本發(fā)明屬于微生物菌劑
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及－種造肥催腐型復(fù)合菌劑及其制備方法和應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：在過去化學(xué)肥料累積了大量的化學(xué)元素而造成了農(nóng)田土壤酸化、硬化、病蟲害與毒素的嚴(yán)重問題。過量的氮肥造成脫氨現(xiàn)象及形成亞硝酸鹽的毒害，磷肥形成不溶性的磷鹽化物而加深土壤酸化板結(jié)的問題，進(jìn)而造成土壤深層厭氣發(fā)酵而產(chǎn)生硫化氫氣體與氨氣，導(dǎo)致形成爛根敗叢，致使植物根部營(yíng)養(yǎng)不良而衰弱多病，植物病蟲害問題隨之加重。這樣迫使大量化學(xué)激素與化學(xué)農(nóng)藥使用，結(jié)果又帶來了農(nóng)藥化學(xué)殘留與土壤污染的問題。要解決這一連串的問題，目前最需要的是創(chuàng)制一種多樣化復(fù)合菌劑提供多方位的功能，一氣呵成地解決現(xiàn)今土壤面臨的復(fù)雜難題。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供了－種造肥催腐型復(fù)合菌劑及其制備方法和應(yīng)用。該造肥催腐型復(fù)合菌劑能促進(jìn)秸稈分解利用，改善土壤板結(jié)酸化現(xiàn)象，防止肥分流失，保護(hù)生態(tài)環(huán)境，省肥料，省農(nóng)藥，降低農(nóng)作物耕種成本，保證農(nóng)作物生長(zhǎng)旺盛，增產(chǎn)豐收。本發(fā)明提供的技術(shù)方案為：一種造肥催腐型復(fù)合菌劑，包括以下重量百分比的菌種原粉：大豆根瘤菌10～15％；螢光假單胞菌10～15％；蠟樣芽孢桿菌10～15％；膠質(zhì)芽孢桿菌10～15％；枯草芽孢桿菌10～15％；淡紫擬青霉菌10～15％；哈茨木霉菌10～15％。各菌種原粉的活菌數(shù)分別為：大豆根瘤菌3～5×108cfu/g；螢光假單胞菌3～5×108cfu/g；蠟樣芽孢桿菌3～5×108cfu/g；膠質(zhì)芽孢桿菌3～5×108cfu/g；枯草芽孢桿菌3～5×108cfu/g；淡紫擬青霉菌3～5×107cfu/g；哈茨木霉菌3～5×107cfu/g。本發(fā)明還提供了所述造肥催腐型復(fù)合菌劑的制備方法，其包括以下步驟：(1)將大豆根瘤菌、螢光假單胞菌、蠟樣芽孢桿菌、膠質(zhì)芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、淡紫擬青霉菌、哈茨木霉菌菌種分別培養(yǎng)熟化成菌種液；(2)將步驟(1)得到的各菌種液分別經(jīng)粉末培養(yǎng)基培養(yǎng)成各菌種原粉；(3)將步驟(2)得到的各菌種原粉調(diào)整至目標(biāo)活菌數(shù)，具體為：大豆根瘤菌、螢光假單胞菌、蠟樣芽孢桿菌、膠質(zhì)芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌目標(biāo)活菌數(shù)均為3～5×108cfu/g；淡紫擬青霉菌和哈茨木霉菌目標(biāo)活菌數(shù)均為3～5×107cfu/g；(4)將調(diào)整至目標(biāo)活菌數(shù)的各菌種原粉按所述重量百分比的配比混合均勻，即可得到造肥催腐型復(fù)合菌劑。所述步驟(1)中，大豆根瘤菌、螢光假單胞菌、蠟樣芽孢桿菌、膠質(zhì)芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基每升中所含成分及重量百分比均為：培養(yǎng)基中氨基酸2.0％，磷酸二氫鉀1.0％，尿素1.0％，氯化鈉0.2％，碳酸鈣0.2％，葡萄糖0.5％，其余為蒸餾水，ph為6.8～7.2。所述步驟(1)中，淡紫擬青霉菌培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基每升中所含成分及重量百分比為：氨基酸1.0％，磷酸二氫鉀1.0％，尿素1.0％，氯化鈉0.2％，糖蜜5.0％，其余為蒸餾水，ph為7.0～7.4；哈茨木霉菌培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基每升中所含成分及重量百分比為：磷酸氫二鉀0.2％，硝酸鉀0.2％，氯化鉀0.05％，氯化鈉0.1％，糖蜜5.0％，葡萄糖1.0％，其余為蒸餾水，ph為6.8～7.2。以上各培養(yǎng)基均經(jīng)過高溫高壓反應(yīng)罐滅菌。各菌種需要在各自適配培養(yǎng)基中培養(yǎng)，以提升各菌種的生長(zhǎng)繁殖速度和菌種質(zhì)量。所述步驟(1)中，培養(yǎng)條件為將各菌種分別接種于各自適配培養(yǎng)基中，28～30℃攪拌培養(yǎng)48～72小時(shí)，然后再將培養(yǎng)后的菌種全部接種于80倍體積的培養(yǎng)基中，28～30℃擴(kuò)大攪拌培養(yǎng)3～5天，即可得到菌種液。所述步驟(1)中還包括在培養(yǎng)的過程中，向培養(yǎng)基中充氧。所述步驟(2)中，菌種液與粉末培養(yǎng)基的重量之比為(4～8)：(42～63)，所述粉末培養(yǎng)基包括以下重量份的成分：玉米細(xì)粉400～600份、大豆蛋白細(xì)粉20～30份。所述粉末培養(yǎng)基的制備方法為：將玉米細(xì)分和大豆蛋白細(xì)粉混合均勻后，加熱至100～120℃，持續(xù)10-30分鐘，達(dá)到無菌狀態(tài)后冷卻至30～35℃，待用。所述步驟(2)中，培養(yǎng)條件為：用無菌水調(diào)節(jié)體系水分含量為40％～50％，于28～32℃培養(yǎng)，培養(yǎng)過程中保持無菌空氣正壓充氧，并斷續(xù)攪拌，當(dāng)菌種到達(dá)生長(zhǎng)高峰期后改用30～40℃無菌干燥空氣吹入體系并持續(xù)攪拌至體系水分含量降至10％以下，即可得到菌種原粉。所述無菌空氣的流量為0.2-0.5m3/min，所述斷續(xù)攪拌為以24～36rpm/s的轉(zhuǎn)速每3～6小時(shí)攪拌3～5分鐘，所述生長(zhǎng)高峰期的判斷方式為：在培養(yǎng)的過程中每24小時(shí)檢測(cè)菌株總菌數(shù)濃度，根據(jù)總菌數(shù)濃度判斷生長(zhǎng)高峰期；所述無菌干燥空氣的流量為0.2-0.5m3/min。所述步驟(3)中，所述調(diào)整的方法為向步驟(2)得到的各菌種原粉中加入無菌混合粉末，所述無菌混合粉末包括以下重量百分比的成分：玉米細(xì)粉75～90％，黃豆粕粉2～15％，葡萄糖2～12％。采用此配比的無菌混合粉末具有調(diào)整稀釋活菌數(shù)的作用,同時(shí)又能為菌種繁殖提供營(yíng)養(yǎng)成分,維持菌種活力的效果。本發(fā)明還提供了所述造肥催腐型復(fù)合菌劑的應(yīng)用，所述造肥催腐型復(fù)合菌劑具有固氮、溶磷、解鉀、防止土壤肥分流失、腐化秸稈的作用。在應(yīng)用時(shí)，所述造肥催腐型復(fù)合菌劑的使用方法為：a.活化：將上述造肥催腐型復(fù)合菌劑加9倍水稀釋，放置室溫24-72小時(shí)，令其相互拮抗以激發(fā)有效分泌物的大量產(chǎn)出后，稀釋50-100倍，待用；b.散布：將上述己稀釋活化的造肥催腐型復(fù)合菌劑按200-500kg/畝散布于耕地；c.翻耕：菌劑散布后，立即耕耘入土15-40厘米以上，保持濕度30-50％放置14-21天。本發(fā)明公開的造肥催腐型復(fù)合菌劑，其成分中，大豆根瘤菌和螢光假單胞菌具有固氮能力，螢光假單胞菌和蠟樣芽孢桿菌對(duì)土壤中不溶性磷具有解磷作用，地衣芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌以及哈茨木霉菌具有強(qiáng)烈的分解能力，能夠分解農(nóng)殘、秸稈有機(jī)質(zhì)、木質(zhì)纖維、淀粉、脂肪、蛋白。在這群群體中，淡紫擬青霉菌、地衣芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌和哈茨木霉都是具備強(qiáng)烈生物防治能力的菌種。所述造肥催腐型復(fù)合菌劑存活力強(qiáng)大又能迅速繁殖，能緩沖土壤肥分，使可利用肥分不致于發(fā)生施肥瞬間過剩而流失的現(xiàn)象。防止肥分流失而污染河川湖泊。所述造肥催腐型復(fù)合菌劑各菌種功能搭配完美，能夠有效解決目前國(guó)內(nèi)農(nóng)業(yè)與土地的難題，它有助于固氮、溶磷、防止化肥流失、病蟲害防冶及秸稈和有機(jī)廢棄物之資源再利用。是一種由多種功能范疇相輔相成的菌群完美結(jié)合而成的新穎生物土壤改良劑。在所述造肥催腐型復(fù)合菌劑的制備過程中，為實(shí)現(xiàn)個(gè)菌種的高純度高活菌數(shù)的品質(zhì)，本發(fā)明使用高溫高壓反應(yīng)罐消毒滅菌各適用液態(tài)培養(yǎng)基，采用各菌種單獨(dú)各自培養(yǎng)以制得高純度高菌數(shù)的量化菌種；接著再將此液態(tài)單一菌種投入己滅菌的固態(tài)培養(yǎng)基中繼續(xù)量化培養(yǎng)，菌種在液態(tài)培養(yǎng)及固體培養(yǎng)過程中均為單一菌種，并在單一菌種的最適培養(yǎng)基與環(huán)境下培養(yǎng)，因此各菌種能充分繁殖茁壯，避免多種微生物一起培養(yǎng)過程中，因生存競(jìng)爭(zhēng)產(chǎn)生拮抗作用或因繁殖生長(zhǎng)速度懸殊而發(fā)生部分菌種衰微或近乎消跡的缺點(diǎn)；最后又依照合理安排的活菌數(shù)混配而成。施用時(shí)各種不同微生物都能充分發(fā)揮其特有功能，以達(dá)到預(yù)期效果。本發(fā)明公開的造肥催腐型復(fù)合菌劑，可利用固氮菌將存在于大氣中含量達(dá)80％以上，但不能為作物所直接吸收利用的氮分子轉(zhuǎn)化為植物能夠吸收利用的氮離子狀態(tài)，即可為植物提供大量生長(zhǎng)所需，又可使土壤中的氨及亞硝酸氧化而成硝酸態(tài)氮，解毒造肥。本發(fā)明公開的造肥催腐型復(fù)合菌劑，可利用溶磷菌和解鉀菌將累積在土壤中的不溶性磷鉀化合物取代為可溶性磷鉀鹽類，如此一來不但解除了板結(jié)問題，同時(shí)也提升了土壤中的磷鉀肥分。并采用具有強(qiáng)烈分解力的有益微生物群，包括大豆根瘤菌、螢光假單胞菌、蠟樣芽孢桿菌、膠質(zhì)芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、淡紫擬青霉菌、哈茨木霉菌等，這些微生物群的結(jié)合不但能迅速分解腐化秸稈為肥分，同時(shí)也能對(duì)抗病蟲害，達(dá)到減免農(nóng)藥的目的。這群強(qiáng)勢(shì)的微生物大量而快速地耗盡土壤中的營(yíng)養(yǎng)資源而快速成長(zhǎng)繁殖，使土壤中氮、磷、鉀等無機(jī)肥分不致于發(fā)生施肥瞬間過剩而流失的現(xiàn)象。當(dāng)土壤中的營(yíng)養(yǎng)成分漸被耗盡時(shí)，微生物也隨著漸次因饑餓而死亡，死亡菌體腐化而成有機(jī)營(yíng)養(yǎng)回歸大地，達(dá)到防止肥分流失又能轉(zhuǎn)化無機(jī)肥分為緩效有機(jī)肥的效果。達(dá)到造肥催腐的雙重效果。本發(fā)明公開的造肥催腐型復(fù)合菌劑用于堆肥發(fā)酵時(shí)，可縮短堆肥熟化所需時(shí)間，菌群生長(zhǎng)繁殖迅速而產(chǎn)生的高溫可達(dá)75℃以上，由于持續(xù)高溫能殺死病原體、蟲卵和雜草種子，能徹底使堆肥無害化。當(dāng)堆肥發(fā)酵完成而施用于耕地時(shí)，大量繁殖而強(qiáng)勢(shì)的有益菌群即以其菌群優(yōu)勢(shì)占據(jù)大地發(fā)揮其益生功能。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明得到的造肥催腐型復(fù)合菌劑具有如下有益效果：a.固定天然氮源：能使自然界中存在但不能為作物為所直接吸收利用的氮分子轉(zhuǎn)化為植物能夠吸收利用的氮離子狀態(tài)或含氮鹽類以提供植物生長(zhǎng)所需。b.解除磷鉀板結(jié)：能將累積在土壤中的不溶性磷鉀化合物化學(xué)取代為可溶性磷鉀鹽類，不但解除了板結(jié)問題，同時(shí)也提升了土壤中的磷鉀肥分。c.防止肥分流失：能快速地耗盡土壤中的營(yíng)養(yǎng)資源而繁殖，當(dāng)營(yíng)養(yǎng)資源耗盡，微生物死亡之際，菌體腐化而成有機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分回歸大地。即能防止無機(jī)肥分發(fā)生施肥瞬間過剩而流失的現(xiàn)象，同時(shí)轉(zhuǎn)化化學(xué)肥分為緩效有機(jī)肥的效果。d.腐化秸稈分解農(nóng)殘：具有強(qiáng)大分解能力的菌群能迅速分解有機(jī)質(zhì)及農(nóng)殘物質(zhì)，并能使秸稈的纖維質(zhì)細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)破壞，使秸稈迅速破壁分解腐化并釋出其養(yǎng)分供植物吸收利用。e.防治病蟲害：具有造肥、防流失、分解秸稈、解毒之外，并具有強(qiáng)烈生物防治的能力。螢光假單孢菌分泌假單孢菌素，對(duì)腐霉、絲囊霉、小麥全蝕病、棉花幼苗猝倒病、馬鈴薯軟腐病、殺線蟲有效。地衣芽孢桿菌防治黑星病及花生線蟲?？莶菅挎邨U菌能對(duì)付不同種類的病蟲害，包括馬鈴薯瘡痂、蕃茄青枯病、蘋果紅腐病、霉心病、炭疽病、小麥赤霉病、水稻紋枯病、立枯絲核菌、腐霉菌、鐮霉菌等廣幅度病害，同時(shí)也具有殺滅線蟲的能力。淡紫擬青霉則為線蟲卵寄生真菌，能消滅線蟲包括大豆孢囊線蟲、煙草根結(jié)線蟲，亦可消滅塊莖娥、粉蚧等。哈茨木霉木霉素分泌trichodermin、peptaibole、chitinase。能防治腐霉、絲囊霉、小麥全蝕病、蕃茄、棉花幼苗猝倒病、馬鈴薯軟腐病、立枯病、花生辣椒的白絹病、水稻紋枯病。具體實(shí)施方式一種造肥催腐型復(fù)合菌劑，包括如表1所示的重量百分比及活菌數(shù)的菌種：表1其制備方法，包括以下步驟：(1)將大豆根瘤菌、螢光假單胞菌、蠟樣芽孢桿菌、膠質(zhì)芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、淡紫擬青霉菌、哈茨木霉菌菌種分別培養(yǎng)熟化成菌種液；具體方法為：將大豆根瘤菌、螢光假單胞菌、蠟樣芽孢桿菌、膠質(zhì)芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌分別經(jīng)培養(yǎng)基一培養(yǎng)，淡紫擬青霉菌經(jīng)培養(yǎng)基二培養(yǎng)，哈茨木霉菌經(jīng)培養(yǎng)基三培養(yǎng)，各菌種培養(yǎng)條件均為：在28-30℃溫度下，維持?jǐn)嚢璩溲?，培養(yǎng)48-72小時(shí)后，再將此菌種全部投入種子罐中，種子罐中的培養(yǎng)基與上一步驟培養(yǎng)基相同，菌種與種子罐中培養(yǎng)基的重量之比為1：80，維持28-30℃溫度，攪拌充氧培養(yǎng)3-5天，得到熟化后的菌種液備用。培養(yǎng)基一每升中所含成分及重量百分比為：培養(yǎng)基中氨基酸2.0％，磷酸二氫鉀1.0％，尿素1.0％，氯化鈉0.2％，碳酸鈣0.2％，葡萄糖0.5％，其余為蒸餾水，ph為6.8～7.2；培養(yǎng)基二每升中所含成分及重量百分比為：氨基酸1.0％，磷酸二氫鉀1.0％，尿素1.0％，氯化鈉0.2％，糖蜜5.0％，其余為蒸餾水，ph為7.0～7.4；培養(yǎng)基三每升中所含成分及重量百分比為：磷酸氫二鉀0.2％，硝酸鉀0.2％，氯化鉀0.05％，氯化鈉0.1％，糖蜜5.0％，葡萄糖1.0％，其余為蒸餾水，ph為6.8～7.2。(2)將步驟(1)得到的各菌種液分別經(jīng)粉末培養(yǎng)基培養(yǎng)成各菌種原粉；將各菌種液添加到粉末培養(yǎng)基中充分?jǐn)嚢杌旌暇鶆?，菌種液與粉末培養(yǎng)基的重量之比為(4～8)：(42～63)，同時(shí)用常溫?zé)o菌水調(diào)節(jié)體系水分含量為40-50％,達(dá)到最佳好氣發(fā)酵含水率，控制溫度為28-32℃，無菌空氣以0.2-0.5m3/min正壓充氧，同時(shí)以24-36rpm/s轉(zhuǎn)速，每3-6小時(shí)攪拌3-5分鐘的頻率斷續(xù)攪拌，培養(yǎng)24小時(shí)后，每24小時(shí)檢測(cè)菌株總菌數(shù)濃度，根據(jù)總菌數(shù)濃度判斷生長(zhǎng)高峰期，當(dāng)達(dá)到生長(zhǎng)高峰期后即時(shí)改用30-40℃無菌干燥空氣吹入，所述無菌干燥空氣的流量為0.2-0.5m3/min，同時(shí)以24-36rpm/s轉(zhuǎn)速持續(xù)攪拌，降低體系濕度達(dá)到水分10％以下時(shí)，即成固態(tài)“單一菌種原粉”，出料，備用；所述粉末培養(yǎng)基包括以下重量份的成分：玉米細(xì)粉400～600份、大豆蛋白細(xì)粉20～30份。(3)向步驟(2)得到的各菌種原粉中加入無菌混合粉末，所述無菌混合粉末包括以下重量百分比的成分：玉米細(xì)粉75～90％，黃豆粕粉2～15％，葡萄糖2～12％，調(diào)整至目標(biāo)活菌數(shù)，具體為：大豆根瘤菌、螢光假單胞菌、蠟樣芽孢桿菌、膠質(zhì)芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌目標(biāo)活菌數(shù)均為3～5×108cfu/g；淡紫擬青霉菌和哈茨木霉菌目標(biāo)活菌數(shù)均為3～5×107cfu/g；(4)將調(diào)整至目標(biāo)活菌數(shù)的各菌種原粉按所述重量百分比的配比混合均勻，即可得到造肥催腐型復(fù)合菌劑。下面結(jié)合具體實(shí)施例1～3對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說明。實(shí)施例1一種造肥催腐型復(fù)合菌劑，包括如表2所示的重量百分比及活菌數(shù)的菌種：表2造肥催腐型復(fù)合菌劑的制備方法為：(1)將大豆根瘤菌、螢光假單胞菌、蠟樣芽孢桿菌、膠質(zhì)芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、淡紫擬青霉菌、哈茨木霉菌菌種分別培養(yǎng)熟化成菌種液；具體方法為：將大豆根瘤菌、螢光假單胞菌、蠟樣芽孢桿菌、膠質(zhì)芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌分別經(jīng)培養(yǎng)基一培養(yǎng)，淡紫擬青霉菌經(jīng)培養(yǎng)基二培養(yǎng)，哈茨木霉菌經(jīng)培養(yǎng)基三培養(yǎng)，各菌種培養(yǎng)條件均為：在28℃溫度下，維持?jǐn)嚢璩溲?，培養(yǎng)72小時(shí)后，再將此菌種全部投入種子罐中，種子罐中的培養(yǎng)基與上一步驟培養(yǎng)基相同，菌種與種子罐中培養(yǎng)基的重量之比為1：80，維持28℃溫度，攪拌充氧培養(yǎng)5天，得到熟化后的菌種液備用。培養(yǎng)基一每升中所含成分及重量百分比為：培養(yǎng)基中氨基酸2.0％，磷酸二氫鉀1.0％，尿素1.0％，氯化鈉0.2％，碳酸鈣0.2％，葡萄糖0.5％，其余為蒸餾水，ph為6.8；培養(yǎng)基二每升中所含成分及重量百分比為：氨基酸1.0％，磷酸二氫鉀1.0％，尿素1.0％，氯化鈉0.2％，糖蜜5.0％，其余為蒸餾水，ph為7.0；培養(yǎng)基三每升中所含成分及重量百分比為：磷酸氫二鉀0.2％，硝酸鉀0.2％，氯化鉀0.05％，氯化鈉0.1％，糖蜜5.0％，葡萄糖1.0％，其余為蒸餾水，ph為6.8。(2)將步驟(1)得到的各菌種液分別經(jīng)粉末培養(yǎng)基培養(yǎng)成各菌種原粉；將各菌種液410kg添加到420kg粉末培養(yǎng)基中充分?jǐn)嚢杌旌暇鶆?，同時(shí)用常溫?zé)o菌水調(diào)節(jié)體系水分含量為40％，達(dá)到最佳好氣發(fā)酵含水率，控制溫度為28℃，無菌空氣以0.2-0.5m3/min正壓充氧，同時(shí)以24rpm/s轉(zhuǎn)速，每3小時(shí)攪拌3分鐘的頻率斷續(xù)攪拌，培養(yǎng)24小時(shí)后，每24小時(shí)檢測(cè)菌株總菌數(shù)濃度，根據(jù)總菌數(shù)濃度判斷生長(zhǎng)高峰期，當(dāng)達(dá)到生長(zhǎng)高峰期后即時(shí)改用30-40℃無菌干燥空氣吹入，所述無菌干燥空氣的流量為0.2-0.5m3/min，同時(shí)以24rpm/s轉(zhuǎn)速持續(xù)攪拌，降低體系濕度達(dá)到水分10％以下時(shí)，即成固態(tài)“單一菌種原粉”，出料，備用；所述粉末培養(yǎng)基包括以下重量份的成分：玉米細(xì)粉400kg、大豆蛋白細(xì)粉20kg。(3)向步驟(2)得到的各菌種原粉中加入無菌混合粉末，所述無菌混合粉末包括以下重量百分比的成分：玉米細(xì)粉75％，黃豆粕粉15％，葡萄糖10％，調(diào)整至目標(biāo)活菌數(shù)，具體為：大豆根瘤菌、螢光假單胞菌、蠟樣芽孢桿菌、膠質(zhì)芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌目標(biāo)活菌數(shù)均為3×108cfu/g；淡紫擬青霉菌和哈茨木霉菌目標(biāo)活菌數(shù)均為3×107cfu/g；(4)將調(diào)整至目標(biāo)活菌數(shù)的各菌種原粉按所述重量百分比的配比混合均勻，即可得到造肥催腐型復(fù)合菌劑。將所述造肥催腐型復(fù)合菌劑，經(jīng)活化并稀釋后平均散布于耕地：1.活化：使用上述造肥催腐型復(fù)合菌劑0.4kg，加水3.6kg，共4.0kg，放置室溫24-72小時(shí)，令其相互拮抗以激發(fā)有效分泌物的大量產(chǎn)出后，稀釋100倍，共400kg待用；2.用量：每畝平均散布上述己活化并稀釋之造肥催腐型復(fù)合菌劑200kg；3.處理：菌劑散布后，立即耕耘入土20厘米以上，保持濕度40-50％放置21天。田間試驗(yàn)作業(yè)及采樣過程：選取的2畝正在休耕的耕地作為供試田塊。測(cè)試項(xiàng)目包據(jù)土壤的酸堿度、有機(jī)質(zhì)含量、全氮、有效磷、速效鉀等。第一天采樣前先在地面依井字劃分為九方區(qū)，于四角落方區(qū)內(nèi)以及中央方區(qū)內(nèi)采取樣土共五袋，每袋一千克作為處理前樣品送檢，采土后，當(dāng)天即全面平均噴哂上述己活化的造肥催腐型復(fù)合菌劑200kg/畝，并耕耘入土20厘米以上。測(cè)試期間保持地面濕度40-50％。第二十一天重新于四角落方區(qū)內(nèi)以及中央方區(qū)內(nèi)采樣土共五袋，每袋一千克作為處理后樣品送檢。檢驗(yàn)結(jié)果：處理前五袋樣品及處理后五袋樣品所檢測(cè)各項(xiàng)目之平均數(shù)據(jù)如下表3所示：表3試驗(yàn)結(jié)果分析：依據(jù)處理前后各項(xiàng)數(shù)據(jù)平均值顯示土壤酸堿值稍微傾向中性，有機(jī)質(zhì)也微量增加，全氮含量則由0.0156％升為0.0262％，全氮含量明顯提升。有效磷和速效鉀則分別由29.49mg/kg及93.6mg/kg升為98.74mg/kg及325.6mg/kg。氮、磷、鉀三元素的上升比率分別為1.68倍、3.35倍、3.48倍。由此可見，本發(fā)明公開的造肥催腐型復(fù)合菌劑具有固氮、溶磷、解鉀及防止肥分流失的效果。實(shí)施例2一種造肥催腐型復(fù)合菌劑，包括如表4所示的重量百分比及活菌數(shù)的菌種：表4菌種活菌數(shù)重量百分比大豆根瘤菌4×108cfu/g15％螢光假單胞菌4×108cfu/g15％蠟樣芽孢桿菌4×108cfu/g15％膠質(zhì)芽孢桿菌4×108cfu/g14％枯草芽孢桿菌4×108cfu/g12％淡紫擬青霉菌4×107cfu/g14％哈茨木霉菌4×107cfu/g15％造肥催腐型復(fù)合菌劑的制備方法為：(1)將大豆根瘤菌、螢光假單胞菌、蠟樣芽孢桿菌、膠質(zhì)芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、淡紫擬青霉菌、哈茨木霉菌菌種分別培養(yǎng)熟化成菌種液；具體方法為：將大豆根瘤菌、螢光假單胞菌、蠟樣芽孢桿菌、膠質(zhì)芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌分別經(jīng)培養(yǎng)基一培養(yǎng)，淡紫擬青霉菌經(jīng)培養(yǎng)基二培養(yǎng)，哈茨木霉菌經(jīng)培養(yǎng)基三培養(yǎng)，各菌種培養(yǎng)條件均為：在30℃溫度下，維持?jǐn)嚢璩溲酰囵B(yǎng)48小時(shí)后，再將此菌種全部投入種子罐中，種子罐中的培養(yǎng)基與上一步驟培養(yǎng)基相同，菌種與種子罐中培養(yǎng)基的重量之比為1：80，維持30℃溫度，攪拌充氧培養(yǎng)3天，得到熟化后的菌種液備用。培養(yǎng)基一每升中所含成分及重量百分比為：培養(yǎng)基中氨基酸2.0％，磷酸二氫鉀1.0％，尿素1.0％，氯化鈉0.2％，碳酸鈣0.2％，葡萄糖0.5％，其余為蒸餾水，ph為7.0；培養(yǎng)基二每升中所含成分及重量百分比為：氨基酸1.0％，磷酸二氫鉀1.0％，尿素1.0％，氯化鈉0.2％，糖蜜5.0％，其余為蒸餾水，ph為7.2；培養(yǎng)基三每升中所含成分及重量百分比為：磷酸氫二鉀0.2％，硝酸鉀0.2％，氯化鉀0.05％，氯化鈉0.1％，糖蜜5.0％，葡萄糖1.0％，其余為蒸餾水，ph為7.0。(2)將步驟(1)得到的各菌種液分別經(jīng)粉末培養(yǎng)基培養(yǎng)成各菌種原粉；將各菌種液60kg添加到55kg粉末培養(yǎng)基中充分?jǐn)嚢杌旌暇鶆颍瑫r(shí)用常溫?zé)o菌水調(diào)節(jié)體系水分含量為45％，達(dá)到最佳好氣發(fā)酵含水率，控制溫度為32℃，無菌空氣以0.2-0.5m3/min正壓充氧，同時(shí)以24rpm/s轉(zhuǎn)速，每6小時(shí)攪拌5分鐘的頻率斷續(xù)攪拌，培養(yǎng)24小時(shí)后，每24小時(shí)檢測(cè)菌株總菌數(shù)濃度，根據(jù)總菌數(shù)濃度判斷生長(zhǎng)高峰期，當(dāng)達(dá)到生長(zhǎng)高峰期后即時(shí)改用32℃無菌干燥空氣吹入，所述無菌干燥空氣的流量為0.2-0.5m3/min，同時(shí)以24rpm/s轉(zhuǎn)速持續(xù)攪拌，降低體系濕度達(dá)到水分10％以下時(shí)，即成固態(tài)“單一菌種原粉”，出料，備用；所述粉末培養(yǎng)基包括以下重量份的成分：玉米細(xì)粉500kg、大豆蛋白細(xì)粉25kg。(3)向步驟(2)得到的各菌種原粉中加入無菌混合粉末，所述無菌混合粉末包括以下重量百分比的成分：玉米細(xì)粉82％，黃豆粕粉6％，葡萄糖12％，調(diào)整至目標(biāo)活菌數(shù)，具體為：大豆根瘤菌、螢光假單胞菌、蠟樣芽孢桿菌、膠質(zhì)芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌目標(biāo)活菌數(shù)均為4×108cfu/g；淡紫擬青霉菌和哈茨木霉菌目標(biāo)活菌數(shù)均為4×107cfu/g；(4)將調(diào)整至目標(biāo)活菌數(shù)的各菌種原粉按所述重量百分比的配比混合均勻，即可得到造肥催腐型復(fù)合菌劑。使用所述造肥催腐型復(fù)合菌劑，經(jīng)活化后平均散布于耕地：所述造肥催腐型復(fù)合菌劑的活化方法為：將述造肥催腐型復(fù)合菌劑0.2kg，加水1.8kg，共2.0kg，放置室溫24-72小時(shí)，令其相互拮抗以激發(fā)有效分泌物的大量產(chǎn)出后，稀釋100倍，共200kg待用；選取棉花為供試作物，供試田塊面積2.0畝，將田塊平均分成兩份，即試驗(yàn)區(qū)和對(duì)比區(qū)，兩區(qū)同等施以15-15-15氮磷鉀三元復(fù)合肥50kg/畝，試驗(yàn)區(qū)均勻散布500kg秸稈，同時(shí)均勻噴灑上述己活化的造肥催腐型復(fù)合菌劑200kg，菌劑散布后，試驗(yàn)區(qū)及對(duì)比區(qū)同時(shí)耕耘入土20厘米，保持濕度為40-50％，放置5天后將棉花分別移裁到實(shí)驗(yàn)區(qū)和對(duì)比區(qū)。試驗(yàn)區(qū)每30天噴灑己活化的造肥催腐型復(fù)合菌劑200kg/畝，試驗(yàn)區(qū)及對(duì)比區(qū)的其它農(nóng)藝措施保持一致。試驗(yàn)結(jié)果：棉花收成前兩天由試驗(yàn)區(qū)及對(duì)比區(qū)隨機(jī)采取五株棉花，實(shí)驗(yàn)區(qū)棉花株高平均113.4cm，對(duì)比區(qū)棉花株高平均為106.8cm.實(shí)驗(yàn)區(qū)單株結(jié)鈴平均19.8個(gè)，對(duì)比區(qū)單株結(jié)鈴平均18.2個(gè)。兩區(qū)所產(chǎn)單鈴籽棉重量無明顯差異，但是實(shí)驗(yàn)區(qū)畝產(chǎn)籽棉為221.1kg，對(duì)比區(qū)畝產(chǎn)籽棉則僅為203.4kg。試驗(yàn)結(jié)果分析:實(shí)驗(yàn)區(qū)葉面翠綠光亮而平均株高相對(duì)于對(duì)比區(qū)增加6.18％，田間現(xiàn)場(chǎng)可明顯看出實(shí)驗(yàn)區(qū)與對(duì)比區(qū)的差異。畝產(chǎn)籽棉總量實(shí)驗(yàn)區(qū)相對(duì)于對(duì)比區(qū)增加8.7％。由此可見：本發(fā)明公開的造肥催腐型復(fù)合菌劑能使植株生長(zhǎng)茁壯旺盛，無嚴(yán)重病蟲害。實(shí)施例3一種造肥催腐型復(fù)合菌劑，包括如表4所示的重量百分比及活菌數(shù)的菌種：表4菌種活菌數(shù)重量百分比大豆根瘤菌5×108cfu/g15％螢光假單胞菌5×108cfu/g15％蠟樣芽孢桿菌5×108cfu/g15％膠質(zhì)芽孢桿菌5×108cfu/g15％枯草芽孢桿菌5×108cfu/g10％淡紫擬青霉菌5×107cfu/g15％哈茨木霉菌5×107cfu/g15％造肥催腐型復(fù)合菌劑的制備方法為：(1)將大豆根瘤菌、螢光假單胞菌、蠟樣芽孢桿菌、膠質(zhì)芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、淡紫擬青霉菌、哈茨木霉菌菌種分別培養(yǎng)熟化成菌種液；具體方法為：將大豆根瘤菌、螢光假單胞菌、蠟樣芽孢桿菌、膠質(zhì)芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌分別經(jīng)培養(yǎng)基一培養(yǎng)，淡紫擬青霉菌經(jīng)培養(yǎng)基二培養(yǎng)，哈茨木霉菌經(jīng)培養(yǎng)基三培養(yǎng)，各菌種培養(yǎng)條件均為：在30℃溫度下，維持?jǐn)嚢璩溲?，培養(yǎng)56小時(shí)后，再將此菌種全部投入種子罐中，種子罐中的培養(yǎng)基與上一步驟培養(yǎng)基相同，菌種與種子罐中培養(yǎng)基的重量之比為1：80，維持30℃溫度，攪拌充氧培養(yǎng)5天，得到熟化后的菌種液備用。培養(yǎng)基一每升中所含成分及重量百分比為：培養(yǎng)基中氨基酸2.0％，磷酸二氫鉀1.0％，尿素1.0％，氯化鈉0.2％，碳酸鈣0.2％，葡萄糖0.5％，其余為蒸餾水，ph為7.2；培養(yǎng)基二每升中所含成分及重量百分比為：氨基酸1.0％，磷酸二氫鉀1.0％，尿素1.0％，氯化鈉0.2％，糖蜜5.0％，其余為蒸餾水，ph為7.4；培養(yǎng)基三每升中所含成分及重量百分比為：磷酸氫二鉀0.2％，硝酸鉀0.2％，氯化鉀0.05％，氯化鈉0.1％，糖蜜5.0％，葡萄糖1.0％，其余為蒸餾水，ph為7.2。(2)將步驟(1)得到的各菌種液分別經(jīng)粉末培養(yǎng)基培養(yǎng)成各菌種原粉；將各菌種液80kg添加到630kg粉末培養(yǎng)基中充分?jǐn)嚢杌旌暇鶆?，同時(shí)用常溫?zé)o菌水調(diào)節(jié)體系水分含量為50％，達(dá)到最佳好氣發(fā)酵含水率，控制溫度為30℃，無菌空氣以0.2-0.5m3/min正壓充氧，同時(shí)以36rpm/s轉(zhuǎn)速，每4.5小時(shí)攪拌4分鐘的頻率斷續(xù)攪拌，培養(yǎng)24小時(shí)后，每24小時(shí)檢測(cè)菌株總菌數(shù)濃度，根據(jù)總菌數(shù)濃度判斷生長(zhǎng)高峰期，當(dāng)達(dá)到生長(zhǎng)高峰期后即時(shí)改用35℃無菌干燥空氣吹入，所述無菌干燥空氣的流量為0.2-0.5m3/min，同時(shí)以36rpm/s轉(zhuǎn)速持續(xù)攪拌，降低體系濕度達(dá)到水分10％以下時(shí)，即成固態(tài)“單一菌種原粉”，出料，備用；所述粉末培養(yǎng)基包括以下重量份的成分：玉米細(xì)粉600kg、大豆蛋白細(xì)粉30kg。(3)向步驟(2)得到的各菌種原粉中加入無菌混合粉末，所述無菌混合粉末包括以下重量百分比的成分：玉米細(xì)粉90％，黃豆粕粉2％，葡萄糖8％，調(diào)整至目標(biāo)活菌數(shù)，具體為：大豆根瘤菌、螢光假單胞菌、蠟樣芽孢桿菌、膠質(zhì)芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌目標(biāo)活菌數(shù)均為5×108cfu/g；淡紫擬青霉菌和哈茨木霉菌目標(biāo)活菌數(shù)均為5×107cfu/g；(4)將調(diào)整至目標(biāo)活菌數(shù)的各菌種原粉按所述重量百分比的配比混合均勻，即可得到造肥催腐型復(fù)合菌劑。本發(fā)明所使用的各菌種均為購(gòu)買得到。上述參照實(shí)施例對(duì)造肥催腐型復(fù)合菌劑及其制備方法和應(yīng)用進(jìn)行的詳細(xì)描述，是說明性的而不是限定性的，可按照所限定范圍列舉出若干個(gè)實(shí)施例，因此在不脫離本發(fā)明總體構(gòu)思下的變化和修改，應(yīng)屬本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。當(dāng)前第1頁(yè)12