【技術(shù)領(lǐng)域】
本發(fā)明屬于農(nóng)業(yè)畜牧業(yè)技術(shù)領(lǐng)域。更具體地，本發(fā)明涉及一種青貯用包埋菌劑，還涉及所述青貯用包埋菌劑的生產(chǎn)方法。
背景技術(shù)：
我國秸稈資源十分豐富。每年秸稈產(chǎn)量達6千萬噸左右，占世界秸稈總產(chǎn)量的20％～30％。目前，我國約70％各類農(nóng)作物秸稈作為生活能源燃料消耗掉，不僅浪費資源，而且還給環(huán)境帶來負面影響，所以采用科學的方法對玉米秸稈等秸稈進行高效處理，既可以減少浪費，保護環(huán)境，又可以解決能源不足的問題。因此，有關(guān)玉米秸稈處理成本低、操作簡單并能廣泛推廣應(yīng)用的飼料青貯技術(shù)受到人們的重視。青貯飼料技術(shù)的研究與利用有著上百年的歷史，經(jīng)過青貯的玉米秸稈質(zhì)地蓬松、具有酸香的口感且秸稈的纖維素含量下降，營養(yǎng)成分大幅上升，是家畜喜食的飼料。現(xiàn)有青貯技術(shù)關(guān)鍵在于優(yōu)良青貯微生物選育、秸稈青貯前處理、復(fù)合菌種復(fù)配以及發(fā)酵工藝條件優(yōu)化，國內(nèi)外許多學者在這些方面投入了大量研究工作，但是針對可以解決如何抑制發(fā)酵過程中雜菌生長、降低發(fā)酵成本、降解纖維素、提高蛋白質(zhì)含量等方面仍然存在許多問題。
cn105331564a公開了一種固定化復(fù)合菌劑直接發(fā)酵甜高粱秸稈制作飼料的方法，該技術(shù)制作甜高粱秸稈飼料的關(guān)鍵是利用固定化技術(shù)對菌劑進行處理，從而達到菌劑可以緩釋作用，但其菌劑需與纖維素酶混合使用，成本過高，不利于大規(guī)模推廣。cn105379971a公開了一種青貯玉米的制作方法，該技術(shù)制作青貯玉米的關(guān)鍵是利用白地霉菌、產(chǎn)脘假絲酵母菌與植物乳桿菌三種菌同時處理玉米，從而達到降低玉米秸稈纖維素、提高飼料營養(yǎng)的作用，但由于三種菌同時作用，其降解纖維素，提高飼料蛋白質(zhì)等方面的效果不明顯。
針對現(xiàn)有技術(shù)存在的這些技術(shù)缺陷，本發(fā)明人在總結(jié)現(xiàn)有技術(shù)的基礎(chǔ)之上，通過大量實驗研究與分析，終于完成了本發(fā)明。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
[要解決的技術(shù)問題]
本發(fā)明的目的是提供一種青貯用包埋菌劑。
本發(fā)明的另一個目的是提供所述青貯用包埋菌劑的生產(chǎn)方法。
[技術(shù)方案]
本發(fā)明是通過下述技術(shù)方案實現(xiàn)的。
本發(fā)明涉及一種青貯用包埋菌劑。該包埋菌劑由含有產(chǎn)酯酵母和植物乳桿菌的菌劑a與枯草芽孢桿菌菌劑b按照重量比2.5～3.5：1組成，該包埋菌劑含有2.5～3.5×108個/g枯草芽孢桿菌、6.0～7.0×108個/g產(chǎn)酯酵母與2.0～2.6×109個/g植物乳桿菌。
根據(jù)本發(fā)明的一種優(yōu)選實施方式，該包埋菌劑由含有產(chǎn)酯酵母和植物乳桿菌的菌劑a與枯草芽孢桿菌菌劑b按照重量比2.8～3.2:1組成，該包埋菌劑含有2.8～3.2×108個/g枯草芽孢桿菌、6.4～6.8×108個/g產(chǎn)酯酵母與2.2～2.4×109個/g植物乳桿菌。
根據(jù)本發(fā)明的另一種優(yōu)選實施方式，所述的枯草芽孢桿菌選自bacillussubtilisstrainb48(保藏單位：中國工業(yè)微生物菌種保藏管理中心cicc；保藏號cicc10089)、bacillussubtilisstrainb49(保藏單位：中國工業(yè)微生物菌種保藏管理中心cicc；保藏號cicc10090)或bacillussubtilisstrainwl1021(保藏單位：中國工業(yè)微生物菌種保藏管理中心cicc；保藏號cicc10063)菌株；所述的產(chǎn)酯酵母選自pichiaanomala(保藏單位中國典型培養(yǎng)物保藏中心cctcc；保藏號cicimy0297)、candidasp.(保藏單位：中國工業(yè)微生物菌種保藏管理中心cicc；保藏號cicc1257)或brettanomycessp.(保藏單位：中國典型培養(yǎng)物保藏中心cctcc；保藏號cctccay93142)菌株；所述的植物乳桿菌選自lactobacillusplantarumstrainf1(保藏單位：中國典型培養(yǎng)物保藏中心cctcc；保藏號ccremsdmcc050029)、lactobacillusplantaruma15(保藏單位：中國工業(yè)微生物菌種保藏管理中心cicc；保藏號cicc21814)或lactobacillusplantarumy15118(保藏單位：中國工業(yè)微生物菌種保藏管理中心cicc；保藏號cicc20768)菌株。
本發(fā)明涉及上述青貯用包埋菌劑的生產(chǎn)方法。
該青貯用包埋菌劑生產(chǎn)方法的步驟如下：
i、產(chǎn)酯酵母培養(yǎng)液制備：
制備具有下述組成的搖瓶培養(yǎng)基：20g/l蛋白胨、20g/l葡萄糖與10g/l酵母浸膏；
將選自pichiaanomala、candidasp.或brettanomycessp.的產(chǎn)酯酵母菌株按照1％接種量接種于在溫度110～120℃下滅菌8～12min的搖瓶培養(yǎng)基中，在搖瓶中在溫度30℃條件下培養(yǎng)24～36h，得到含有2.0～2.5×108個/g產(chǎn)酯酵母的搖瓶培養(yǎng)液；
制備具有下述組成的發(fā)酵培養(yǎng)基：10g/l蛋白胨、10g/l葡萄糖與5g/l氯化鈉；
按照3％接種量將上述搖瓶培養(yǎng)液接種于在溫度110～120℃下滅菌8～12min的發(fā)酵培養(yǎng)基中，在發(fā)酵罐中在溫度30～32℃條件下培養(yǎng)36～48h，得到含有6.4～6.8×108個/g產(chǎn)酯酵母的發(fā)酵培養(yǎng)液；
ii、植物乳桿菌培養(yǎng)液制備：
制備具有下述組成的搖瓶培養(yǎng)基：10g/l牛肉膏、10g/l蛋白胨、10g/l酵母膏、5g/l葡萄糖、20g/l醋酸鈉、5g/l磷酸氫二鉀、2g/l檸檬酸二銨、2g/l吐溫80、1g/l硫酸鎂與0.58g/l硫酸錳；
將選自lactobacillusplantarumstrainf1、lactobacillusplantaruma15或lactobacillusplantarumy15118的植物乳桿菌菌株按照1％接種量接種于在溫度110～120℃下滅菌8～12min的搖瓶培養(yǎng)基中，在搖瓶中在溫度30℃條件下培養(yǎng)48～72h，得到含有5.0～5.5×108植物乳桿菌的搖瓶培養(yǎng)液；
制備具有下述組成的發(fā)酵培養(yǎng)基：20g/l蛋白胨、10g/l酵母膏、5g/l葡萄糖、0.008g/l氯化鈉、0.008g/l磷酸氫二鉀、2g/l檸檬酸二銨、0.008g/l硫酸鎂與0.008g/l硫酸錳；
按照3％接種量將上述搖瓶培養(yǎng)液接種于在溫度110～120℃下滅菌8～12min的發(fā)酵培養(yǎng)基中，在發(fā)酵罐中在溫度30～32℃條件下培養(yǎng)60～72h，得到含有2.2～2.4×109個/g植物乳桿菌的發(fā)酵培養(yǎng)液；
iii、枯草芽孢桿菌培養(yǎng)液制備：
制備具有下述組成的搖瓶培養(yǎng)基：5g/l羧甲基纖維素鈉、2g/l硫酸銨、1g/l磷酸氫二鉀、0.5g/l氯化鈉與0.5g/l硫酸鎂；
將選自bacillussubtilisstrainb48、bacillussubtilisstrainb49或bacillussubtilisstrainwl1021的枯草芽孢桿菌菌株按照1％接種量接種于在溫度110～120℃下滅菌8～12min的搖瓶培養(yǎng)基中，在搖瓶中在溫度30℃條件下培養(yǎng)24～36h，得到含有7.5～8.0×107個/g枯草芽孢桿菌的搖瓶培養(yǎng)液；
制備具有下述組成的發(fā)酵培養(yǎng)基：5g/l羧甲基纖維素鈉、2g/l硫酸銨、1g/l磷酸氫二鉀、0.5g/l氯化鈉與0.5g/l硫酸鎂；
按照3％接種量將上述搖瓶培養(yǎng)液接種于在溫度110～120℃下滅菌8～12min的發(fā)酵培養(yǎng)基中，在發(fā)酵罐中在溫度30～32℃條件下培養(yǎng)36～48h，得到含有2.5～3.5×108個/g枯草芽孢桿菌的發(fā)酵培養(yǎng)液；
iv、植物秸稈預(yù)處理
將植物秸稈粉碎，篩分，收集植物秸稈粉，再使用飽和水蒸汽處理1.0～1.5h，接著冷卻至室溫，得到滅菌植物秸稈粉；
v、菌劑制備
菌劑a的制備：
將步驟i得到的產(chǎn)酯酵母發(fā)酵培養(yǎng)液與步驟ii得到的植物乳桿菌發(fā)酵培養(yǎng)液按照體積比1：1.0～1.5混合均勻，按照滅菌植物秸稈粉干重計1.0～5.0％接種量，把混合均勻的發(fā)酵培養(yǎng)液加到滅菌植物秸稈粉中，在搖床中震蕩8h，離心清洗，得到吸附產(chǎn)酯酵母與植物乳桿菌的載體；
將以混合溶液重量計6％聚乙烯醇、0.3％海藻酸鈉與0.3％羧甲基纖維素鈉在去離子水中浸泡一夜，在溫度121℃的條件下滅菌20min，接著冷卻至溫度40℃，得到一種混合溶液；
將所述載體與所述混合溶液按照重量比10：1混合，再滴入ph6.0～6.8的含有以重量計4％cacl2的飽和硼酸溶液中，靜置24h，得到菌劑a；
菌劑b的制備：
將步驟iii得到的枯草芽孢桿菌發(fā)酵培養(yǎng)液、按照枯草芽孢桿菌發(fā)酵培養(yǎng)液重量計6％海藻糖與15％脫脂乳混合均勻，再置于冷凍干燥設(shè)備中處理得到所述的菌劑b；
將菌劑a與菌劑b按照重量比2.5～3.5：1混合均勻，得到所述的包埋菌劑。
根據(jù)本發(fā)明的一種優(yōu)選實施方式，所述的植物秸稈是玉米秸稈、高粱秸稈、小麥秸稈或水稻秸稈。
根據(jù)本發(fā)明的另一種優(yōu)選實施方式，所述植物秸稈粉的粒度是80目以上。
根據(jù)本發(fā)明的另一種優(yōu)選實施方式，所述的包埋菌劑在溫度4℃下保存。
根據(jù)本發(fā)明的另一種優(yōu)選實施方式，所述的包埋菌劑含有2.5～3.5×108個/g枯草芽孢桿菌、6.0～7.0×108個/g產(chǎn)酯酵母與2.0～2.6×109個/g植物乳桿菌。
下面將更詳細地描述本發(fā)明。
本發(fā)明涉及一種青貯用包埋菌劑。
我國市面銷售的秸稈青貯菌劑大多為以乳酸菌為主的快速發(fā)酵產(chǎn)酸菌劑，秸稈纖維素基本不會降解，蛋白質(zhì)提升也不大，而且也不適合內(nèi)蒙地區(qū)寒冷環(huán)境施用。本發(fā)明通過從內(nèi)蒙古地區(qū)各地采得樣品中篩選到的枯草芽孢桿菌、產(chǎn)酯酵母與植物乳桿菌，將其接種于玉米秸稈等秸稈時，利用菌劑b快速溶解，微生物迅速繁殖，將降解秸稈中的纖維素轉(zhuǎn)化為糖，而利用吸附-包埋-交聯(lián)技術(shù)制得的菌劑a在菌劑b加入后12h內(nèi)緩慢釋放出來，利用秸稈自身的糖分以及被菌劑b降解的糖分，可以大幅度提高飼料的蛋白含量。
該包埋菌劑由含有產(chǎn)酯酵母和植物乳桿菌的菌劑a與枯草芽孢桿菌菌劑b按照重量比2.5～3.5：1組成，該包埋菌劑含有2.5～3.5×108個/g枯草芽孢桿菌、6.0～7.0×108個/g產(chǎn)酯酵母與2.0～2.6×109個/g植物乳桿菌。
優(yōu)選地，該包埋菌劑由含有產(chǎn)酯酵母和植物乳桿菌的菌劑a與枯草芽孢桿菌菌劑b按照重量比2.8～3.2:1組成，該包埋菌劑含有2.8～3.2×108個/g枯草芽孢桿菌、6.4～6.8×108個/g產(chǎn)酯酵母與2.2～2.4×109個/g植物乳桿菌。
本發(fā)明使用的枯草芽孢桿菌自身產(chǎn)生一種能夠分解纖維素的酶，因此可以充分利用秸稈中的纖維素并將其降解為其它細菌可以利用的低聚糖，具有牛羊采食后可以使腸道內(nèi)其他厭氧益生菌大量繁殖、促進消化、提高免疫力等優(yōu)點，是秸稈青貯菌種的優(yōu)良品種。
根據(jù)本發(fā)明，所述的枯草芽孢桿菌選自bacillussubtilisstrainb48、bacillussubtilisstrainb49或bacillussubtilisstrainwl1021菌株；這些菌株都是可以從相關(guān)微生物保藏機構(gòu)獲得的菌株。
本發(fā)明使用的產(chǎn)酯酵母可以有效提升青貯飼料的風味，能夠利用枯草芽孢桿菌分解纖維素產(chǎn)生的低聚糖進行繁殖。產(chǎn)酯酵母蛋白含量很高，可以有效提升飼料蛋白含量，成為牛羊都可以食用的單細胞蛋白。
根據(jù)本發(fā)明，所述的產(chǎn)酯酵母選自pichiaanomala、candidasp.或brettanomycessp.菌株；這些菌株都是可以從相關(guān)微生物保藏機構(gòu)獲得的菌株。
本發(fā)明使用的植物乳桿菌為兼性厭氧微生物，隨著枯草芽孢桿菌和產(chǎn)酯酵母將原料間隙的氧氣利用完畢后迅速占據(jù)優(yōu)勢并且大量生長，本菌劑利用吸附-包埋-交聯(lián)方式可以使植物乳桿菌緩慢釋放出來，不至于因為植物乳桿菌過快生長而導(dǎo)致青貯飼料中營養(yǎng)不足，可以使得酵母菌、枯草芽孢桿菌、植物乳桿菌分段成為飼料微環(huán)境中的優(yōu)勢菌群，發(fā)酵的秸稈可成為低纖維素、高蛋白、質(zhì)地蓬松、氣味酸香的優(yōu)質(zhì)牛羊青貯飼料。
根據(jù)本發(fā)明，所述的植物乳桿菌選自lactobacillusplantarumstrainf1、lactobacillusplantaruma15或lactobacillusplantarumy15118菌株；這些菌株都是可以從相關(guān)微生物保藏機構(gòu)獲得的菌株。
本發(fā)明涉及所述青貯用包埋菌劑的生產(chǎn)方法。
該青貯用包埋菌劑生產(chǎn)方法的步驟如下：
i、產(chǎn)酯酵母培養(yǎng)液制備：
制備具有下述組成的搖瓶培養(yǎng)基：20g/l蛋白胨、20g/l葡萄糖與10g/l酵母浸膏；
蛋白胨、葡萄糖與酵母浸膏都是目前市場上銷售的產(chǎn)品。
將選自pichiaanomala、candidasp.或brettanomycessp.的產(chǎn)酯酵母菌株按照1％接種量接種于在溫度110～120℃下滅菌8～12min的搖瓶培養(yǎng)基中，在搖瓶中在溫度30℃條件下培養(yǎng)24～36h，得到含有2.0～2.5×108個/g產(chǎn)酯酵母的搖瓶培養(yǎng)液；
制備具有下述組成的發(fā)酵培養(yǎng)基：10g/l蛋白胨、10g/l葡萄糖與5g/l氯化鈉；
按照3％接種量將上述搖瓶培養(yǎng)液接種于在溫度110～120℃下滅菌8～12min的發(fā)酵培養(yǎng)基中，在發(fā)酵罐中在溫度30～32℃條件下培養(yǎng)36～48h，得到含有6.4～6.8×108個/g產(chǎn)酯酵母的發(fā)酵培養(yǎng)液；
這個步驟使用的蛋白胨、葡萄糖、酵母浸膏以及后續(xù)制備步驟使用的其它原料都是目前市場上銷售的產(chǎn)品，也是目前市場上銷售的產(chǎn)品；這個步驟以及后續(xù)步驟使用的搖瓶與發(fā)酵罐是本技術(shù)領(lǐng)域里通常使用的設(shè)備，也是目前市場上銷售的產(chǎn)品，因此，下面將不再贅述這些技術(shù)內(nèi)容。
ii、植物乳桿菌培養(yǎng)液制備：
制備具有下述組成的搖瓶培養(yǎng)基：10g/l牛肉膏、10g/l蛋白胨、10g/l酵母膏、5g/l葡萄糖、20g/l醋酸鈉、5g/l磷酸氫二鉀、2g/l檸檬酸二銨、2g/l吐溫80、1g/l硫酸鎂與0.58g/l硫酸錳；
將選自lactobacillusplantarumstrainf1、lactobacillusplantaruma15或lactobacillusplantarumy15118的植物乳桿菌菌株按照1％接種量接種于在溫度110～120℃下滅菌8～12min的搖瓶培養(yǎng)基中，在搖瓶中在溫度30℃條件下培養(yǎng)48～72h，得到含有5.0～5.5×108植物乳桿菌的搖瓶培養(yǎng)液；
制備具有下述組成的發(fā)酵培養(yǎng)基：20g/l蛋白胨、10g/l酵母膏、5g/l葡萄糖、0.008g/l氯化鈉、0.008g/l磷酸氫二鉀、2g/l檸檬酸二銨、0.008g/l硫酸鎂與0.008g/l硫酸錳；
按照3％接種量將上述搖瓶培養(yǎng)液接種于在溫度110～120℃下滅菌8～12min的發(fā)酵培養(yǎng)基中，在發(fā)酵罐中在溫度30～32℃條件下培養(yǎng)60～72h，得到含有2.2～2.4×109個/g植物乳桿菌的發(fā)酵培養(yǎng)液；
iii、枯草芽孢桿菌培養(yǎng)液制備：
制備具有下述組成的搖瓶培養(yǎng)基：5g/l羧甲基纖維素鈉、2g/l硫酸銨、1g/l磷酸氫二鉀、0.5g/l氯化鈉與0.5g/l硫酸鎂；
將選自bacillussubtilisstrainb48、bacillussubtilisstrainb49或bacillussubtilisstrainwl1021的枯草芽孢桿菌菌株按照1％接種量接種于在溫度110～120℃下滅菌8～12min的搖瓶培養(yǎng)基中，在搖瓶中在溫度30℃條件下培養(yǎng)24～36h，得到含有7.5～8.0×107個/g枯草芽孢桿菌的搖瓶培養(yǎng)液；
制備具有下述組成的發(fā)酵培養(yǎng)基：5g/l羧甲基纖維素鈉、2g/l硫酸銨、1g/l磷酸氫二鉀、0.5g/l氯化鈉與0.5g/l硫酸鎂；
按照3％接種量將上述搖瓶培養(yǎng)液接種于在溫度110～120℃下滅菌8～12min的發(fā)酵培養(yǎng)基中，在發(fā)酵罐中在溫度30～32℃條件下培養(yǎng)36～48h，得到含有2.5～3.5×108個/g枯草芽孢桿菌的發(fā)酵培養(yǎng)液；
iv、植物秸稈預(yù)處理
將植物秸稈粉碎，篩分，收集植物秸稈粉，再使用飽和水蒸汽處理1.0～1.5h，接著冷卻至室溫，得到滅菌植物秸稈粉；
本發(fā)明使用的植物秸稈是玉米秸稈、高粱秸稈、小麥秸稈或水稻秸稈。當然，凡是能夠被本發(fā)明菌劑分解并不會對其菌劑產(chǎn)生不良影響的其它植物秸稈，也可以用于本發(fā)明，也都在本發(fā)明保護范圍之內(nèi)。
根據(jù)本發(fā)明，所述植物秸稈粉的粒度是80目以上。
粉碎、篩分、水蒸汽處理所使用的設(shè)備都是本技術(shù)領(lǐng)域里通常使用的設(shè)備。
v、菌劑制備
菌劑a的制備：
將步驟i得到的產(chǎn)酯酵母發(fā)酵培養(yǎng)液與步驟ii得到的植物乳桿菌發(fā)酵培養(yǎng)液按照體積比1：1.0～1.5混合均勻，按照滅菌植物秸稈粉干重計1.0～5.0％接種量，把混合均勻的發(fā)酵培養(yǎng)液加到滅菌植物秸稈粉中，在搖床中震蕩8h，離心清洗，得到吸附產(chǎn)酯酵母與植物乳桿菌的載體；
將以混合溶液重量計6％聚乙烯醇、0.3％海藻酸鈉與0.3％羧甲基纖維素鈉在去離子水中浸泡一夜，在溫度121℃的條件下滅菌20min，接著冷卻至溫度40℃，得到一種混合溶液；
將所述載體與所述混合溶液按照重量比10：1混合，再滴入ph6.0～6.8的含有以重量計4％cacl2的飽和硼酸溶液中，靜置24h，得到菌劑a；
菌劑b的制備：
將步驟iii得到的枯草芽孢桿菌發(fā)酵培養(yǎng)液、按照枯草芽孢桿菌發(fā)酵培養(yǎng)液重量計6％海藻糖與15％脫脂乳混合均勻，再置于冷凍干燥設(shè)備中處理得到所述的菌劑b；
將菌劑a與菌劑b按照重量比2.5～3.5：1混合均勻，得到所述的包埋菌劑。所述的包埋菌劑在溫度4℃下保存。
根據(jù)本發(fā)明方法制備得到的包埋菌劑含有2.5～3.5×108個/g枯草芽孢桿菌、6.0～7.0×108個/g產(chǎn)酯酵母與2.0～2.6×109個/g植物乳桿菌。
接種時將菌劑溶于25～35℃的水中，加入少許糖，然后把粉碎后的玉米秸稈經(jīng)飽和蒸汽處理1h，冷卻至25℃?zhèn)溆?，按干料總?％接入液體菌劑，然后將原料與菌液拌好后分層填入池中，添加20～30cm后將原料踩實后繼續(xù)添加下一層原料，將原料加完畢后覆蓋塑料薄膜，再埋10cm左右土壤后踩實，接著進行自然發(fā)酵，得到所述的青貯飼料。
[有益效果]
本發(fā)明的有益效果是：我國市售秸稈青貯菌劑大多為以乳酸菌為主的快速發(fā)酵產(chǎn)酸菌劑，它們對秸稈本身含有的纖維素基本不會降解，蛋白質(zhì)提升也不大，對內(nèi)蒙地區(qū)寒冷環(huán)境適應(yīng)性也不高。本發(fā)明通過從內(nèi)蒙各地采得樣品中篩到的枯草芽孢桿菌、產(chǎn)酯酵母、植物乳桿菌，將其接種于玉米秸稈時，菌劑b可快速溶解繁殖，將秸稈的纖維素降解轉(zhuǎn)化為糖，而菌劑a在菌劑b后才緩慢釋放出來，利用秸稈自身糖分以及被菌劑b降解得到的糖分，能夠大幅度提高飼料蛋白含量，例如提高50％以上。
本發(fā)明枯草芽孢桿菌自產(chǎn)分解纖維素酶，可以充分利用秸稈中的纖維素并將其降解為其它細菌可以利用的低聚糖，在牛羊采食后可以使腸道內(nèi)其它厭氧益生菌大量繁殖、促進消化、提高免疫力，因此本發(fā)明的是秸稈青貯菌種的優(yōu)良品種。
本發(fā)明所采用的產(chǎn)酯酵母可以有效提升青貯飼料的風味，其可以利用枯草芽孢桿菌分解纖維素產(chǎn)生的低聚糖進行繁殖。產(chǎn)酯酵母的蛋白含量很高，可以有效提升飼料的蛋白含量，成為牛羊都可以食用的單細胞蛋白。
本發(fā)明所采用的植物乳桿菌為兼性厭氧微生物，隨著枯草芽孢桿菌和產(chǎn)酯酵母將原料間隙的氧氣利用完畢后迅速占據(jù)優(yōu)勢并且大量生長，本菌劑利用吸附-包埋-交聯(lián)的方式可以使植物乳桿菌緩慢釋放出來，不至于因為植物乳桿菌的過快生長而導(dǎo)致青貯飼料中的營養(yǎng)不足，可以使得酵母菌、枯草芽孢桿菌、植物乳桿菌分段成為飼料微環(huán)境中的優(yōu)勢菌群，發(fā)酵過后的秸稈即可成為低纖維素、高蛋白、質(zhì)地蓬松、氣味酸香的優(yōu)質(zhì)牛羊青貯飼料。
本發(fā)明青貯用包埋菌劑中的菌種均為內(nèi)蒙古各地玉米秸稈中篩選得到的菌株，它們非常適于針對本地玉米秸稈青貯飼料，可以有效提高秸稈的利用率，同時本菌劑可以對秸稈進行快速青貯，縮短飼料成熟時間。
【具體實施方式】
通過下述實施例將能夠更好地理解本發(fā)明。
實施例1：生產(chǎn)本發(fā)明青貯用包埋菌劑
該實施例的實施步驟如下：
i、產(chǎn)酯酵母培養(yǎng)液制備：
制備具有下述組成的搖瓶培養(yǎng)基：20g/l蛋白胨、20g/l葡萄糖與10g/l酵母浸膏；
將pichiaanomala產(chǎn)酯酵母菌株按照1％接種量接種于在溫度110℃下滅菌12min的搖瓶培養(yǎng)基中，在搖瓶中在溫度30℃條件下培養(yǎng)24h，得到含有2.0×108個/g產(chǎn)酯酵母的搖瓶培養(yǎng)液；
制備具有下述組成的發(fā)酵培養(yǎng)基：10g/l蛋白胨、10g/l葡萄糖與5g/l氯化鈉；
按照3％接種量將上述搖瓶培養(yǎng)液接種于在溫度110℃下滅菌12min的發(fā)酵培養(yǎng)基中，在發(fā)酵罐中在溫度30℃條件下培養(yǎng)44h，得到含有6.4×108個/g產(chǎn)酯酵母的發(fā)酵培養(yǎng)液；
ii、植物乳桿菌培養(yǎng)液制備：
制備具有下述組成的搖瓶培養(yǎng)基：10g/l牛肉膏、10g/l蛋白胨、10g/l酵母膏、5g/l葡萄糖、20g/l醋酸鈉、5g/l磷酸氫二鉀、2g/l檸檬酸二銨、2g/l吐溫80、1g/l硫酸鎂與0.58g/l硫酸錳；
將lactobacillusplantarumstrainf1植物乳桿菌菌株按照1％接種量接種于在溫度110℃下滅菌12min的搖瓶培養(yǎng)基中，在搖瓶中在溫度30℃條件下培養(yǎng)48h，得到含有5.2×108植物乳桿菌的搖瓶培養(yǎng)液；
制備具有下述組成的發(fā)酵培養(yǎng)基：20g/l蛋白胨、10g/l酵母膏、5g/l葡萄糖、0.008g/l氯化鈉、0.008g/l磷酸氫二鉀、2g/l檸檬酸二銨、0.008g/l硫酸鎂與0.008g/l硫酸錳；
按照3％接種量將上述搖瓶培養(yǎng)液接種于在溫度110℃下滅菌12min的發(fā)酵培養(yǎng)基中，在發(fā)酵罐中在溫度32℃條件下培養(yǎng)64h，得到含有2.2×109個/g植物乳桿菌的發(fā)酵培養(yǎng)液；
iii、枯草芽孢桿菌培養(yǎng)液制備：
制備具有下述組成的搖瓶培養(yǎng)基：5g/l羧甲基纖維素鈉、2g/l硫酸銨、1g/l磷酸氫二鉀、0.5g/l氯化鈉與0.5g/l硫酸鎂；
將bacillussubtilisstrainb48枯草芽孢桿菌菌株按照1％接種量接種于在溫度110℃下滅菌12min的搖瓶培養(yǎng)基中，在搖瓶中在溫度30℃條件下培養(yǎng)28h，得到含有7.6×107個/g枯草芽孢桿菌的搖瓶培養(yǎng)液；
制備具有下述組成的發(fā)酵培養(yǎng)基：5g/l羧甲基纖維素鈉、2g/l硫酸銨、1g/l磷酸氫二鉀、0.5g/l氯化鈉與0.5g/l硫酸鎂；
按照3％接種量將上述搖瓶培養(yǎng)液接種于在溫度110℃下滅菌12min的發(fā)酵培養(yǎng)基中，在發(fā)酵罐中在溫度30℃條件下培養(yǎng)36h，得到含有2.8×108個/g枯草芽孢桿菌的發(fā)酵培養(yǎng)液；
iv、植物秸稈預(yù)處理
將玉米秸稈粉碎，篩分，收集80目玉米秸稈粉，再使用飽和水蒸汽處理1.0h，接著冷卻至室溫，得到滅菌玉米秸稈粉；
v、菌劑制備
菌劑a的制備：
將步驟i得到的產(chǎn)酯酵母發(fā)酵培養(yǎng)液與步驟ii得到的植物乳桿菌發(fā)酵培養(yǎng)液按照體積比1：1.0混合均勻，按照滅菌植物秸稈粉干重計3.01.05.04.0％接種量，把混合均勻的發(fā)酵培養(yǎng)液加到滅菌玉米秸稈粉中，在搖床中震蕩8h，離心清洗，得到吸附產(chǎn)酯酵母與植物乳桿菌的載體；
將以混合溶液重量計6％聚乙烯醇、0.3％海藻酸鈉與0.3％羧甲基纖維素鈉在去離子水中浸泡一夜，在溫度121℃的條件下滅菌20min，接著冷卻至溫度40℃，得到一種混合溶液；
將所述載體與所述混合溶液按照重量比10：1混合，再滴入ph6.0的含有以重量計4％cacl2的飽和硼酸溶液中，靜置24h，得到菌劑a；
菌劑b的制備：
將步驟iii得到的枯草芽孢桿菌發(fā)酵培養(yǎng)液、按照枯草芽孢桿菌發(fā)酵培養(yǎng)液重量計6％海藻糖與15％脫脂乳混合均勻，再置于冷凍干燥設(shè)備中處理得到所述的菌劑b；
將菌劑a與菌劑b按照重量比2.5：1混合均勻，得到所述的包埋菌劑，它含有2.5×108個/g枯草芽孢桿菌、6.2×108個/g產(chǎn)酯酵母與2.0×109個/g植物乳桿菌。所述的包埋菌劑在溫度4℃下保存。
實施例2：生產(chǎn)本發(fā)明青貯用包埋菌劑
該實施例的實施步驟如下：
i、產(chǎn)酯酵母培養(yǎng)液制備：
制備具有下述組成的搖瓶培養(yǎng)基：20g/l蛋白胨、20g/l葡萄糖與10g/l酵母浸膏；
將candidasp.產(chǎn)酯酵母菌株按照1％接種量接種于在溫度120℃下滅菌8min的搖瓶培養(yǎng)基中，在搖瓶中在溫度30℃條件下培養(yǎng)28h，得到含有2.2×108個/g產(chǎn)酯酵母的搖瓶培養(yǎng)液；
制備具有下述組成的發(fā)酵培養(yǎng)基：10g/l蛋白胨、10g/l葡萄糖與5g/l氯化鈉；
按照3％接種量將上述搖瓶培養(yǎng)液接種于在溫度120℃下滅菌8min的發(fā)酵培養(yǎng)基中，在發(fā)酵罐中在溫度32℃條件下培養(yǎng)36h，得到含有6.8×108個/g產(chǎn)酯酵母的發(fā)酵培養(yǎng)液；
ii、植物乳桿菌培養(yǎng)液制備：
制備具有下述組成的搖瓶培養(yǎng)基：10g/l牛肉膏、10g/l蛋白胨、10g/l酵母膏、5g/l葡萄糖、20g/l醋酸鈉、5g/l磷酸氫二鉀、2g/l檸檬酸二銨、2g/l吐溫80、1g/l硫酸鎂與0.58g/l硫酸錳；
將lactobacillusplantaruma15植物乳桿菌菌株按照1％接種量接種于在溫度120℃下滅菌8min的搖瓶培養(yǎng)基中，在搖瓶中在溫度30℃條件下培養(yǎng)72h，得到含有5.0×108植物乳桿菌的搖瓶培養(yǎng)液；
制備具有下述組成的發(fā)酵培養(yǎng)基：20g/l蛋白胨、10g/l酵母膏、5g/l葡萄糖、0.008g/l氯化鈉、0.008g/l磷酸氫二鉀、2g/l檸檬酸二銨、0.008g/l硫酸鎂與0.008g/l硫酸錳；
按照3％接種量將上述搖瓶培養(yǎng)液接種于在溫度120℃下滅菌8min的發(fā)酵培養(yǎng)基中，在發(fā)酵罐中在溫度30℃條件下培養(yǎng)60h，得到含有2.4×109個/g植物乳桿菌的發(fā)酵培養(yǎng)液；
iii、枯草芽孢桿菌培養(yǎng)液制備：
制備具有下述組成的搖瓶培養(yǎng)基：5g/l羧甲基纖維素鈉、2g/l硫酸銨、1g/l磷酸氫二鉀、0.5g/l氯化鈉與0.5g/l硫酸鎂；
將bacillussubtilisstrainb49枯草芽孢桿菌菌株按照1％接種量接種于在溫度120℃下滅菌8min的搖瓶培養(yǎng)基中，在搖瓶中在溫度30℃條件下培養(yǎng)24h，得到含有7.5×107個/g枯草芽孢桿菌的搖瓶培養(yǎng)液；
制備具有下述組成的發(fā)酵培養(yǎng)基：5g/l羧甲基纖維素鈉、2g/l硫酸銨、1g/l磷酸氫二鉀、0.5g/l氯化鈉與0.5g/l硫酸鎂；
按照3％接種量將上述搖瓶培養(yǎng)液接種于在溫度120℃下滅菌8min的發(fā)酵培養(yǎng)基中，在發(fā)酵罐中在溫度32℃條件下培養(yǎng)48h，得到含有2.5×108個/g枯草芽孢桿菌的發(fā)酵培養(yǎng)液；
iv、植物秸稈預(yù)處理
將高粱秸稈粉碎，篩分，收集100目高粱秸稈粉，再使用飽和水蒸汽處理1.2h，接著冷卻至室溫，得到滅菌高粱秸稈粉；
v、菌劑制備
菌劑a的制備：
將步驟i得到的產(chǎn)酯酵母發(fā)酵培養(yǎng)液與步驟ii得到的植物乳桿菌發(fā)酵培養(yǎng)液按照體積比1：1.5混合均勻，按照滅菌高粱秸稈粉干重計1.0％接種量，把混合均勻的發(fā)酵培養(yǎng)液加到滅菌植物秸稈粉中，在搖床中震蕩8h，離心清洗，得到吸附產(chǎn)酯酵母與植物乳桿菌的載體；
將以混合溶液重量計6％聚乙烯醇、0.3％海藻酸鈉與0.3％羧甲基纖維素鈉在去離子水中浸泡一夜，在溫度121℃的條件下滅菌20min，接著冷卻至溫度40℃，得到一種混合溶液；
將所述載體與所述混合溶液按照重量比10：1混合，再滴入ph6.4的含有以重量計4％cacl2的飽和硼酸溶液中，靜置24h，得到菌劑a；
菌劑b的制備：
將步驟iii得到的枯草芽孢桿菌發(fā)酵培養(yǎng)液、按照枯草芽孢桿菌發(fā)酵培養(yǎng)液重量計6％海藻糖與15％脫脂乳混合均勻，再置于冷凍干燥設(shè)備中處理得到所述的菌劑b；
將菌劑a與菌劑b按照重量比3.5：1混合均勻，得到所述的包埋菌劑，它含有3.5×108個/g枯草芽孢桿菌、6.0×108個/g產(chǎn)酯酵母與2.2×109個/g植物乳桿菌。所述的包埋菌劑在溫度4℃下保存。
實施例3：生產(chǎn)本發(fā)明青貯用包埋菌劑
該實施例的實施步驟如下：
i、產(chǎn)酯酵母培養(yǎng)液制備：
制備具有下述組成的搖瓶培養(yǎng)基：20g/l蛋白胨、20g/l葡萄糖與10g/l酵母浸膏；
將brettanomycessp.產(chǎn)酯酵母菌株按照1％接種量接種于在溫度114℃下滅菌9min的搖瓶培養(yǎng)基中，在搖瓶中在溫度30℃條件下培養(yǎng)36h，得到含有2.5×108個/g產(chǎn)酯酵母的搖瓶培養(yǎng)液；
制備具有下述組成的發(fā)酵培養(yǎng)基：10g/l蛋白胨、10g/l葡萄糖與5g/l氯化鈉；
按照3％接種量將上述搖瓶培養(yǎng)液接種于在溫度114℃下滅菌9min的發(fā)酵培養(yǎng)基中，在發(fā)酵罐中在溫度30℃條件下培養(yǎng)48h，得到含有6.4×108個/g產(chǎn)酯酵母的發(fā)酵培養(yǎng)液；
ii、植物乳桿菌培養(yǎng)液制備：
制備具有下述組成的搖瓶培養(yǎng)基：10g/l牛肉膏、10g/l蛋白胨、10g/l酵母膏、5g/l葡萄糖、20g/l醋酸鈉、5g/l磷酸氫二鉀、2g/l檸檬酸二銨、2g/l吐溫80、1g/l硫酸鎂與0.58g/l硫酸錳；
將lactobacillusplantarumy15118植物乳桿菌菌株按照1％接種量接種于在溫度114℃下滅菌9min的搖瓶培養(yǎng)基中，在搖瓶中在溫度30℃條件下培養(yǎng)56h，得到含有5.5×108植物乳桿菌的搖瓶培養(yǎng)液；
制備具有下述組成的發(fā)酵培養(yǎng)基：20g/l蛋白胨、10g/l酵母膏、5g/l葡萄糖、0.008g/l氯化鈉、0.008g/l磷酸氫二鉀、2g/l檸檬酸二銨、0.008g/l硫酸鎂與0.008g/l硫酸錳；
按照3％接種量將上述搖瓶培養(yǎng)液接種于在溫度114℃下滅菌9min的發(fā)酵培養(yǎng)基中，在發(fā)酵罐中在溫度32℃條件下培養(yǎng)72h，得到含有2.3×109個/g植物乳桿菌的發(fā)酵培養(yǎng)液；
iii、枯草芽孢桿菌培養(yǎng)液制備：
制備具有下述組成的搖瓶培養(yǎng)基：5g/l羧甲基纖維素鈉、2g/l硫酸銨、1g/l磷酸氫二鉀、0.5g/l氯化鈉與0.5g/l硫酸鎂；
將bacillussubtilisstrainwl1021枯草芽孢桿菌菌株按照1％接種量接種于在溫度114℃下滅菌9min的搖瓶培養(yǎng)基中，在搖瓶中在溫度30℃條件下培養(yǎng)36h，得到含有7.8×107個/g枯草芽孢桿菌的搖瓶培養(yǎng)液；
制備具有下述組成的發(fā)酵培養(yǎng)基：5g/l羧甲基纖維素鈉、2g/l硫酸銨、1g/l磷酸氫二鉀、0.5g/l氯化鈉與0.5g/l硫酸鎂；
按照3％接種量將上述搖瓶培養(yǎng)液接種于在溫度114℃下滅菌9min的發(fā)酵培養(yǎng)基中，在發(fā)酵罐中在溫度30℃條件下培養(yǎng)40h，得到含有3.2×108個/g枯草芽孢桿菌的發(fā)酵培養(yǎng)液；
iv、植物秸稈預(yù)處理
將小麥秸稈粉碎，篩分，收集120目小麥秸稈粉，再使用飽和水蒸汽處理1.01.21.51.4h，接著冷卻至室溫，得到滅菌小麥秸稈粉；
v、菌劑制備
菌劑a的制備：
將步驟i得到的產(chǎn)酯酵母發(fā)酵培養(yǎng)液與步驟ii得到的植物乳桿菌發(fā)酵培養(yǎng)液按照體積比1：1.4混合均勻，按照滅菌小麥秸稈粉干重計5.0％接種量，把混合均勻的發(fā)酵培養(yǎng)液加到滅菌植物秸稈粉中，在搖床中震蕩8h，離心清洗，得到吸附產(chǎn)酯酵母與植物乳桿菌的載體；
將以混合溶液重量計6％聚乙烯醇、0.3％海藻酸鈉與0.3％羧甲基纖維素鈉在去離子水中浸泡一夜，在溫度121℃的條件下滅菌20min，接著冷卻至溫度40℃，得到一種混合溶液；
將所述載體與所述混合溶液按照重量比10：1混合，再滴入ph6.6的含有以重量計4％cacl2的飽和硼酸溶液中，靜置24h，得到菌劑a；
菌劑b的制備：
將步驟iii得到的枯草芽孢桿菌發(fā)酵培養(yǎng)液、按照枯草芽孢桿菌發(fā)酵培養(yǎng)液重量計6％海藻糖與15％脫脂乳混合均勻，再置于冷凍干燥設(shè)備中處理得到所述的菌劑b；
將菌劑a與菌劑b按照重量比2.8：1混合均勻，得到所述的包埋菌劑，它含有3.2×108個/g枯草芽孢桿菌、7.0×108個/g產(chǎn)酯酵母與2.4×109個/g植物乳桿菌。所述的包埋菌劑在溫度4℃下保存。
實施例4：生產(chǎn)本發(fā)明青貯用包埋菌劑
該實施例的實施步驟如下：
i、產(chǎn)酯酵母培養(yǎng)液制備：
制備具有下述組成的搖瓶培養(yǎng)基：20g/l蛋白胨、20g/l葡萄糖與10g/l酵母浸膏；
將brettanomycessp.產(chǎn)酯酵母菌株按照1％接種量接種于在溫度118℃下滅菌10min的搖瓶培養(yǎng)基中，在搖瓶中在溫度30℃條件下培養(yǎng)32h，得到含有2.4×108個/g產(chǎn)酯酵母的搖瓶培養(yǎng)液；
制備具有下述組成的發(fā)酵培養(yǎng)基：10g/l蛋白胨、10g/l葡萄糖與5g/l氯化鈉；
按照3％接種量將上述搖瓶培養(yǎng)液接種于在溫度118℃下滅菌10min的發(fā)酵培養(yǎng)基中，在發(fā)酵罐中在溫度32℃條件下培養(yǎng)40h，得到含有6.6×108個/g產(chǎn)酯酵母的發(fā)酵培養(yǎng)液；
ii、植物乳桿菌培養(yǎng)液制備：
制備具有下述組成的搖瓶培養(yǎng)基：10g/l牛肉膏、10g/l蛋白胨、10g/l酵母膏、5g/l葡萄糖、20g/l醋酸鈉、5g/l磷酸氫二鉀、2g/l檸檬酸二銨、2g/l吐溫80、1g/l硫酸鎂與0.58g/l硫酸錳；
將lactobacillusplantarumy15118植物乳桿菌菌株按照1％接種量接種于在溫度118℃下滅菌10min的搖瓶培養(yǎng)基中，在搖瓶中在溫度30℃條件下培養(yǎng)64h，得到含有5.4×108植物乳桿菌的搖瓶培養(yǎng)液；
制備具有下述組成的發(fā)酵培養(yǎng)基：20g/l蛋白胨、10g/l酵母膏、5g/l葡萄糖、0.008g/l氯化鈉、0.008g/l磷酸氫二鉀、2g/l檸檬酸二銨、0.008g/l硫酸鎂與0.008g/l硫酸錳；
按照3％接種量將上述搖瓶培養(yǎng)液接種于在溫度118℃下滅菌10min的發(fā)酵培養(yǎng)基中，在發(fā)酵罐中在溫度30℃條件下培養(yǎng)68h，得到含有2.2×109個/g植物乳桿菌的發(fā)酵培養(yǎng)液；
iii、枯草芽孢桿菌培養(yǎng)液制備：
制備具有下述組成的搖瓶培養(yǎng)基：5g/l羧甲基纖維素鈉、2g/l硫酸銨、1g/l磷酸氫二鉀、0.5g/l氯化鈉與0.5g/l硫酸鎂；
將bacillussubtilisstrainwl1021枯草芽孢桿菌菌株按照1％接種量接種于在溫度118℃下滅菌10min的搖瓶培養(yǎng)基中，在搖瓶中在溫度30℃條件下培養(yǎng)32h，得到含有8.0×107個/g枯草芽孢桿菌的搖瓶培養(yǎng)液；
制備具有下述組成的發(fā)酵培養(yǎng)基：5g/l羧甲基纖維素鈉、2g/l硫酸銨、1g/l磷酸氫二鉀、0.5g/l氯化鈉與0.5g/l硫酸鎂；
按照3％接種量將上述搖瓶培養(yǎng)液接種于在溫度118℃下滅菌10min的發(fā)酵培養(yǎng)基中，在發(fā)酵罐中在溫度32℃條件下培養(yǎng)44h，得到含有3.5×108個/g枯草芽孢桿菌的發(fā)酵培養(yǎng)液；
iv、植物秸稈預(yù)處理
將玉米秸稈、高粱秸稈、小麥秸稈或水稻秸稈粉碎，篩分，收集80100120100目玉米秸稈、高粱秸稈、小麥秸稈或水稻秸稈粉，再使用飽和水蒸汽處理1.01.21.51.4h，接著冷卻至室溫，得到滅菌植物秸稈粉；
v、菌劑制備
菌劑a的制備：
將步驟i得到的產(chǎn)酯酵母發(fā)酵培養(yǎng)液與步驟ii得到的植物乳桿菌發(fā)酵培養(yǎng)液按照體積比1：1.2混合均勻，按照滅菌植物秸稈粉干重計4.0％接種量，把混合均勻的發(fā)酵培養(yǎng)液加到滅菌植物秸稈粉中，在搖床中震蕩8h，離心清洗，得到吸附產(chǎn)酯酵母與植物乳桿菌的載體；
將以混合溶液重量計6％聚乙烯醇、0.3％海藻酸鈉與0.3％羧甲基纖維素鈉在去離子水中浸泡一夜，在溫度121℃的條件下滅菌20min，接著冷卻至溫度40℃，得到一種混合溶液；
將所述載體與所述混合溶液按照重量比10：1混合，再滴入ph6.8的含有以重量計4％cacl2的飽和硼酸溶液中，靜置24h，得到菌劑a；
菌劑b的制備：
將步驟iii得到的枯草芽孢桿菌發(fā)酵培養(yǎng)液、按照枯草芽孢桿菌發(fā)酵培養(yǎng)液重量計6％海藻糖與15％脫脂乳混合均勻，再置于冷凍干燥設(shè)備中處理得到所述的菌劑b；
將菌劑a與菌劑b按照重量比3.2：1混合均勻，得到所述的包埋菌劑，它含有2.8×108個/g枯草芽孢桿菌、6.8×108個/g產(chǎn)酯酵母與2.6×109個/g植物乳桿菌。所述的包埋菌劑在溫度4℃下保存。
試驗實施例1：制備青貯飼料
該試驗實施例的實施步驟如下：
i、發(fā)酵池與原料
選擇長2m×寬1.5m×深1.8m長方形發(fā)酵池進行試驗。該發(fā)酵池四周鋪設(shè)塑料薄膜，選擇新鮮青綠玉米秸稈，粉碎，備用。
ii、菌種活化
往實施例1制備包埋菌劑中添加少許糖，再置于溫度25℃～35℃的水中攪拌溶解1h，備用。
iii、接種裝料
將粉碎玉米秸稈經(jīng)飽和蒸汽處理1h，冷卻至25℃?zhèn)溆?，按照粉碎玉米秸稈干重?％接入步驟ii得到的菌液，然后混勻，得到的原料填入發(fā)酵池中，填充厚度達到20～30cm時踩實，接著繼續(xù)添加原料，以同樣方式進行，直到原料加完，接著覆蓋塑料薄膜，再填埋約10cm土壤，踩實，每池裝約7t原料。
iv、青貯飼料制備
讓原料在青貯池中在自然條件下發(fā)酵15d，得到所述的青貯飼料。
根據(jù)gb/t6434-2006標準分析方法，對得到的青貯飼料進行粗纖維分析；根據(jù)gb/t6432-1994標準分析方法，對得到的青貯飼料進行粗蛋白分析，這些分析結(jié)果列于下表1中。在4℃的條件下，對得到的青貯飼料進行有效保存時間檢測。
試驗實施例2：制備青貯飼料
該試驗實施例的實施步驟與試驗實施例1相同，只是該試驗實施例2使用實施例2制備的包埋菌劑、發(fā)酵時間20天。該試驗實施例得到的青貯飼料進行粗纖維分析、粗蛋白分析與有效保存時間檢測，這些分析結(jié)果也列于下表1中。
試驗實施例3：制備青貯飼料
該試驗實施例的實施步驟與試驗實施例1相同，只是該試驗實施例3使用實施例3制備的包埋菌劑。該實施例得到的青貯飼料進行粗纖維分析、粗蛋白分析與有效保存時間檢測，這些分析結(jié)果也列于下表1中。
試驗實施例4：制備青貯飼料
該試驗實施例的實施步驟與試驗實施例1相同，只是該試驗實施例3使用實施例4制備的包埋菌劑。該試驗實施例得到的青貯飼料進行粗纖維分析、粗蛋白分析與有效保存時間檢測，這些分析結(jié)果也列于下表1中。
試驗實施例5：制備青貯飼料
該試驗實施例的實施步驟與試驗實施例1相同，只是該試驗實施例5沒有添加本發(fā)明的包埋菌劑。該試驗實施例得到的青貯飼料進行粗纖維分析、粗蛋白分析與有效保存時間檢測，這些分析結(jié)果也列于下表1中。
試驗實施例6：制備青貯飼料
該試驗實施例的實施步驟與試驗實施例1相同，只是該試驗實施例6添加目前市售的“農(nóng)富康”牌秸稈發(fā)酵菌劑。該試驗實施例得到的青貯飼料進行粗纖維分析、粗蛋白分析與有效保存時間檢測，這些分析結(jié)果也列于下表1中。
表1：本發(fā)明制備青貯飼料的分析結(jié)果
由表1列出的結(jié)果清楚地看出，由本發(fā)明所得到的青貯飼料無論在飼料本身的營養(yǎng)上，還是在有效保質(zhì)期上，均超過市售菌劑，所以，本發(fā)明提高了玉米秸稈的利用率，改善了青貯飼料的營養(yǎng)價值，具有良好的應(yīng)用前景。