本發(fā)明涉及化學(xué)中分離提取技術(shù)，具體地，涉及金釵石斛中一種新的成分，及其分離制備的方法。
背景技術(shù)：
金釵石斛(dendrobiumnobile)，為蘭科石斛屬植物，是我國傳統(tǒng)名貴中藥，貴州道地藥材。金釵石斛以莖入藥，甘，性微寒，益胃生津，滋陰清熱。用于陰傷津虧、口干煩渴、食少干嘔，病后虛熱、目暗不明。研究表明石斛屬植物具有抗腫瘤、增強(qiáng)機(jī)體免疫能力、抗氧化、抗血小板凝集及降血糖等作用，有較大的開發(fā)和應(yīng)用前景，符合國家倡導(dǎo)的大健康研究主題。
金釵石斛因其藥理作用明顯被譽(yù)為“民間仙草、植物黃金”，但是其含有的化學(xué)成分復(fù)雜多樣，主要有生物堿、芳香類和倍半萜類化合物，對金釵石斛生物堿部分研究較多，為了徹底了解金釵石斛的活性成分，對金釵石斛中新化合物的開發(fā)和分離還是非常需要的。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明提供一種金釵石斛中新化合物提取分離方法，所述新成分的化學(xué)名稱為：dendrocandinv，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下：
本發(fā)明還提供了一種金釵石斛中新化合物提取分離方法，包括以下步驟。
1)取金釵石斛干燥莖、粉碎后，用體積分?jǐn)?shù)70～95％乙醇回流提取1～4次，每次提取1～5小時，合并提取液減壓濃縮得到乙醇浸膏；
2)將步驟1)中所得乙醇浸膏分散于0.2％～1％的鹽酸水溶液充分?jǐn)嚢韬?，過濾，得到酸水不溶物；酸水不溶物依次用石油醚、石油醚：乙酸乙酯1：1體積、乙酸乙酯各提取1～4次，減壓濃縮得到各部位浸膏；
3)將步驟2)中乙酸乙酯部位浸膏合并后上硅膠柱色譜，用石油醚-乙酸乙酯以不同體積比進(jìn)行梯度洗脫，結(jié)合tlc檢測方法，根據(jù)極性不同分為若干個組分；
4)將步驟3)中某個組分過sephadexlh-20凝膠柱，分為若干個亞組分；
5)將步驟4)中得到的某個亞組分過制備hplc，用甲醇-水70％～100％等度洗脫，得到新化合物。
上述步驟5)用乙腈-水代替甲醇-水等度洗脫，也可以得到基本類似結(jié)果。
優(yōu)選的，所述步驟1)中體積分?jǐn)?shù)90％乙醇回流提取3次，每次提取2小時。
優(yōu)選的，所述步驟2)中鹽酸水溶液為0.5％，萃取3次。
優(yōu)選的，所述步驟3)中用石油醚-乙酸乙酯以體積比100:0、9:1、8:2、6:4、0:100進(jìn)行梯度洗脫，根據(jù)極性不同分為8個組分。
優(yōu)選的，所述步驟4)中用100％甲醇等度洗脫，分為4亞組分。
優(yōu)選的，所述步驟5)中所用甲醇-水85％等度洗脫。
本發(fā)明提供的分離提取方法成功從金釵石斛中提取分離了一種新成分，為金釵石斛進(jìn)一步的藥理藥效研究提供了物質(zhì)基礎(chǔ)。
附圖說明
圖1為本發(fā)明新成分的hr-esi-ms；
圖2為本發(fā)明新成分的1h-nmr光譜圖；
圖3為本發(fā)明新成分的13c-nmr光譜圖；
圖4為本發(fā)明新成分的dept135光譜圖；
圖5為本發(fā)明新成分的核磁共振hsqc光譜圖；
圖6為本發(fā)明新成分的核磁共振hmbc光譜圖。
具體實(shí)施方式
現(xiàn)結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步說明。
實(shí)施例1
本發(fā)明所述的新成分的制備方法包括以下步驟：
1)取金釵石斛莖16kg，經(jīng)干燥、粉碎后，用體積分?jǐn)?shù)90％乙醇回流提取3次，減壓濃縮得到乙醇浸膏1.4kg；
2)將步驟1)中乙醇浸膏分散0.5％的鹽酸水溶液充分?jǐn)嚢韬?，過濾，得到酸水不溶物；酸水不溶物依次用石油醚、石油醚：乙酸乙酯1：1體積、乙酸乙酯各提取3次，減壓濃縮得到各部位浸膏；
3)將步驟2)中乙酸乙酯部位浸膏點(diǎn)tlc板合并之后上硅膠柱色譜，用石油醚-乙酸乙酯以體積比100:0、9:1、8:2、6:4、0:100梯度洗脫，結(jié)合tlc檢測方法，根據(jù)極性不同分為8個組分，fr.1～fr.8，以下每個組分都結(jié)合tlc分析；
4)將步驟3)中第5個組分fr.5過sephadexlh-20凝膠柱，用純甲醇洗脫，分為4個部分fr.5.1～fr.5.4；
5)步驟4)中fr.5.3過制備hplc，用體積分?jǐn)?shù)85％甲醇-水，色譜柱用c18，10×250mm，流速4ml/min洗脫,收集12～15min之間色譜峰，檢測波長230nm，得到新成分。
上述步驟1)中回流提取用的含水乙醇體積分?jǐn)?shù)85％，90％，100％，回流提取1次，2次，4次；步驟2)中萃取1次，2次，4次；步驟4)中用體積分?jǐn)?shù)78％，80％，83％的乙腈-水；步驟5)中用體積分?jǐn)?shù)78％，80％，83％的乙腈-水。步驟同實(shí)施例1，也可以取得本發(fā)明所述的有益效果。
本發(fā)明進(jìn)行tlc檢識的條件：展開劑為石油醚-乙酸乙酯系統(tǒng)及氯仿-甲醇系統(tǒng)，顯色劑a：紫外燈(254nm)下觀察熒光；顯色劑b：碘缸顯色。
結(jié)構(gòu)鑒定：利用的光譜技術(shù)，主要包括核磁共振譜(1h-nmr、13c-nmr、dept、hsqc、hmbc)和質(zhì)譜分析(hr-esi-ms)鑒定化合物的結(jié)構(gòu)。
該化合物為黃色膠狀物，遇三氯化鐵試劑顯藍(lán)色。hr-esi-ms[m+h]+m/z527.13366(計算值527.13306)，結(jié)合nmr譜確定化合物的分子式為c30h22o9,通過光譜技術(shù)，確定該化合物為。其核磁數(shù)據(jù)見表1。
表1新成分的核磁數(shù)據(jù)(400/100mhz，cd3od)：
盡管已經(jīng)示出和描述了本發(fā)明的實(shí)施例，對于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員而言，可以理解在不脫離本發(fā)明的原理和精神的情況下可以對這些實(shí)施例進(jìn)行多種變化、修改、替換和變型，本發(fā)明的范圍由所附權(quán)利要求及其等同物限定。