本發(fā)明涉及保健酒加工
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體而言，涉及一種基于高壓脈沖電場(chǎng)技術(shù)的鹿血酒制備方法。
背景技術(shù)：
：眾所周知，鹿的全身都是寶，鹿血系名貴中藥，自古以來(lái)就是宮廷皇族、達(dá)官貴人的滋補(bǔ)珍品，鹿血中含有豐富的氨基酸、維生素、多糖類(lèi)、酶類(lèi)，還有多種脂類(lèi)、固醇類(lèi)、激素。鹿血在歷代醫(yī)書(shū)中有詳細(xì)記載，最早見(jiàn)于唐代孫思邈《千金翼方·食治》，至明朝李時(shí)珍《本草綱目》，均對(duì)鹿血的醫(yī)療作用做了詳細(xì)記載：“主陽(yáng)痿、補(bǔ)虛，止腰痛，鼻衄，跌傷，狂犬傷，和酒服治肺痿吐血，及崩中帶下，諸氣痛欲危者飲之立愈。大補(bǔ)虛損，益精血，解痘毒、藥毒”。近代臨床研究表明，鹿血有促進(jìn)新陳代謝，增強(qiáng)體質(zhì)的作用，對(duì)治療神經(jīng)衰弱及各種虛損、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、痙攣癥療效甚佳；大棗補(bǔ)中益氣，養(yǎng)血安神，用于脾虛食少，乏力便溏，婦人臟躁；枸杞子滋補(bǔ)肝腎，益精明目，用于虛勞精虧，腰膝酸痛，眩暈耳鳴，內(nèi)熱消渴，血虛萎黃，目昏不明。高壓脈沖電場(chǎng)技術(shù)是近年來(lái)液體食品非熱處理領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)之一，常見(jiàn)于食品殺菌，此技術(shù)可以最大限度的保留食品原有的色澤和風(fēng)味。在成分提取方面，人們常用回流提取、超聲波、微波等方法提取藥材中的有效成分，這些方法存在著溶劑消耗大、提取時(shí)間長(zhǎng)、操作步驟繁瑣等不足之處，而高壓脈沖電場(chǎng)可以彌補(bǔ)這些缺點(diǎn)，其作用機(jī)理是利用高壓電脈沖的作用使細(xì)胞膜脂雙層上形成微孔，從而使細(xì)胞膜的通透性和膜導(dǎo)電率增強(qiáng)，細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)泄漏出來(lái)，達(dá)到提取的目的。陳釀是制酒工藝中關(guān)鍵的一個(gè)步驟，俗話說(shuō)：“酒越陳越香”，經(jīng)陳釀后的酒香氣更柔和、口感更醇厚，但人們通常采用自然陳釀的方法比較費(fèi)時(shí)費(fèi)力。有鑒于此，特提出本發(fā)明。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的在于提供一種基于高壓脈沖電場(chǎng)技術(shù)的鹿血酒制備方法，該方法采用多種中藥與鹿血配伍，不僅增強(qiáng)了鹿血酒的功效，還改善酒的香氣、風(fēng)味，使酒體更加濃郁、豐富。經(jīng)蛋白酶處理的鹿血酒營(yíng)養(yǎng)成分更易被人體吸收。高壓脈沖電場(chǎng)技術(shù)可使有效成分充分浸出，解決酒自然陳釀消耗時(shí)間長(zhǎng)的問(wèn)題，經(jīng)催陳后的鹿血酒酒味醇厚、回味綿長(zhǎng)、具有令人愉悅的酒香，利用高壓脈沖電場(chǎng)制備鹿血酒方法簡(jiǎn)單易行，不僅提高了酒的品質(zhì)還提高了生產(chǎn)效率。為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的上述目的，特采用以下技術(shù)方案：本發(fā)明涉及一種基于高壓脈沖電場(chǎng)技術(shù)的鹿血酒制備方法，包括1)、鹿血經(jīng)預(yù)處理后用高壓脈沖電場(chǎng)進(jìn)行提取得到鹿血提取物；2)、將人參、枸杞子、黃精、茯苓以及梔子粉碎、乙醇回流提取并濃縮后得到中藥濃縮液；3)、將所述鹿血提取物、所述中藥濃縮液與高粱酒混合攪拌均勻后使用高壓脈沖電場(chǎng)催陳，再經(jīng)過(guò)濾后即得；其中，步驟1)、2)無(wú)先后順序。本發(fā)明提供的基于高壓脈沖電場(chǎng)技術(shù)的鹿血酒制備方法，采用高壓脈沖電場(chǎng)的方法引入電場(chǎng)作為能量，從而加速氧化、還原、酯化反應(yīng)的發(fā)生，促進(jìn)有效成分充分釋出，又能使酒中醇類(lèi)物質(zhì)和雜味物質(zhì)減少，酯類(lèi)、酸類(lèi)、醛類(lèi)物質(zhì)增加，達(dá)到催陳的目的。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果為：1)、本申請(qǐng)所提供的一種高壓脈沖電場(chǎng)制備鹿血酒的方法，利用高壓脈沖電場(chǎng)提取鹿血中的有效成分，與傳統(tǒng)提取方法相比有所創(chuàng)新，在高壓電脈沖的作用下使細(xì)胞膜脂雙層上形成微孔，從而增強(qiáng)細(xì)胞膜的通透性和膜導(dǎo)電率，使細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)泄漏出來(lái)，提高提取效率。2)、本申請(qǐng)所提供的一種高壓脈沖電場(chǎng)制備鹿血酒的方法，利用高壓脈沖電場(chǎng)技術(shù)對(duì)鹿血酒進(jìn)行催陳，與傳統(tǒng)自然陳釀方法相比操作簡(jiǎn)單，節(jié)省時(shí)間，可提高生產(chǎn)效率。3)、本申請(qǐng)所提供的一種高壓脈沖電場(chǎng)制備鹿血酒的方法，以鹿血為主要材料，經(jīng)蛋白酶解的鹿血腥味小、沉淀少、營(yíng)養(yǎng)更易于人體吸收，與本發(fā)明所述的其他藥材配伍，功效更顯著。具體實(shí)施方式本發(fā)明所提供的鹿血酒，由以下組分制成：鹿血：取自梅花鹿，味甘、咸；性熱，歸肝、腎二經(jīng)；功效：養(yǎng)血益精、行血祛瘀、消腫療傷。人參：味甘、微苦；性溫、平；歸脾、肺經(jīng)、心三經(jīng)；功效：補(bǔ)氣，固脫，生津，安神，益智。枸杞子：味甘；性平；歸肝、腎二經(jīng)；功效：養(yǎng)肝，滋腎，潤(rùn)肺。黃精：味甘；性平；歸脾、肺、腎三經(jīng)；功效：補(bǔ)氣養(yǎng)陰，健脾，潤(rùn)肺，益腎。茯苓：味甘、淡；性平；歸心、肺、脾、腎四經(jīng)；功效：利水滲濕，健脾，寧心。梔子：味苦；性寒；歸心、肺、三焦經(jīng)；功效：瀉火除煩，清熱利濕，涼血解毒；外用消腫止痛。以上配方復(fù)合使用具有益精養(yǎng)血、補(bǔ)虛壯陽(yáng)、解痘毒，藥毒、止腰痛的功效，對(duì)于肺痿吐血、崩漏帶下、失眠、心悸等損虛之癥有良好的療效。本發(fā)明涉及一種基于高壓脈沖電場(chǎng)技術(shù)的鹿血酒制備方法，包括1)、鹿血經(jīng)預(yù)處理后用高壓脈沖電場(chǎng)進(jìn)行提取得到鹿血提取物；2)、將人參、枸杞子、黃精、茯苓以及梔子粉碎、乙醇回流提取并濃縮后得到中藥濃縮液；3)、將所述鹿血提取物、所述中藥濃縮液與高粱酒混合攪拌均勻后使用高壓脈沖電場(chǎng)催陳，再經(jīng)過(guò)濾后即得；其中，步驟1)、2)無(wú)先后順序。本發(fā)明提供的基于高壓脈沖電場(chǎng)技術(shù)的鹿血酒制備方法，采用高壓脈沖電場(chǎng)的方法引入電場(chǎng)作為能量，從而加速氧化、還原、酯化反應(yīng)的發(fā)生，促進(jìn)有效成分充分釋出，又能使酒中醇類(lèi)物質(zhì)和雜味物質(zhì)減少，酯類(lèi)、酸類(lèi)、醛類(lèi)物質(zhì)增加，達(dá)到催陳的目的。優(yōu)選的，如上所述的制備方法，在步驟1)中，所述預(yù)處理包括：將鹿血加入抗凝劑混勻后再加入蛋白酶酶解并過(guò)濾。優(yōu)選的，如上所述的制備方法，所述蛋白酶酶解的條件為：蛋白酶添加0.03～0.07wt％、酶解溫度為38℃～42℃、酶解時(shí)間為22h～26h；更優(yōu)選的，所述蛋白酶酶解的條件為：蛋白酶添加0.05～0.06wt％、酶解溫度為39℃～41℃、酶解時(shí)間為23h～25h；更優(yōu)選的，所述蛋白酶為胃蛋白酶。優(yōu)選的，如上所述的制備方法，在步驟1)中，所述用高壓脈沖電場(chǎng)進(jìn)行提取的提取條件為：電場(chǎng)強(qiáng)度10～30kv/cm，脈沖數(shù)6～12個(gè)；更優(yōu)選的，所述用高壓脈沖電場(chǎng)進(jìn)行提取的提取條件為電場(chǎng)強(qiáng)度15～25kv/cm，脈沖數(shù)8～10個(gè)；更優(yōu)選的，所述用高壓脈沖電場(chǎng)進(jìn)行提取的提取條件為電場(chǎng)強(qiáng)度20kv/cm，脈沖數(shù)9個(gè)。優(yōu)選的，如上所述的制備方法，在步驟2)中，所述人參、枸杞子、黃精、茯苓以及梔子的質(zhì)量比為(2～7):(2～6):(1～5):(1～6):(1.5～4)；更優(yōu)選的，所述人參、枸杞子、黃精、茯苓以及梔子的質(zhì)量比為(3～6):(3～5):(2～4):(2～5):(2～3)；更優(yōu)選的，所述人參、枸杞子、黃精、茯苓以及梔子的質(zhì)量比為4:4:3:4:3。優(yōu)選的，如上所述的制備方法，在步驟2)中，所述乙醇回流的操作條件為：用藥材體積13～17倍的體積百分?jǐn)?shù)為28％～32％食用乙醇進(jìn)行回流提取2～4次，提取溫度為65℃～75℃，每次1.5h～2.5h，合并提取液；更優(yōu)選的，所述乙醇回流的操作條件為：用藥材體積15倍的體積百分?jǐn)?shù)為30％食用乙醇進(jìn)行回流提取3次，提取溫度為70℃，每次2h，合并提取液。優(yōu)選的，如上所述的制備方法，在步驟2)中，所述濃縮具體為濃縮至0.4～0.6g/ml；更優(yōu)選為0.5g/ml。優(yōu)選的，如上所述的制備方法，在步驟3)中，所述鹿血提取物、所述中藥濃縮液與高粱酒的體積比為(1～4):(3～6):(180～220)；更優(yōu)選的，所述鹿血提取物、所述中藥濃縮液與高粱酒的體積比為(2～3):(4～5):(190～210)；更優(yōu)選的，所述鹿血提取物、所述中藥濃縮液與高粱酒的體積比為2:5:200。優(yōu)選的，如上所述的制備方法，在步驟3)中，所述用高壓脈沖電場(chǎng)催陳的條件為：電場(chǎng)強(qiáng)度10～30kv/cm，脈沖數(shù)5～9個(gè)；更優(yōu)選的，所述用高壓脈沖電場(chǎng)催陳的條件為：電場(chǎng)強(qiáng)度15～25kv/cm，脈沖數(shù)6～8個(gè)；更優(yōu)選的，所述用高壓脈沖電場(chǎng)催陳的條件為：電場(chǎng)強(qiáng)度20kv/cm，脈沖數(shù)7個(gè)。優(yōu)選的，如上所述的制備方法，在步驟3)中，所述過(guò)濾為：先用280～320目的濾布粗濾，再經(jīng)管式離心精濾2～4次；更優(yōu)選的，先用300目的濾布粗濾，再經(jīng)管式離心精濾3次。下面將結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的實(shí)施方案進(jìn)行詳細(xì)描述，但是本領(lǐng)域技術(shù)人員將會(huì)理解，下列實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明，而不應(yīng)視為限制本發(fā)明的范圍。實(shí)施例中未注明具體條件者，按照常規(guī)條件或制造商建議的條件進(jìn)行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為可以通過(guò)市售購(gòu)買(mǎi)獲得的常規(guī)產(chǎn)品。實(shí)施例1本實(shí)施例提供了一種高壓脈沖電場(chǎng)制備鹿血酒的方法，步驟如下：(1)新鮮鹿血的處理選成年無(wú)病的梅花鹿取血，當(dāng)即加入檸檬酸鈉，按同一方向攪拌15min，使其充分混勻。(2)酶解向步驟(1)所得的鹿血中加入蛋白酶，酶添加量：0.03wt％、酶解溫度：38℃、酶解時(shí)間：26h，用300目濾布過(guò)濾。(3)高壓脈沖提取將步驟(2)中的鹿血在高壓脈沖電場(chǎng)下以電場(chǎng)強(qiáng)度10kv/cm，脈沖數(shù)12個(gè)為參數(shù)進(jìn)行鹿血酒的提取然后后備用。(4)藥材濃縮液的制備將質(zhì)量比為2:6:1:6:1.5的人參、枸杞子、黃精、茯苓、梔子打碎至80目，用藥材體積13倍的28％食用乙醇進(jìn)行回流提取2次，提取溫度為65℃，每次2.5h，合并兩次提取液，過(guò)濾后濃縮至生藥濃度為0.4g/ml的濃縮液備用。(5)混合將步驟(3)和步驟(4)處理好的鹿血、濃縮液、高粱酒分別按1:6:220的體積比混合，攪拌均勻。(6)高壓脈沖電場(chǎng)催陳將步驟(5)中的酒以電場(chǎng)強(qiáng)度30kv/cm，脈沖數(shù)5個(gè)為參數(shù)進(jìn)行鹿血酒的催陳。(7)過(guò)濾將步驟(6)中制備好的酒先用320目的濾布粗濾，再經(jīng)管式離心精濾4次即得成品。實(shí)施例2本實(shí)施例提供了一種高壓脈沖電場(chǎng)制備鹿血酒的方法，步驟如下：(1)新鮮鹿血的處理選成年無(wú)病的梅花鹿取血，當(dāng)即加入檸檬酸鈉，按同一方向攪拌15min，使其充分混勻。(2)酶解向步驟(1)所得的鹿血中加入蛋白酶，酶添加量：0.07wt％、酶解溫度：42℃、酶解時(shí)間：22h，用300目濾布過(guò)濾。(3)高壓脈沖提取將步驟(2)中的鹿血在高壓脈沖電場(chǎng)下以電場(chǎng)強(qiáng)度30kv/cm，脈沖數(shù)6個(gè)為參數(shù)進(jìn)行鹿血酒的提取然后后備用。(4)藥材濃縮液的制備將質(zhì)量比為7:2:5:1:4的人參、枸杞子、黃精、茯苓、梔子打碎至80目，用藥材體積17倍的32％食用乙醇進(jìn)行回流提取4次，提取溫度為75℃，每次1.5h，合并四次提取液，過(guò)濾后濃縮至生藥濃度為0.6g/ml的濃縮液備用。(5)混合將步驟(3)和步驟(4)處理好的鹿血、濃縮液、高粱酒分別按4:3:180的體積比混合，攪拌均勻。(6)高壓脈沖電場(chǎng)催陳將步驟(5)中的酒以電場(chǎng)強(qiáng)度10kv/cm，脈沖數(shù)9個(gè)為參數(shù)進(jìn)行鹿血酒的催陳。(7)過(guò)濾將步驟(6)中制備好的酒先用280目的濾布粗濾，再經(jīng)管式離心精濾2次即得成品。實(shí)施例3本實(shí)施例提供了一種高壓脈沖電場(chǎng)制備鹿血酒的方法，步驟如下：(1)新鮮鹿血的處理選成年無(wú)病的梅花鹿取血，當(dāng)即加入檸檬酸鈉，按同一方向攪拌15min，使其充分混勻。(2)酶解向步驟(1)所得的鹿血中加入蛋白酶，酶添加量：0.05wt％、酶解溫度：40℃、酶解時(shí)間：24h，用300目濾布過(guò)濾。(3)高壓脈沖提取將步驟(2)中的鹿血在高壓脈沖電場(chǎng)下以電場(chǎng)強(qiáng)度20kv/cm，脈沖數(shù)8個(gè)為參數(shù)進(jìn)行鹿血酒的提取然后后備用。(4)藥材濃縮液的制備將質(zhì)量比為4:4:3:4:3的人參、枸杞子、黃精、茯苓、梔子打碎至80目，用藥材體積15倍的30％食用乙醇進(jìn)行回流提取3次，提取溫度為70℃，每次2h，合并三次提取液，過(guò)濾后濃縮至生藥濃度為0.4～0.6g/ml的濃縮液備用。(5)混合將步驟(3)和步驟(4)處理好的鹿血、濃縮液、高粱酒分別按3:4:200的體積比混合，攪拌均勻。(6)高壓脈沖電場(chǎng)催陳將步驟(5)中的酒以電場(chǎng)強(qiáng)度20kv/cm，脈沖數(shù)7個(gè)為參數(shù)進(jìn)行鹿血酒的催陳。(7)過(guò)濾將步驟(6)中制備好的酒先用300目的濾布粗濾，再經(jīng)管式離心精濾3次即得成品。實(shí)驗(yàn)例1鹿血酒抗疲勞功能鹿血具有養(yǎng)血益精的功效，用于多種虛弱癥。鹿血中球蛋白含量極高,尤其羊球蛋白的含量是人血清的倍以上，可以明顯的提高機(jī)體免疫功能和應(yīng)激能力。動(dòng)物分組：對(duì)小鼠進(jìn)行稱(chēng)量之后，將120只小鼠分成兩大組，每大組小鼠60只，兩批小鼠分別進(jìn)行游泳力竭實(shí)驗(yàn)和生化指標(biāo)測(cè)試。每批小鼠再隨機(jī)分為6組，空白對(duì)照組10只，實(shí)施例1～3各10只，對(duì)比例1組10只，對(duì)比例2組10只?？瞻讓?duì)照組不灌胃。每組灌胃7天。對(duì)比例1采用公開(kāi)號(hào)為cn1194083c，公開(kāi)日為2005年3月23日的專(zhuān)利文件中第三實(shí)施例中的配方和制備方法；對(duì)比例2的制備工藝與實(shí)施例3一致，區(qū)別僅在于在制備過(guò)程中不添加中草藥成分。表1各組小鼠負(fù)重游泳力竭時(shí)間的測(cè)定結(jié)果注：與空白對(duì)照組比較，*p＜0.05，**p＜0.01。負(fù)重力游泳實(shí)驗(yàn)：末次灌胃30min后，在小鼠尾根部負(fù)重5％體重的鉛皮，置于30℃的游泳箱內(nèi)，記錄小鼠開(kāi)始游泳至頭部全部入水超過(guò)八秒不能浮出水面的時(shí)間為其力竭游泳時(shí)間。表2各組小鼠血清尿素氮和乳酸脫氧酶含量(n＝10)注：與空白對(duì)照組比較，*p＜0.05，**p＜0.01。與空白對(duì)照組比較，各實(shí)施例組肝糖原、肌糖原含量升高明顯，有顯著性差異。說(shuō)明目標(biāo)樣品具有明顯的抗疲勞作用。實(shí)驗(yàn)例2鹿血酒促進(jìn)傷口愈合鹿血對(duì)長(zhǎng)期不愈合和新生不良的潰瘍和創(chuàng)口的再生過(guò)程有增強(qiáng)的作用，并能促進(jìn)骨折的愈合。為探究本發(fā)明所制備的鹿血酒對(duì)傷口愈合的促進(jìn)作用，采用如下實(shí)驗(yàn)：選用40只spf級(jí)雌性balb/c小鼠，體量20±2g，由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供。將實(shí)驗(yàn)小鼠隨機(jī)分為2組，每組20只。分組如下：b組-實(shí)施例3組、a組-空白對(duì)照組。灌服方法和劑量同實(shí)驗(yàn)例1。a組和b組小鼠麻醉后背部遞毛，于脊柱中部切割一個(gè)0.8cm×0.8cm創(chuàng)面，去除皮膚與筋膜，特粘合劑粘合一側(cè)的硅酮夾板，中心夾板的傷口和夾板固定中斷6-0尼龍線縫合，以確保定定位，用透明閉塞敷料覆蓋傷口。各組分別于術(shù)前10日即開(kāi)始灌服，術(shù)后第1、3、7、10日觀察，第10日后處死動(dòng)物，獲取皮膚傷口標(biāo)本。檢測(cè)方法：(1)創(chuàng)面一般觀察：傷后第1、3、7、10日觀察創(chuàng)面一般情況。(2)藥物對(duì)創(chuàng)面愈合率的影響：計(jì)算傷后第1、3、7、10日大鼠創(chuàng)面愈合率。其中愈合率＝(原始創(chuàng)面面積-未愈合創(chuàng)面面積)/原始創(chuàng)面面積。實(shí)驗(yàn)結(jié)果：(1)創(chuàng)面一般觀察結(jié)果：a組和b組之間創(chuàng)面修復(fù)情況有明顯差別。術(shù)后1d，b組傷口周邊出現(xiàn)少許紅暈，表明肉芽組織已在生長(zhǎng)，而a組傷口濕潤(rùn)。術(shù)后3d，b組肉芽組織生長(zhǎng)明顯，創(chuàng)緣皮膚收縮明顯，而a組傷口開(kāi)始出現(xiàn)紅暈，可見(jiàn)少量肉芽組織。術(shù)后7d，b組傷口干燥，創(chuàng)面已基本為肉芽組織所填充，傷口已大部分愈合，而a組傷口較濕潤(rùn)，肉芽組織生長(zhǎng)明顯，傷口開(kāi)始愈合。術(shù)后10d，b組創(chuàng)面基本愈合，而a組傷口僅愈合大半。(2)藥物對(duì)創(chuàng)面愈合率的影響結(jié)果：除傷后24小時(shí)外，a組與b組傷后各時(shí)相點(diǎn)創(chuàng)面愈合率相比較差異均具有顯著性(每組n＝17或18；treatment,f(1,57)＝7.198,p＜0.05；testday,f(3,52)＝13.216,p＜0.01；interaction,f(3,56)＝0.609,p＝0.462)，且第3、7、10天比較均有顯著性差異(表1所示)。表1顯著性差異統(tǒng)計(jì)a組b組p值d103.10％0.414d315.62％37.85％＜0.01d737.77％70.16％＜0.01d1064.28％86.45％＜0.01最后應(yīng)說(shuō)明的是：以上各實(shí)施例僅用以說(shuō)明本發(fā)明的技術(shù)方案，而非對(duì)其限制；盡管參照前述各實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了詳細(xì)的說(shuō)明，但本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解：其依然可以對(duì)前述各實(shí)施例所記載的技術(shù)方案進(jìn)行修改，或者對(duì)其中部分或者全部技術(shù)特征進(jìn)行等同替換；而這些修改或者替換，并不使相應(yīng)技術(shù)方案的本質(zhì)脫離本發(fā)明各實(shí)施例技術(shù)方案的范圍。當(dāng)前第1頁(yè)12