯酸采用三氟化硼乙醚、三氟化硼四氫呋喃、氯化鋅、氯化鋁、氯化鐵等，優(yōu)選三氟化硼乙醚；化合物c與路易斯酸的摩爾比為1:1～10；優(yōu)選1:1～2。上述技術(shù)方案中，步驟三所述常溫反應(yīng)的反應(yīng)溫度為10～20℃。上述技術(shù)方案中，步驟三所述的反應(yīng)時間為3-12h，優(yōu)選4-6h。反應(yīng)終點(diǎn)一般是根據(jù)tlc跟蹤監(jiān)測判斷達(dá)到反應(yīng)終點(diǎn)。上述技術(shù)方案中，步驟三所述碳酸氫鈉溶液的濃度為10％，采用碳酸氫鈉淬滅反應(yīng)，碳酸氫鈉溶液的用量保證反應(yīng)液ph值為7-8即可。上述技術(shù)方案中，步驟四所述反應(yīng)溶劑采用醇類溶劑，醇類溶劑優(yōu)選采用甲醇、乙醇、四氫呋喃等，卡格列凈雜質(zhì)ⅰ與反應(yīng)溶劑的質(zhì)量比為1:3～10；優(yōu)選1:5～7。上述技術(shù)方案中，步驟四所述常溫反應(yīng)的反應(yīng)溫度為15～35℃，優(yōu)選反應(yīng)溫度為20～25℃。上述技術(shù)方案中，步驟四所述反應(yīng)完成以tlc跟蹤監(jiān)測判斷達(dá)到反應(yīng)終點(diǎn)。上述技術(shù)方案中，步驟四所述加入堿進(jìn)行脫保護(hù)，所述的堿選用甲醇鈉、乙醇鈉、氫氧化鋰、氫氧化鈉、氫氧化鉀等，優(yōu)選甲醇鈉。卡格列凈雜質(zhì)ⅰ與堿的摩爾比為1:0.5～5；優(yōu)選為1:1～2?？ǜ窳袃綦s質(zhì)ⅰ與甲醇鈉的摩爾比為1:0.5～5；優(yōu)選為1:1～2。上述技術(shù)方案中，步驟四所述采用乙酸淬滅反應(yīng)，乙酸采用純冰醋酸，乙酸的用量保證反應(yīng)液ph值為6-7即可。通過上述方法能夠制備得到卡格列凈的有關(guān)雜質(zhì)，通過核磁和質(zhì)譜確定為卡格列凈雜質(zhì)ⅰ和卡格列凈雜質(zhì)ⅱ，可用于卡格列凈原料藥制備的質(zhì)量控制和研究的標(biāo)準(zhǔn)品，為定性定量檢測卡格列凈提供了一種新的選擇。具體實(shí)施方式下面將結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實(shí)施例僅僅是本發(fā)明一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例?；诒景l(fā)明中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有作出創(chuàng)造性勞動前提下所獲得的所有其他實(shí)施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。實(shí)施例1式葡萄糖酸內(nèi)酯10g，加入100ml干燥三頸瓶中，攪拌下加入乙酸酐90g，降溫至0℃～10℃，加入三氟乙酸29.3g(三氟乙酸加入時放熱)，加入過程控制體系溫度在15℃～35℃。加入完畢后25℃～30℃保溫反應(yīng)3～4h，至反應(yīng)溶液基本澄清，tlc監(jiān)控至反應(yīng)液基本無葡萄糖酸內(nèi)酯，反應(yīng)完成。上述反應(yīng)液，70℃～80℃減壓濃縮，至無液體流出，得到棕色透明的油狀粘稠液體化合物b約25g(收率：約117％)實(shí)施例2式葡萄糖酸內(nèi)酯150g，加入1000ml干燥三頸瓶中，攪拌下加入乙酸酐900g，降溫至0℃～10℃，加入三氟乙酸29.3g(三氟乙酸加入時放熱)，加入過程控制體系溫度在15℃～25℃。加入完畢后25℃～30℃保溫反應(yīng)6h，至反應(yīng)溶液基本澄清，tlc監(jiān)控至反應(yīng)液基本無葡萄糖酸內(nèi)酯，反應(yīng)完成。上述反應(yīng)液，70℃～80℃減壓濃縮，至無液體流出，得到棕色透明的油狀粘稠液體化合物b約360g(收率：約113％)實(shí)施例3式100ml干燥三頸瓶中，加入甲苯15g，攪拌下加入碘代物15g，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下降溫至0℃～-10℃，攪拌下加入三甲基硅基鋰的四氫呋喃溶液50ml，控制溫度在0℃～-5℃加完，在-5℃-0℃保溫反應(yīng)2-3h。得到制備好的格式試劑。將制備好的格氏試劑加入裝有甲苯30g和化合物b25g的250ml三頸瓶中。在氮?dú)獗Ｗo(hù)下降溫至-20℃以下，保溫反應(yīng)4h。反應(yīng)完成后，保持溫度在-20℃以下，攪拌下緩慢加入10％乙酸溶液，測體系ph值為5～6。加入完成后，攪拌30min，升溫至20～30℃攪拌15min，靜置30～40min，棄去水相(下層)，有機(jī)相用純化水洗2次，每次攪拌30min，棄去水相(下層)。有機(jī)相加入無水硫酸鎂，過濾，50℃～60℃減壓蒸干溶劑至無液體流出，得到中間體化合物c，直接用于下一步反應(yīng)。實(shí)施例4式將乙腈100g和上一步得到的中間體化合物c加入250ml三頸瓶中，加入三乙基硅烷28g，攪拌使溶解，氮?dú)獗Ｗo(hù)下，降溫至0℃，加入三氟化硼乙醚,10.4g，加入過程控溫至0℃，加入完畢后，在10℃～20℃反應(yīng)約4h，tlc監(jiān)控至反應(yīng)完成。反應(yīng)完成后，加入10％的碳酸鈉溶液，使溶液ph為7～8(,加入過程控溫-5℃～0℃，，攪拌30min，分離水相，有機(jī)相用飽和食鹽水洗2次，棄去水相。有機(jī)相加入無水硫酸鎂干燥，過濾，蒸干溶劑得到粗品卡格列凈雜質(zhì)ⅰ，柱層析純化，洗脫劑比例為(乙酸乙酯:石油醚＝1:1)，收集組分，濃縮干燥，得到淡黃色的固體純品卡格列凈雜質(zhì)ⅰ2.2g(兩步收率為10.2％)es-ms(m/z):943.2760[m+na]+；1h-nmr(dmso-d6,brukerav-400mhz；)1.46(d,j＝5.6hz,3h)；1.62(d,j＝4.4hz,3h)；1.90(s,3h)；1.94(d,3h)；2.00(s,3h)；2.21,2.19(dd,j＝2hz,3.6hz,6h)；3.99-4.13(m,8h)；4.605,4.585(dd,j＝1.6hz,2hz,1h)；4.93-4.97(m,1h)；5.01-5.04(m,1h)；5.33(t,j＝7.6hz,1h)；6.74-6.76(m,1h)；6.817(d,j＝5.6hz,1h)；6.94-6.97(m,2h)；7.06-7.07(m,1h)；7.11-7.18(m,7h)；7.18-7.27(m,3h)；7.55-7.58(m,2h)。實(shí)施例5式500ml干燥三頸瓶中，加入甲苯75g，攪拌下加入碘代物75g，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下降溫至0℃～-10℃，攪拌下加入異丙基氯化鎂氯化鋰四氫呋喃溶液250ml(1.3mol/l)，控制溫度在0℃～-5℃加完，在-5℃-0℃保溫反應(yīng)2-3h。得到制備好的格式試劑。將制備好的格氏試劑加入裝有甲苯150g和化合物b125g的2000ml三頸瓶中。在氮?dú)獗Ｗo(hù)下降溫至-20℃以下，保溫反應(yīng)4h。反應(yīng)完成后，保持溫度在-20℃以下，攪拌下緩慢加入10％乙酸溶液，測體系ph值為5～6。加入完成后，攪拌30min，升溫至20～30℃攪拌15min，靜置30～40min，棄去水相(下層)，有機(jī)相用純化水洗2次，每次攪拌30min，棄去水相(下層)。有機(jī)相加入無水硫酸鎂，過濾，50℃～60℃減壓蒸干溶劑至無液體流出，得到中間體化合物c，直接用于下一步反應(yīng)。實(shí)施例6式將二氯甲烷133g和上一步得到的中間體化合物c加入250ml三頸瓶中，加入三乙基硅烷20g，攪拌使溶解，氮?dú)獗Ｗo(hù)下，降溫至0℃，加入三氟化硼乙醚,6.7g，加入過程控溫至0℃，加入完畢后，在10℃～20℃反應(yīng)約4h，tlc監(jiān)控至反應(yīng)完成。反應(yīng)完成后，加入10％的碳酸鈉溶液，使溶液ph為7～8(,加入過程控溫-5℃～0℃，，攪拌30min，分離水相，有機(jī)相用飽和食鹽水洗2次，棄去水相。有機(jī)相加入無水硫酸鎂干燥，過濾，蒸干溶劑得到粗品卡格列凈雜質(zhì)ⅰ，柱層析純化，洗脫劑比例為(乙酸乙酯:石油醚＝1:1)，收集組分，濃縮干燥，得到淡黃色的固體純品卡格列凈雜質(zhì)ⅰ3.2g(兩步收率為14.8％)實(shí)施例750ml干燥三頸瓶中，加入甲醇10g，攪拌下加入卡格列凈雜質(zhì)ⅰ0.8g，緩慢加入甲醇鈉0.18g，加入過程控溫20℃～30℃，控溫25℃～30℃攪拌下反應(yīng)1～3h，tlc監(jiān)測反應(yīng)完全(直至混合物完全溶清)。反應(yīng)完成后，降溫至0～5℃加入冰乙酸，測體系ph值為6-7。向其中緩慢加入純化水30g，20℃～25℃攪拌2h，過濾，干燥，得到類白色卡格列凈雜質(zhì)ⅱ450mg(收率為70％)。es-ms(m/z):775.2344[m+na]+；1h-nmr(dmso-d6,brukerav-400mhz；)1.46(d,j＝5.6hz,3h)；2.21(s,3h)；3.12-3.16(m,3h)；3.19-3.22(m,1h)；3.69(d,j＝8.4hz,1h)；3.95(d,j＝7.6hz,1h)；4.00-4.09(m,5h)；6.74-6.75(m,1h)；6.86(d,j＝2.8hz,1h)；6.95-6.96(m,2h)；7.06-7.07(m,2h)；7.10-7.20(m,6h)；7.25-7.28(m,3h)；7.55-7.58(m,2h)實(shí)施例8式50ml干燥三頸瓶中，加入甲醇10g，攪拌下加入卡格列凈雜質(zhì)ⅰ1.6g，緩慢加入氫氧化鋰0.078g，加入過程控溫20℃～30℃，控溫25℃～30℃攪拌下反應(yīng)1～3h，tlc監(jiān)測反應(yīng)完全(直至混合物完全溶清)。反應(yīng)完成后，降溫至0～5℃加入冰乙酸，測體系ph值為6-7。向其中緩慢加入純化水30g，20℃～25℃攪拌2h，過濾，干燥，得到類白色卡格列凈雜質(zhì)ⅱ750mg(收率為61％)。實(shí)施例9式50ml干燥三頸瓶中，加入甲醇10g，攪拌下加入卡格列凈雜質(zhì)ⅰ1.5g，緩慢加入氫氧化鈉0.098g，加入過程控溫20℃～30℃，控溫25℃～30℃攪拌下反應(yīng)1～3h，tlc監(jiān)測反應(yīng)完全(直至混合物完全溶清)。反應(yīng)完成后，降溫至0～5℃加入冰乙酸，測體系ph值為6-7。向其中緩慢加入純化水30g，20℃～25℃攪拌2h，過濾，干燥，得到類白色卡格列凈雜質(zhì)ⅱ1.1g(收率為89.7％)。以下為采用本發(fā)明制備的卡格列凈雜質(zhì)ⅰ和卡格列凈雜質(zhì)ⅱ進(jìn)行定性定量檢測的方法。應(yīng)用本發(fā)明發(fā)明人發(fā)現(xiàn)并制備的2種雜質(zhì)能夠使卡格列凈制備過程中的中間體k3及卡格列凈成品的質(zhì)量檢測更加準(zhǔn)確、可控。若沒有這2種雜質(zhì)的情況：1)如沒有卡格列凈雜質(zhì)ⅰ，卡格列凈制備過程中中間體k3的質(zhì)量控制則不能很好地規(guī)定該中間體的特定雜質(zhì)的含量，這會降低卡格列凈后續(xù)的制備過程的質(zhì)量的可控性；2)如沒有卡格列凈雜質(zhì)ⅱ，則卡格列凈的有關(guān)物質(zhì)控制只能規(guī)定一個總雜質(zhì)的限度，這對于原料藥有關(guān)物質(zhì)的把控上顯得不夠精確和細(xì)致。近年來，化合物原料藥有關(guān)物質(zhì)的研究與控制是國內(nèi)藥品研發(fā)工作的重點(diǎn)。在我國，雜質(zhì)控制理念的變化：“純度控制”→“雜質(zhì)控制”→“雜質(zhì)譜控制”，其中“雜質(zhì)譜控制”要做的即“雜質(zhì)譜分析”——建立針對性控制特定雜質(zhì)的分析方法。因此，相關(guān)特定雜質(zhì)的定量分析控制是順應(yīng)藥品研發(fā)要求的。以下采用本發(fā)明提供的雜質(zhì)對中間體k3及卡格列凈成品進(jìn)行檢測的方法。一、卡格列凈中間體k3的檢測方法k3為卡格列凈制備過程中的中間體，其化學(xué)式為：乙酸-3(r),4(r),5(s)-三乙酰氧基-6(s)-[3-[5-(4-氟苯基)-噻吩-2-苯甲基]-4-甲基-苯基]-四氫吡喃-2(r)-基甲酯。結(jié)構(gòu)式如下：【性狀】k3為類白色至淡黃色粉末或顆粒?！緳z查】水分：取本品，照水分測定法(中國藥典2015年版四部通則0832第一法a)測定，含水應(yīng)不得過為0.5％。【純度】色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑(agilenttc-c18，4.6×250mm，5μm)，以乙腈為流動相a；水(磷酸調(diào)ph值至2.0)為流動相b，進(jìn)行梯度洗脫，洗脫程序見下表。梯度洗脫程序表流速為每分鐘1.0ml，檢測波長為290nm，柱溫35℃。測定法取卡格列凈中間體k3樣品約10mg，精密稱定，置50ml量瓶中，加乙腈適量，振搖10分鐘使溶解，稀釋至刻度，搖勻，作為供試品液。另取卡格列凈雜質(zhì)ⅰ適量，加乙腈溶解并定量稀釋制成每1ml中各約含10ug的溶液，作為雜質(zhì)對照品溶液；照高效液相色譜法(中國藥典2010年版二部附錄ⅴd)測定。精密量取空白溶劑、供試品溶液、卡格列凈雜質(zhì)ⅰ各20μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。扣除空白溶劑干擾，按面積歸一化法計(jì)算，純度不得低于99.0％，卡格列凈雜質(zhì)ⅰ不得過0.3％。本發(fā)明“卡格列凈雜質(zhì)ⅰ”則是k3的專屬雜質(zhì)，利用卡格列凈雜質(zhì)ⅰ對k3的進(jìn)行檢測控制能有效提高生產(chǎn)質(zhì)量。二、卡格列凈成品的檢測方法【有關(guān)物質(zhì)】項(xiàng)【檢查】有關(guān)物質(zhì)取卡格列凈樣品適量，精密稱定，加45％乙腈溶解并稀釋制成每1ml約含0.5mg的溶液，作為供試品液。精密量取適量，加上述溶劑定量稀釋制成每lml中約含0.5ug的溶液，作為對照溶液。另取卡格列凈雜質(zhì)ⅱ對照品適量，加乙腈溶解并定量稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液，作為雜質(zhì)對照品儲備液；另取卡格列凈對照品約50mg，并精密量取上述雜質(zhì)對照品儲備液1ml，置同一100ml量瓶中，加45％乙腈溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為系統(tǒng)適用性溶液。照高效液相色譜法試驗(yàn)，用十八烷基硅烷鍵合硅膠(agilenttc-c18，4.6×250mm，5μm)為填充劑；以乙腈為流動相a；水(用磷酸調(diào)ph值至2.0)為流動相b，按下表進(jìn)行梯度洗脫；檢測波長為290mn；柱溫為35℃，流速為1.0ml/min。精密量取系統(tǒng)適用性溶液20u1，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，出峰順序依次為卡格列凈、卡格列凈雜質(zhì)ⅱ，。精密量取對照溶液、供試品溶液、空白溶劑各20u1，分別注人液相色譜儀，記錄色譜圖至60分鐘。除與空白溶劑相同位置的色譜峰外，供試品溶液色譜圖中如有下表所列雜質(zhì)峰，單個雜質(zhì)峰面積按校正后的峰面積計(jì)算不得大于對照溶液主峰面積的1倍(0.1％)，其他單個雜質(zhì)峰面積不得大于對照溶液主峰面積1倍(0.1％),其他各雜質(zhì)峰面積的和不得大于對照溶液主峰面積的5倍(0.5％)。供試品溶液色譜圖中小于對照溶液主峰面積0.2倍的峰忽略不計(jì)。化合物類別校正因子卡格列凈雜質(zhì)ⅱ工藝雜質(zhì)1.4通過上述檢測方法對卡格列凈進(jìn)行檢測，可準(zhǔn)確快速的定性定量檢測原料中的有關(guān)雜質(zhì)，有利于在生產(chǎn)過程中及時快速的確定成品質(zhì)量，確保原料藥的質(zhì)量。當(dāng)前第1頁12