本發(fā)明屬于藥物化學(xué)的合成技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種具有4,5-二氫-1,2,3-三氮唑結(jié)構(gòu)的新型法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制劑的制備方法。

背景技術(shù)：

ras蛋白是一種小的鳥嘌呤結(jié)合蛋白，它在信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞增殖和惡性轉(zhuǎn)化方面起著重要作用。ras基因突變常見于哺乳動(dòng)物和人類的許多癌癥中，其表達(dá)產(chǎn)物ras蛋白對(duì)來自表皮因子和血小板源性生長(zhǎng)因子信號(hào)，以結(jié)合gtp的形式，通過一系列信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，引起細(xì)胞分裂。當(dāng)gtp水解為gdp時(shí)，信號(hào)終止。一旦ras基因發(fā)生突變，ras蛋白始終為結(jié)合gtp形式，則連續(xù)的生長(zhǎng)信號(hào)導(dǎo)致細(xì)胞的惡性增殖，造成生物組織的癌變。

ras蛋白在轉(zhuǎn)導(dǎo)信號(hào)時(shí)，有一定的位置要求，即必須停靠在細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)，方能與氣他生長(zhǎng)細(xì)胞進(jìn)行信息的交換。這一過程的關(guān)鍵步驟是在法尼基轉(zhuǎn)移酶(ftase)的催化作用下，ras蛋白羧基端的caax(caax的組成中c為cys，a為疏水性氨基酸，x為甲硫氨酸和絲氨酸等)盒被法尼基化。因此，能抑制法尼基轉(zhuǎn)移酶的活性、阻止ras蛋白的caax端基法尼化的化合物，將是一類具有潛在應(yīng)用價(jià)值的抗癌藥物，法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制劑成為藥物分子設(shè)計(jì)的新靶點(diǎn)，引起了國(guó)外許多著名藥物研究機(jī)構(gòu)和藥物公司的關(guān)注。

本課題組通過計(jì)算機(jī)輔助藥物設(shè)計(jì)的方法，設(shè)計(jì)并合成了一系列具有4,5-二氫-1,2,3-三氮唑結(jié)構(gòu)的新型法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制劑，并對(duì)其進(jìn)行了相關(guān)活性測(cè)試。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明解決的技術(shù)問題是提供了一種合成方法簡(jiǎn)單，分子結(jié)構(gòu)新穎的具有4,5-二氫-1,2,3-三氮唑結(jié)構(gòu)的新型法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制劑制備方法。

本發(fā)明為解決上述技術(shù)問題采用如下技術(shù)方案，一種具有4,5-二氫-1,2,3-三氮唑結(jié)構(gòu)的新型法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制劑分子結(jié)構(gòu)為：其中r為苯，鄰羥基苯，間羥基苯和對(duì)羥基苯。

本發(fā)明為解決上述技術(shù)問題采用如下技術(shù)方案，一種具有4,5-二氫-1,2,3-三氮唑結(jié)構(gòu)的新型法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制劑制備方法，其特征在于具體步驟為：

a、n-boc-4-哌啶酮與碳酸二甲酯在叔丁醇鉀的作用下反應(yīng)得到n-boc-3-甲酸甲酯-4-哌啶酮；

b、n-boc-3-甲酸甲酯-4-哌啶酮在乙酸銨作用下，酮羰基氧化還原成氨基，得到化合物n-boc-3-甲酸甲酯-4-氨基-3-烯-哌啶；

c、n-boc-3-甲酸甲酯-4-氨基-3-烯-哌啶與氯甲酰乙酸乙酯在tea作用下發(fā)生取代反應(yīng)得到化合物n-boc-3-甲酸甲酯-4-氨基甲酰乙酸乙酯-3-烯-哌啶；

d、n-boc-3-甲酸甲酯-4-氨基甲酰乙酸乙酯-3-烯-哌啶在叔丁醇鉀的作用下發(fā)生分子內(nèi)成環(huán)得到化合物然后在酸性條件下該化合物進(jìn)行分子內(nèi)氫轉(zhuǎn)移和羰基還原得到化合物

e、在強(qiáng)酸條件下，加熱脫去酯基和boc基團(tuán)，得到化合物

f、在三氯氧磷作用下，羥基被氯取代得到化合物

g、在濃鹽酸作用下使氯代碳氮雙鍵變?yōu)轷０锋I得到化合物

h、在堿性條件下，進(jìn)行boc氨基保護(hù)，同時(shí)進(jìn)行分子內(nèi)氫轉(zhuǎn)移得到化合物

i、在碳酸銫作用下與碘甲烷反應(yīng)得到化合物

j、在有機(jī)強(qiáng)酸作用下使氯代碳碳雙鍵變?yōu)轷０锋I得到化合物

k、經(jīng)過選擇性羰基還原生成羥基得到化合物

l、脫去羥基生成碳碳雙鍵得到化合物

m、與疊氮化合物反應(yīng)得到化合物

n、脫去boc基團(tuán)和甲基得到化合物

o、與磺酸化合物反應(yīng)得到

進(jìn)一步限定，步驟a的具體過程為：在反應(yīng)瓶中，把1eq的n-boc-4-哌啶酮加入到10v體積的甲苯中，再加入2eq的碳酸二甲酯和2eq的叔丁醇鉀，加熱至70℃反應(yīng)1h，冷卻至室溫，加水淬滅，用1mol/l的hcl調(diào)節(jié)反應(yīng)液ph為7，乙酸乙酯萃取，無水硫酸鈉干燥后，旋干得到黃色油狀物n-boc-3-甲酸甲酯-4-哌啶酮。

進(jìn)一步限定，步驟b的具體過程為：將1eq的n-boc-3-甲酸甲酯-4-哌啶酮加入到10倍體積的甲醇中，再加入3eq的乙酸銨，反應(yīng)過夜，旋干甲醇，加入3倍體積的水，二氯甲烷萃取反應(yīng)液后用無水硫酸鈉干燥，旋干后得到紅的油狀液體n-boc-3-甲酸甲酯-4-氨基-3-烯-哌啶。

進(jìn)一步限定，步驟c的具體過程為：將1eq的n-boc-3-甲酸甲酯-4-氨基-3-烯-哌啶加入到8倍體積的dcm中，再加入1.05eq的tea，冷卻至10℃，滴加1.05eq的4-氯甲酰乙酸乙酯，室溫反應(yīng)過夜，再加入8倍體積的dcm稀釋反應(yīng)液，水洗兩次，無水硫酸鈉干燥，旋干既得紅色油狀產(chǎn)物n-boc-3-甲酸甲酯-4-氨基甲酰乙酸乙酯-3-烯-哌啶。

進(jìn)一步限定，步驟d的具體過程為：把1eq的n-boc-3-甲酸甲酯-4-氨基甲酰乙酸乙酯-3-烯-哌啶加入到10倍體積的thf中，再分批加入2.0eq的t-buok，反應(yīng)溫度控制在小于25℃，反應(yīng)1h后加入冰水淬滅，用2mol/l的hcl調(diào)節(jié)反應(yīng)液ph為3，過濾，真空干燥得到類白色固體產(chǎn)品

進(jìn)一步限定，步驟e的具體過程為：在10eq6mol/l的hcl溶液中，分批加入1.0eq的加熱至100℃，反應(yīng)過夜，旋干反應(yīng)溶劑，再用乙醚洗滌，真空干燥得到類白色固體

進(jìn)一步限定，步驟f的具體過程為：向5eqpocl3中分批加入1.0eq的加熱至100℃，反應(yīng)過夜，旋干pocl3得到紅色油狀產(chǎn)物

進(jìn)一步限定，步驟g的具體過程為：把加入到4倍體積的1,4-二氧六環(huán)中，再加入4倍體積的濃鹽酸，加熱至100℃，回流反應(yīng)2天，旋干溶劑后加入10倍體積的乙酸乙酯，水洗三次，干燥旋干后得到棕色固體

進(jìn)一步限定，步驟h的具體過程為：把1eq的加入到10倍體積的1,4-二氧六環(huán)和10倍體積的水中，再分批加入3.0eq的碳酸鈉和1.5eq的(boc)2o，室溫反應(yīng)10h后，過濾，再用乙酸乙酯洗滌濾餅后用乙酸乙酯萃取反應(yīng)液，再用氯化鈉溶液洗滌，干燥，旋反應(yīng)液得到

進(jìn)一步限定，步驟i的具體過程為：把1.0eq的加入到10倍體積的dmf中，再加入1.5eq的cs2co3，1.3eq的碘化鉀，室溫反應(yīng)過夜，加入冰水淬滅反應(yīng)液，乙酸乙酯萃取反應(yīng)液，氯化鈉溶液洗滌，干燥，旋干，再用乙醚打漿，過濾，真空干燥得到白色固體

進(jìn)一步限定，步驟j的具體過程為：將1.0eq的加入到4倍體積的1,4-二氧六環(huán)中，再加入一定量的有機(jī)強(qiáng)酸，加熱至100℃，回流反應(yīng)2天，旋干溶劑后加入10倍體積的乙酸乙酯，水洗三次，干燥旋干后得到棕色固體所述的有機(jī)強(qiáng)酸為三氟甲磺酸。

進(jìn)一步限定，步驟k的具體過程為：在反應(yīng)容器中將加入到甲醇中，再加入羰基還原催化劑nabh(oac)3，氮?dú)獗Ｗo(hù)反應(yīng)體系，加熱至回流反應(yīng)，tlc監(jiān)控原料反應(yīng)完全后蒸除甲醇，加入二氯甲烷，用碳酸氫鈉飽和溶液調(diào)節(jié)反應(yīng)液的ph為中性，分出有機(jī)相，蒸除溶劑后得到

進(jìn)一步限定，步驟l的具體過程為：在反應(yīng)容器中將固體酸性催化劑so2-4/tio2/al2o3和沸石加入到甲苯中，升溫至回流反應(yīng)，tlc監(jiān)控原料反應(yīng)完后蒸除反應(yīng)溶劑甲苯，再加入飽和nacl溶液，用氯仿萃取反應(yīng)液多次，合并有機(jī)相，用無水氯化鈣干燥，蒸除氯仿后得到

進(jìn)一步限定，步驟m的具體過程為：在反應(yīng)瓶中，1.0eq的加入到20倍體積的叔丁醇中，再加入3.0eq的碳酸鉀和1.2eq的tmsn3，在室溫下反應(yīng)一段時(shí)間后，tlc監(jiān)控原料反應(yīng)完全，得到化合物

進(jìn)一步限定，步驟n的具體過程為：在反應(yīng)瓶中，將1.0eq的加入到10倍體積的甲醇和10體積的12mol/l的hcl/1,4-二氧六環(huán)中，室溫反應(yīng)過夜，旋干，乙醚洗滌，得到

進(jìn)一步限定，步驟o的具體過程為：在反應(yīng)瓶中，把加入到dmf中，再加入三乙胺和磺酸化合物，加熱到70℃，反應(yīng)一段時(shí)間得到化合物

本發(fā)明所述的具有4,5-二氫-1,2,3-三氮唑結(jié)構(gòu)的新型法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制劑的合成路線為：

本發(fā)明合成了一系列具有4,5-二氫-1,2,3-三氮唑結(jié)構(gòu)的新型法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制劑并進(jìn)行了抗腫瘤活性測(cè)試，發(fā)現(xiàn)該類化合物具有良好的抗腫瘤活性。

具體實(shí)施方式

以下通過實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的上述內(nèi)容做進(jìn)一步詳細(xì)說明，但不應(yīng)該將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實(shí)施例，凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容實(shí)現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。

實(shí)施例1

在反應(yīng)瓶中，把n-boc-4-哌啶酮20g(0.1mol)加入到甲苯200ml中，再加入碳酸二甲酯18g(0.2mol)和叔丁醇鉀22g(0.2mol)，加熱至70℃反應(yīng)1h，冷卻至室溫，加水100ml淬滅，用1mol/l的hcl調(diào)節(jié)反應(yīng)液ph為7，乙酸乙酯萃取，無水硫酸鈉干燥后，旋干得到黃色油狀物n-boc-3-甲酸甲酯-4-哌啶酮25g；¹hnmr(400mhz,cd3cl)δ:3.81(s,1h),3.71(d,j＝8.4hz,1h),3.68(d,j＝8.4hz,1h),3.45(s,3h),3.07-3.05(m,2h),2.76-2.73(m,2h),1.37(s,9h).ms-esi(m/z):258.3[m+h⁺]。

實(shí)施例2

在反應(yīng)瓶中，將n-boc-3-甲酸甲酯-4-哌啶酮25g(0.1mol)加入到甲醇300ml中，再加入乙酸銨22g(0.3mol)，反應(yīng)過夜，tlc監(jiān)控原料反應(yīng)完全，旋干甲醇，加入水900ml，用二氯甲烷300ml萃取反應(yīng)液三次，合并有機(jī)相后用無水硫酸鈉干燥，旋干后得到紅的油狀液體n-boc-3-甲酸甲酯-4-氨基-3-烯-哌啶25g；¹hnmr(400mhz,cd3cl)δ:8.56(s,2h),3.93(s,2h),3.77(s,3h),3.57-3.55(m,2h),2.16-2.13(m,2h),1.37(s,9h).ms-esi(m/z):257.3[m+h⁺]。

實(shí)施例3

在反應(yīng)瓶中，將n-boc-3-甲酸甲酯-4-氨基-3-烯-哌啶26g(0.1mol)加入到二氯甲烷200ml中，再加入tea11g(0.11mol)，冷卻至10℃，緩慢滴加4-氯甲酰乙酸乙酯16g(0.105mol)，室溫反應(yīng)過夜，tlc監(jiān)控原料反應(yīng)完全，再加入二氯甲烷200ml稀釋反應(yīng)液，水洗兩次，無水硫酸鈉干燥，旋干既得紅色油狀產(chǎn)物n-boc-3-甲酸甲酯-4-氨基甲酰乙酸乙酯-3-烯-哌啶25g；¹hnmr(400mhz,cd3cl)δ:4.71(s,2h),3.93(s,2h),3.79(s,3h),3.57-3.55(m,2h),3.53(s,2h),2.16-2.13(m,2h),1.37(s,9h),1.29(s,3h).ms-esi(m/z):371.4[m+h⁺]。

實(shí)施例4

在反應(yīng)瓶中，把n-boc-3-甲酸甲酯-4-氨基甲酰乙酸乙酯-3-烯-哌啶37g(0.1mol)加入到thf400ml中，再分批加入t-buok23g(0.2mol)，反應(yīng)溫度控制在小于25℃，反應(yīng)1h后加入冰水300ml淬滅，用2mol/l的hcl調(diào)節(jié)反應(yīng)液ph為3，過濾，真空干燥得到類白色固體產(chǎn)品32g；¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:11.51(s,1h),5.35(s,1h),4.71(s,2h),4.33(d,j＝4.0hz,2h),3.66-3.62(m,2h),3.25(d,j＝12.0hz,2h),1.41-1.39(m,9h),1.33-1.32(m,3h)。

實(shí)施例5

在反應(yīng)瓶中，加入在6mol/l的hcl溶液200ml，再分批加入34g(0.1mol)，加熱至100℃，反應(yīng)過夜，旋干反應(yīng)溶劑，再用乙醚洗滌，真空干燥得到類白色固體15g；¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:11.47(s,1h),5.95(s,1h),5.41(s,1h),3.86-3.85(m,2h),3.71(d,j＝12.0hz,2h),3.11-3.09(m,2h),1.90(s,1h)。

實(shí)施例6

在密閉的反應(yīng)瓶中，向三氯氧磷50g(0.5mol)中分批加入16g(0.1mol)，緩慢加熱至100℃，反應(yīng)過夜，tlc監(jiān)控原料反應(yīng)完全后，真空旋干三氯氧磷得到紅色油狀產(chǎn)物16g；¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:7.61(s,1h),3.81(s,2h),3.37(d,j＝12.0hz,2h),3.13-3.12(m,2h),1.87(s,1h)。

實(shí)施例7

在帶有溫度計(jì)和攪拌的反應(yīng)瓶中，把20g加入到1,4-二氧六環(huán)100ml中，再緩慢加入濃鹽酸100ml，加熱至100℃，回流反應(yīng)2天，tlc監(jiān)控原料反應(yīng)完全后，旋干溶劑并把濃縮物加入10倍體積的乙酸乙酯，水洗三次，分出有機(jī)相，干燥旋干后得到棕色固體17g；¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:8.17(s,1h),6.62(s,1h),3.35(s,2h),2.96(d,j＝12.0hz,2h),2.07-2.05(m,2h).ms-esi(m/z):185.6[m+h⁺]。

實(shí)施例8

在反應(yīng)瓶中，把18g(0.1mol)加入到1,4-二氧六環(huán)200ml和水200ml中，再分批加入碳酸鈉30g(0.3mol)和(boc)2o33g(0.15mol)，室溫反應(yīng)10h后，tlc監(jiān)控原料反應(yīng)完全，過濾反應(yīng)液，再用乙酸乙酯100ml洗滌濾餅后用乙酸乙酯200ml萃取反應(yīng)液三次，再用氯化鈉溶液洗滌，干燥，旋反應(yīng)液得到20g；¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:6.61(s,1h),3.93(s,2h),3.54(s,3h),3.57(d,j＝12.0hz,2h),2.07-2.05(m,2h),1.39(s,9h)

實(shí)施例9

在反應(yīng)液中，把28g(0.1mol)加入到dmf300ml中，再加入碳酸銫50g(0.15mol)，碘甲烷20g(0.13mol)，室溫反應(yīng)過夜，tlc監(jiān)控原料反應(yīng)完全，加入冰水100ml淬滅反應(yīng)液，乙酸乙酯200ml萃取反應(yīng)液三次，飽和氯化鈉溶液200ml洗滌反應(yīng)液，干燥，旋干，再用乙醚打漿，過濾，真空干燥得到白色固體26g；¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:6.61(s,1h),3.94(s,2h),3.54(s,3h),3.55(d,j＝8.0hz,2h),2.07-2.05(m,2h),1.38(s,9h).ms-esi(m/z):299.8[m+h⁺]。

實(shí)施例10

在反應(yīng)液中，將30g(0.1mol)加入到1,4-二氧六環(huán)200ml中，再緩慢加入三氟甲磺酸20ml，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，加熱至100℃，回流反應(yīng)3h，tlc監(jiān)控原料反應(yīng)完全，把反應(yīng)液倒入冰水1000ml中，再用碳酸鈉飽和溶液調(diào)節(jié)反應(yīng)液的ph為中性，再用乙酸乙酯300ml萃取反應(yīng)液三次，合并有機(jī)相，再用水洗三次，分出有機(jī)相干燥旋干后得到棕色固體23g；¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:4.17(s,2h),3.83(s,2h),3.54(s,2h),3.51(d,j＝8.0hz,3h),2.07-2.05(m,2h),1.37(s,9h)；ms-esi(m/z):281.3[m+h]⁺。

實(shí)施例11

在反應(yīng)瓶中，把55g加入到甲醇300ml中，再加入羰基還原催化劑nabh(oac)320g，氮?dú)獗Ｗo(hù)反應(yīng)體系，加熱至回流反應(yīng)，tlc監(jiān)控原料反應(yīng)完全后蒸除甲醇，加入二氯甲烷200ml，用碳酸氫鈉飽和溶液調(diào)節(jié)反應(yīng)液的ph為中性，分出有機(jī)相，蒸除溶劑后得到43g；

實(shí)施例12

在反應(yīng)瓶中，把50g、固體酸性催化劑so2-4/tio2/al2o35g和沸石10g加入到甲苯200ml中，緩慢升溫至回流反應(yīng)，tlc監(jiān)控原料反應(yīng)完后蒸除反應(yīng)溶劑甲苯，再加入一定量的飽和nacl溶液，用氯仿100ml萃取反應(yīng)液三次，合并有機(jī)相，用無水氯化鈣干燥，蒸除氯仿后得到42g；¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:7.19(s,1h),6.71(s,1h),3.93-3.91(m,2h),3.57(d,j＝12.0hz,2h),3.52(s,3h),2.11-2.10(m,2h),1.39(s,9h)；ms-esi(m/z):265.3[m+h⁺]。

實(shí)施例13

在反應(yīng)瓶中，把28g(0.1mol)加入到叔丁醇400ml中，再加入碳酸鉀42g(0.3mol)和tmsn314g(0.12mol)，在室溫下反應(yīng)一段時(shí)間后，tlc監(jiān)控原料反應(yīng)完全，把反應(yīng)液倒入水500ml中，用乙酸乙酯200ml萃取反應(yīng)液三次，合并有機(jī)相，蒸除溶劑得到化合物29g

實(shí)施例14

在反應(yīng)瓶中，將30g(0.1mol)加入到甲醇300ml和12mol/l的hcl/1,4-二氧六環(huán)200ml中，室溫反應(yīng)過夜，tlc監(jiān)控原料反應(yīng)完全，旋干，乙醚洗滌濃縮物，得到17g；¹hnmr(400mhz,cd3cl)δ:8.03(s,1h),3.57(s,1h),3.32(s,2h),3.01-3.00(m,2h),2.75(s,1h),2.19-2.17(m,1h),2.01-1.99(m,1h),1.91(s,1h).ms-esi(m/z):194.2[m+h⁺]。

實(shí)施例15

在反應(yīng)瓶中，把19g(0.1mol)加入到dmf200ml中，再加入三乙胺30ml和苯磺酸31g(0.2mol)，加熱到70℃，反應(yīng)一段時(shí)間得到化合物31g；¹hnmr(400mhz,cd3cl)δ:8.13(s,1h),7.85-7.79(m,5h),3.94-3.92(m,2h),3.57-3.55(m,2h),3.53(s,2h),3.54(s,1h),2.75(s,1h),2.01-1.99(m,1h).ms-esi(m/z):334.4[m+h⁺]。

實(shí)施例16

反應(yīng)瓶中，把19g(0.1mol)加入到dmf200ml中，再加入三乙胺30ml和鄰羥基苯磺酸35g(0.2mol)，加熱到70℃，反應(yīng)一段時(shí)間得到化合物29g；¹hnmr(400mhz,cd3cl)δ:8.13(s,1h),7.69-7.65(m,3h),6.93(s,1h),5.31(s,1h),3.94(s,2h),3.57-3.55(m,2h),3.53(s,2h),3.51(s,1h),2.73(s,1h),2.07-2.05(m,1h).ms-esi(m/z):350.4[m+h⁺]。

實(shí)施例17

反應(yīng)瓶中，把19g(0.1mol)加入到dmf200ml中，再加入三乙胺30ml和間羥基苯磺酸35g(0.2mol)，加熱到70℃，反應(yīng)一段時(shí)間得到化合物29g；¹hnmr(400mhz,cd3cl)δ:8.09(s,1h),7.56-7.49(m,3h),6.95(s,1h),5.35(s,1h),3.93(s,2h),3.57-3.55(m,2h),3.53(s,2h),3.51(s,1h),2.73(s,1h),2.01-1.99(m,1h).ms-esi(m/z):350.4[m+h⁺]。

實(shí)施例18

抗腫瘤活性測(cè)試

收集生長(zhǎng)期乳腺癌細(xì)胞mcf-7，以mts法測(cè)定一下化合物的抗癌活性，將細(xì)胞以適當(dāng)濃度(每毫升4×10⁴個(gè)細(xì)胞)加到96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中(含10％胎小牛血清得培養(yǎng)液配成單個(gè)細(xì)胞懸液)，培養(yǎng)24小時(shí)后，在37℃、體積濃度為5％的co2條件下與不同濃度的化合物作用72小時(shí)，然后將mts(最終質(zhì)量濃度2mg/ml)和dms(最終摩爾濃度30μm)的混合物直接加入含細(xì)胞的培養(yǎng)基中，繼續(xù)置培養(yǎng)箱孵育4h。作用4h后，棄去上清液，每孔加入150μldmso，振蕩，細(xì)胞存活率通過其對(duì)mts作用的代謝物在酶聯(lián)免疫監(jiān)測(cè)儀490nm波長(zhǎng)下的吸收率測(cè)定。

初步生物活性測(cè)試表明，該類化合物在乳腺癌細(xì)胞mcf-7中對(duì)癌細(xì)胞均有抑制作用。

綜上所述，本發(fā)明提供了一種新型法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制劑及其制備方法，這是該類化合物該用途的首次發(fā)現(xiàn)，具有重大的研發(fā)潛力。

以上實(shí)施例描述了本發(fā)明的基本原理、主要特征及優(yōu)點(diǎn)，本行業(yè)的技術(shù)人員應(yīng)該了解，本發(fā)明不受上述實(shí)施例的限制，上述實(shí)施例和說明書中描述的只是說明本發(fā)明的原理，在不脫離本發(fā)明原理的范圍下，本發(fā)明還會(huì)有各種變化和改進(jìn)，這些變化和改進(jìn)均落入本發(fā)明保護(hù)的范圍內(nèi)。