本發(fā)明屬于酰基脲類化合物制備技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種含1-甲基-3-三氟甲基-1h-吡唑結(jié)構(gòu)的酰基脲類化合物及其制備方法和應(yīng)用。
背景技術(shù)：
雜環(huán)結(jié)構(gòu)是合成藥物，農(nóng)藥等物質(zhì)的重要關(guān)鍵因素，這是由于雜環(huán)的高效，低毒和可以進(jìn)行多樣化取代的特點(diǎn)所決定的。它已經(jīng)成為醫(yī)藥，農(nóng)藥的領(lǐng)域的一個研究熱點(diǎn)。琥珀酸脫氫酶抑制劑作用于病原菌線粒體呼吸電子傳遞鏈上的蛋白復(fù)合體ii，即琥珀酸脫氫酶或琥珀酸-泛醌還原酶，是被殺菌劑抗性行動委員會(frac)新劃分出來的一類作用機(jī)制和抗性機(jī)理相似的化合物。自從靶向琥珀酸脫氫酶的莠銹靈(carboxin)和氧化莠銹靈(oxycarboxin)問世后，這類抑制劑已成為生產(chǎn)上一類非常重要的殺菌劑品種，同時新穎結(jié)構(gòu)的該類殺菌劑不斷問世。如近年來開發(fā)的聯(lián)苯吡菌胺、氟唑環(huán)菌胺、氟唑菌酰胺、吡唑萘菌胺、吡噻菌胺、呋吡菌胺、苯并烯氟菌唑等。該類殺菌劑分子結(jié)構(gòu)變化比較大，且近年來發(fā)現(xiàn)的大多含吡唑環(huán)。另一方面，脲類化合物因具有除草、殺蟲、殺菌、滅蚊、抗癌等多樣性的生物活性而受到廣泛關(guān)注。一些含?；孱惢衔镆呀?jīng)開發(fā)成功許多商品化的農(nóng)藥和醫(yī)藥。
本發(fā)明基于之前研究的基礎(chǔ)上提供了一種具有殺菌活性的含1-甲基-3-三氟甲基-1h-吡唑結(jié)構(gòu)的?；孱惢衔锏闹苽浞椒ㄅc應(yīng)用技術(shù)。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明目的是提供一種具有殺菌活性的含1-甲基-3-三氟甲基-1h-吡唑結(jié)構(gòu)的?；孱惢衔锛捌渲苽浞椒ê蛻?yīng)用。
所述的一種含1-甲基-3-三氟甲基-1h-吡唑結(jié)構(gòu)的酰基脲類化合物，其特征在于其結(jié)構(gòu)式如(i)所示：
其中：r為3,5二甲基，2-甲氧基，2,4,6-三甲基，2-氟苯基，3,4-二氟，2,6-二氟，2,5-二氟，2,3,4-三氟，3-氟，2-三氟甲基，2-氯，4-乙基，2,6-二乙基。
所述的含1-甲基3-三氟甲基-1h-吡唑結(jié)構(gòu)的?；孱惢衔锏闹苽浞椒?，其特征在于包括如下步驟：
1)在乙酸酐的作用下三氟乙酰乙酸乙酯和原甲酸三乙酯進(jìn)行回流反應(yīng)，得到如式(1)所示的化合物1，即(e)-2-(乙氧基亞甲基)-4,4,4-三氟-3-氧代丁酸乙酯；
2)將步驟1)得到的化合物1在乙醇存在下與甲基肼反應(yīng)、得到如式(2)所示的化合物2，即1-甲基-3-(三氟甲基)-1h-吡唑-4-羧酸乙酯；
3)將步驟2)得到的化合物2在乙醇中與氫氧化鈉水解反應(yīng)，再由hcl酸化得到如式(3)所示的化合物3，即1-甲基-3-(三氟甲基)-1h-吡唑-4-甲酸；
4)將步驟3)得到的化合物3與氯化亞砜反應(yīng)得到如式(4)所示的化合物4，即1-甲基-3-(三氟甲基)-1h-吡唑-4-甲酰氯；
5)將步驟4)得到的化合物4與氨水反應(yīng)得到如式(5)所示的化合物5，即1-甲基-3-(三氟甲基)-1h-吡唑-4-甲酰胺；
6)將步驟5)得到的化合物5與草酰氯反應(yīng)得到如式(6)所示的化合物6，即1-甲基-3-(三氟甲基)-1h-吡唑?；惽杷狨ィ?/p>
7)將步驟6)得到的化合物6與取代苯胺反應(yīng)得到如式(i)所示的含1-甲基3-三氟甲基-1h-吡唑結(jié)構(gòu)的?；孱惢衔?；
其制備過程如下：
所述的含1-甲基-3-三氟甲基-1h-吡唑結(jié)構(gòu)的?；孱惢衔锏闹苽浞椒?，其特征在于步驟1)中三氟乙酰乙酸乙酯、原甲酸三乙酯和乙酸酐的摩爾比為1:2.8～3.2:5.8～6.2；其回流反應(yīng)的時間為6-8h。
所述的含1-甲基-3-三氟甲基-1h-吡唑結(jié)構(gòu)的酰基脲類化合物的制備方法，其特征在于步驟2)中化合物1與甲基肼的質(zhì)量比為1:5.1～5.5。
所述的含1-甲基-3-三氟甲基-1h-吡唑結(jié)構(gòu)的?；孱惢衔锏闹苽浞椒ǎ涮卣髟谟诓襟E3)中化合物2與氫氧化鈉的物質(zhì)的量之比為1:1.5～2，hcl與氫氧化鈉的物質(zhì)的量之比為1:0.8～1；
所述的含1-甲基-3-三氟甲基-1h-吡唑結(jié)構(gòu)的?；孱惢衔锏闹苽浞椒ǎ涮卣髟谟诓襟E4)中化合物3與氯化亞砜的物質(zhì)的量之比為1:2～3。
所述的含1-甲基-3-三氟甲基-1h-吡唑結(jié)構(gòu)的?；孱惢衔锏闹苽浞椒?，其特征在于步驟5)中化合物4與氨水的物質(zhì)的量之比為1:5～6。
所述的含1-甲基-3-三氟甲基-1h-吡唑結(jié)構(gòu)的?；孱惢衔锏闹苽浞椒?，其特征在于步驟6)中化合物5與草酰氯的物質(zhì)的量之比為1:2～4。
所述的含1-甲基-3-三氟甲基-1h-吡唑結(jié)構(gòu)的酰基脲類化合物的制備方法，其特征在于步驟7)中化合物6與取代苯胺的物質(zhì)的量之比為1:0.95～1.05。
所述的含1-甲基-3-三氟甲基-1h-吡唑結(jié)構(gòu)的?；孱惢衔镌跉⒕矫娴膽?yīng)用。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果主要體現(xiàn)在：本發(fā)明提供了含1-甲基-3-三氟甲基-1h-吡唑結(jié)構(gòu)的?；孱惢衔锛捌渲苽浞椒ê蛻?yīng)用，其原料簡單易得，制備方法簡單、后處理方便，產(chǎn)品收率高，該化合物為具有殺菌活性，為新農(nóng)藥的研發(fā)提供了基礎(chǔ)。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合具體實(shí)施例對本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步描述，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不僅限于此：
本發(fā)明的含1-甲基-3-三氟甲基-1h-吡唑結(jié)構(gòu)的酰基脲類化合物(i)可以如下方法合成：
將三氟乙酰乙酸乙酯(18.4g，100mmol)，原甲酸三乙酯(300mmol)和乙酸酐(600mmol)加入到500ml的四口燒瓶中，在120℃下反應(yīng)6小時，之后懸蒸除去溶劑得到無色液體即為化合物1(e)-2-(乙氧基亞甲基)-4,4,4-三氟-3-氧代丁酸乙酯。將9.7克化合物1和1.9克甲基肼加入到乙酸乙酯中，混合物在5℃下攪拌一小時，而后加熱攪拌回流3小時，反應(yīng)完成后，冷卻濃縮得到化合物2(e)-1-甲基-3-(三氟甲基)-1h-吡唑-4-羧酸乙酯。將化合物2(25mmol)和高錳酸鉀(30mmol)加入到50ml水中，常溫下攪拌過夜，然后酸化至ph＝1，過濾得到白色固體化合物31-甲基-(三氟甲基)-1h-吡唑-4-甲酸。將化合物3(7.5mmol)和氯化亞砜(30mmol)混合后加熱回流4小時，而后冷卻、懸蒸除去過量的氯化亞砜得到黃色液體化合物41-甲基-3-(三氟甲基)-1h-吡唑-4-甲酰氯。將第四步產(chǎn)生的化合物4溶解在50mlthf中，而后加入氨水混合物(40mmol，25％)，攪拌過夜，得到大量白色固體，經(jīng)石油醚和乙酸乙酯純化，得到化合物51-甲基-3-(三氟甲基)-1h-吡唑-4-甲酰胺。在冰水浴的作用下將化合物5(0.01mol)溶解在8ml無水1,2-二氯乙烷中，而后緩慢滴加草酰氯(0.02mol)，在室溫下攪拌一個小時，而后保持在50-55℃攪拌3小時，最后回流6小時，懸蒸除去過量的草酰氯，得到化合物6吡唑?；惽杷狨ァＴ?0ml圓底瓶中加入化合物6(1mmol)，以及取代苯胺(1mmol)和二氯甲烷(4ml)，室溫下攪拌過夜隨即得到最終產(chǎn)物(i)吡唑?；孱惢衔?。
實(shí)施例1～14，具體化合物的結(jié)構(gòu)式如表2所示，其它合成條件不改變。
實(shí)施例1
n-((3,5-二甲基苯基)氨基甲酰基)-1-甲基-3-(三氟甲基)-1h-吡唑-4-?；澹咨腆w，收率59.7％，m.p.209-210℃；ftir(ν,cm-1):3242(n-h),3131(n-h),1701(c＝o),1692(c＝o),1614(ar),1569(ph,c＝c),1541(c-n),1509(ph,c＝c),1475(ph,c＝c),1298(c-n),1229(c-n),1000-1200(c-f),771(ar-h)；1hnmr(cdcl3,400mhz),δ:2.26(s,6h,2ch3),3.98(s,3h,ch3),6.75(s,1h,ph),7.20(s,2h,ph),8.74(s,1h,ch),10.53(s,1h,nh),10.94(s,1h,nh).hrms(esi)forc15h15f3n4o2m/z:calculated,341.1220,found,341.1218[m+h]+.
實(shí)施例2
n-((2-甲氧基苯基)氨基甲?；?-1-甲基-3-(三氟甲基)-1h-吡唑-4-?；?，白色固體，收率72.6％，m.p.246-247℃；ftir(ν,cm-1):3243(n-h),3134(n-h),1705(c＝o),1688(c＝o),1604(ar),1565(ph,c＝c),1541(c-n),1492(ph,c＝c),1466(ph,c＝c),1301(c-n),1247(c-n),1000-1200(c-f),761(ar-h),745(ph,c-h).1hnmr(cdcl3,400mhz),δ:3.89(s,3h,o-ch3),3.98(s,3h,ch3),6.94-6.97(m,1h,ph),7.08-7.10(m,2h,ph),8.17(d,j＝7.5hz,1h,ph),8.73(s,1h,ch),10.88(s,1h,nh),10.97(s,1h,nh).hrms(esi)forc14h13f3n4o3m/z:calculated,343.1013,found,343.1016[m+h]+.
實(shí)施例3
n-((2,4,6-三甲基苯基)氨基甲?；?-1-甲基-3-(三氟甲基)-1h-吡唑-4-酰基脲，白色固體，收率54.8％，m.p.222-223℃；ftir(ν,cm-1):3273(n-h),3127(n-h),1697(c＝o),1625(ar),1607(ph,c＝c),1540(c-n),1503(ph,c＝c),1478(ph,c＝c),1299(c-n),1249(c-n),1000-1200(c-f),777(ar-h),759,679(ph,c-h).1hnmr(cdcl3,400mhz),δ:3.35(s,3h,ch3),3.98(s,3h,ch3),6.91(s,2h,ph),8,74(s,1h,ch),9.72(s,1h,nh),10.88(s,1h,nh).hrms(esi)forc16h17f3n4o2m/z:calculated,355.1376,found,355.1377[m+h]+.
實(shí)施例4
n-((2-氟苯基)氨基甲酰基)-1-甲基-3-(三氟甲基)-1h-吡唑-4-?；澹咨腆w，收率76.2％，m.p.227-228℃；ftir(ν,cm-1):3243(n-h),3160(n-h),1701(c＝o),1684(c＝o),1621(ar),1599(ph,c＝c),1543(c-n),1515(ph,c＝c),1458(ph,c＝c),1301(c-n),1247(c-n),1000-1200(c-f),772(ar-h),759(ph,c-h).1hnmr(cdcl3,400mhz),δ:3.99(s,3h,ch3),7.113-7.17(m,1h,ph),7.22(t,j＝7.5hz,1h,ph),7.31-7.34(m,1h,ph),8.14-8.18(m,1h,ph),8.75(s,1h,ch),10.86(s,1h,nh),11.15(s,1h,nh).hrms(esi)forc13h10f4n4o2m/z:calculated,331.0813,found,331.0812[m+h]+.
實(shí)施例5
n-((3,4-二氟苯基)氨基甲?；?-1-甲基-3-(三氟甲基)-1h-吡唑-4-?；?，白色固體，收率69.2％，m.p.192-193℃；ftir(ν,cm-1):3207(n-h),3142(n-h),1704(c＝o),1681(c＝o),1615(ar),1582(ph,c＝c),1542(c-n),1521(ph,c＝c),1481(ph,c＝c),1300(c-n),1269(c-n),1000-1200(c-f),771(ar-h),839,762,(ph,c-h).1hnmr(cdcl3,400mhz),δ:3.98(s,3h,ch3),7,39-7,44(m,2h,ph),7.78-7.83(m,1h,ph),8.74(s,1h,ch),10.59(s,1h,nh),11.04(s,1h,nh).hrms(esi)forc13h9f5n4o2m/z:calculated,349.0718,found,349.0715[m+h]+.
實(shí)施例6
n-((2,6-二氟苯基)氨基甲酰基)-1-甲基-3-(三氟甲基)-1h-吡唑-4-?；澹咨腆w，收率91.2％，m.p.211-212℃；ftir(ν,cm-1):3245(n-h),3127(n-h),1704(c＝o),1687(c＝o),1606(ar),1587(ph,c＝c),1568(ph,c＝c),1540(c-n),1472(ph,c＝c),1298(c-n),1246(c-n),1000-1200(c-f),763(ar-h),786,713(ph,c-h).1hnmr(cdcl3,400mhz),δ:3.99(s,3h,ch3),7.17-7.21(m,2h,ph),7.36-7.42(m,1h,ph),8.75(s,1h,ch),9.93(s,1h,nh),11.14(s,1h,nh).hrms(esi)forc13h9f5n4o2m/z:calculated,349.0718,found,349.0721[m+h]+.
實(shí)施例7
n-((2,5-二氟苯基)氨基甲?；?-1-甲基-3-(三氟甲基)-1h-吡唑-4-酰基脲，白色固體，收率97.5％，m.p.230-231℃；ftir(ν,cm-1):3243(n-h),3158(n-h),1704(c＝o),1697(c＝o),1629(ar),1587(ph,c＝c),1568(ph,c＝c),1541(c-n),1473(ph,c＝c),1300(c-n),1242(c-n),1000-1200(c-f),772(ar-h),761,731,(ph,c-h).1hnmr(cdcl3,400mhz),δ:3.99(s,3h,ch3),6.97-7.01(m,1h,ph),7.37-7.42(m,1h,ph),8.01-8.05(m,1h,ph),8.76(s,1h,ch),11.02(s,1h,nh),11.26(s,1h,nh).hrms(esi)forc13h9f5n4o2m/z:calculated,349.0718,found,349.0717[m+h]+.
實(shí)施例8
n-((2,3,4-三氟苯基)氨基甲?；?-1-甲基-3-(三氟甲基)-1h-吡唑-4-酰基脲，白色固體，收率47.8％，m.p.240-241℃；ftir(ν,cm-1):3209(n-h),3156(n-h),1707(c＝o),1683(c＝o),1625(ar),1581(ph,c＝c),1543(c-n),1517(ph,c＝c),1483(ph,c＝c),1301(c-n),1254(c-n),1000-1200(c-f),773(ar-h),821,761(ph,c-h).1hnmr(cdcl3,400mhz),δ:4.00(s,3h,ch3),7.34(s,1h,ph),7.86(s,1h,ph),8.76(s,1h,ch),10.77(s,1h,nh),11.23(s,1h,nh).hrms(esi)forc13h8f6n4o2m/z:calculated,367.0624,found,367.0620[m+h]+.
實(shí)施例9
n-((3-氟苯基)氨基甲酰基)-1-甲基-3-(三氟甲基)-1h-吡唑-4-?；澹咨腆w，收率70.0％，m.p.205-206℃；ftir(ν,cm-1):3237(n-h),3146(n-h),1710(c＝o),1684(c＝o),1606(ar),1541(c-n),1513(ph,c＝c),1481(ph,c＝c),1448(ph,c＝c),1300(c-n),1279(c-n),1000-1200(c-f),771(ar-h),884,847,711(ph,c-h).1hnmr(cdcl3,400mhz),δ:3.99(s,3h,ch3),6.93-6.96(m,1h,ph),7.33-7.38(m,2h,ph),7.60-7.62(m,1h,ph),8.74(s,1h,ch),10.65(s,1h,nh),11.03(s,1h,nh).hrms(esi)forc13h10f4n4o2m/z:calculated,331.0813,found,331.0809[m+h]+.
實(shí)施例10
n-((2-三氟甲基苯基)氨基甲?；?-1-甲基-3-(三氟甲基)-1h-吡唑-4-酰基脲，白色固體，收率90.8％，m.p.192-193℃；ftir(ν,cm-1):3241(n-h),3137(n-h),1705(c＝o),1695(c＝o),1616(ar),1559(ph,c＝c),1541(c-n),1477(ph,c＝c),1456(ph,c＝c),1322(c-n),1301(c-n),1000-1200(c-f),767(ar-h)；1hnmr(cdcl3,400mhz),δ:3.99(s,3h,ch3),7.38(t,j＝7.5hz,1h,ph),7.71(t,j＝7.5hz,1h,ph),7.75(d,j＝8.0hz,1h,ph),8.76(s,1h,ch),10.95(s,1h,nh),11.20(s,1h,nh).hrms(esi)forc14h10f6n4o2m/z:calculated,381.0781,found,381.0780[m+h]+.
實(shí)施例11
n-((2-氯苯基)氨基甲?；?-1-甲基-3-(三氟甲基)-1h-吡唑-4-?；澹咨腆w，收率96.4％，m.p.218-219℃；ftir(ν,cm-1):3259(n-h),3127(n-h),1701(c＝o),1682(c＝o),1596(ph,c＝c),1540(c-n),1510(ph,c＝c),1291(c-n),1236(c-n),1000-1200(c-f),757(ar-h),734(ph,c-h).1hnmr(cdcl3,400mhz),δ:3.99(s,3h,ch3),7.15-7.18(m,1h,ph),7.37-7.39(m,1h,ph),7.55-7.56(m,1h,ph),8.76(s,1h,ch),11.09(s,1h,nh),11.17(s,1h,nh).hrms(esi)forc13h10clf3n4o2m/z:calculated,347.0517,found,347.0512[m+h]+.
實(shí)施例12
n-((4-乙基苯基)氨基甲?；?-1-甲基-3-(三氟甲基)-1h-吡唑-4-?；澹咨腆w，收率72.3％，m.p.246-247℃；ftir(ν,cm-1):3244(n-h),3127(n-h),1701(c＝o),1697(c＝o),1598(ph,c＝c),1541(c-n),1514(ph,c＝c),1471(ph,c＝c),1296(c-n),1235(c-n),1000-1200(c-f),826(ph,c-h),765(ar-h).1hnmr(cdcl3,400mhz),δ:1.17(t,j＝7.5hz,3h,ch3),2.58(m,2h,ch2),3.98(s,3h,ch3),7.18(d,j＝8.5hz,2h,ph),7.48(d,j＝8.5hz,2h,ph),8,74(s,1h,ch),10.49(s,1h,nh),10.93(s,1h,nh).hrms(esi)forc15h15f3n4o2m/z:calculated,341.1220,found,341.1222[m+h]+.
實(shí)施例13
n-((2,6-二乙基苯基)氨基甲?；?-1-甲基-3-(三氟甲基)-1h-吡唑-4-酰基脲，白色固體，收率46.3％，m.p.219～220℃；ftir(ν,cm-1):3234(n-h),3124(n-h),1705(c＝o),1697(c＝o),1591(ph,c＝c),1521(c-n),1299(c-n),1230(c-n),1000-1200(c-f),777(ar-h),760(ph,c-h).1hnmr(cdcl3,400mhz),δ:1.13(t,j＝7.5hz,6h,2ch3),2.56(m,4h,2ch2),3.98(s,3h,ch3),7.14(d,j＝7.5hz,2h,ph),7.21-7.24(m,1h,ph),8,75(s,1h,ch),9.81(s,1h,nh),10.92(s,1h,nh).hrms(esi)forc17h19f3n4o2m/z:calculated,369.1533,found,369.1533[m+h]+.
實(shí)施例14抗菌性測試
試驗(yàn)對象：黃瓜枯萎病，黃瓜細(xì)菌性角斑斑，黃瓜灰霉病和黃瓜褐斑病。
試驗(yàn)方法：在盆栽黃瓜的雙子葉階段時，接種上訴四種真菌，而后分別使用百菌清，中生菌素，腐霉利和多菌靈作為對照(10ppm)，標(biāo)題化合物進(jìn)行試驗(yàn)，濃度為100μg/ml，50μg/ml，10μg/ml。
藥效計算方法應(yīng)用如下公式：
相對防治效果(％)＝(ck-pt)/ck×100％
其中ck是空白測定期間的平均疾病指數(shù)，pt是測試期間治療后的平均疾病指數(shù)。所有實(shí)驗(yàn)重復(fù)三次?；钚詼y試結(jié)果如表1所示。
表1不同濃度的標(biāo)題化合物的殺真菌活性
對照分別為黃瓜枯萎?。喊倬?；黃瓜細(xì)菌性角斑?。褐猩?；黃瓜灰霉?。焊估稽S瓜褐斑?。憾嗑`。
具體化合物結(jié)構(gòu)如表2所示：
表2化合物1-13的具體結(jié)構(gòu)
從表1的殺菌活性表明，大多數(shù)化合物均對參與測試的四種真菌具有一定的殺菌活性，其中化合物4,6,9,10,11對黃瓜灰霉病的防效達(dá)到80％以上?；衔?,10,11的殺菌活性受到濃度的輕微影響，而化合物5,9，在濃度較低時殺菌效果反而更好。