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一種提取單組織樣本核酸以及測(cè)OD值的自動(dòng)提取儀的制作方法

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一種提取單組織樣本核酸以及測(cè)OD值的自動(dòng)提取儀的制作方法與工藝

本發(fā)明涉及生物學(xué)裝置領(lǐng)域,特別是涉及一種提取單組織樣本核酸以及測(cè)od值的自動(dòng)提取儀。



背景技術(shù):

目前,生命體遺傳特征的基本單元是核酸,在病毒、基因研究領(lǐng)域都離不開(kāi)對(duì)核酸的檢測(cè),而針對(duì)對(duì)核酸檢測(cè),目前普遍有pcr、測(cè)序、分子雜交等技術(shù)。這些技術(shù)的運(yùn)用的關(guān)鍵前提是提取出核酸。

傳統(tǒng)手工提取組織樣本核酸(如酚氯仿法),效率低、穩(wěn)定性差、耗時(shí)長(zhǎng),且含有害性的化學(xué)物質(zhì)。目前市場(chǎng)提取方法一般有柱提法、煮沸法。柱提法主要缺點(diǎn)在于人工操作時(shí)間長(zhǎng)、樣本交叉污染,不適用于大批量提取。煮沸法的主要缺點(diǎn)在于提取的樣本核酸雜質(zhì)多,影響下一步實(shí)驗(yàn),且樣本容易交叉污染。

所以,一種人工操作時(shí)間段、樣本不容易交叉污染、準(zhǔn)確、有效地提取出組織核酸的儀器設(shè)備非常重要。



技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:

為解決上述問(wèn)題,本發(fā)明提供一種能實(shí)現(xiàn)提取單個(gè)組織樣本的核酸并測(cè)得其od值的自動(dòng)提取儀。

本發(fā)明解決其技術(shù)問(wèn)題所采用的技術(shù)方案是:

一種提取單組織樣本核酸以及測(cè)od值的自動(dòng)提取儀,包括提取儀的艙體及在艙體內(nèi)底座上設(shè)置的用于提取單組織樣本核酸的試管筒,試管筒包含8孔試管,正對(duì)試管筒的尾端設(shè)有微小孔裝置和用于發(fā)射紫外光測(cè)od值的紫外光裝置。

進(jìn)一步作為本發(fā)明技術(shù)方案的改進(jìn),試管筒包括依次排列的第一孔試管、第二孔試管、第三孔試管、第四孔試管、第五孔試管及第八孔試管。

進(jìn)一步作為本發(fā)明技術(shù)方案的改進(jìn),第一孔試管用于放置環(huán)保脫蠟劑,第二孔試管內(nèi)設(shè)有al溶液和磁珠,第三孔試管內(nèi)設(shè)有洗滌液ⅰ,第四孔試管內(nèi)設(shè)有洗滌液ⅱ,第五孔試管內(nèi)設(shè)有洗滌液ⅱ,第八孔試管內(nèi)設(shè)有洗脫液。

進(jìn)一步作為本發(fā)明技術(shù)方案的改進(jìn),各試管底部均設(shè)有用于提高試管內(nèi)液體溫度的加熱裝置或者至少在第一孔試管和第八孔試管底部設(shè)有加熱裝置。

進(jìn)一步作為本發(fā)明技術(shù)方案的改進(jìn),試管筒通過(guò)固定框固定,在固定框上設(shè)有與試管筒相匹配的卡位。

進(jìn)一步作為本發(fā)明技術(shù)方案的改進(jìn),艙體內(nèi)還設(shè)置磁鐵裝置,所述磁鐵裝置設(shè)有旋轉(zhuǎn)頭,且旋轉(zhuǎn)頭帶有有磁性的磁芯。套上磁套棒后的旋轉(zhuǎn)頭,用于旋轉(zhuǎn)混勻液體和轉(zhuǎn)移磁珠。

進(jìn)一步作為本發(fā)明技術(shù)方案的改進(jìn),磁鐵裝置包括x方向水平運(yùn)動(dòng)臂、y方向水平運(yùn)動(dòng)臂及z向垂直運(yùn)動(dòng)臂,所述旋轉(zhuǎn)頭通過(guò)x向水平運(yùn)動(dòng)臂、y方向水平運(yùn)動(dòng)臂及z向垂直運(yùn)動(dòng)臂可向x向、y向、z向運(yùn)動(dòng)。

進(jìn)一步作為本發(fā)明技術(shù)方案的改進(jìn),艙體內(nèi)還設(shè)置有用于移動(dòng)槍頭的吸頭移動(dòng)裝置,吸取的槍頭用于移動(dòng)各試管中的液體并通過(guò)吹打混勻液體。

進(jìn)一步作為本發(fā)明技術(shù)方案的改進(jìn),吸頭移動(dòng)裝置包括x向水平運(yùn)動(dòng)臂、y向水平運(yùn)動(dòng)臂及z向垂直運(yùn)動(dòng)臂,吸取的槍頭通過(guò)x向水平運(yùn)動(dòng)臂、y向水平運(yùn)動(dòng)臂及z向垂直運(yùn)動(dòng)臂可向x向、y向、z向運(yùn)動(dòng)。

進(jìn)一步作為本發(fā)明技術(shù)方案的改進(jìn),艙體內(nèi)還設(shè)有槍頭放置區(qū)、蛋白酶k放置區(qū)、無(wú)水乙醇放置區(qū)、磁棒套放置區(qū)、atl溶液放置區(qū)、棄置區(qū)和微小孔裝置,艙體設(shè)有安全門(mén)。

本發(fā)明的有益效果:

此提取單組織樣本核酸以及測(cè)od值的自動(dòng)提取儀通過(guò)試管筒實(shí)現(xiàn)單組織樣本核酸的提取,并且可以在提取完樣本后,通過(guò)紫外光裝置對(duì)提取的核酸進(jìn)行測(cè)od值,顯示核酸濃度,更方便核酸后續(xù)的使用。

人工操作時(shí)間大大減少(5min/12個(gè)樣本),樣本量越大,優(yōu)勢(shì)越明顯。

不僅提高了工作效率,還減少了人工操作時(shí)間,降低人為錯(cuò)誤,重復(fù)性好、穩(wěn)定性強(qiáng)。

本發(fā)明還避免了現(xiàn)有技術(shù)中的提取儀槍頭容易堵住,槍頭掉落等缺點(diǎn),大大提高了裝置運(yùn)行的穩(wěn)定性。

附圖說(shuō)明

下面結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明:

圖1是本發(fā)明實(shí)施例整體結(jié)構(gòu)示意圖;

圖2為在提取相同組織樣本核酸時(shí):自動(dòng)提取儀跟qiagen公司的qiaampdnabloodminikit(50)-貨號(hào)51104試劑盒作對(duì)比,得到的核酸進(jìn)行瓊脂糖電泳的結(jié)果。其中,共以8個(gè)樣本進(jìn)行提取對(duì)比:第1至第8泳道為qiagen試劑盒提取的結(jié)果,第9泳道為100bpmarker,第10至第17泳道為自動(dòng)提取儀的提取結(jié)果。

具體實(shí)施方式

以下將結(jié)合實(shí)施例和附圖對(duì)本發(fā)明的構(gòu)思、具體結(jié)構(gòu)及產(chǎn)生的技術(shù)效果進(jìn)行清楚、完整地描述,以充分地理解本發(fā)明的目的、特征和效果。顯然,所描述的實(shí)施例只是本發(fā)明的一部分實(shí)施例,而不是全部實(shí)施例,基于本發(fā)明的實(shí)施例,本領(lǐng)域的技術(shù)人員在不付出創(chuàng)造性勞動(dòng)的前提下所獲得的其他實(shí)施例,均屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。

參照?qǐng)D1,本發(fā)明為一種提取單組織樣本核酸以及測(cè)od值的自動(dòng)提取儀,包括提取儀的艙體15及在艙體15內(nèi)底座上設(shè)置的用于提取單組織樣本核酸的試管筒7,試管筒7包含8孔試管,正對(duì)試管筒的尾端設(shè)有微小孔裝置10和用于發(fā)射紫外光測(cè)od值的紫外光裝置11。

此提取單組織樣本核酸以及測(cè)od值的自動(dòng)提取儀通過(guò)試管筒7實(shí)現(xiàn)單組織樣本核酸的提取,并且可以在提取完樣本后,通過(guò)紫外光裝置11對(duì)提取的核酸進(jìn)行測(cè)od值,顯示核酸濃度,更方便核酸后續(xù)的使用,具有效率高、成本低、重復(fù)性好、穩(wěn)定性強(qiáng)等特點(diǎn)。

作為本發(fā)明優(yōu)選的實(shí)施方式,試管筒7包括依次排列的第一孔試管71、第二孔試管72、第三孔試管73、第四孔試管74、第五孔試管75、第六孔試管76、第七孔試管77及第八孔試管78。

作為本發(fā)明優(yōu)選的實(shí)施方式,第一孔試管71用于放置環(huán)保脫蠟劑,第二孔試管72內(nèi)設(shè)有al溶液和磁珠,第三孔試管73內(nèi)設(shè)有洗滌液ⅰ,第四孔試管74內(nèi)設(shè)有洗滌液ⅱ,第五孔試管75內(nèi)設(shè)有洗滌液ⅱ,第八孔試管78內(nèi)設(shè)有洗脫液。

作為本發(fā)明優(yōu)選的實(shí)施方式,各試管底部均設(shè)有用于提高試管內(nèi)液體溫度的加熱裝置9或者至少在第一孔試管71底部設(shè)有加熱裝置91和第八孔試管78底部設(shè)有加熱裝置92。

作為本發(fā)明優(yōu)選的實(shí)施方式,試管筒7通過(guò)固定框8固定,在固定框8上設(shè)有與試管筒7相匹配的卡位。

作為本發(fā)明優(yōu)選的實(shí)施方式,艙體15內(nèi)還設(shè)置磁鐵移動(dòng)裝置13,磁鐵移動(dòng)裝置13設(shè)有旋轉(zhuǎn)頭131,且旋轉(zhuǎn)頭帶有有磁性的磁芯,套上磁套棒后的旋轉(zhuǎn)頭,用于旋轉(zhuǎn)混勻液體和轉(zhuǎn)移磁珠。

旋轉(zhuǎn)頭131套上磁棒套。

作為本發(fā)明優(yōu)選的實(shí)施方式,磁鐵移動(dòng)裝置13包括x軸水平移動(dòng)臂132、y軸水平移動(dòng)臂133及z向垂直運(yùn)動(dòng)臂134,旋轉(zhuǎn)頭131通過(guò)x向水平運(yùn)動(dòng)臂132、y軸水平移動(dòng)臂133及z向垂直運(yùn)動(dòng)臂134可向x向、y向、z向運(yùn)動(dòng)。

作為本發(fā)明優(yōu)選的實(shí)施方式,艙體15內(nèi)還設(shè)置有用于移動(dòng)吸槍頭的吸頭移動(dòng)裝置12,吸取的槍頭用于移動(dòng)各試管中的液體并通過(guò)吹打混勻液體。

作為本發(fā)明優(yōu)選的實(shí)施方式,吸引頭移動(dòng)裝置12包括x向水平運(yùn)動(dòng)臂121、y向水平運(yùn)動(dòng)臂122及z向垂直運(yùn)動(dòng)臂123,所述吸取的槍頭通過(guò)x向水平運(yùn)動(dòng)臂121、y向水平運(yùn)動(dòng)臂121及z向垂直運(yùn)動(dòng)臂123可向x向、y向、z向運(yùn)動(dòng)。

作為本發(fā)明優(yōu)選的實(shí)施方式,艙體15內(nèi)還設(shè)有槍頭放置區(qū)1、蛋白酶k放置區(qū)2、無(wú)水乙醇放置區(qū)3、磁套棒放置區(qū)4、atl溶液放置區(qū)5、棄置區(qū)6和微小孔裝置14,艙體15設(shè)有安全門(mén)14。

本發(fā)明優(yōu)選實(shí)施例:試管筒一共設(shè)有八孔試管,分別是第一孔試管71、第二孔試管72、第三孔試管73、第四孔試管74、第五孔試管75、第六孔試管76、第七孔試管77及第八孔試管78。其中第一孔試管71用于放置環(huán)保脫蠟劑,第二孔試管72內(nèi)設(shè)有al溶液和磁珠,第三孔試管73內(nèi)設(shè)有洗滌液ⅰ,第四孔試管74內(nèi)設(shè)有洗滌液ⅱ,第五孔試管75內(nèi)設(shè)有洗滌液ⅱ,第八孔試管78內(nèi)設(shè)有洗脫液,第六孔試管76和第七孔試管77作為備用暫時(shí)不使用。第一孔試管71底部設(shè)有加熱裝置91及第八孔試管78底部設(shè)有加熱裝置92,可以在提取的過(guò)程中加熱。固定框8設(shè)有卡位,可以將試管筒卡住。

將組織樣本加入到試管筒7的第一孔試管71中,再將試管筒7放到固定框8中卡好。

磁套棒裝置13的旋轉(zhuǎn)頭131從磁棒套放置區(qū)4套上磁套棒,并運(yùn)動(dòng)到試管筒7的第一孔試管,旋轉(zhuǎn)頭131進(jìn)行旋轉(zhuǎn)脫蠟,同時(shí)加熱裝置91開(kāi)始預(yù)設(shè)溫度的加熱。

脫蠟完畢后,磁套棒裝置回到原位,吸頭移動(dòng)裝置12運(yùn)動(dòng)到槍頭放置區(qū)1吸取槍頭,再運(yùn)行到試管筒7的第一孔試管71,吸取孔內(nèi)液體,運(yùn)行到棄置區(qū),連槍頭一起丟棄,且加熱裝置91停止加熱,。

吸頭移動(dòng)裝置121運(yùn)動(dòng)到槍頭放置區(qū)1吸取槍頭,再運(yùn)行到atl溶液放置區(qū)5,吸取atl溶液后,移動(dòng)到試管筒7的第一孔試管71,將atl溶液打進(jìn)孔內(nèi)并吹打混勻,再運(yùn)行到棄置區(qū),丟棄槍頭,然后回到原位。

吸頭移動(dòng)裝置12運(yùn)動(dòng)到槍頭放置區(qū)1吸取槍頭,再運(yùn)行到蛋白酶k放置區(qū)2,吸取蛋白酶k溶液后,移動(dòng)到試管筒7的第一孔試管71,將蛋白酶k溶液打進(jìn)孔內(nèi)并吹打混勻,再運(yùn)行到棄置區(qū),丟棄槍頭,然后回到原位。

套上磁套棒的旋轉(zhuǎn)頭131移動(dòng)到試管筒7的第一孔試管71,開(kāi)始旋轉(zhuǎn)混勻,進(jìn)行組織樣本的第一次裂解,同時(shí)加熱裝置91開(kāi)始預(yù)設(shè)溫度的加熱。

組織樣本的第一次裂解結(jié)束后,加熱裝置91停止加熱,套上磁套棒的旋轉(zhuǎn)頭131回到原位。

吸頭移動(dòng)裝置12運(yùn)動(dòng)到槍頭放置區(qū)1吸取槍頭,再運(yùn)行到試管筒7的第二孔試管72并吹打混勻al溶液和磁珠,然后吸取al溶液和磁珠,移動(dòng)到試管筒7的第一孔試管71,將其打進(jìn)孔內(nèi)并吹打混勻,再運(yùn)行到棄置區(qū),丟棄槍頭,然后回到原位。

套上磁套棒的旋轉(zhuǎn)頭131移動(dòng)到試管筒7的第一孔試管71,開(kāi)始旋轉(zhuǎn)混勻,進(jìn)行組織樣本的第二次裂解,同時(shí)加熱裝置91開(kāi)始預(yù)設(shè)溫度的加熱。

組織樣本的第二次裂解結(jié)束后,加熱裝置91停止加熱,套上磁套棒的旋轉(zhuǎn)頭131回到原位,吸頭移動(dòng)裝置12運(yùn)動(dòng)到槍頭放置區(qū)1吸取槍頭,再運(yùn)行到無(wú)水乙醇放置區(qū)3,吸取無(wú)水乙醇后,移動(dòng)到試管筒7的第一孔試管71,將其打進(jìn)孔內(nèi)并吹打混勻,再運(yùn)行到棄置區(qū),丟棄槍頭,然后回到原位。

套上磁套棒的旋轉(zhuǎn)頭131移動(dòng)到試管筒7的第一孔試管71,開(kāi)始旋轉(zhuǎn)混勻后,磁芯下降,將磁珠吸住在磁套棒底部,運(yùn)行到試管筒7的第三孔試管73;磁芯上升,開(kāi)始旋轉(zhuǎn)混勻,將磁珠洗脫到試管筒7的第三孔試管73中并進(jìn)行洗滌液ⅰ的洗滌。

洗滌液ⅰ的洗滌結(jié)束后,磁芯下降將磁珠吸住在磁套棒底部;套上磁套棒的旋轉(zhuǎn)頭131運(yùn)行到試管筒7的第四孔試管74,磁芯上升,開(kāi)始旋轉(zhuǎn)混勻,將磁珠洗脫到試管筒7的第四孔試管74中并進(jìn)行洗滌液ⅱ的第一次洗滌。

洗滌液ⅱ的第一次洗滌結(jié)束后,磁芯下降將磁珠吸住在磁套棒底部;套上磁套棒的旋轉(zhuǎn)頭131運(yùn)行到試管筒7的第五孔試管75,磁芯上升,開(kāi)始旋轉(zhuǎn)混勻,將磁珠洗脫到試管筒7的第五孔試管75中并進(jìn)行洗滌液ⅱ的第二次洗滌。

洗滌液ⅱ的第二次洗滌結(jié)束后,磁芯下降將磁珠吸住在磁套棒底部;套上磁套棒的旋轉(zhuǎn)頭131運(yùn)行到試管筒7的第八孔試管78,磁芯上升,磁套棒進(jìn)行旋轉(zhuǎn)混勻,將磁珠洗脫到試管筒7的第八孔試管78中并進(jìn)行洗脫液的洗脫,同時(shí)加熱塊92開(kāi)始預(yù)設(shè)溫度的加熱。

洗脫液的洗脫結(jié)束后,加熱塊92停止加熱,磁芯下降將磁珠吸住在磁套棒底部;套上磁套棒的旋轉(zhuǎn)頭131運(yùn)行到試管筒7的第四孔試管74,磁芯上升,磁套棒進(jìn)行旋轉(zhuǎn)混勻,將磁珠洗脫到試管筒7的第四孔試管74中,再運(yùn)行到棄置區(qū)將磁套棒丟棄,接著回到原位。

吸頭移動(dòng)裝置12運(yùn)動(dòng)到槍頭放置區(qū)1吸取,再運(yùn)行到試管筒7的第八孔試管78,吸取5μl提取得到的核酸,再運(yùn)行到微小孔裝置10,將核酸打進(jìn)微小孔中;接著運(yùn)行到棄置區(qū)6,丟棄槍頭,再運(yùn)行回原位。

紫外光裝置11開(kāi)始測(cè)核酸od,得到核酸濃度。

整個(gè)提取流程結(jié)束,試管筒7的第八孔試管78中提取好的核酸可立即使用或移至-20℃保存。

以8份組織為樣本,一份為二,同時(shí)用核酸自動(dòng)提取儀和qiagen公司的qiaampdnabloodminikit(50)-貨號(hào)51104試劑盒進(jìn)行提取對(duì)比,其提取的核酸的濃度如下表1所示:

從圖2和表1的結(jié)果中可以肯定自動(dòng)提取儀的提取效率。

本發(fā)明可以快速提取動(dòng)植物的石蠟組織、新鮮組織等組織樣品中的dna和rna,廣泛的應(yīng)用于醫(yī)療、司法、高校、質(zhì)量監(jiān)督、試劑公司、疾控中心、研究所等領(lǐng)域。

當(dāng)然,本發(fā)明創(chuàng)造并不局限于上述實(shí)施方式,熟悉本領(lǐng)域的技術(shù)人員在不違背本發(fā)明精神的前提下還可做出等同變形或替換,這些等同的變形或替換均包含在本申請(qǐng)權(quán)利要求所限定的范圍內(nèi)。

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