本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，尤其是涉及酚氧類氮氧化物作為新型組蛋白去乙酰化酶抑制劑的制備、用途及其衍生物，包含此化合物的藥物組合物，涉及所述化合物的制備方法及所述化合物的抗腫瘤應(yīng)用，涉及所述化合物在疾病，例如抗腫瘤細(xì)胞的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

hdac抑制劑已經(jīng)在臨床上用于治療腫瘤疾病，并表現(xiàn)出良好的臨床應(yīng)用前景。hdac抑制劑對腫瘤細(xì)胞的生理功能可以產(chǎn)生多種影響，如抑制腫瘤細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)細(xì)胞周期阻滯，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡和抑制腫瘤新血管的生成等。hdac抑制劑在作用機制上既區(qū)別于傳統(tǒng)細(xì)胞毒類藥物，也不同于典型的靶向藥物。此外hdac抑制劑作用于對其他藥物產(chǎn)生耐藥性的腫瘤細(xì)胞時仍然具有較好的抑制活性。hdac抑制劑既可以單獨用于治療腫瘤疾病，也可以與很多其他作用機制的抗腫瘤藥物聯(lián)合使用，都表現(xiàn)出顯著的抗腫瘤作用。hdac抑制劑作為一類新型的抗腫瘤藥物具有重要的研發(fā)價值。

目前，hdac抑制劑主要分為五類：異羥肟酸(hydroxamicacid)類，如saha、環(huán)氧酮結(jié)構(gòu)的環(huán)四肽類如trapoxina、苯甲酰胺(benzamides)類，如ms-275、不含環(huán)氧酮結(jié)構(gòu)的環(huán)肽類、短鏈和芳香脂肪酸類，如丁酸鈉、苯丁酸鈉、雜環(huán)化合物類，如depudecin。其中已經(jīng)上市的hdac抑制劑包vorinostat(saha,zolina)、romidepsin(istodax,fk228,fr901228，depsipeptide、belinostat(beleodaq,pxd-101)、panobinostat(lbh-589，farydak)、西達(dá)本胺(chidamide)。根據(jù)已經(jīng)上市的hdac抑制劑的結(jié)構(gòu)特點，其主要包含鋅離子鰲合部分(zbg)、連接部分(linker)和表面部分(surfacerecognition，cap)三個部分。zbg部分與活性口袋底部的鋅離子進(jìn)行配位，通常為異羥肟酸、苯甲酞胺、梭酸或親電酮等。linker主要占據(jù)疏水管狀通道，以保證其他兩部分的正確取向，通常為鏈狀烷烴、肉桂酞基、芳香基或雜環(huán)芳香基等。cap與結(jié)合口袋入口處的氨基酸殘基緊密接觸，產(chǎn)生相互作用。以saha為例，其結(jié)構(gòu)如圖3所示.

隨著分子生物學(xué)研究的不斷深入，hdac抑制劑的抗腫瘤作用機制逐漸被揭示，但仍然存在hdacs對別的分子靶標(biāo)是否有作用，對hdacs亞型具有選擇性的hdac抑制劑，提高h(yuǎn)dac抑制劑的體內(nèi)穩(wěn)定性等問題。因此設(shè)計合成酚氧類氮氧化物作為新型組蛋白去乙酰化酶抑制劑，以已經(jīng)上市的結(jié)構(gòu)特點為基礎(chǔ)，對zbg、linker部分進(jìn)行修飾以期發(fā)現(xiàn)對hdac亞型具有選擇性的hdac抑制劑以及對別的分子靶標(biāo)的相互作用等。選擇抗腫瘤活性的化合物進(jìn)一步的進(jìn)行hdac亞型的選擇以及其他分子靶標(biāo)的相互作用。因此，根據(jù)羥肟酸類化合物的結(jié)構(gòu)特點進(jìn)行修飾，主要是zbg部分換為酚類氮氧化合物作為一類新的hdac抑制劑，以期發(fā)現(xiàn)對hdac亞型具有良好選擇性的化合物，為hdac抑制劑的后續(xù)靶向藥物開發(fā)提供重要理論依據(jù)，從而開發(fā)出藥效更好，特異性更強、選擇性更好的hdac抑制劑。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是通過酚氧類氮氧化物作為新型組蛋白去乙?；敢种苿瑏韺ふ覍dac亞型具有良好的選擇性的抑制劑。本發(fā)明實現(xiàn)該目的的技術(shù)方案是提供酚氧類氮氧化物作為新型組蛋白去乙?；敢种苿┘八幬锝M合的制備方法和應(yīng)用，解決hdac抑制劑對hdac亞型選擇性等問題。

為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用下述技術(shù)方案：本發(fā)明的酚氧類氮氧化物作為新型組蛋白去乙?；敢种苿?，該化合物的結(jié)構(gòu)通式如下：

其中：n可為1-14個碳；可為不飽和鍵。

r：為羥基；

r1：可為h及酚氧類化合物；

r2、r3:取代基可以為鹵素、氨基、羥基、硝基、氰基、1-4個碳原子的烷基、1-4個碳原子的烷氧基、1-4個碳原子的烷氨基、1-4個碳原子的氨烷基、2-4個碳原子的?；?、2-4個碳原子的酰胺基、1-4個碳原子的硫代烷基、1-4個碳原子的全氟烷基、1-4個碳原子的全氟烷或雜環(huán)取代基；或分別為氫、羥基；或可同時為二甲胺也可當(dāng)其中一個為氫或羥基時，另一個為二甲胺(接上二甲胺后再經(jīng)過氧化得氮氧化合物)；

r4、r5、r6、r7、r8：可以同時有1-4個取代基；當(dāng)其中之一為鹵素、氨基、羥基、硝基、氰基、磺?；⑼檠趸?、酰基、2-4個碳原子的酰基、2-4個碳原子的酰胺基、1-4個碳原子的硫代烷基、1-4個碳原子的全氟烷基、1-4個碳原子的氟烷氧基、1-4個碳原子的羧基、1-4個碳原子的烷氧基羧基時；其余分別為鹵素、氨基、羥基、硝基、氰基、磺?；?、烷氧基、?；?、2-4個碳原子的?；?、2-4個碳原子的酰胺基、1-4個碳原子的硫代烷基、1-4個碳原子的全氟烷基、1-4個碳原子的氟烷氧基、1-4個碳原子的羧基、1-4個碳原子的烷氧基羧基；其中r4、r5、r6、r7、r8也可以為苯環(huán)或雜環(huán)；

其中，本發(fā)明所述的雜環(huán)，是指含一個或多個雜原子(包括氮、氧、硫)的飽和或不飽和雜環(huán)，如四氫吡啶、二氫吡諾、二氫吡唑、哌啶、咪唑、吡啶等；

本發(fā)明所述的鹵素，為氟、氯、溴、碘；

本發(fā)明所述的1-4個碳原子的烷基，包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基等；

本發(fā)明的酚氧類氮氧化物作為新型組蛋白去乙酰化酶抑制劑的合成方法的合成路線如下：

合成路線1：

合成路線2：

合成路線3：

合成路線4：

本發(fā)明制得的酚氧類氮氧化物作為新型組蛋白去乙?；敢种苿θ朔伟┘?xì)胞(a549),人乳腺癌細(xì)胞(mcf7)等多種腫瘤細(xì)胞生長抑制均較好，可應(yīng)用于制備預(yù)防或治療腫瘤的藥物。

附圖說明

圖1是hdac抑制劑的篩選示意圖；

圖2是胰酶抑制劑的篩選示意圖；

圖3是saha結(jié)構(gòu)示意圖。

具體實施方式

下面結(jié)合附圖和實施例對本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)一步的詳細(xì)說明。

1.化合物y-1的合成：

取100ml茄型瓶烘干，稱取對羥基苯甲酸(1160mg，8.40mmol)，加入四氫呋喃(thf，10ml)溶解，攪拌，冰浴下加入苯胺(phnh2，1ml)和二氯亞砜(socl2,0.874ml)0.5h后，置于常溫反應(yīng)26h，反應(yīng)完畢，濃縮，硅膠柱用二氯甲烷：甲醇＝60:1,50:1,40:1梯度洗脫分離得白色粉末y-1312mg，收率為26.9％¹h-nmr(400mhz,dmso)δ(ppm):7.80-7.77(m,2h)7.61-7.59(d,2h,j＝8hz)7.37-7.33(m,2h)7.14-7.11(d,1h)6.91-6.89(d,2h,j＝8hz)；¹³c-nmr(300hz,dmso)δ(ppm):165.03,160.49,139.43,128.41,125.35,123.14,120.20,114.81。

2.化合物y-2的合成：

取上述所得y-1(300mg，1.41mmol)加入乙醇(etoh，10ml)溶解，攪拌，加入二甲胺(me2nh，0.2ml)和甲醛(hcho,0.09ml)，油浴78℃回流反應(yīng)4天，反應(yīng)完畢，將茄型瓶置于室溫，濃縮，硅膠柱用洗脫劑為二氯甲烷：甲醇＝100:1，60:1，30:1梯度洗脫分離得白色粉末y-275mg，收率為25％¹h-nmr(400mhz,dmso)δ(ppm):7.86(s,1h)7.67-7.54(m,4h)7.37-7.26(m,2h)7.15-7.11(m,1h)6.87-6.85(d,1h,j＝8hz)3.71(s,2h)2.39-2.35(s,6h)¹³c-nmr(300hz,dmso)δ(ppm):164.76,161.30,136.64,128.54,127.40,122.31,121.33,114.32,59.71,45.21。

3.化合物y-3的合成：

取上述所得y-2(31mg，0.11mmol)加入碳酸鉀(k2co3，32.6mg)，用四氫呋喃(thf，5ml)溶解，攪拌，冰浴下緩慢滴加用tfh溶解的間氯過氧苯甲酸(mcpba，25mg)，繼續(xù)反應(yīng)40min，反應(yīng)完畢，將茄型瓶置于室溫，濃縮，硅膠柱用洗脫劑為二氯甲烷：甲醇＝30:1，20:1，10:1梯度洗脫分離得白色粉末y-328.5mg，收率為92％；¹h-nmr(400mhz,dmso)δ(ppm):7.88-7.84(m,1h)7.76-7.70(d.3h)7.33-7.29(d,1h)6.73-6.71(d,1h)5.74(s,1h)4.64(s,1h)3.19-3.15(s,6h).¹³c-nmr(300hz,dmso)δ(ppm)165.89,165.23,139.61,133.44,130.77,128.64,123.25,122.27,120.27,118.66,117.39,71.58,56.98,55.00。

4.化合物y-4的合成

取100ml茄型瓶烘干，稱取對羥基苯乙酸(1000mg,6.57mmol)，加入四氫呋喃(thf，10ml)溶解，攪拌，冰浴下加入苯胺(phnh2，0.9ml)和二氯亞砜(socl2，0.794ml)反應(yīng)0.5h后，置于常溫反應(yīng)26h，反應(yīng)完畢，濃縮，硅膠柱用洗脫劑為二氯甲烷：甲醇＝1:0，60:1梯度洗脫分離得白色粉末y-4312mg，收率為41％；¹h-nmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):7.40-7.38(d,2h,j＝8hz)7.28-7.27(m,2h)7.16-7.12(m,3h)7.10-7.05(m,1h)6.84-6.82(d,2h,j＝8hz)5.28(s,1h)3.69-3.65(m,3h).¹³c-nmr(300hz,cdcl3)δ(ppm):169.70,155.26,137.41,130.91,130.47,128.95,126.15,124.54,119.79,116.16,115.43,52.08,43.90,40.24。

5.化合物y-5的合成：

取上述所得y-4(200mg，0.70mmol)加入乙醇(10ml)溶解，攪拌，加入二甲胺(me2nh，0.146ml)和甲醛(hcho，0.108ml)，回流反應(yīng)4天，反應(yīng)完畢，將茄型瓶置于室溫，濃縮，硅膠柱用洗脫劑為二氯甲烷：甲醇＝60:1，40:1，20:1梯度洗脫分離得白色粉末y-580mg，收率為40％¹h-nmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):7.42-7.40(d,2h,j＝8hz)7.30-7.26(m,3h)7.13-7.08(m,3h)6.94(s,1h)6.87-6.85(d,1h,j＝8hz)3.66-3.63(d,4h)2.35(s,6h)¹³c-nmr(300hz,cdcl3)δ(ppm)169.71,157.66,137.59,129.91,129.56,128.93,124.47,124.37,122.61,119.63,116.81,62.53,44.46,44.03,29.69。

6.化合物y-6的合成：

取y-5(50mg，0.17mmol)加入碳酸鉀(k2co3，62mg),用四氫呋喃(thf，10ml)溶解，攪拌，冰浴下緩慢滴加用thf溶解的間氯過氧苯甲酸(mcpba，35mg)，繼續(xù)反應(yīng)70min，反應(yīng)完畢，將茄型瓶置于室溫，濃縮，硅膠柱用洗脫劑為二氯甲烷：甲醇＝60:1，30:1，10:1梯度洗脫分離得y-621mg，收率為42％¹h-nmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):7.53-7.51(m,1h)7.43-7.41m,1h)7.29-7.26(m,2h)7.17-7.13(m,1h)6.95-6.91(m,1h)4.47-4.44(s,1h)3.61(s,1h)3.45(s,3h)3.12(s,2h)2.91-2.88(m,1h)2.70-2.67(m,1h).¹³c-nmr(300hz,cdcl3)δ(ppm):165.43,161.85,138.14,129.02,128.36,127.42,124.22,121.95,120.10,116.02,62.37,44.37。

7.化合物y-7的合成：

取100ml茄型瓶烘干，稱取對羥基苯丙酸(1010mg,6.08mmol)，加入四氫呋喃(thf，10ml)溶解，攪拌，冰浴下加入苯胺(phnh2，1.6ml)和二氯亞砜(socl2，1.45ml)，0.5h后，常溫反應(yīng)10h，反應(yīng)完畢，濃縮，硅膠柱用洗脫劑為石油醚：乙酸乙酯＝10:1，8:1，5:1梯度洗脫分離得白色粉末y-7620mg，收率為61％；¹h-nmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):7.52(m,2h)7.24-7.2(m,2h)6.98-6.94(m,3h)6.63-6.60(m,2h)2.75-2.71(m,2h)2.51-2.45(m,3h).¹³c-nmr(300hz,cdcl3)δ(ppm):170.55,155.49,139.28,131.21,129.12,128.69,122.98,119.02,115.07,38.49,30.10。

8.化合物y-8的合成：

取上述所得y-7(300mg,1.24mmol)加入乙醇(10ml)溶解，攪拌，加入二甲胺(me2nh，0.2ml)和甲醛(hcho，0.09ml)回流反應(yīng)4天，反應(yīng)完畢，將茄型瓶置于室溫，濃縮，硅膠柱用洗脫劑為二氯甲烷：甲醇＝100:1，60:1，30:1梯度洗脫分離得白色粉末y-875mg，收率為25％¹h-nmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):7.60-7.58(d,2h,j＝8hz)7.32-7.28(m,2h)7.05-6.97(m,3h)6.67-6.65(d,1h,j＝8hz)3.55-3.51(s,2h)2.82-2.78(m,2h)2.58-2.52(m,3h)2.23-2.19(m,6h).¹³c-nmr(300hz,cdcl3)δ(ppm)170.57,155.20,139.27,131.07,128.87,128.68,127.94,122.98,119.01,115.15,60.40,38.51,30.19,29.04。

9.化合物y-9的合成：

取上述所得y-8(40mg，0.15mmol)加入碳酸鉀(k2co3，30mg),用四氫呋喃(thf，5ml)溶解，攪拌，冰浴下緩慢滴加用四氫呋喃溶解的間氯過氧苯甲酸(mcpba，23mg)，繼續(xù)反應(yīng)1h，反應(yīng)完畢，將茄型瓶置于室溫，濃縮，硅膠柱用洗脫劑為二氯甲烷：甲醇＝50:1，30:1，20:1梯度洗脫分離得白色粉末y-914.4mg，收率為36％；¹h-nmr(400mhz,dmso)δ(ppm):7.61(s,1h)7.49-7.43(d,2h，j＝8hz)7.28-7.24(t,3h，)7.15-7.13(m,1h)7.08-7.05(m,1h)6.89-6.87(d,2h,j＝8hz)4.38-4.34(s,2h)3.09-3.05(s,6h)2.96-2.93(m,2h)2.62-2.58(t,2h)；¹³c-nmr(300hz,dmso)δ(ppm):170.74,158.38,137.84,132.70,131.82,130.50,128.93,124.18,119.63,118.87,117.05,72.99,57.62,39.90,30.61。

10.化合物y-10的合成：

取上述所得y-7(300mg，1.24mmol)加入乙醇(10ml)溶解，攪拌，加入二甲胺(me2nh，0.4ml)和甲醛(hcho，0.18ml)，回流反應(yīng)2天，繼續(xù)加入二甲胺(me2nh，0.4ml)甲醛(hcho，0.18ml)反應(yīng)2天，反應(yīng)完畢，將茄型瓶置于室溫，濃縮，硅膠柱用洗脫劑為二氯甲烷：甲醇＝100:1，50:1，25:1，10:1梯度洗脫純化得白色粉末y-10162mg，收率為54％；¹h-nmr(400mhz,dmso)δ(ppm):7.52-7.50(m,2h)7.27-7.07(m,3h)7.07-7.04(s,2h)7.01-6.85(m,1h)6.72-6.69(m,1h)3.66-3.63(s,4h)2.96-2.92(m,2h)2.73-2.71(m,2h)2.31-2.22(m,12h)2.24-2.22(s,2h)；¹³c-nmr(300hz,dmso)δ(ppm):171.18,155.07,138.39,130.50,129.90,128.76,123.61,120.21,119.57,59.48,44.28,44.48,39.12,31.08。

11.化合物y-11的合成：

取上述所得y-10(27mg，0.76mmol)加入碳酸鉀(k2co3,338mg),用四氫呋喃(thf，5ml)溶解，攪拌，冰浴下緩慢滴加用thf溶解的間氯過氧苯甲酸(mcpba，36.6mg)繼續(xù)反應(yīng)1h，反應(yīng)完畢，將茄型瓶置于室溫，濃縮，硅膠柱用洗脫劑為二氯甲烷：甲醇＝60:1，30:1，10:1，5:1，2:1梯度洗脫分離得白色粉末y-1120mg，收率為74％；¹h-nmr(400mhz,dmso)δ(ppm):8.36(s,1h)7.59-7.547(d,2h,j＝8hz)7.30-7.22(m,4h)4.42(s,4h)3.07-3.01(m,12h)2.84-2.81(m,2h)2.62-2.22(m,3h)；¹³c-nmr(300hz,dmso)δ(ppm):170.61,139.29,128.65,128.02,122.99,119.02,57.06,13.57,30.19。

12.化合物y-12的合成：

取苯酚(510mg，5.41mmol)加入乙醇(10ml)溶解，攪拌，加入二甲胺(me2nh，0.7ml)和甲醛(hcho，0.2ml)常溫反應(yīng)4天，反應(yīng)完畢，濃縮，硅膠柱用洗脫劑為二氯甲烷：甲醇＝1:0，50:1梯度洗脫分離得y-12300mg(含苯酚)，收率為59％；¹h-nmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):7.17-7.13(d,1h)6.95-6.93(d,1h)6.80-6.77(d,1h)6.76-6.73(m,1h)5.28(s,1h)3.63-3.62(s,1h)2.31(s,6h)；¹³c-nmr(300hz,cdcl3)δ(ppm):158.19,128.89,128.48,122.08,119.12,116.19,62.97,53.64,51.07,44.65。

13.化合物y-13的合成：

取y-12(50mg，0.33mmol)加入碳酸鉀(k2co3，101mg)，用四氫呋喃(thf，10ml)溶解，攪拌，冰浴下緩慢滴加用thf溶解的間氯過氧苯甲酸(mcpba，64mg)，繼續(xù)反應(yīng)30min，反應(yīng)完畢，將茄型瓶置于室溫，濃縮，硅膠柱用洗脫劑為二氯甲烷：甲醇＝60:1，30:1梯度洗脫分離得y-1337mg，收率為74％；¹h-nmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):7.30-7.26(m,1h)6.99-6.96(d,2h)6.77-6.73(d,1h)4.48(s,2h)3.23(s,6h)；¹³c-nmr(300hz,cdcl3)δ(ppm):160.33,132.23,132.04,118.95,118.21,117.20,93.58,58.00,53.43,29.68。

14.化合物y-14的合成：

取n,n-二甲基芐胺(0.1ml)，加入碳酸鉀(k2co3，112mg)，用四氫呋喃(thf，5ml)溶解，攪拌，冰浴下緩慢滴加用thf溶解的間氯過氧苯甲酸(mcpba，71mg)繼續(xù)反應(yīng)30min，反應(yīng)完畢，將茄型瓶置于室溫，濃縮.硅膠柱用洗脫劑為二氯甲烷：甲醇＝60:1，40:1，30:1梯度洗脫分離得y-1460mg，收率為60％；¹h-nmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):8.09-7.98(d,3h,j＝8hz)7.48-7.37(m,7h)4.21(s,2h)2.77-2.74(s,6h)；¹³c-nmr(300hz,cdcl3)δ(ppm):135.62,130.05,129.81,127.75,60.86,41.88。

本發(fā)明化合物抗腫瘤活性的實驗方法與結(jié)果如下：

(1)組蛋白去乙?；笧榘袠?biāo)的氮氧化合物的抗腫瘤試劑對組蛋白去乙?；富钚缘臏y定,采用熒光方法檢測：

培養(yǎng)a549細(xì)胞，從中提取核蛋白，獲取含hdac的活性生物樣本，進(jìn)行活性測試；

實驗方法：

hdac抑制劑的篩選

在ep管中加入反應(yīng)體系需要的溶液(兩控制組也要加入相應(yīng)的dmso)，最后加核提取物37℃孵育1h,(第一個樣品加入后間隔30s，再加入第二個樣品中)，反應(yīng)完成后，30s取一個插冰上，再加入2×胰酶繼續(xù)孵育1h，反應(yīng)完成后，30s取一個插冰上，再取120ul加入96孔板中，360nm,460nm處測熒光。部分?jǐn)?shù)據(jù)見圖1。

從實驗結(jié)果中可以看出y-3、y-6、y-9、y-11分別比y-2、y-5、y-8、y-10的抑制效果好，說明經(jīng)過氧化后的化合物比未經(jīng)氧化的化合物的抑制劑效果作用強，通過y-3、y-6、y-9、y-11的熒光強度比較說明linker的長短對化合物的有較大的影響，linker相對較長抑制效果相對明顯。其中部分化合物有明顯的抑制劑作用，可能潛在的hdac抑制劑。由于本實驗涉及兩步反應(yīng)，不確定是抑制了hdac還是胰酶，所以，下一步針對是否是胰酶的方面的原因，進(jìn)行了胰酶抑制篩選的實驗。

胰酶抑制劑的篩選：

在ep管中加入反應(yīng)體系需要的溶液(兩控制組也要加入相應(yīng)的dmso)，胰酶50ul(不加蛋白組加50ul水)，37℃孵育1h(第一個樣品加入后間隔30s，再加入第二個樣品中)，反應(yīng)完成后，30s取一個插冰上,再取120ul加入96孔板中，在360nm,460nm處使用酶標(biāo)儀檢測熒光。部分?jǐn)?shù)據(jù)見圖2。

根據(jù)如圖結(jié)果所示，雖然胰酶對該批藥物有輕微抑制作用，但是經(jīng)過圖1圖2對比可知該批藥物對hdac有抑制作用。

(2)氮氧化物作為新型組蛋白去乙酰化酶抑制劑的細(xì)胞活性測試

采用公認(rèn)的可用于大規(guī)?？鼓[瘤藥物篩選、細(xì)胞毒性試驗測定的四甲基氮唑藍(lán)比色法(mtt)評價目標(biāo)化合物對5種人癌細(xì)胞株的抗增殖活性。陽性對照藥為臨床上廣泛使用的抗腫瘤藥物阿霉素(adr)及vorinostat(saha)。

細(xì)胞株：人肺癌細(xì)胞a549,人乳腺癌細(xì)胞mcf7，人肝癌細(xì)胞hepg2，人結(jié)腸癌細(xì)胞sw480，腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞u87，宮頸癌細(xì)胞hela。

細(xì)胞增殖抑制率＝(陰性對照組od值—藥物組od值)*100％/陰性對照組od值。

表1為本發(fā)明化合物對腫瘤細(xì)胞增殖的抑制率％(100μmol/l)

部分實驗測試結(jié)果如表1：

*：saha的濃度為10μmol/l；其余化合物濃度為100μmol/l。

由實驗數(shù)據(jù)可知所有化合物與陽性saha對照，所有的化合物的抑制劑率都相對較低，其中y-6、y-8、y-9、y-10、y-11對a549、mcf7、hepg2、u87、hela腫瘤細(xì)胞抑制效率較其他化合物相對較好；y-2、y-5、y-8、y-10分別與y-3、y-6、y-9、y-11相比抑制劑率相對偏低，說明氧化后的化合物相對未氧化的化合物抑制劑率較好；y-3、y-6、y-9、y-11、y-13、y-14的抑制率相比，說明linker的長短影響化合物的抑制劑率。故，該類化合物具有較大的發(fā)展?jié)摿?。進(jìn)一步考察linker部分的長短及結(jié)構(gòu)修飾，有望能得到活性較好的化合物。

綜上所述，本發(fā)明的優(yōu)點在于：本發(fā)明提供了一種酚氧類氮氧化合物作為新型hdac抑制劑的抗腫瘤應(yīng)用及其制備方法，根據(jù)活性測試實驗數(shù)據(jù)顯示：該類化合物對hdac有潛在抑制劑效果；因此，可進(jìn)一步對zbg提供更多的氮氧、linker進(jìn)行多個長度的考察等在現(xiàn)有的基礎(chǔ)上進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾，以期發(fā)現(xiàn)對hdac亞型具有良好選擇性的抑制劑及其他靶點的作用。本發(fā)明合成原料相對便宜、工藝簡潔，純度較高、成本較低，所用試劑都較為安全。有望成為選擇性強、高效低毒的新型hdac抑制劑類抗腫瘤藥物。

當(dāng)然，以上只是本發(fā)明的具體應(yīng)用范例，本發(fā)明還有其他的實施方式，凡采用等同替換或等效變換形成的技術(shù)方案，均落在本發(fā)明所要求的保護(hù)范圍之內(nèi)。