本發(fā)明涉及有機(jī)化學(xué)和藥物學(xué)領(lǐng)域，具體而言，本發(fā)明涉及一種新的喜巴辛類似物，所述化合物具有式(ι)結(jié)構(gòu)，以及式(ι)化合物的立體異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、前藥或藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物和含有它們的藥物組合物，以及其用途。

背景技術(shù)：

心腦血管事件包括急性冠脈綜合征(acutecoronarysyndrome，acs)、心肌梗塞、腦血栓等，具有高發(fā)病率和高死亡率的特點(diǎn)。世界衛(wèi)生組織也指出缺血性心腦血管事件是導(dǎo)致死亡的首要因素。目前我國(guó)每年有超過(guò)300萬(wàn)人死于心腦血管疾病，占全部死亡人數(shù)的40.3％。此類疾病的病理原因是由于血小板活化后聚集形成血栓，進(jìn)而導(dǎo)致機(jī)體組織的缺血，因此抗血栓治療是目前預(yù)防心腦血管事件發(fā)生的主要方式。

血小板發(fā)生黏附后是血小板的活化過(guò)程，包括多種自分泌和旁分泌因子的釋放，這些因子包括二磷酸腺苷(adenosinediphosphate，adp)、凝血酶、腎上腺素、血栓烷素a2，它們不僅對(duì)血小板的最初反應(yīng)起信號(hào)放大和維持作用，而且使血液循環(huán)中的血小板逐漸形成止血栓子。血小板表面結(jié)合的多種凝血因子激活促使凝血酶原轉(zhuǎn)化為凝血酶，凝血酶可促進(jìn)血小板的聚集又可促進(jìn)纖維蛋白原轉(zhuǎn)化為纖維蛋白，這是促進(jìn)凝血和止血的主要原因。血小板對(duì)凝血酶的反應(yīng)由血小板表面g蛋白偶聯(lián)受體，即凝血酶受體介導(dǎo)。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)凝血酶受體可被蛋白酶水解所激活，因此凝血酶受體又被稱為蛋白酶激活受體(proteaseactivatedreceptors，pars)。有4種pars亞型，廣泛分布于組織中，par-1，par-3，par-4可被凝血酶激活，par-2則被胰蛋白酶或類胰蛋白酶激活。人類血小板只表達(dá)par-1和par-4兩種受體，其中par-1在凝血酶介導(dǎo)的血小板激活中起著最主要的作用。鼠類血小板表達(dá)par-1和par-3兩種受體。

目前已上市的口服抗血栓藥物均通過(guò)抑制血小板活化途徑發(fā)揮作用。環(huán)氧化酶抑制劑阿司匹林可以抑制血栓烷素a2的產(chǎn)生。噻吩吡啶類藥物(如氯吡格雷)可與血小板表面的adp受體p2y12產(chǎn)生不可逆結(jié)合，從而抑制adp的血小板活化作用。adp和血栓烷素a2引起的血小板活化途徑對(duì)于常規(guī)病理性血栓形成和止血都是關(guān)鍵性步驟，因而聯(lián)合應(yīng)用環(huán)氧化酶抑制劑和噻吩吡啶類藥物在發(fā)揮抗栓作用的同時(shí)，不可避免地導(dǎo)致出血并發(fā)癥風(fēng)險(xiǎn)的上升。因此盡管抗血小板治療在目前臨床上已取得了較好的效果，但其所帶來(lái)的出血風(fēng)險(xiǎn)仍值得關(guān)注。

由par-1介導(dǎo)的血小板活化途徑主要對(duì)病理性血栓形成有作用。par-1受體抑制劑可阻斷凝血酶介導(dǎo)的血小板激活而不影響凝血酶介導(dǎo)的纖維蛋白原裂解，同時(shí)par-1受體抑制劑也不影響參與血小板黏附、激活或聚集途徑的相關(guān)因子，如膠原，vwf，adp和促凝血素(參見coughlinsr.；jthrombhaemost.,2005,3:1800-1814)，因此par-1受體抑制劑既有抗血栓的作用又有可能不會(huì)增加出血風(fēng)險(xiǎn)，是理想的抗血小板藥物。另外，凝血酶受體拮抗劑還可與阿司匹林、氯吡格雷等聯(lián)合用藥以增加抗血栓作用。凝血酶受體拮抗劑也有希望開發(fā)成抗動(dòng)脈硬化和抗癌的新藥。

自凝血酶受體發(fā)現(xiàn)以來(lái)，許多制藥公司都致力于以凝血酶受體為靶點(diǎn)的新藥開發(fā)研究。目前已經(jīng)公開了一系列凝血酶受體拮抗劑的專利申請(qǐng)，如wo03089428公開一類喜巴辛衍生物；wo2002085855公開了一種2-亞氨基吡咯烷類衍生物。merck公司開發(fā)的凝血酶受體拮抗劑sch530348在ⅲ期臨床試驗(yàn)中顯示，sch530348明顯降低了心肌梗塞或腦血栓等心血管疾病的發(fā)病率，但同時(shí)也發(fā)現(xiàn)有出血不良反應(yīng)，尤其是中風(fēng)、短暫性腦缺血以及腦出血患者，腦顱內(nèi)出血幾率增加，這使得目前凝血酶受體拮抗劑的適用人群大大減少。研發(fā)出血副反應(yīng)更少，療效更優(yōu)的新型凝血酶受體拮抗劑仍具有很大挑戰(zhàn)。

本發(fā)明設(shè)計(jì)具有通式(i)所示的化合物，本發(fā)明化合物同現(xiàn)有技術(shù)中具體公開的化合物具有較大的結(jié)構(gòu)差異，且表現(xiàn)出優(yōu)異的效果和作用。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

為了克服現(xiàn)有技術(shù)的不足之處，本發(fā)明的目的是提供具有式(ι)結(jié)構(gòu)所示的新的喜巴辛類似物，以及它們的立體異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、或藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物，或代謝產(chǎn)物和代謝前體或前藥，

一種具有式(ι)結(jié)構(gòu)的化合物或其立體異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、前藥或藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物：

其中:

r¹選自雜環(huán)基、芳基或雜芳基，其中所述的雜環(huán)基、芳基或雜芳基可進(jìn)一步任選的被一個(gè)或多個(gè)選自鹵素、羥基、氰基、硝基、胺基、-nr³r⁴、烷氧基、烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基、-c(o)or³、-oc(o)r³、-c(o)r³、-nhc(o)r³、-c(o)nr³r⁴的取代基所取代；其中所述的烷氧基、烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基或雜芳基可進(jìn)一步任選的被一個(gè)或多個(gè)選自鹵素、羥基、氰基、硝基、胺基、-nr³r⁴、烷氧基、烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基的取代基所取代；

r²選自-c(o)or³、-cn、-c(o)nr³r⁴、雜環(huán)基、芳基或雜芳基，其中所述的雜環(huán)基、芳基或雜芳基可進(jìn)一步任選的被一個(gè)或多個(gè)選自鹵素、羥基、氰基、硝基、胺基、-nr³r⁴、烷氧基、烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基、-c(o)or³、-oc(o)r³、-c(o)r³、-nhc(o)r³、-c(o)nr³r⁴的取代基所取代；其中所述的烷氧基、烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基或雜芳基可進(jìn)一步的任選被一個(gè)或多個(gè)選自鹵素、羥基、氰基、硝基、胺基、-nr³r⁴、烷氧基、烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基的取代基所取代；

x選自ch或n；

n選自0、1、2或3，且當(dāng)n＝0，x＝n時(shí)，r²選自雜芳基，其中所述的雜芳基可進(jìn)一步的任選被一個(gè)或多個(gè)選自鹵素、羥基、氰基、硝基、胺基、-nr³r⁴、烷氧基、烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基、-c(o)or³、-oc(o)r³、-c(o)r³、-nhc(o)r³、-c(o)nr³r⁴的取代基所取代；其中所述的烷氧基、烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基或雜芳基可進(jìn)一步的任選被一個(gè)或多個(gè)選自鹵素、羥基、氰基、硝基、胺基、-nr³r⁴、烷氧基、烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基的取代基所取代；

r³和r⁴各自獨(dú)立選自氫原子、烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基或雜芳基，其中所述的雜環(huán)基、芳基或雜芳基可進(jìn)一步的任選被一個(gè)或多個(gè)選自鹵素、羥基、氰基、硝基、胺基、烷氧基、烷基或環(huán)烷基的取代基所取代。

優(yōu)選的，本發(fā)明的式(ι)結(jié)構(gòu)的化合物或其立體異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、前藥或藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物：

其中，

r¹選自雜環(huán)基、芳基或雜芳基，其中所述的雜環(huán)基、芳基或雜芳基可進(jìn)一步的任選被一個(gè)或多個(gè)選自鹵素、羥基、氰基、胺基、-nr³r⁴、烷氧基、烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基、-c(o)or³、-nhc(o)r³、-c(o)nr³r⁴的取代基所取代；其中所述的烷氧基、烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基或雜芳基可進(jìn)一步的任選被一個(gè)或多個(gè)選自鹵素、羥基、氰基、胺基、-nr³r⁴、烷氧基、烷基、環(huán)烷基的取代基所取代；

r²選自-c(o)or³、-cn、-c(o)nr³r⁴、或雜芳基，其中所述的雜芳基可進(jìn)一步的任選被一個(gè)或多個(gè)選自鹵素、羥基、氰基、胺基、-nr³r⁴、烷氧基、烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基、-c(o)or³、-nhc(o)r³、-c(o)nr³r⁴的取代基所取代；其中所述的烷氧基、烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基或雜芳基可進(jìn)一步的任選被一個(gè)或多個(gè)選自鹵素、羥基、氰基、胺基、-nr³r⁴、烷氧基、烷基、環(huán)烷基的取代基所取代；

x選自ch或n；

n選自0、1或2，且當(dāng)n＝0，x＝n時(shí)，r²選自雜芳基，其中所述的雜芳基可進(jìn)一步的任選被一個(gè)或多個(gè)選自鹵素、羥基、氰基、胺基、-nr³r⁴、烷氧基、烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基、-c(o)or³、-nhc(o)r³、-c(o)nr³r⁴的取代基所取代；其中所述的烷氧基、烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基或雜芳基可進(jìn)一步的任選被一個(gè)或多個(gè)選自鹵素、羥基、氰基、胺基、-nr³r⁴、烷氧基、烷基、環(huán)烷基的取代基所取代；；

r³和r⁴各自獨(dú)立選自氫原子、烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基或雜芳基，其中所述的雜環(huán)基、芳基或雜芳基可進(jìn)一步的任選被一個(gè)或多個(gè)選自鹵素、羥基、氰基、胺基、烷氧基、烷基或環(huán)烷基的取代基所取代。

進(jìn)一步優(yōu)選，如式(ⅱ)結(jié)構(gòu)所述的化合物或其立體異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、前藥或藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物，其特征在于，該化合物優(yōu)選自：

其中：

r¹選自雜環(huán)基、芳基或雜芳基，所述的雜環(huán)基、芳基或雜芳基任選被一個(gè)或多個(gè)選自鹵素、羥基、氰基、硝基、胺基、-nr³r⁴、烷氧基、烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基、-c(o)or³、-oc(o)r³、-c(o)r³、-nhc(o)r³、-c(o)nr³r⁴的取代基所取代；所述的烷氧基、烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基或雜芳基任選被一個(gè)或多個(gè)選自鹵素、羥基、氰基、硝基、胺基、-nr³r⁴、烷氧基、烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基的取代基所取代；

式(ⅱ-1)結(jié)構(gòu)中，r²選自-c(o)or³、-cn、-c(o)nr³r⁴、雜環(huán)基、芳基或雜芳基，所述的雜環(huán)基、芳基或雜芳基任選被一個(gè)或多個(gè)選自鹵素、羥基、氰基、硝基、胺基、-nr³r⁴、烷氧基、烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基、-c(o)or³、-oc(o)r³、-c(o)r³、-nhc(o)r³、-c(o)nr³r⁴的取代基所取代；所述的烷氧基、烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基或雜芳基任選被一個(gè)或多個(gè)選自鹵素、羥基、氰基、硝基、胺基、-nr³r⁴、烷氧基、烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基的取代基所取代；

式(ⅱ-2)結(jié)構(gòu)中，r²選自雜芳基；所述的雜芳基任選被一個(gè)或多個(gè)選自鹵素、羥基、氰基、硝基、胺基、-nr³r⁴、烷氧基、烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基、-c(o)or³、-oc(o)r³、-c(o)r³、-nhc(o)r³、-c(o)nr³r⁴的取代基所取代；所述的烷氧基、烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基或雜芳基任選被一個(gè)或多個(gè)選自鹵素、羥基、氰基、硝基、胺基、-nr³r⁴、烷氧基、烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基的取代基所取代；

r³和r⁴各自獨(dú)立選自氫原子、烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基或雜芳基，所述的雜環(huán)基、芳基或雜芳基任選被一個(gè)或多個(gè)選自鹵素、羥基、氰基、硝基、胺基、烷氧基、烷基或環(huán)烷基的取代基所取代。

本發(fā)明涉及式(ⅰ)中任何一項(xiàng)化合物或其立體異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、前藥在藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物，其中藥學(xué)上可接受的鹽為所述化合物與無(wú)機(jī)酸/有機(jī)酸或無(wú)機(jī)堿/有機(jī)堿形成的常規(guī)無(wú)毒鹽，這些鹽可以為單鹽、二鹽、三鹽或者多鹽，由所述化合物所含的可成鹽官能團(tuán)所決定。其中如果所述式(ⅰ)化合物含有堿性官能團(tuán)，則可與硫酸、鹽酸、氫溴酸、磷酸、酒石酸、富馬酸、馬來(lái)酸、檸檬酸、乙酸、甲酸、甲磺酸、對(duì)甲苯磺酸、草酸或琥珀酸形成酸加成鹽，這些鹽可以根據(jù)常規(guī)化學(xué)方法從包含堿性官能團(tuán)的本發(fā)明化合物和相應(yīng)無(wú)機(jī)酸/有機(jī)酸反應(yīng)合成；如果所述式(ⅰ)化合物含有酸性官能團(tuán)，則可與堿性試劑形成穩(wěn)定的堿金屬鹽、堿土金屬鹽或任選取代的銨鹽，所述堿性試劑為例如氫氧化物、碳酸鹽、碳酸氫鹽、烷氧化物和氨或者有機(jī)堿，例如三甲基胺、三乙基胺、乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、氨丁三醇或其他堿性氨基酸，例如賴氨酸、鳥氨酸或精氨酸等；這些鹽可以根據(jù)常規(guī)化學(xué)方法從包含酸性官能團(tuán)的本發(fā)明化合物和相應(yīng)無(wú)機(jī)堿/有機(jī)堿反應(yīng)合成。

本發(fā)明還涉及所述化合物在藥學(xué)上可接受的溶劑化物，包括常規(guī)溶劑化物，例如本發(fā)明所述化合物在制備過(guò)程中由于溶劑存在而形成的溶劑化物，由水或者乙醇的存在形成的溶劑化物可以作為非限制性實(shí)例。

本發(fā)明的另一方面涉及所述式(ⅰ)結(jié)構(gòu)中任何一項(xiàng)化合物的異構(gòu)體，式(ⅰ)結(jié)構(gòu)所述化合物中存在一個(gè)或多個(gè)碳碳雙鍵，可能存在順反異構(gòu)體，沒有特殊說(shuō)明下本發(fā)明包含所有可能存在的順反異構(gòu)體或者不同比例異構(gòu)體組成的混合物；同時(shí)式(ⅰ)結(jié)構(gòu)所述化合物中還存在一個(gè)或多個(gè)手性中心，沒有特殊說(shuō)明下本發(fā)明包含所有理論上可能存在的消旋體、消旋體混合物、對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體及非對(duì)應(yīng)異構(gòu)體混合物。本發(fā)明中所述的化學(xué)結(jié)構(gòu)式、化學(xué)名稱包括所述化合物所有理論上可能存在的異構(gòu)體。

如果式(ⅰ)所述化合物以非對(duì)映異構(gòu)體或者對(duì)映異構(gòu)體的混合物形式存在或在所選合成中以其混合物形式得到，則式(ⅰ)所述化合物可按如下方法分離成光學(xué)純立體異構(gòu)體：在任選手性的載體物質(zhì)上進(jìn)行色譜分離，或如果外消旋化合物能夠形成鹽，則也可與作為助劑的光學(xué)活性堿或者光學(xué)活性酸形成的非對(duì)映異構(gòu)體鹽進(jìn)行分級(jí)結(jié)晶。對(duì)于非對(duì)映異構(gòu)體薄層色譜分離或者柱色譜的合適手性固定相的實(shí)例為改性硅膠載體(成為pirkle相)和高分子量烴例如三乙?；w維素。為了分離式(ⅰ)所述化合物中含有酸性基團(tuán)的外消旋體，與光學(xué)活性堿例如(-)-煙堿、(+)-和(-)-苯基乙基胺、奎寧堿、l-賴氨酸、l-精氨酸和d-精氨酸形成具有不同溶解度的非對(duì)映異構(gòu)體鹽，溶解度較小的組分以固體形式來(lái)分離，純的對(duì)映異構(gòu)體由以上方法得到的非對(duì)映異構(gòu)體鹽來(lái)得到。式(ⅰ)所述化合物中含有堿性基團(tuán)例如氨基的外消旋體可按上述方法用光學(xué)活性酸例如(+)-樟腦-10-磺酸、d-和l-酒石酸、d-和l-乳酸、d-和l-扁桃酸轉(zhuǎn)化成純的對(duì)映異構(gòu)體。

本發(fā)明的另一方面涉及式(ⅰ)所述化合物或其立體異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、前藥或藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物的同位素取代物，其中任何一個(gè)化合物中可以存在至少一個(gè)氫原子被氘原子取代或至少一個(gè)碳原子或氟原子被相應(yīng)的同位素取代。

本發(fā)明的另一方面涉及一種藥物組合物，其含有式(ⅰ)中任何一項(xiàng)化合物或其立體異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、前藥或藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物及可藥用的載體。

本發(fā)明的另一方面涉及式(ⅰ)中所述任何一項(xiàng)化合物或其立體異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、前藥或藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物，或藥物組合物在制備凝血酶受體拮抗劑的藥物中的用途。

本發(fā)明的另一方面涉及式(ⅰ)中所述任何一項(xiàng)化合物或其立體異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、前藥或藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物，或藥物組合物在制備凝血酶受體拮抗劑的藥物中的用途，其中凝血酶受體拮抗劑是par1受體拮抗劑。

本發(fā)明的另一方面涉及式(ⅰ)中所述任何一項(xiàng)化合物或其立體異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、前藥或藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物，或藥物組合物在制備血小板凝集抑制劑的藥物中的用途。

本發(fā)明的另一方面涉及式(ⅰ)中所述任何一項(xiàng)化合物或其立體異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、前藥或藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物，或藥物組合物在制備治療和/或預(yù)防與凝血酶受體有關(guān)疾病的藥物中的用途，其中所述的與凝血酶受體有關(guān)疾病選自動(dòng)脈和靜脈血栓癥、急性冠狀動(dòng)脈綜合征、再狹窄、穩(wěn)定型心絞痛、心律紊亂、心肌梗塞、高血壓、心衰竭、中風(fēng)、炎性疾病、肺栓塞癥等肺部疾病、胃腸疾病、風(fēng)濕、哮喘、慢性肝纖維化、腫瘤和皮膚病。

本發(fā)明的另一方面涉及式(ⅰ)中所述任何一項(xiàng)化合物或其立體異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、前藥或藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物，或藥物組合物和另外一種心血管類藥物的產(chǎn)品，作為組合產(chǎn)品同時(shí)、或分別用于心血管疾病治療，其中所述的另一類心血管類藥物是選自阿司匹林、氯吡格雷、噻氯匹啶、阿昔單抗、替羅非班或依替巴肽等抗血小板凝集藥物。

發(fā)明的詳述

除非有相反陳述，在說(shuō)明書和權(quán)利要求書中使用的術(shù)語(yǔ)具有下述含義。

“鹵素”指氟、氯、溴、碘。

“烷基”指飽和的脂肪族烴基團(tuán)，包括1至20個(gè)碳原子的直鏈和支鏈基團(tuán)。優(yōu)選含有1至12個(gè)碳原子的烷基，非限制性實(shí)施例包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1，1-二甲基丙基、1，2-二甲基丙基、2，2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1，1，2_三甲基丙基、1，1-二甲基丁基、1，2-二甲基丁基、2，2_二甲基丁基、1，3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2，3_二甲基丁基、正庚基、2-甲基己基、3-甲基己基、4-甲基己基、5-甲基己基、2，3-二甲基戊基、2，4_二甲基戊基、2，2-二甲基戊基、3，3-二甲基戊基、2-乙基戊基、3-乙基戊基、正辛基、2，3_二甲基己基、2，4_二甲基己基、2，5_二甲基己基、2，2_二甲基己基、3，3_二甲基己基、4，4_二甲基己基、2-乙基己基、3-乙基己基、4-乙基己基、2-甲基-2-乙基戊基、2-甲基-3-乙基戊基、正壬基、2-甲基-2-乙基己基、2-甲基-3-乙基己基、2，2-二乙基戊基、正癸基、3，3-二乙基己基、2，2-二乙基己基，及其各種支鏈異構(gòu)體等。更優(yōu)選的是含有1至6個(gè)碳原子的低級(jí)烷基，非限制性實(shí)施例包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1，1-二甲基丙基、1，2-二甲基丙基、2，2_二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1，1，2-三甲基丙基、1，1-二甲基丁基、1，2-二甲基丁基、2，2-二甲基丁基、1，3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2，3-二甲基丁基等。烷基可以是取代的或未取代的，當(dāng)被取代時(shí)，取代基可以在任何可使用的連接點(diǎn)上被取代，優(yōu)選為一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)，獨(dú)立地選自鹵素、羥基、氰基、硝基、胺基、-nr³r⁴、烷氧基、烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基。

“環(huán)烷基”指飽和或部分不飽和單環(huán)或多環(huán)環(huán)狀烴取代基，其包括3至20個(gè)碳原子，優(yōu)選包括3至12個(gè)碳原子，更優(yōu)選環(huán)烷基環(huán)包含3至10個(gè)碳原子。單環(huán)環(huán)烷基的非限制性實(shí)施例包含環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)戊烯基、環(huán)己基、環(huán)己烯基、環(huán)己二烯基、環(huán)庚基、環(huán)庚三烯基、環(huán)辛基等。多環(huán)環(huán)烷基包括螺環(huán)、稠環(huán)和橋環(huán)的環(huán)烷基。

“螺環(huán)烷基”指5至20元，單環(huán)之間共用一個(gè)碳原子(稱螺原子)的多環(huán)基團(tuán)，這些可以含有一個(gè)或多個(gè)雙鍵，但沒有一個(gè)環(huán)具有完全共軛的π電子系統(tǒng)。優(yōu)選為6至14元，更優(yōu)選為7至10元。根據(jù)環(huán)與環(huán)之間共用螺原子的數(shù)目將螺環(huán)烷基分為單螺環(huán)烷基、雙螺環(huán)烷基或多螺環(huán)烷基，優(yōu)選為單螺環(huán)烷基和雙螺環(huán)烷基。更優(yōu)選為4元/4元、4元/5元、4元/6元、5元/5元或5元/6元單螺環(huán)烷基。

“橋環(huán)烷基”指5至20元，任意兩個(gè)環(huán)共用兩個(gè)不直接連接的碳原子的全碳多環(huán)基團(tuán)，這些可以含有一個(gè)或多個(gè)雙鍵，但沒有一個(gè)環(huán)具有完全共軛的π電子系統(tǒng)。優(yōu)選為6至14元，更優(yōu)選為7至10元。根據(jù)組成環(huán)的數(shù)目可以分為雙環(huán)、三環(huán)、四環(huán)或多環(huán)橋環(huán)烷基，優(yōu)選為雙環(huán)、三環(huán)或四環(huán)，更優(yōu)選為雙環(huán)或三環(huán)。

所述環(huán)烷基環(huán)可以稠合于芳基、雜芳基或雜環(huán)烷基環(huán)上，其中與母體結(jié)構(gòu)連接在一起的環(huán)為環(huán)烷基，非限制性實(shí)施例包括茚滿基、四氫萘基、苯并環(huán)庚烷基等。環(huán)烷基可以是任選取代的或未取代的，當(dāng)被取代時(shí)，取代基優(yōu)選為一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)，獨(dú)立地選自鹵素、羥基、氰基、硝基、胺基、-nr³r⁴、烷氧基、烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基。

“雜環(huán)基”指飽和或部分不飽和單環(huán)或多環(huán)環(huán)狀烴取代基，其包括3至20個(gè)環(huán)原子，其中一個(gè)或多個(gè)環(huán)原子選自n、o或s(o)m(其中m是整數(shù)0至2)的雜原子，其余環(huán)原子為c。優(yōu)選包括3至12個(gè)環(huán)原子，其中1～4個(gè)是雜原子，更優(yōu)選環(huán)烷基環(huán)包含3至10個(gè)環(huán)原子。單環(huán)雜環(huán)基的非限制性實(shí)施例包含吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、嗎啉基、硫代嗎啉基、高哌嗪基等；多環(huán)雜環(huán)基包括螺環(huán)、稠環(huán)和橋環(huán)的雜環(huán)基。

“螺雜環(huán)基”指5至20元，單環(huán)之間共用一個(gè)原子(稱螺原子)的多環(huán)雜環(huán)基團(tuán)，其中一個(gè)或多個(gè)環(huán)原子選自n、o或s(o)m(其中m是整數(shù)0至2)的雜原子，其余環(huán)原子為c。這些可以含有一個(gè)或多個(gè)雙鍵，但沒有一個(gè)環(huán)具有完全共軛的π電子系統(tǒng)。優(yōu)選為6至14元，更優(yōu)選為7至10元。根據(jù)環(huán)與環(huán)之間共用螺原子的數(shù)目將螺雜環(huán)基分為單螺雜環(huán)基、雙螺雜環(huán)基或多螺雜環(huán)基，優(yōu)選為單螺雜環(huán)基和雙螺雜環(huán)基。更優(yōu)選為4元/4元、4元/5元、4元/6元、5元/5元或5元/6元單螺環(huán)烷基。

“稠雜環(huán)基”指5至20元，系統(tǒng)中的每個(gè)環(huán)與體系中的其他環(huán)共享毗鄰的一對(duì)原子的多環(huán)雜環(huán)基團(tuán)，一個(gè)或多個(gè)環(huán)可以含有一個(gè)或多個(gè)雙鍵，但沒有一個(gè)環(huán)具有完全共軛的π電子系統(tǒng)，其中一個(gè)或多個(gè)環(huán)原子選自n、o或s(o)m(其中m是整數(shù)0至2)的雜原子，其余環(huán)原子為c。優(yōu)選為6至14元，更優(yōu)選為7至10元。根據(jù)組成環(huán)的數(shù)目可以分為雙環(huán)、三環(huán)、四環(huán)或多環(huán)稠雜環(huán)烷基，優(yōu)選為雙環(huán)或三環(huán)，更優(yōu)選為5元/5元或5元/6元雙環(huán)稠雜環(huán)基。

“橋雜環(huán)基”指5至14元，任意兩個(gè)環(huán)共用兩個(gè)不直接連接的原子的多環(huán)雜環(huán)基團(tuán)，這些可以含有一個(gè)或多個(gè)雙鍵，但沒有一個(gè)環(huán)具有完全共軛的π電子系統(tǒng)，其中一個(gè)或多個(gè)環(huán)原子選自n、o或s(o)m(其中m是整數(shù)0至2)的雜原子，其余環(huán)原子為c。優(yōu)選為6至14元，更優(yōu)選為7至10元。根據(jù)組成環(huán)的數(shù)目可以分為雙環(huán)、三環(huán)、四環(huán)或多環(huán)橋雜環(huán)基，優(yōu)選為雙環(huán)、三環(huán)或四環(huán)，更優(yōu)選為雙環(huán)或三環(huán)。

所述雜環(huán)基環(huán)可以稠合于芳基、雜芳基或環(huán)烷基環(huán)上，其中與母體結(jié)構(gòu)連接在一起的環(huán)為雜環(huán)基；雜環(huán)基可以是任選取代的或未取代的，當(dāng)被取代時(shí)，取代基優(yōu)選為一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)，獨(dú)立地選自鹵素、羥基、氰基、硝基、胺基、-nr³r⁴、烷氧基、烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基。

“芳基”指6至14元全碳單環(huán)或稠合多環(huán)(也就是共享毗鄰碳原子對(duì)的環(huán))基團(tuán)，具有共軛的π電子體系的多環(huán)(即其帶有相鄰對(duì)碳原子的環(huán))基團(tuán)，優(yōu)選為6至10元，例如苯基和萘基。所述芳基環(huán)可以稠合于雜芳基、雜環(huán)基或環(huán)烷基環(huán)上，其中與母體結(jié)構(gòu)連接在一起的環(huán)為芳基環(huán)；芳基可以是取代的或未取代的，當(dāng)被取代時(shí)，取代基優(yōu)選為一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)，獨(dú)立地選自鹵素、羥基、氰基、硝基、胺基、-nr³r⁴、烷氧基、烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基。

“雜芳基”指包含1至4個(gè)雜原子，5至14個(gè)環(huán)原子的雜芳族體系，其中雜原子包括氧、硫和氮。優(yōu)選為6至10元，更優(yōu)選為是5元或6元，例如呋喃基、噻吩基、吡啶基、吡咯基、n-烷基吡咯基、嘧啶基、吡嗪基、咪唑基、四唑基等。所述雜芳基環(huán)可以稠合于芳基、雜環(huán)基或環(huán)烷基環(huán)上，其中與母體結(jié)構(gòu)連接在一起的環(huán)為雜芳基環(huán)；雜芳基可以是任選取代的或未取代的，當(dāng)被取代時(shí)，取代基優(yōu)選為一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)，獨(dú)立地選自鹵素、羥基、氰基、硝基、胺基、-nr³r⁴、烷氧基、烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基。

“烷氧基”指-o-(烷基)和-o-(未取代的環(huán)烷基)，其中烷基的定義如上所述。非限制性實(shí)施例包含甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、環(huán)丙氧基、環(huán)丁氧基、環(huán)戊氧基、環(huán)己氧基等。烷氧基可以是任選取代的或未取代的，當(dāng)被取代時(shí)，取代基優(yōu)選為一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)，獨(dú)立地選自為鹵素、羥基、氰基、硝基、胺基、-nr³r⁴、烷氧基、烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基。

“任選”或“任選地”意味著隨后所描述地事件或環(huán)境可以但不必須發(fā)生，該說(shuō)明包括該事件或環(huán)境發(fā)生或不發(fā)生地場(chǎng)合。例如，“任選被烷基取代的雜環(huán)基團(tuán)”意味著烷基可以但不必須存在，該說(shuō)明包括雜環(huán)基團(tuán)被烷基取代的情形和雜環(huán)基團(tuán)不被烷基取代的情形。

“藥物組合物”表示含有一種或多種本文所述化合物或其生理學(xué)上/可藥用的鹽或前體藥物與其他化學(xué)組分的混合物，以及其他組分例如生理學(xué)/可藥用的載體和賦形劑。藥物組合物的目的是促進(jìn)對(duì)生物體的給藥，利于活性成分的吸收進(jìn)而發(fā)揮生物活性。

本發(fā)明還包括，含有本發(fā)明化合物或其立體異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、前藥或藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物的藥物組合物。

本發(fā)明的藥物組合物，可以是任何可服用的藥物形式：如片劑、糖衣片劑、薄膜衣片劑、腸溶衣片劑、膠囊劑、硬膠囊劑、軟膠囊劑、口服液、口含劑、顆粒劑、沖劑、丸劑、散劑、膏劑、丹劑、混懸劑、粉劑、溶液劑、注射劑、栓劑、軟膏劑、硬膏劑、霜?jiǎng)?、噴霧劑、滴劑或貼劑。

本發(fā)明的藥物組合物，優(yōu)選的是單位劑量的藥物制劑形式。

本發(fā)明的藥物組合物，在制成藥劑時(shí)，單位劑量的藥劑可含有本發(fā)明的藥物活性物質(zhì)0.1-1000mg，其余為藥學(xué)上可接受的載體。藥學(xué)上可接受的載體以重量計(jì)可以是制劑總重量的0.01-99.99％。

本發(fā)明的組合物在使用時(shí)根據(jù)病人的情況確定用法用量，如一日1-3次。一次1-10片等。

優(yōu)選的，本發(fā)明的組合物為口服制劑或注射劑。

其中，所述口服制劑選自膠囊劑、片劑、滴丸、顆粒劑、濃縮丸、口服液和合劑中的一種。

其中，所述注射劑選自注射液、凍干粉針劑和水針劑中的一種。

本發(fā)明的藥物組合物，其口服給藥的制劑可含有常用的賦形劑，諸如粘合劑、填充劑、稀釋劑、壓片劑、潤(rùn)滑劑、崩解劑、著色劑、調(diào)味劑或濕潤(rùn)劑，必要時(shí)可對(duì)片劑進(jìn)行包衣。

適用的填充劑包括纖維素、甘露糖醇、乳糖或其它類似的填充劑。適宜的崩解劑包括淀粉、聚乙烯吡咯烷酮或淀粉衍生物，優(yōu)選羥基乙酸淀粉鈉。適宜的潤(rùn)滑劑為硬脂酸鎂。適宜的濕潤(rùn)劑為十二烷基硫酸鈉。

本發(fā)明的藥物組合物可通過(guò)混合，填充，壓片等常用的方法制備固體口服組合物。進(jìn)行反復(fù)混合可使活性物質(zhì)分布在整個(gè)使用大量填充劑的組合物中。

口服液體制劑的形式可以是水性或油性懸浮液、溶液、乳劑、糖漿劑或酏劑，也可以是一種在使用前可用水或其它適宜的載體復(fù)配的干燥產(chǎn)品。這種液體制劑可含有常規(guī)的添加劑，諸如懸浮劑，例如山梨醇、糖漿、甲基纖維素、明膠、羥乙基纖維素、羧甲基纖維素、硬脂酸鋁凝膠或氫化食用脂肪，乳化劑，例如卵磷脂、脫水山梨醇一油酸酯或阿拉伯膠；非水性載體(它們可以包括食用油)，例如杏仁油、分餾椰子油、諸如甘油酯的油性酯、丙二醇或乙醇；防腐劑，例如對(duì)羥基苯甲酯、對(duì)羥基苯甲酸丙酯或山梨酸，并且如果需要，可含有常規(guī)的香味劑或著色劑。

對(duì)于注射劑，制備的液體單位劑型含有本發(fā)明的活性物質(zhì)和無(wú)菌載體。根據(jù)載體和濃度，可以將此化合物懸浮或者溶解。溶液的制備通常是通過(guò)將活性物質(zhì)溶解在一種載體中，在將其裝入一種適宜的小瓶或安瓿前過(guò)濾消毒，然后密封。輔料例如一種局部麻醉劑、防腐劑和緩沖劑也可以溶解在這種載體中。為了提高其穩(wěn)定性，可在裝入小瓶以后將這種組合物冰凍，并在真空下將水除去。

本發(fā)明的藥物組合物，在制備成藥劑時(shí)可選擇性的加入適合的藥物可接受的載體，所述藥物可接受的載體選自如下的一種或幾種：甘露醇、山梨醇、焦亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、硫代硫酸鈉、鹽酸半胱氨酸、巰基乙酸、蛋氨酸、維生素c、edta二鈉、edta鈣鈉，一價(jià)堿金屬的碳酸鹽、醋酸鹽、磷酸鹽或其水溶液、鹽酸、醋酸、硫酸、磷酸、氨基酸、氯化鈉、氯化鉀、乳酸鈉、木糖醇、麥芽糖、葡萄糖、果糖、右旋糖苷、甘氨酸、淀粉、蔗糖、乳糖、甘露糖醇、硅衍生物、纖維素及其衍生物、藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯烷酮、甘油、土溫80、瓊脂、碳酸鈣、碳酸氫鈣、表面活性劑、聚乙二醇、環(huán)糊精、β－環(huán)糊精、磷脂類材料、高嶺土、滑石粉、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂等。

本發(fā)明的藥物劑型不完全局限于此，它可以制備成更多的劑型，如滴丸、緩釋制劑等任何可服用的藥物形式。

具體實(shí)施方式

下面通過(guò)具體的實(shí)施例進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，下述實(shí)施例中給出了代表性化合物的合成及相關(guān)結(jié)構(gòu)鑒定數(shù)據(jù)，其用于說(shuō)明本發(fā)明而不是對(duì)本發(fā)明的限制，根據(jù)本發(fā)明的實(shí)質(zhì)對(duì)本發(fā)明進(jìn)行的簡(jiǎn)單改進(jìn)都屬于本發(fā)明要求保護(hù)的范圍。

實(shí)施例1：n-[(1r,3ar,4ar,6r,8ar,9s,9as)-9-[(1e)-2-[5-(3-氟苯)-2-吡啶基]-乙烯基]十二氫-1-甲基-3-氧代萘并[2,3-c]呋喃-6-基]氨基乙酸(ι-1)

n-[(1r,3ar,4ar,6r,8ar,9s,9as)-9-[(1e)-2-[5-(3-fluorophenyl)-2-pyridinyl]ethenyl]dodecahydro-1-methyl-3-oxonaphtho[2,3-c]furan-6-yl]aminoaceticacid(ι-1)

第一步：

將化合物1a(30g,0.275mol)和吡啶(32g)加入到300mldcm中，氮?dú)獗Ｗo(hù)下降溫至0℃；滴加三氟甲磺酸酐(93g，0.33mol)，反應(yīng)體系升至室溫；1h后反應(yīng)體系倒入400ml水中，150ml二氯甲烷萃取，有機(jī)相用2n的稀鹽酸(100ml)洗一次，飽和食鹽水洗一次,干燥濃縮得棕色液體化合物1b(62g，收率93％)。

第二步：

將化合物1b(62g，0.257mol)、1c(43.2g，0.308mol)、碳酸鉀(106g，0.77mol)、pd(pph3)4依次加入到400ml甲苯中，氮?dú)庵脫Q3次，將體系溫度升至90℃，回流反應(yīng)6h；體系降至室溫后，倒入400ml水中,體系經(jīng)硅藻土過(guò)濾,濾液經(jīng)水洗一次,飽和食鹽水洗一次,干燥濃縮得145g棕色液體；粗品經(jīng)柱層析純化(pe:ea＝20：1)，濃縮得棕色液體化合物1d(42g，收率87％)。

第三步：

氮?dú)獗Ｗo(hù)下，將正丁基鋰滴加到-40℃的二異丙胺thf(280ml)溶液中，-30℃反應(yīng)1.5h；將1d(48g，0.256mol)溶于500mlthf中，氮?dú)獗Ｗo(hù)下，降溫至-60℃，將上述lda滴加到該體系中，-60℃保溫反應(yīng)1h；將1e(53g，0.308mol)滴加到體系中，-50℃反應(yīng)1.5h；將體系倒入1l的飽和氯化銨中，水相用乙酸乙酯(400ml×2)萃取，合并有機(jī)相，濃縮干得紅棕色液體，經(jīng)柱層析純化(dcm:meoh＝50:1)，得紅棕色液體化合物1f(38g，收率79.7％)。

第四步：

n2保護(hù)下，0℃，將lhmds的thf滴加到1f(600mg，1.8mmol)的thf(6ml)溶液中，加畢，保溫30min；將ti(i-opr)4的thf(1ml)滴加到體系中，反應(yīng)10min；將1g【合成方法見bioorganic&medicinalchemistryletters，20，2010，6676】(200mg，0.61mmol)的thf(1.5ml)滴加到體系中，然后恢復(fù)至室溫反應(yīng)3h；向體系中加入20ml飽和酒石酸鉀鈉的水溶液，乙酸乙酯萃取，干燥旋干有機(jī)相。后經(jīng)柱色譜純化得淡白色固體1h(130mg，收率22％)。

第五步：

室溫下將1h(0.8g，1.6mmol)溶于濃鹽酸中，升至120℃反應(yīng)3小時(shí)；旋干得化合物1i，并直接投入下一步。

第六步：

室溫下，n2保護(hù)，將tea加入到1i(200mg，0.43mmol)的meoh中，室溫反應(yīng)15min；向體系中加入乙醛酸水溶液(65mg，0.43mmol)，室溫反應(yīng)30min；向體系中加入nabh3cn(28mg，0.43mmol)，室溫反應(yīng)1h；向體系中加入少量的水-甲醇淬滅，直接濃縮旋干，薄層色譜制備(mecn:h2o＝5:1)，濃縮得淡黃色固體化合物i-1(50mg，收率24％)。

¹hnmr(dmso,400mhz):δ8.65(1h,s),7.95(1h,d,j＝6.0hz),7.48(1h,d,j＝8.0hz),7.40(2h,m),7.33(1h,d,j＝9.6hz),7.05(1h,s),6.55(2h,d,j＝3.6hz),4.74(1h,m),3.46(2h,m),3.21(1h,m),2.65(1h,m),2.35(2h,t,j＝1.6hz),2.03(2h,m),1.85(2h,m),1.30-1.18(12h,m),0.80(2h,m),0.77(2h,m)；

esi-ms:479.2[m+h]⁺

實(shí)施例2：n-[(1r,3ar,4ar,6r,8ar,9s,9as)-9-[(1e)-2-[5-(3-氟苯)-2-吡啶基]-乙烯基]十二氫-1-甲基-3-氧代萘并[2,3-c]呋喃-6-基]氨基乙腈(ι-2)

n-[(1r,3ar,4ar,6r,8ar,9s,9as)-9-[(1e)-2-[5-(3-fluorophenyl)-2-pyridinyl]ethenyl]dodecahydro-1-methyl-3-oxonaphtho[2,3-c]furan-6-yl]aminoacetonitrile(ι-2)

室溫下，將1i(0.39g，0.92mmol)、溴乙腈(0.14g，1.21mmol)、dipea(0.36g，2.78mmol)加入到乙腈中，氮?dú)獗Ｗo(hù)下40℃反應(yīng)5h；反應(yīng)體系中加入飽和100mlnahco3溶液，乙酸乙酯萃取，有機(jī)相濃縮干燥得0.185g粗產(chǎn)品；經(jīng)薄層色譜純化(dcm:meoh＝15:1)后得白色固體ⅰ-2(60mg，收率25％)。

¹hnmr(dmso,400mhz):δ8.78(1h,s),7.82(1h,d,j＝6.4hz),7.47(1h,m),7.37(1h,m),7.28(4h,m),7.10(1h,m),6.61-6.53(2h,m),4.75(1h,m),3.64(2h,m),2.73(2h,m),2.39(2h,m),2.01-1.91(4h,m),1.61-0.89(12h,m)；

esi-ms:460.2[m+h]⁺

實(shí)施例3：n-[(1r,3ar,4ar,6r,8ar,9s,9as)-9-[(1e)-2-[5-(3-氟苯)-2-吡啶基]-乙烯基]十二氫-1-甲基-3-氧代萘并[2,3-c]呋喃-6-基]-n-(4-甲基嘧啶基-2)-氨(ι-3)

n-[(1r,3ar,4ar,6r,8ar,9s,9as)-9-[(1e)-2-[5-(3-fluorophenyl)-2-pyridinyl]ethenyl]dodecahydro-1-methyl-3-oxonaphtho[2,3-c]furan-6-yl]-n-(4-methylpyrimidin-2-yl)amino(ι-3)

將1i(150mg，0.36mmol)、3a(92mg，0.71mmol)、dipea(1ml)加入至5mldmso中，n2保護(hù)下，加熱至150℃反應(yīng)10h；反應(yīng)體系降至室溫，加入20ml水析出固體，過(guò)濾，濾餅用水洗，得白色固體ι-3(40mg，收率21.9％)。

¹hnmr(dmso,400mhz):δ8.70(1h,s),8.04(1h,d,j＝4.0hz),7.74(1h,d,j＝11.2hz),7.37(1h,m),7.34(1h,m),7.28(1h,m),7.02(1h,m),6.55(2h,m),6.31(1h,d,j＝4.8hz),4.83(1h,d,j＝7.6hz),4.68(1h,m),3.82(1h,m),2.67(1h,m),2.53(1h,m),2.31(2h,m),2.22(3h,s),2.02(2h,m),1.88(2h,m),1.37(3h,s),1.24-0.80(8h,m)；

esi-ms:513.35[m+h]⁺

實(shí)施例4：n-[(1r,3ar,4ar,6r,8ar,9s,9as)-9-[(1e)-2-[5-(3-氟苯)-2-吡啶基]-乙烯基]十二氫-1-甲基-3-氧代萘并[2,3-c]呋喃-6-基]-n–(苯并惡唑基-2)-氨(ι-4)

n-[(1r,3ar,4ar,6r,8ar,9s,9as)-9-[(1e)-2-[5-(3-fluorophenyl)-2-pyridinyl]ethenyl]dodecahydro-1-methyl-3-oxonaphtho[2,3-c]furan-6-yl]-n-(benzo[d]oxazol-2-yl)amino(ι-4)

室溫下，將1i(110mg，0.26mmol)、4a(80mg，0.52mmol)、碳酸鉀(69mg，0.52mmol)加入至10mldmf中，n2保護(hù)下，加熱至100℃反應(yīng)10h；反應(yīng)體系降至室溫，加入20ml水，乙酸乙酯(20ml×2)萃取，合并有機(jī)相，干燥濃縮后經(jīng)高壓制備色譜純化得到白色固體ι-4(29mg，收率20.7％)。

¹hnmr(dmso,400mhz):δ8.82(1h,s),7.87(1h,d,j＝2.0hz),7.48(1h,s),7.47(2h,m),7.46-7.06(6h,m),6.63(2h,m),5.43(1h,d,j＝12.6hz),4.80(1h,d,j＝12.6hz),3.85(1h,m),2.76(1h,m),2.44(2h,d,j＝8.0hz),2.28(2h,m),2.02(3h,m),1.48(3h,s),1.36-1.01(7h,m)；

esi-ms:538.60[m+h]⁺

實(shí)施例5:n-[(1r,3ar,4ar,6r,8ar,9s,9as)-9-[(1e)-2-(3’-氟-1,1’-聯(lián)苯基)-4-乙烯基]十二氫-1-甲基-3-氧代萘并[2,3-c]呋喃-6-基]氨基甲酸乙酯(ι-5)

n-[(1r,3ar,4ar,6r,8ar,9s,9as)-9-[(1e)-2-[3'-fluoro-(1,1'-biphenyl)-4-yl]ethenyl]dodecahydro-1-methyl-3-oxonaphtho[2,3-c]furan-6-yl]carbamicacidethylester(ι-5)

第一步：

0℃下，將nah(139mg，2.7mmol)加入到5a(1.78g，2.7mmol)的10mlthf溶液中，繼續(xù)反應(yīng)1h；滴加1g(450mg，1.38mmol)的thf(10ml)溶液，升至室溫反應(yīng)2h；體系用飽和nh4cl水溶液淬滅，乙酸乙酯萃取，有機(jī)相干燥濃縮后得化合物5b直接用于下一步。

第二步：

室溫下，將5c(0.48g，3.4mmol)、pd(pph3)4(140mg，0.7mmol)加入到5b(0.66g，1.3mmol)的甲苯-etoh-na2co3水溶液(10ml-5ml-5ml)的混合液中，n2保護(hù)升溫到85℃過(guò)夜；向體系中加入50ml水，乙酸乙酯萃取，合并有機(jī)相，干燥濃縮后經(jīng)硅膠柱色譜純化得白色固體ⅰ-5(100mg，收率15.6％)。

¹hnmr(dmso,400mhz):δ8.65(1h,s),7.54(2h,d,j＝8.0hz),7.40(4h,m),7.27(1h,d,j＝10.8hz),7.04(1h,s),6.47(1h,d,j＝16.0hz),5.95(1h,m),4.72(1h,d,j＝4.0hz),4.55(1h,m),4.10(2h,m),3.56(1h,m),2.70(1h,m),2.37(2h,m),2.04(2h,m),1.90(2h,m),1.44(3h,s),1.27(6h,m),0.97(2h,m),0.91(2h,m)；

esi-ms:492.20[m+h]⁺

實(shí)施例6：n-[(1r,3ar,4ar,6r,8ar,9s,9as)-9-[(1e)-4-(2-吡啶基)-苯乙烯基]十二氫-1-甲基-3-氧代萘并[2,3-c]呋喃-6-基]氨基甲酸乙酯(ι-6)

n-[(1r,3ar,4ar,6r,8ar,9s,9as)-9-[(1e)-2-[4-(pyridin-2-yl)-phenyl]ethenyl]dodecahydro-1-methyl-3-oxonaphtho[2,3-c]furan-6-yl]carbamicacidethylester(ι-6)

0℃下，ar保護(hù)，將n-buli滴加到6a(590mg，1.9mmol)的thf(6ml)溶液中,并在0℃下反應(yīng)30min；向體系滴加1g(250mg，0.77mmol)的thf(6ml)溶液，反應(yīng)1h；飽和nh4cl水溶液淬滅反應(yīng)，乙酸乙酯萃取，有機(jī)相濃縮干燥后經(jīng)硅膠柱色譜純化(pe:ea＝1:2)得白色固體ⅰ-6(140mg，收率38.2％)。

¹hnmr(dmso,400mhz):δ8.69(1h,s),7.98(2h,d,j＝6.8hz),7.75(2h,d,j＝8.6hz),7.44(2h,d,j＝6.8hz),7.25(1h,d,j＝7.6hz),6.48(1h,d,j＝7.6hz),5.97(1h,m),4.73(1h,m),4.5(1h,m),4.10(2h,d,j＝6.0hz),3.50(1h,m),2.69(1h,m),2.39(2h,m),2.04(2h,m),1.93(2h,m),1.43(3h,s),1.23(6h,m),1.07(2h,m),0.92(2h,m)；

esi-ms:475.25[m+h]⁺

生物測(cè)試實(shí)施例1：鈣離子轉(zhuǎn)運(yùn)抑制實(shí)驗(yàn)

下面所述的模型表明本發(fā)明所述化合物是par-1受體抑制劑。在各種細(xì)胞類型中，通過(guò)選擇性par-1激動(dòng)劑激活par-1受體觸發(fā)細(xì)胞內(nèi)信號(hào)通路導(dǎo)致內(nèi)質(zhì)網(wǎng)釋放鈣離子。在表達(dá)人類par1的knrk細(xì)胞系中，使用鈣離子選擇性探針通過(guò)熒光技術(shù)測(cè)定通過(guò)sfllr激活的對(duì)受體里的鈣釋放。熒光的發(fā)射強(qiáng)度與par-1拮抗劑的活性和濃度成正比。該方法可以測(cè)定本發(fā)明化合物對(duì)par-1介導(dǎo)的鈣離子轉(zhuǎn)運(yùn)的影響。

一、實(shí)驗(yàn)材料：

試劑：hbss緩沖液，hepes，probenecid，bsa，calcium4dye購(gòu)自invitrogen。tfllr-nh2，sch-79797等試劑由法國(guó)serep公司提供。

細(xì)胞系：穩(wěn)定表達(dá)人類par1的knrk細(xì)胞系。

熒光顯微鏡：celllux(perkinelmer)。

化合物ⅰ-1～ⅰ-6：由天士力制藥集團(tuán)股份有限公司研究院提供。

緩沖液與原液配制：

assaybuffer：1×hbss緩沖液，配制成含20mmhepes，2.5mmprobenecid，0.1％bsa，ph＝7.4(probenecid與bsa需要新鮮配制)的緩沖液；

loadingbuffer：1×hbss緩沖液，配制成含20mmhepes，2.5mmprobenecid，0.1％bsa，ph＝7.4(probenecid與bsa需要新鮮配制)，2μmcalcium4dye的緩沖液；

化合物原液(5×cpd)：首先用100％dmso溶解化合物，使化合物終濃度為10mm。實(shí)驗(yàn)時(shí)，將上述原液用assaybuffer配制成5倍濃度溶液備用；

6×tfllr-nh2：用assaybuffer將hatrap稀釋成終濃度為30um備用。

反應(yīng)終體積：20ulloadingbuffer，5ul5×cpd，5ul6×tfllr-nh2(hatrap，終濃度為5um)。

二、實(shí)驗(yàn)步驟：

1、預(yù)先用1倍matrigel處理無(wú)菌384孔板，37℃放置15-30min；

2、將上述處理好的無(wú)菌384孔板的每孔中加入2×10⁴個(gè)穩(wěn)定表達(dá)人類par1的knrk細(xì)胞，細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時(shí)；

3、將384孔板中的細(xì)胞培養(yǎng)液去除，加入20ul含calcium4dye的loadingbuffer；

4、在培養(yǎng)箱中避光培養(yǎng)60min；

5、然后再培養(yǎng)孔中加入5ul5倍化合物原液(dmso的終濃度為1％)，繼續(xù)培養(yǎng)15min，然后加入5ul6倍tfllr-nh2，在熒光顯微鏡下記錄熒光強(qiáng)度100秒。

6、實(shí)驗(yàn)結(jié)果中抑制劑活性表示為抑制劑在不同濃度下的熒光強(qiáng)度占空白對(duì)照hatrap激發(fā)熒光強(qiáng)度的百分比。測(cè)試化合物對(duì)par-1的抑制率按以下公式計(jì)算：ir＝(fnc-ftc)/fnc％

fnc:陰性對(duì)照組孔的熒光強(qiáng)度

ftc:測(cè)試化合物孔的熒光強(qiáng)度

在10μm濃度下，鈣信號(hào)拮抗作用>60％，本發(fā)明的衍生物被鑒定為par-1受體拮抗劑。

7、測(cè)試化合物的半數(shù)抑制濃度ic50可以通過(guò)不同濃度下的抑制率計(jì)算得出。

三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果：

本發(fā)明化合物不同濃度下對(duì)par-1受體的抑制率如下：

本發(fā)明化合物的半數(shù)抑制濃度ic50測(cè)定如下：

結(jié)論：本發(fā)明測(cè)試化合物對(duì)par-1介導(dǎo)的鈣離子轉(zhuǎn)運(yùn)具有明顯的抑制作用，鈣信號(hào)拮抗作用ic50在0.18～2.1μm范圍內(nèi)，活性優(yōu)于或近似于上市藥物sch530348，本發(fā)明所述化合物被鑒定為par-1受體拮抗劑。

生物測(cè)試實(shí)施例2：本發(fā)明化合物的藥代動(dòng)力學(xué)測(cè)試

研究本發(fā)明實(shí)施例ⅰ-2、ⅰ-3、ⅰ-6化合物不同時(shí)刻血漿及腦組織中的藥物濃度，研究本發(fā)明化合物在大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)行為，評(píng)價(jià)其藥動(dòng)學(xué)特征。

1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

健康成年sd大鼠8只，雌雄各半，平均分成4組。購(gòu)買于北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司。

2.給藥劑量

本研究為單劑量給藥實(shí)驗(yàn)。8只sd大鼠雌雄各半，平均分成4組，每組2只，分別為sch530348組、ⅰ-2組、ⅰ-3組、ⅰ-6組。給藥前禁食12h。給藥劑量為5mg/kg。

3.藥物配制

稱取適量藥物，加入0.5％羧甲基纖維素鈉研磨至樣品均勻混懸，樣品濃度為2.0mg/ml，臨用時(shí)配制。

4.采血方案

大鼠給藥后0min，5min，15min，25min，40min，1h，2h，4h，8h,12h，24h眼眶取血0.5ml，于4500rpm離心10分鐘取血漿。-20℃冰箱保存。

5.樣品制備

取血漿樣品50ul,加入20ul1ug/ml的地西泮內(nèi)標(biāo)溶液，再加入10ul甲醇，400ul的乙酸乙酯，充分渦旋3min后，17000r/min離心10min,取上清300ul，氮吹吹干后，用100ul的甲醇：水＝1:1復(fù)溶，充分渦旋1min后直接進(jìn)樣進(jìn)行l(wèi)c-ms分析。

本發(fā)明化合物的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)如下表：

結(jié)論：本發(fā)明化合物ⅰ-2和ⅰ-6化合物在體內(nèi)的半衰期和血藥濃度均優(yōu)于已上市藥物sch530348，并且ⅰ-2和ⅰ-6化合物在腦組織/血漿中的藥物濃度比值要遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于sch530348，提示本發(fā)明化合物ⅰ-2和ⅰ-6穿越血腦屏障能力更弱，腦出血的風(fēng)險(xiǎn)可能會(huì)大大減小，具有更好的臨床應(yīng)用前景。