本發(fā)明具體涉及一種鷹嘴豆根瘤菌菌劑制備方法,屬于鷹嘴豆栽培方法
技術領域:
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背景技術:
:鷹嘴豆,學名:cicerarietinum,又名桃爾豆、雞豆、雞頭豆等,是印度和巴基斯坦的重要蔬菜之一,在歐洲食用鷹嘴豆也十分普遍,也是維吾爾醫(yī)學常用藥材。因其面形奇特,尖如鷹嘴,故稱此名。鷹嘴豆為豆科草本植物,起源于亞洲西部和近東地區(qū)。是世界上栽培面積較大的豆類植物,約一億五千萬畝,其中印度和巴基斯坦兩國的種植面積占全世界的80%以上,中國只有零星分布。鷹嘴豆的淀粉具有板栗香味。鷹嘴豆粉加上奶粉制成豆乳粉,易于吸收消化,是嬰兒和老年人的營養(yǎng)食品。鷹嘴豆還可以做成各種點心和油炸豆。籽粒可做利尿劑、催奶劑、可治療失眠,預防皮膚病和防治膽病。淀粉廣泛用于造紙工業(yè)和紡織工業(yè)。根瘤菌是與豆科植物共生,形成根瘤并固定空氣中的氮氣供植物營養(yǎng)的一類桿狀細菌。能促使植物異常增生的一類革蘭氏染色陰性需氧桿菌。正常細胞以鞭毛運動,無芽孢??衫枚喾N碳水化合物,并產(chǎn)生相當量的胞外粘液。目前,對鷹嘴豆根瘤菌的研究非常少,對于根瘤菌劑的研究在現(xiàn)有技術中,限于大豆根瘤菌劑、復合根瘤菌劑、花生根瘤菌劑、苜蓿根瘤菌劑等,對于鷹嘴豆根瘤菌的制備尚沒有現(xiàn)有技術進行研究。技術實現(xiàn)要素:因此,針對現(xiàn)有技術的上述問題,本發(fā)明提供一種鷹嘴豆根瘤菌菌劑制備方法,具體的,所述制備方法具體為用鷹嘴豆根瘤菌菌株、培養(yǎng)基、微量元素營養(yǎng)液、粘合劑制備鷹嘴豆根瘤菌菌劑;所述培養(yǎng)基為優(yōu)化的yma培養(yǎng)基。進一步的,所述培養(yǎng)基包括甘露醇8-12g,谷氨酸鈉0.3-0.7g,k2hpo40.3-0.7g,無水mgso40.05-0.15g,nacl0.03-0.07g,cacl20.02-0.06g,fecl30.02-0.06g,酵母粉0.8-1.2g,瓊脂粉15-20g,去離子水1000ml,培養(yǎng)基的ph值為6.g-7.2。進一步的,所述微量元素營養(yǎng)液包括znso40.15-0.25g,mnso41.0-2.0g,h3bo32.5-3.5g,cuso4·5h2o0.5-1.2g,h2moo40.01-0.03g,制備方法為將上述組分用去離子水溶解并定容到1l。進一步的,所述粘合劑為0.5-2.0%羧甲基纖維素鈉溶液。本發(fā)明的有益效果在于:本發(fā)明提供一種鷹嘴豆根瘤菌菌劑制備方法,通過本方法制備的鷹嘴豆根瘤菌菌劑,在大田對鷹嘴豆進行接種,鷹嘴豆的株高、根重量、地上部重量、根瘤重量等都獲得了明顯的提升。具體實施方式下面對本發(fā)明的具體實施方式進行說明:本實施例中,鷹嘴豆根瘤菌菌劑制備用到了菌株、培養(yǎng)基、配套微量元素營養(yǎng)液、粘合劑。1、菌株的準備。鷹嘴豆根瘤菌菌株從我們建立的鷹嘴豆根瘤菌菌庫里優(yōu)選出了一個適應性較好的菌株mesorhizobiummuleienseccbau83963(該菌株保藏于中國農(nóng)業(yè)大學菌庫,可以直接從該菌庫購買),用該菌株進行菌劑的制備。2、培養(yǎng)基的制備和菌株的發(fā)酵。選用優(yōu)化的yma培養(yǎng)基,更加有利于生長較慢的根瘤菌的培養(yǎng)。【甘露醇8-12g,谷氨酸鈉0.3-0.7g,k2hpo40.3-0.7g,無水mgso40.05-0.15g,nacl0.03-0.07g,cacl20.02-0.06g,fecl30.02-0.06g,酵母粉0.8-1.2g,去離子水1000ml,ph6.8-7.2】,按上述配方配置培養(yǎng)基后,滅菌處理,然后,接種菌株ccbau83963到制作的培養(yǎng)基里,25-28攝氏度下,以每分鐘160-180轉的轉速振蕩培養(yǎng)4-7天,直至菌體生長達到對數(shù)生長期,即od600大約為0.8-1.2;3、微量元素營養(yǎng)液的準備:微量元素液里含有多種成分,包括根瘤菌結瘤必須的鉬、鋅、錋、銅和錳,有利于根瘤菌的結瘤固氮;配方為:znso40.15-0.25g,mnso41.0-2.0g,h3bo32.5-3.5g,cuso4·5h2o0.5-1.2g,h2moo40.01-0.03g,去離子水溶解并定容到1l。4、粘合劑的制備:制備0.5-2.0%羧甲基纖維素鈉溶液。在接種前,先將微量元素液以1∶1000比例加入第2步獲得的菌液內(nèi),混勻;然后再加入1-1.5倍體積的粘合劑,混勻后就獲得了高活性速配菌劑,然后以每畝地種子用量為4-6公斤種子為例,接入15-30ml速配菌劑,戴上無菌手套拌勻后,在遮光條件下放置5-10分鐘即可播種。用上述鷹嘴豆根瘤菌菌劑,在大田做接種實驗,結果如表1所示,接種過鷹嘴豆根瘤菌菌劑的鷹嘴豆株高、根重量、地上部重量、根瘤數(shù)量、根瘤重量等均優(yōu)于未接種對照,證明該接種方法切實可行。表1鷹嘴豆株高(cm)根部重量(g)地上部重量(g)根瘤數(shù)量(個/株)接種菌劑處理832015020不接種對照526730從表1可以看出,接種使得鷹嘴豆結出了根瘤,結瘤率增長了200%;接種增加了地上部和根部重量,分別增加了105%和230%,鷹嘴豆株高增加了60%。以上是本發(fā)明的優(yōu)選實施方式,應當指出,對于本
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的普通技術人員來說,在不脫離本發(fā)明原理的前提下,還可以作出若干改選和潤飾,這些改進和潤飾也應視為本發(fā)明的保護范圍。技術特征:技術總結本發(fā)明公開了一種鷹嘴豆根瘤菌菌劑制備方法,屬于鷹嘴豆栽培方法
技術領域:
。目的是提供一種鷹嘴豆根瘤菌菌劑制備方法,具體的,所述制備方法具體為用鷹嘴豆根瘤菌菌株、培養(yǎng)基、微量元素營養(yǎng)液、粘合劑制備鷹嘴豆根瘤菌菌劑;所述培養(yǎng)基為優(yōu)化的YMA培養(yǎng)基。通過本方法制備的鷹嘴豆根瘤菌菌劑,在大田對鷹嘴豆進行接種,鷹嘴豆的株高、根重量、地上部重量、根瘤重量等都獲得了明顯的提升。技術研發(fā)人員:張俊杰;陳文峰;鄭堅強;孟牒;何培新;楊旭;郭晨;尚益民受保護的技術使用者:鄭州輕工業(yè)學院技術研發(fā)日:2017.05.11技術公布日:2017.08.18