本發(fā)明屬于生物實驗用品技術領域，涉及一種簡易濾紙卡的制作方法及應用。
背景技術：
質粒是現(xiàn)代生物實驗室進行基因操作常用的dna載體，是一種使用頻繁的基因操作工具。在試驗中，構建好的含目標dna的重組質?；蚬ぞ哔|粒都需要進行保存。通常情況下，質粒保存有兩種方法：一種是將質粒轉入相應的感受態(tài)細菌細胞中，經選擇性培養(yǎng)基鋪板培養(yǎng)后挑取單克隆，接種到含有相應抗生素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，然后加入終濃度為15～20％的甘油，直接置于-70℃以下冰箱中冷凍保存。另一種是將質粒從培養(yǎng)的細菌中提取出來，用緩沖液(如te)溶解，置于-70℃以下冰箱中冷凍保存。
這兩種方法的缺點：(1)需要一定的實驗室生物操作過程和耗材，如培養(yǎng)、提取及凍存管等；(2)細菌或質粒取用時的反復凍融導致的細菌死亡或質粒裂解；(3)需要超低溫保存條件，不適宜于長途運輸及攜帶。
技術實現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術中存在的缺陷，提供一種簡易濾紙卡的制作方法及應用，是將質粒直接點樣于經適當剪裁和排列濾紙形成的濾紙卡中，密封于加入干燥劑的簡易自封袋中即可?？沙鼗虻蜏亻L期保存，便于攜帶、使用方便。
其具體技術方案為：
一種簡易濾紙卡的制作方法，包括以下步驟：
步驟1、將三片濾紙按照上層、中間層和下層依次疊放整齊，用訂書機將四個邊裝訂整齊；
步驟2、在上層濾紙上以1cm的直徑畫圓圈，每個圓圈之間的間距在1cm，沿圓周從右側將圓圈剪開四分之三，留有四分之一圓周未剪開，掀開剪開的濾紙片上的半圓片，在相應圓片下的中間層濾紙片上畫直徑為0.5cm的圓圈，每個圓圈中能保存一種或一份質粒。
一種簡易濾紙卡在保存質粒過程中的應用，包括以下步驟：
步驟1、將一定濃度的質粒溶液點在中間層濾紙的0.5cm直徑的圓圈內，蓋上上層濾紙上的半圓片，在每個圓片上做好標記，用透明膠帶封口；
步驟2、將濾紙卡放入一個干凈的密閉塑料袋中，加入干燥劑，能常溫保存攜帶，或者低溫長期保存；
步驟3、使用時，剪開上層濾紙上的相應圓片，將中間層中包含質粒的相應0.5cm直徑的圓圈用剪下或刀片取下，浸泡于滅菌水或緩沖液中，離心，吸取上清，即能用于實驗室實驗。
進一步，步驟1中，所述質粒溶液的點樣量為10ul。
與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明的有益效果：
本發(fā)明提供的方法，是將質粒直接點樣于經適當剪裁和排列濾紙形成的濾紙卡中，密封于加入干燥劑的簡易自封袋中即可?？沙鼗虻蜏亻L期保存，不需要復雜的實驗室生物操作過程和凍存管等耗材，具有便于攜帶、使用方便的特點，適合推廣應用。
具體實施方式
下面結合具體實施方案對本發(fā)明的技術方案作進一步詳細地說明。
本發(fā)明使用任何一種普通或加厚濾紙(如bio-rad公司生產的濾紙)，將濾紙裁剪成一定大小的紙片(實際大小以保存質粒的數(shù)量或使用的自封袋大小、并便于攜帶為宜，如長10cm、寬6cm的紙片上可保存8種質粒，見下文)。滅菌后，每三片濾紙裝訂成一個用于保存質粒的濾紙卡。具體方法如下：
(1)將三片濾紙疊放整齊，成三層濾紙(上、中、下)，用訂書機將四個邊裝訂整齊。
(2)在上層濾紙上以1cm的直徑畫圓圈，每個圓圈之間的間距在1cm左右，沿圓周從右側將圓圈剪開約四分之三，掀開剪開的濾紙片上的半圓片(有四分之一圓周未剪開)，在相應圓片下的中間層濾紙片上畫直徑為0.5cm的圓圈，每個圓圈中可以保存一種或一份質粒。
保存方法：
(1)將一定濃度的質粒溶液點在中間層濾紙的0.5cm直徑的圓圈內(點樣量以10ul左右為宜)，蓋上上層濾紙上的半圓片，在每個圓片上做好標記，用透明膠帶封口。
(2)將濾紙卡放入一個干凈的密閉塑料袋中，加入干燥劑，可常溫保存攜帶，也可低溫長期保存。
使用方法：
使用時，剪開第一層濾紙上的相應圓片，將中間層中包含質粒的相應0.5cm直徑的圓圈用剪下或刀片取下，浸泡與滅菌水或緩沖液中，離心，吸取上清即可用于實驗室實驗。
以上所述，僅為本發(fā)明較佳的具體實施方式，本發(fā)明的保護范圍不限于此，任何熟悉本技術領域的技術人員在本發(fā)明披露的技術范圍內，可顯而易見地得到的技術方案的簡單變化或等效替換均落入本發(fā)明的保護范圍內。