一、技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及化學(xué)制藥領(lǐng)域，具體涉及一種達(dá)肝素鈉和那屈肝素鈣的聯(lián)合制備方法。
二、技術(shù)背景
達(dá)肝素鈉和那屈肝素鈣均為低分子量肝素的一種，都是肝素鈉在酸性條件下，被亞硝酸鈉裂解制得。
達(dá)肝素鈉可用于治療急性深靜脈血栓，預(yù)防急性腎功能衰竭或慢性腎功能不全者進(jìn)行血液透析和血液過(guò)濾期間體外循環(huán)系統(tǒng)中的抗凝血，治療不穩(wěn)定型冠狀動(dòng)脈疾病，預(yù)防與手術(shù)有關(guān)的血栓形成。歐洲藥典規(guī)定的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，抗xa效價(jià)為110～210iu/mg，抗xa/抗iia效價(jià)比值為1.9～3.2，重均分子量為5600～6400。
那屈肝素鈣主要用于在外科手術(shù)中，用于靜脈血栓形成中度或高度危險(xiǎn)的情況，預(yù)防靜脈血栓栓塞性疾病，治療已形成的深靜脈血栓；聯(lián)合阿司匹林用于不穩(wěn)定性心絞痛和非q波性心肌梗塞急性期的治療；在血液透析中預(yù)防體外循環(huán)中的血凝塊形成。歐洲藥典規(guī)定的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，抗xa效價(jià)為95～130iu/mg，抗xa/抗iia效價(jià)比值為2.5～4.0，分子量為3600～5000。
與普通肝素相比，這兩種低分子肝素在抗血栓形成、生物利用度和出血不良反應(yīng)等方面具有明顯優(yōu)勢(shì)，已廣泛應(yīng)用于臨床。
目前在生產(chǎn)低分子肝素工藝中，每次投料只能生產(chǎn)出一種低分子肝素，成本較高。聯(lián)合生產(chǎn)兩種低分子肝素的方法將更加有效利用原料，降低生產(chǎn)成本，目前尚未見(jiàn)報(bào)道。
三、
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的在于提供一種達(dá)肝素鈉和那屈肝素鈣的聯(lián)合制備工藝，該工藝一次投料，可以制備達(dá)肝素鈉和那屈肝素鈣兩種產(chǎn)品。該工藝通過(guò)肝素鈉降解、還原，乙醇分級(jí)沉淀，來(lái)制備達(dá)肝素鈉；乙醇分級(jí)沉淀過(guò)程中的上層料液經(jīng)回收，再經(jīng)過(guò)乙醇分級(jí)沉淀，鈉鈣置換，制備那屈肝素鈣。該方法簡(jiǎn)單易行，操作便捷，更重要的是其綜合收率較高，可以達(dá)到60％以上，具有廣闊的應(yīng)用前景。
文中提到的重均分子量和效價(jià)檢測(cè)方法均為藥典方法，乙醇度數(shù)為折合20℃時(shí)，酒精計(jì)測(cè)量值。本發(fā)明的目的是通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)：
1)降解：以普通肝素鈉為原料，將其溶解，調(diào)節(jié)ph至2.0～3.5，然后加入亞硝酸鈉，攪拌反應(yīng)5～6小時(shí)，控制所得產(chǎn)品分子量在2800～3600，得到降解料液；將降解料液的ph調(diào)節(jié)至中性，加入硼氫化鈉，10℃～30℃攪拌反應(yīng)6小時(shí)；調(diào)節(jié)料液ph至4.0～4.5，攪拌1小時(shí)得到還原料液。
2)達(dá)肝素鈉制備：將還原料液加入乙醇至35～45°得到沉淀，沉淀中低分子肝素重均分子量控制在5600～6400。有時(shí)分子量會(huì)低于這個(gè)范圍。如果低于這個(gè)范圍，收集沉淀用5倍重量水溶解后加入料液體積3％的氯化鈉，再用乙醇分級(jí)35～45°得到沉淀，重復(fù)操作，直至重均分子量達(dá)到5600～6400。
3)那屈肝素鈣制備：制備達(dá)肝素乙醇分級(jí)沉淀過(guò)程中的上層含乙醇料液，再加入2～4倍料液體積的乙醇，收集沉淀。沉淀用5倍重量水溶解后加入3％氯化鈉，再用乙醇分級(jí)沉淀，乙醇度數(shù)控制在45～55°，收集沉淀，沉淀中低分子肝素重均分子量控制在3600～5000。有時(shí)分子量會(huì)低于這個(gè)范圍。如果低于這個(gè)范圍，收集沉淀用5倍重量水溶解后加入料液體積3％的氯化鈉，再用乙醇分級(jí)45～55°得到沉淀，重復(fù)操作，直至重均分子量達(dá)到3600～5000。沉淀用水溶解后再經(jīng)過(guò)鈉鈣置換，得到那屈肝素鈣。
四、具體實(shí)施方案
實(shí)施例1，稱(chēng)取肝素鈉2kg，并將其溶解，調(diào)節(jié)ph至2.0～3.5，然后加入亞硝酸鈉，攪拌反應(yīng)6小時(shí)，得到降解料液，其中低分子肝素重均分子量為2818。
將降解料液的ph調(diào)節(jié)至中性，加入硼氫化鈉，10℃～30℃攪拌反應(yīng)6小時(shí)，調(diào)節(jié)料液ph至4.0～4.5，攪拌1小時(shí)得到還原料液。
將還原料液加入乙醇分級(jí)沉淀，控制乙醇度數(shù)為35°。收集沉淀，沉淀用5倍重量水溶解后加入3％氯化鈉，再用乙醇分級(jí)沉淀，乙醇度數(shù)控制在35°，收集沉淀，檢測(cè)沉淀中低分子肝素重均分子量5967。沉淀干燥后得到達(dá)肝素鈉，重量0.67kg，收率33.5％。
乙醇分級(jí)沉淀過(guò)程中的上層料液，再加入2倍料液體積的乙醇，收集沉淀。將收集的沉淀用5倍重量水溶解后加入料液體積3％的氯化鈉，再用乙醇分級(jí)沉淀，控制乙醇度數(shù)為45°。沉淀用5倍重量水溶解后加入3％氯化鈉，再用乙醇分級(jí)沉淀，乙醇度數(shù)控制在45°，收集沉淀檢測(cè)沉淀中低分子肝素重均分子量4359。再經(jīng)過(guò)鈉鈣置換，得到那屈肝素鈣重量0.71kg，收率35％。
實(shí)施例2，稱(chēng)取肝素鈉2kg，并將其溶解，調(diào)節(jié)ph至2.0～3.5，然后加入亞硝酸鈉，攪拌反應(yīng)5小時(shí)，得到降解料液，其中低分子肝素重均分子量為3591。
將降解料液的ph調(diào)節(jié)至中性，加入硼氫化鈉，10℃～30℃攪拌反應(yīng)6小時(shí)，調(diào)節(jié)料液ph至4.0～4.5，攪拌1小時(shí)得到還原料液。
將還原料液加入乙醇分級(jí)沉淀，控制乙醇度數(shù)為45°，收集沉淀檢測(cè)沉淀中低分子肝素重均分子量6055。沉淀干燥后得到達(dá)肝素鈉，重量0.69kg，收率34.5％。
乙醇分級(jí)沉淀過(guò)程中的上層料液，再加入2倍料液體積的乙醇，收集沉淀。將收集的沉淀用5倍重量水溶解后加入料液體積3％的氯化鈉，再用乙醇分級(jí)沉淀，控制乙醇度數(shù)為55°，收集沉淀檢測(cè)沉淀中低分子肝素重均分子量4864。再經(jīng)過(guò)鈉鈣置換，得到那屈肝素鈣重量0.66kg，收率33％。
實(shí)施例3，稱(chēng)取肝素鈉2kg，并將其溶解，調(diào)節(jié)ph至2.0～3.5，然后加入亞硝酸鈉，攪拌反應(yīng)6小時(shí)，得到降解料液，其中低分子肝素重均分子量為3346。
將降解料液的ph調(diào)節(jié)至中性，加入硼氫化鈉，10℃～30℃攪拌反應(yīng)6小時(shí)，調(diào)節(jié)料液ph至4.0～4.5，攪拌1小時(shí)得到還原料液。
將還原料液加入乙醇分級(jí)沉淀，控制乙醇度數(shù)為40°，收集沉淀檢測(cè)沉淀中低分子肝素重均分子量5755。沉淀干燥后得到達(dá)肝素鈉，重量0.60kg，收率30％。
乙醇分級(jí)沉淀過(guò)程中的上層料液，再加入2倍料液體積的乙醇，收集沉淀。將收集的沉淀用5倍重量水溶解后加入料液體積3％的氯化鈉，再用乙醇分級(jí)沉淀，控制乙醇度數(shù)為50°，收集沉淀檢測(cè)沉淀中低分子肝素重均分子量4379。再經(jīng)過(guò)鈉鈣置換，得到那屈肝素鈣重量0.64kg，收率32％。
達(dá)肝素鈉檢測(cè)結(jié)果
那屈肝素鈣檢測(cè)結(jié)果