本發(fā)明涉及醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及一種苯并噁唑類藥物。

背景技術(shù)：

腫瘤是細(xì)胞異常表達(dá)的產(chǎn)物,它分為良性和惡性腫瘤。目前，惡性腫瘤已經(jīng)成為威脅人類健康的一大殺手。近年來，全球患癌癥人數(shù)急劇增長，預(yù)計(jì)2025年全世界因癌癥死亡人數(shù)可能增至1900萬。傳統(tǒng)的腫瘤治療方法都有不同程度的毒副反應(yīng)，有時(shí)還會(huì)產(chǎn)生耐受性以及出現(xiàn)并發(fā)癥，很難從根本上治療腫瘤。

癌癥致死的主要原因之一是癌癥晚期腫瘤細(xì)胞會(huì)發(fā)生轉(zhuǎn)移。目前認(rèn)為腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移主要以三種形式：第一，腫瘤細(xì)胞浸入血管內(nèi)壁，形成轉(zhuǎn)移灶；第二，通過淋巴循環(huán)系統(tǒng)，進(jìn)而進(jìn)入淋巴-血液循環(huán)系統(tǒng)形成轉(zhuǎn)移灶；第三，直接從腫瘤母體脫落，進(jìn)入周邊組織。

腫瘤的生長分為無血管的緩慢生長期和有血管的快速增殖期。腫瘤需要新生血管供應(yīng)營養(yǎng)才能高速增殖，如果沒有新生血管，原生腫瘤一般不會(huì)超過1-2mm，一旦有新生血管生成，腫瘤細(xì)胞將會(huì)發(fā)生轉(zhuǎn)移，繼而導(dǎo)致患者死亡。

血管內(nèi)皮生長因子(vegf)，也稱通透性因子(vpf)，它是促進(jìn)血管生成眾多介導(dǎo)因子中最為重要的生長因子。它不僅在胚胎形成、細(xì)胞遷移和血管新生的過程中起至關(guān)重要的調(diào)節(jié)作用，而且對(duì)血管生長有很強(qiáng)的誘導(dǎo)作用。腫瘤細(xì)胞分泌出的vegf需要通過與血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體(vegfr)結(jié)合，才能使血管產(chǎn)生一系列的刺激作用，而血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體2(vegfr-2)是vegf的最主要受體，也是血管新生最主要的介導(dǎo)因子。vegfr-2與vegf結(jié)合的時(shí)候顯示出很強(qiáng)的酪氨酸激酶的活性，引起內(nèi)皮細(xì)胞增殖與轉(zhuǎn)移，誘導(dǎo)血管向腫瘤實(shí)體生長，進(jìn)入腫瘤細(xì)胞的吸氧范圍，最終形成包裹著腫瘤實(shí)體的毛細(xì)血管網(wǎng)絡(luò)，從而為腫瘤生長提供優(yōu)越的生長環(huán)境并最終致使腫瘤轉(zhuǎn)移。由此可見，血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖依賴于vegfr-2，切斷vegfr-2與下游蛋白的信號(hào)傳導(dǎo)能夠有效地抑制血管新生。目前研究已表明在腫瘤細(xì)胞中vegfr-2的異常表達(dá)和腫瘤的生長、遷移都有關(guān)，所以阻斷vegf/vegfr-2信號(hào)通路可以有效的干擾實(shí)體腫瘤血管的新生，導(dǎo)致生長中的腫瘤細(xì)胞所需要的血液流動(dòng)緩慢，甚至使腫瘤細(xì)胞因缺少營養(yǎng)而停止增長。因此，vegfr-2激酶便成為抗腫瘤血管新生治療中較為理想的靶點(diǎn)。

目前,vegfr-2信號(hào)途徑的小分子抑制劑，第一代是索拉菲尼(sorafenib)和舒尼替尼(sunitinib)，此外還有阿西替尼(axitinib)、帕唑帕尼(pazopanib)等的小分子抑制劑已上市，還有至少100個(gè)的候選小分子藥物正在進(jìn)行不同階段的臨床試驗(yàn)。尋找新型化學(xué)結(jié)構(gòu)，抑制vegfr-2的藥物先導(dǎo)化合物是目前世界各大制藥公司及科研院所的熱門課題。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明目的是提供一種新的具有抑制血管內(nèi)皮生長因子受體信號(hào)傳導(dǎo)作用的新化合物。

為實(shí)現(xiàn)以上目的，本發(fā)明通過以下技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn)。

一種具有抑制血管內(nèi)皮生長因子受體信號(hào)傳導(dǎo)的化合物，其特征在于該化合物為2-芳基苯并噁唑芳酰胺化合物，具有如下結(jié)構(gòu)：

其中r1，r2，r3，r4，r5，r6選擇h，me，ome，f，cl，br中的任意一種為其取代基；

n＝0或1。

優(yōu)選的，上述2-芳基苯并噁唑芳酰胺化合物有以下37種結(jié)構(gòu)，具體如下表2。

表2

上表中，序號(hào)為優(yōu)選化學(xué)結(jié)構(gòu)式的編號(hào)，表中r1，r2，r3，r4，r5，r6所對(duì)應(yīng)的為該化學(xué)結(jié)構(gòu)式所選擇的取代基。

本發(fā)明化合物的合成反應(yīng)如下所示：

具體包括以下步驟：

(1)2-芳基苯并噁唑(化合物3)的合成。將2,4二氨基苯酚(化合物1)和取代苯甲酸(化合物2)溶于多聚磷酸(ppa)中，攪拌加熱至170℃反應(yīng)12h，tlc檢測原料反應(yīng)完畢，停止攪拌，用濃koh溶液中和至中性，有黑褐色的沉淀生成，抽濾得到黑褐色的固體。黑褐色固體溶解于50ml乙酸乙酯中，分別用水50×2ml和食鹽水50ml洗滌。有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥后，用硅膠柱層析分離得黃色或者淡黃色棉花狀2-芳基苯并噁唑(化合物3)。

(2)目標(biāo)產(chǎn)物制備。在50ml圓底燒瓶中，加入取代苯甲酸或取代苯乙酸(化合物4)，溶于n,n-二甲基甲酰胺(dmf)中，再依次加入hobt、edci和tea，然后在常溫下磁力攪拌器攪拌10min左右，再加入用dmf溶解的2-苯基苯并噁唑(化合物3)，常溫?cái)嚢瑁磻?yīng)2-4h，tlc檢測原料反應(yīng)完畢，停止攪拌，加入乙酸乙酯萃取，用稀鹽酸洗滌2次，有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥，用硅膠柱層析分離可得到得黃色、白色固體目標(biāo)產(chǎn)物。

本發(fā)明的化合物用于抗腫瘤藥物，所述腫瘤包括但不限于結(jié)腸癌、十二指腸癌、前列腺癌、乳腺癌、黑素瘤、導(dǎo)管癌、肝癌、胰腺癌、腎癌、子宮內(nèi)膜癌、胃癌、非小細(xì)胞肺癌、神經(jīng)惡性腫瘤和血液惡性腫瘤。

本發(fā)明2-芳基苯并噁唑芳酰胺的新化合物展示有非常高的抑制腫瘤細(xì)胞生長的活性，尤其對(duì)于血管表皮生長因子受體2亞型高表達(dá)的人結(jié)腸癌細(xì)胞的生長具有顯著的抑制效果，其ic50值能達(dá)到7.6μm左右，而且在雞胚尿囊膜模型中具有良好的抗血管生成活性，具有較好的抗vegf刺激huvec后細(xì)胞增殖的能力以及抗vegf刺激huvec后增殖的特異性。具體實(shí)施情況如下。

1、對(duì)上述37種化合物(表2中的5-1至5-37化合物)中的部分化合物體外細(xì)胞水平的抗hct116、sw480、mda-mb-231進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

以srb染色法檢測細(xì)胞活力，觀察樣品對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖的影響，以評(píng)價(jià)樣品的抗腫瘤效果。采用的陽性參照化合物為舒尼替尼(sunitinib)和索拉菲尼(sorafenib)。

細(xì)胞需要接種于96孔板，過夜培養(yǎng)，加入樣品(t)，同時(shí)做不加對(duì)照樣(c)和加藥前對(duì)照(t0)。加藥前對(duì)照(t0)的細(xì)胞加入tca進(jìn)行固定，保留備用。

添加樣本(t)和無對(duì)照樣品(c)的細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng)48小時(shí)后再固定。全部固定好的細(xì)胞以srb染液染色，再用醋酸溶液洗去游離的染料，空氣干燥后加入tris堿，振蕩溶解混勻后490nm測定od值。依據(jù)od值計(jì)算生長率，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表1。

如果t≥t0，生長率＝(t-t0)/(c-t0)×100％；如果t＜t0，(t-t0)/t0×100。初篩時(shí)每一個(gè)樣品單濃度設(shè)雙復(fù)孔，重復(fù)兩次，生長抑制率大于50％的樣品測定ic50值，測定時(shí)每個(gè)樣品梯度稀釋五個(gè)濃度，每個(gè)濃度設(shè)雙復(fù)孔。

tabel1.化合物對(duì)細(xì)胞株抑制活性ic50(μg/ml)

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：這類2-芳基苯并噁唑酰胺類化合物是一類具有較好活性的腫瘤生長抑制劑，對(duì)sw480的抑制活性較為明顯。

2、進(jìn)行雞胚法篩選抗血管生成化合物實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)步驟如下：

(1)制備瓊脂糖顆粒。首先，受試樣品溶解于分析純的dmso中備用，然后在79℃時(shí)，把備用液與2％的瓊脂糖溶液混合制成10μl的瓊脂糖顆粒(質(zhì)量為5-100μg)。

(2)受精雞蛋的培養(yǎng)。在溫度為37.5℃和相對(duì)濕度為62％的自動(dòng)孵化的培養(yǎng)箱里培養(yǎng)受精雞蛋。培養(yǎng)70h和移除8ml的雞蛋白后，在雞蛋殼上打開一個(gè)小口，可以在蛋殼上發(fā)現(xiàn)正在生長的萌發(fā)層。然后，用透明的膠帶把這個(gè)小口封閉后，受精雞蛋又被送回到相對(duì)濕度為90％不轉(zhuǎn)向的培養(yǎng)箱里。

(3)抗血管生成實(shí)驗(yàn)。培養(yǎng)75h后，把瓊脂糖顆粒放置在血管區(qū)域，24h后，可以抓獲樣品處理區(qū)的抗血管生成的圖片。

(4)把得到的圖片與陽性對(duì)照樣的抑制圖片進(jìn)行對(duì)比，血管較細(xì)與對(duì)照樣相似的被看做是有積極的抑制活性。

由結(jié)果圖可見，本發(fā)明化合物具有較好的抑制血管生成活性。

雞胚實(shí)驗(yàn)顯示，這些化合物對(duì)雞胚的新生血管的生成有明顯的抑制效果，這類2-芳基苯并噁唑類化合物是一類高活性的新結(jié)構(gòu)的腫瘤生長抑制劑。

附圖說明

圖1是本發(fā)明的分子結(jié)構(gòu)圖。

圖2是對(duì)化合物5-12至5-37及生理鹽水、陽性對(duì)照藥索拉菲尼、蘇尼替尼的抗雞胚新生血管生成作用的對(duì)照圖；

其中，化合物庫用量20nmol/蛋。

具體實(shí)施方式

為使本發(fā)明實(shí)施例的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點(diǎn)更加清楚，下面將結(jié)合本發(fā)明實(shí)施例對(duì)本發(fā)明技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實(shí)施例是本發(fā)明一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例?；诒景l(fā)明中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有作出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其他實(shí)施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。

實(shí)施例1：制備上述表2中化合物5-3，即3-溴-4-氯-n-(2-苯基-5-苯并噁唑基)苯甲酰胺的制備。

所述3-溴-4-氯-n-(2-苯基-5-苯并噁唑基)苯甲酰胺，具有如下的化學(xué)結(jié)構(gòu)式：

所述的化合物5-3制備方法如下：

選用1mmol取代苯甲酸或取代苯乙酸4，加入20ml圓底燒瓶中，取20ml的dmf溶解，再依次加入1.5mmol的hobt、1.5mmol的edci、2mmol的tea三乙胺，然后用常溫磁力攪拌器攪拌10min左右，再加入用dmf溶解的取代2-苯基苯并噁唑3，常溫?cái)嚢?，反?yīng)2-4h，tlc檢測原料反應(yīng)完畢，停止攪拌，加入乙酸乙酯15ml萃取，再用稀鹽酸50ml洗2次，有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥30min，用硅膠柱層析(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)分離可得到得黃白色固體產(chǎn)物即為本實(shí)施例的化合物5-3。

核磁譜圖數(shù)據(jù)為：黃色固體；mp207.8–209.7℃；ir(kbr):3370,3269,3072,2913,1642,1540,1475,1422,702,617；¹hnmr(500mhz,dmso-d6):δ＝7.59-7.64(m,3h,arh),7.72-7.80(m,3h,arh),7.99-8.01(m,1h,arh),8.18-8.19(d,j＝6.40hz,2h,arh),8.26(s,1h,arh),8.36-8.37(d,j＝1.65hz,1h,arh),10.55(s,1h,nh)；¹³cnmr(125mhz,dmso-d6):δ＝110.99,111.82,119.21,121.99,127.62,128.98,128.98,129.66,130.91,130.91,132.31,133.12,135.42,136.27,142.00,147.19,163.44；hrms(tofes⁺):m/zcalcdforc20h12brcln2o2[m+na]⁺,448.9650；found,448.9663.

實(shí)施例2：制備上述表2中化合物5-1，即4-溴-3-氟-n-2-(2-苯基苯并噁唑-5-基)苯甲酰胺的制備。制備方法如實(shí)施例1，具有如下的化學(xué)結(jié)構(gòu)式：

核磁譜圖數(shù)據(jù)為：黃色固體；mp227.9–229.9℃；ir(kbr):3334,3064,1650,1544,1483,1279,1046,870,764,690；¹hnmr(500mhz,dmso-d6):δ＝7.58-7.61(d,j＝7.20hz,3h,arh),7.73-7.96(m,5h,arh),8.16-8.18(d,j＝7.15hz,2h,arh),8.27(s,1h,arh),10.53(s,1h,arh)；¹³cnmr(125mhz,dmso-d6):δ＝110.91,111.80,116.08,116.27,119.17,125.63,126.74,127.58,127.58,129.59,129.59,132.24,133.99,136.26,136.64,141.96,147.18,157.45,159.40；hrms(tofes⁺):m/zcalcdforc20h12brfn2o2[m+na]⁺,432.9952；found,432.9958.

實(shí)施例3：制備上述表2中化合物5-2，即4-氯-3-氟-n-2-(2-苯基苯并噁唑-5-基)苯甲酰胺的制備。制備方法如實(shí)施例1，具有如下的化學(xué)結(jié)構(gòu)式：

核磁譜圖數(shù)據(jù)為：黃色固體；mp216.9–218.5℃；ir(kbr):3346,3064,1654,1548,1479,1426,1058,812,694,637；¹hnmr(500mhz,dmso-d6):δ＝7.60-7.62(d,j＝6.95hz,3h,arh),7.75-7.89(m,4h,arh),7.99-8.02(d,j＝10.00hz,1h,arh),8.17-8.20(d,j＝7.20hz,2h,arh),8.27(m,1h,arh)；¹³cnmr(125mhz,dmso-d6):δ＝110.97,111.86,116.35,116.53,119.25,125.38,126.74,127.61,127.61,129.63,129.63,131.13,132.29,135.99,136.26,141.97,147.21,163.37,163.60；hrms(tofes⁺):m/zcalcdforc20h12clfn2o2[m+na]⁺,389.0466；found,389.0464.

實(shí)施例4：制備上述表2中化合物5-4，即2-(3,4-二甲氧基苯基)-n-2-(2-苯基苯并噁唑-5-基)乙酰胺的制備。制備方法如實(shí)施例1，具有如下的化學(xué)結(jié)構(gòu)式：

核磁譜圖數(shù)據(jù)為：白色固體；mp170.1–170.6℃；ir(kbr):3269,3060,2991,2835,1650,1520,1471,1266,1152,1021,796,702,604；¹hnmr(500mhz,dmso-d6):δ＝3.61(s,2h,ch2),3.73(s,3h,och3),3.76(s,3h,och3),6.90-7.00(m,3h,arh),7.55-7.72(m,5h,arh),8.16-8.18(m,3h,arh),10.33(s,1h,nh)；¹³cnmr(125mhz,dmso-d6):δ＝43.30,55.88,55.88,110.30,111.05,112.24,113.48,117.90,121.51,126.77,127.58,127.58,128.67,129.62,129.62,132.25,136.91,142.04,146.67,148.04,148.94,163.28,169.81；hrms(tofes⁺):m/zcalcdforc23h20n2o4[m+na]⁺,411.1312；found,411.1315.

實(shí)施例5：制備上述表2中化合物5-5，即n-(2-苯基苯并噁唑-5-基)-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)乙酰胺的制備。制備方法如實(shí)施例1，具有如下的化學(xué)結(jié)構(gòu)式：

核磁譜圖數(shù)據(jù)為：白色固體；mp175.7–177.6℃；ir(kbr):3252,3056,2987,2933,2835,1642,1593,1540,1467,1328,1242,1127,1005,792,698,604；¹hnmr(500mhz,dmso-d6):δ＝3.62(s,2h,ch2),3.64(s,3h,och3),3.78(s,6h,och3),6.50-6.90(s,2h,arh),7.55-7.73(m,5h,arh),8.17-8.19(m,3h,arh),10.34(s,1h,nh)；¹³cnmr(125mhz,dmso-d6):δ＝43.95,56.20,56.20,60.33,106.93,106.93,110.34,111.08,117.94,126.77,127.59,127.59,129.60,129.60,131.83,132.29,136.66,136.86,142.04,146.70,153.08,163.29,169.48；hrms(tofes⁺):m/zcalcdforc25h22n2o5[m+na]⁺,441.1418；found,441.1421.

實(shí)施例6：制備上述表2中化合物5-6，即4-溴-n-(2-(4-氯苯基苯并噁唑-5-基)-3-氟苯甲酰胺的制備。制備方法如實(shí)施例1，具有如下的化學(xué)結(jié)構(gòu)式：

核磁譜圖數(shù)據(jù)為：黃色固體；mp261.0–262.3℃；ir(kbr):3346,3068,1654,1544,1479,1099,821,731,637,498；¹hnmr(500mhz,dmso-d6):δ＝7.51-8.27(m,10h,arh),10.43-10.48(d,1h,nh)；¹³cnmr(125mhz,dmso-d6):δ＝110.81,111.83,116.03,116.23,119.30,125.52,128.68,129.18,129.64,129.90,133.88,136.30,137.10,141.90,147.19,157.46,159.42,162.34,163.56；hrms(tofes⁺):m/zcalcdforc20h11brclfn2o2[m+na]⁺,466.9567；found,466.9569.

實(shí)施例7：制備上述表2中化合物5-7，即4-氯-n-(2-(4-氯苯基苯并噁唑-5-基)-3-氟苯甲酰胺的制備。制備方法如實(shí)施例1，具有如下的化學(xué)結(jié)構(gòu)式：

核磁譜圖數(shù)據(jù)為：黃色固體；mp250.2–250.7℃；ir(kbr):3350,1654,1544,1479,1099,817,739；¹hnmr(500mhz,dmso-d6):δ＝7.60-7.67(m,3h,arh),7.75(s,3h,arh),7.87-8.28(m,5h,arh),10.50(s,1h,nh)；¹³cnmr(125mhz,dmso-d6):δ＝110.90,111.93,116.32,116.50,119.43,125.28,125.65,128.73,129.26,129.53,129.53,129.73,129.73,129.92,131.05,136.33,136.60,137.16,141.96,147.27,158.36,162.42,163.56；hrms(tofes⁺):m/zcalcdforc20h11cl2fn2o2[m+h]⁺,401.0256；found,401.0254.

實(shí)施例8：制備上述表2中化合物5-8，即3-溴-4-氯-n-(2-(4-氯苯基苯并噁唑-5-基)苯甲酰胺的制備。制備方法如實(shí)施例1，具有如下的化學(xué)結(jié)構(gòu)式：

核磁譜圖數(shù)據(jù)為：黃色固體；mp237.2–238.1℃；ir(kbr):3260,3072,2917,1642,1536,1471,829,727；¹hnmr(500mhz,dmso-d6):δ＝7.65-7.74(m,5h,arh),7.98-8.00(d,j＝8.80hz,1h,arh),8.16-8.18(d,j＝6.70hz,2h,arh),8.25(s,1h,arh),8.35(s,1h,arh),10.52(s,1h,nh)；¹³cnmr(125mhz,dmso-d6):δ＝111.04,111.81,119.40,121.98,125.59,128.96,129.33,129.33,129.80,129.80,130.91,133.11,135.40,136.37,136.81,137.08,141.88,147.21,162.41,163.43,hrms(toses⁺):m/zcalcdforc20h11brcl2n2o2[m+h]⁺,460.9452；found,460.9454.

實(shí)施例9：制備上述表2中化合物5-9，即n-(2-(4-氯苯基苯并噁唑-5-基)-2-(3,4,-二甲氧基苯基)乙酰胺的制備。制備方法如實(shí)施例1，具有如下的化學(xué)結(jié)構(gòu)式：

核磁譜圖數(shù)據(jù)為：白色固體；mp188.6–190.1℃；ir(kbr):3256,3048,2929,2835,1642,1524,1471,1266,1152,1086,1025,850,723,608；¹hnmr(500mhz,dmso-d6):δ＝3.61(s,2h,ch2),3.73(s,3h,och3),3.77(s,3h,och3),6.90(s,2h,arh),6.99(s,1h,arh),7.57-7.70(m,4h,arh),8.13-8.17(m,3h,arh),10.29(s,1h,nh)；¹³cnmr(125mhz,dmso-d6):δ＝43.29,55.86,55.92,110.30,111.08,112.29,113.54,118.10,121.52,125.62,128.68,129.27,129.27,129.27,129.27,137.02,141.96,146.68,148.06,148.97,162.31,169.78；hrms(tofes⁺):m/zcalcdforc23h19cln2o4[m+na]⁺,445.0922；found,445.0926.

實(shí)施例10：制備上述表2中化合物5-10，即n-(2-(4-氯苯基苯并噁唑-5-基)-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)乙酰胺的制備。制備方法如實(shí)施例1，具有如下的化學(xué)結(jié)構(gòu)式：

核磁譜圖數(shù)據(jù)為：白色固體；mp184.9–185.7℃；ir(kbr):3248,3085,2933,2831,1659,1561,1471,1340,1238,1127,1009,850,739,674；¹hnmr(500mhz,dmso-d6):δ＝3.63(s,2h,ch2),3.64-3.80(s,9h,och3),6.69(s,2h,arh),7.56-8.18(m,7h,arh),10.34(s,1h,nh)；¹³cnmr(125mhz,dmso-d6):δ＝43.94,56.23,56.23,60.32,107.00,107.00,110.37,111.10,118.14,125.62,129.28,129.28,129.77,129.77,129.77,131.79,136.75,137.00,141.97,146.72,153.09,162.33,169.44；hrms(tofes⁺):m/zcalcdforc24h21cln2o5[m+na]⁺,445.0922；found,445.0926.