本發(fā)明屬于醫(yī)療美容領(lǐng)域，具體涉及一種提高自體脂肪隆胸術(shù)中脂肪細胞生存率的裝置。

背景技術(shù)：

自體脂肪移植一方面可以減少多余的脂肪，另一方面又可以填充胸部凹陷，改善乳房的下垂或使乳房的體積增大。與假體移植相比，自體脂肪隆胸術(shù)無異體組織排斥反應(yīng)，能躲過儀器檢查。

自體脂肪移植需要在脂肪多余的部位，超聲抽取脂肪細胞，獲得的脂肪細胞損傷很大，脂肪細胞在胸部移植后存活率低，造成隆胸術(shù)的隆起效果差、客戶滿意度低、需要多次重復(fù)手術(shù)等問題。在客戶中一部分女性身體瘦弱矮小，提取脂肪細胞苦難，提取脂肪細胞的存活率顯得更為重要。

目前的自體脂肪隆胸術(shù)，對抽取的脂肪細胞進行初步清洗和簡單分離后直接注射，或者注射經(jīng)過增殖培養(yǎng)的脂肪細胞。提高移植注射到乳房的脂肪細胞的存活率可以通過提高移植注射前的脂肪細胞的活性或者完成隆胸術(shù)后注射生長因子等實際提高移植注射后的脂肪細胞的活性兩種方式。cn102357263a公開了一種可用于美容和美體的促自體外周脂肪細胞增殖和增大的復(fù)合誘導(dǎo)劑及其制備方法，該復(fù)合誘導(dǎo)劑由重組人神經(jīng)肽y全長多肽、還原型輔酶ⅱ、乙酰輔酶a、堿性成纖維細胞生長因子、自體富集血小板血漿、油酸、游離脂肪酸、黃芪多糖、蒲黃總黃酮、人參皂甙rb1和姜黃素制成，相關(guān)的技術(shù)效果沒有公布。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

針對上述問題，本發(fā)明的發(fā)明人經(jīng)過不斷實驗，令人驚喜的發(fā)現(xiàn)了一組脂肪細胞生存促進劑加到現(xiàn)有培養(yǎng)基中，其在隆胸術(shù)中產(chǎn)生了預(yù)料不到的效應(yīng)，本發(fā)明即是基于以上發(fā)現(xiàn)而完成。

本發(fā)明的目的在于提供一種含脂肪細胞生存的培養(yǎng)基及其制備方法、使用設(shè)備、和使用方法。

本發(fā)明的第一方面提供一種提高自體脂肪隆胸術(shù)中脂肪細胞生存率的裝置，包括：

處理容器，所述處理容器內(nèi)設(shè)有固定篩網(wǎng)及位于所述固定篩網(wǎng)上部的可拆卸攔截網(wǎng)；所述容器上設(shè)有蓋子，所述蓋子上設(shè)有進液孔和排氣孔；所述進液孔向外連接進液管，所述進液孔向內(nèi)連接內(nèi)進液管，所述內(nèi)進液管向下穿過所述可拆卸攔截網(wǎng)和固定篩網(wǎng)，尾端靠近所述處理容器底部；所述排氣孔連接排氣管，所述排氣管末端設(shè)有尾氣除菌濾膜；

儲液桶，所述儲液桶頂部設(shè)有出液孔和進氣孔；所述出液孔向內(nèi)連接內(nèi)出液管，所述出液孔向外連接進液管；所述進氣孔向外連接進氣管，所述進氣孔向內(nèi)連接內(nèi)進氣管；所述儲液桶內(nèi)部裝有脂肪細胞生存率促進液，所述內(nèi)進氣管尾端暴露于桶內(nèi)空氣中，所述內(nèi)出液管尾端浸沒于所述脂肪細胞生存率促進液中；

氣泵，所述氣泵出氣端連接所述進氣管外端口，所述出氣端還設(shè)有進氣除菌濾膜，所述氣泵連接電源。

優(yōu)選的，所述尾氣除菌濾膜和進氣除菌濾膜為0.45μm的微孔膜，所述固定篩網(wǎng)為不銹鋼金屬網(wǎng)，所述可拆卸攔截網(wǎng)為附著在不銹鋼金屬網(wǎng)基質(zhì)上的核孔膜。

進一步優(yōu)選的，所述核孔膜為核孔孔徑為15nm-8μm、厚度為8-35μm的pet膜。

優(yōu)選的，所述電源為間歇性周期電源。

優(yōu)選的，所述脂肪細胞生存率促進液由脂肪細胞生存促進劑溶解于deme培養(yǎng)基的水溶液制成，所述脂肪細胞生存促進劑包括以下重量份的原料：0.001-0.01份的堿性成纖維細胞生長因子、0.001-0.01份的血管內(nèi)皮生長因子、0.01-1.0份的谷胱甘肽、0.01-1.0份的異抗壞血酸、0.1-1.0份的乙酰輔酶a、0.01-0.1份的轉(zhuǎn)鐵蛋白、100-5000份的精氨酸、0.1-1.0份的紅景天甙、0.1-1.0份的丹參酮ⅱa。

進一步優(yōu)選的，所述脂肪細胞生存促進劑包括以下重量份的原料0.005份的堿性成纖維細胞生長因子、0.005份的血管內(nèi)皮生長因子、0.2份的谷胱甘肽、0.3份的異抗壞血酸、0.5份的乙酰輔酶a、0.05份的轉(zhuǎn)鐵蛋白、4000份的精氨酸、0.5份的紅景天甙、0.5份的丹參酮ⅱa。

優(yōu)選的，所述脂肪細胞生存率促進液中含有1/2體積的deme培養(yǎng)基，所述deme培養(yǎng)基為無糖型deme液體培養(yǎng)基。

本發(fā)明的第二方面提供另第一方面中脂肪細胞生存率促進液的制備方法，包括以下步驟：

a取二分之一目標體積的無糖型deme液體培養(yǎng)基，加入四分之一目標體積的磷酸鹽緩沖液，再依次加入所述谷胱甘肽、異抗壞血酸、乙酰輔酶a和精氨酸，攪拌均勻；

b依次加入所述紅景天甙和丹參酮ⅱa，攪拌均勻；

c依次加入所述轉(zhuǎn)鐵蛋白、堿性成纖維細胞生長因子和血管內(nèi)皮生長因子，攪拌均勻；

d用磷酸鹽緩沖液定容止目標體積。

本發(fā)明的第三方面提供制備第一方面提高自體脂肪隆胸術(shù)中脂肪細胞生存率的裝置處理脂肪細胞的方法，包括以下步驟：

s1，裝置拆除氣泵，全部濕熱滅菌，連接氣泵；

s2，無菌環(huán)境下，儲液桶中加入過濾除菌的脂肪細胞生存率促進液；

s3，無菌環(huán)境下，打開蓋子和可拆卸攔截網(wǎng)，把無菌的或經(jīng)無菌處理的脂肪細胞放置到固定篩網(wǎng)上；

s4，開啟電源，控制脂肪細胞生存率促進液浸沒、懸浮脂肪細胞，保持1-10分鐘，然后排出脂肪細胞生存率促進液，間歇1-5分鐘，重復(fù)1-5次。

優(yōu)選的，s4，開啟電源，控制脂肪細胞生存率促進液浸沒、懸浮脂肪細胞，保持6分鐘，然后排出脂肪細胞生存率促進液，間歇2分鐘，重復(fù)3次。。

本發(fā)明中，deme液體培養(yǎng)基購自thermofisherscientific。所述磷酸鹽緩沖液為1倍磷酸鹽緩沖液，ph為7.4。所述間歇時間從脂肪細胞生存率促進液水平面低于固定濾網(wǎng)開始計時，對脂肪細胞的洗滌、浸沒時不要求脂肪細胞生存率促進液完全進入處理容器中或從處理容器中完全排除，而是以實際完全浸沒脂肪細胞或者不浸沒脂肪細胞為準。所述不銹鋼金屬網(wǎng)以能夠攔截住完整的脂肪細胞為標準，針對脂肪細胞的大小可以選用不同目數(shù)的金屬網(wǎng)。

附圖說明

圖1為實施例1提高自體脂肪隆胸術(shù)中脂肪細胞生存率的裝置的結(jié)構(gòu)示意圖。

具體實施方式

下面將結(jié)合實施例對本發(fā)明的實施方案進行詳細描述，但足本領(lǐng)域技術(shù)人員將會理解，下列實施例僅于說明本發(fā)明，而不應(yīng)視為限定本發(fā)明的范圍。實施例中未注明具體條件者，按照常規(guī)條件或制造商建議的條件進行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為可以通過市購獲得的常規(guī)產(chǎn)品。

實施例1

一種提高自體脂肪隆胸術(shù)中脂肪細胞生存率的裝置，如圖1所示，包括：

處理容器10，所述處理容器10內(nèi)設(shè)有固定篩網(wǎng)11及位于所述固定篩網(wǎng)11上部的可拆卸攔截網(wǎng)12；所述容器10上設(shè)有蓋子13，所述蓋子13上設(shè)有進液孔和排氣孔；所述進液孔向外連接進液管20，所述進液孔向內(nèi)連接內(nèi)進液管14，所述內(nèi)進液管14向下穿過所述可拆卸攔截網(wǎng)12和固定篩網(wǎng)11，尾端靠近所述處理容器10底部；所述排氣孔連接排氣管15，所述排氣管15末端設(shè)有尾氣除菌濾膜16；進液管20，其一端連接所述進液孔，其另一端連接出液孔；儲液桶30，所述儲液桶30頂部設(shè)有出液孔和進氣孔；所述出液孔向內(nèi)連接內(nèi)出液管31，所述出液孔向外連接進液管20；所述進氣孔向外連接進氣管40，所述進氣孔向內(nèi)連接內(nèi)進氣管32；所述儲液桶30內(nèi)部裝有脂肪細胞生存率促進液，所述內(nèi)進氣管32尾端暴露于桶內(nèi)空氣中，所述內(nèi)出液管34尾端浸沒于所述脂肪細胞生存率促進液中；進氣管40，其一端連接所述進氣孔，另一端連接進氣除菌濾膜41，所述進氣除菌濾膜41連接氣泵50；氣泵50，所述氣泵50出氣端連接所述進氣除菌濾膜41，所述氣泵40連接電源。所述尾氣除菌濾膜16和進氣除菌濾膜41為0.45μm的微孔膜，所述固定篩網(wǎng)11為不銹鋼金屬網(wǎng)，所述可拆卸攔截網(wǎng)12為附著在不銹鋼金屬網(wǎng)基質(zhì)上的核孔膜。所述核孔膜為核孔孔徑為15nm-8μm、厚度為8-35μm的pet膜。

本實施例中所述電源為間歇性周期電源，也可以手動開關(guān)來控制生存率脂肪細胞生存率促進液浸沒脂肪細胞的時間。

一種提高自體脂肪隆胸術(shù)中脂肪細胞生存率的裝置，可以用脂肪細胞生存率促進液老反復(fù)洗滌、浸沒脂肪細胞，脂肪細胞碎片可以從固定篩網(wǎng)11漏下，攔截網(wǎng)12可防止把脂肪碎片帶入到液桶30中。

實施例2

實施例1提高自體脂肪隆胸術(shù)中脂肪細胞生存率的裝置的脂肪細胞生存率促進液，

所述脂肪細胞生存率促進液由脂肪細胞生存促進劑溶解于1ldeme培養(yǎng)基水溶液制成，所述脂肪細胞生存促進劑包括以下重量的原料：0.001mg堿性成纖維細胞生長因子、0.001mg血管內(nèi)皮生長因子、0.01mg谷胱甘肽、0.01mg異抗壞血酸、0.1mg乙酰輔酶a、0.01mg轉(zhuǎn)鐵蛋白、100mg精氨酸、0.1mg紅景天甙、0.1mg丹參酮ⅱa。

實施例3

實施例1提高自體脂肪隆胸術(shù)中脂肪細胞生存率的裝置的脂肪細胞生存率促進液的制備方法，包括以下步驟：

a取500ml的無糖型deme液體培養(yǎng)基，加入250ml的磷酸鹽緩沖液，再依次加入所述谷胱甘肽、異抗壞血酸、乙酰輔酶a和精氨酸，攪拌均勻；

b依次加入所述紅景天甙和丹參酮ⅱa，攪拌均勻；

c依次加入所述轉(zhuǎn)鐵蛋白、堿性成纖維細胞生長因子和血管內(nèi)皮生長因子，攪拌均勻；

d用磷酸鹽緩沖液定容止1000ml。

實施例4

與實施例2的不同之處在于，所述脂肪細胞生存促進劑包括以下重量的原料：0.01mg堿性成纖維細胞生長因子、0.01mg血管內(nèi)皮生長因子、1.0mg谷胱甘肽、1.0mg異抗壞血酸、1.0mg乙酰輔酶a、0.1mg份轉(zhuǎn)鐵蛋白、5000mg精氨酸、1.0mg紅景天甙、1.0mg丹參酮ⅱa。

實施例5

與實施例2的不同之處在于，所述脂肪細胞生存促進劑包括以下重量的原料：0.005mg堿性成纖維細胞生長因子、0.005mg血管內(nèi)皮生長因子、0.2mg谷胱甘肽、0.3mg異抗壞血酸、0.5mg乙酰輔酶a、0.05mg轉(zhuǎn)鐵蛋白、4000mg精氨酸、0.5mg紅景天甙、0.5mg丹參酮ⅱa。

實施例6

實施例1的提高自體脂肪隆胸術(shù)中脂肪細胞生存率的裝置處理脂肪細胞的方法，包括以下步驟：

s1，裝置拆除氣泵，全部濕熱滅菌，連接氣泵；

s2，無菌環(huán)境下，儲液桶中加入過濾除菌的脂肪細胞生存率促進液；

s3，無菌環(huán)境下，打開蓋子和可拆卸攔截網(wǎng)，把無菌的或經(jīng)無菌處理的脂肪細胞放置到固定篩網(wǎng)上；

s4，開啟電源，控制脂肪細胞生存率促進液浸沒、懸浮脂肪細胞，保持1分鐘，然后排出脂肪細胞生存率促進液，間歇1分鐘，重復(fù)1次。

實施例7

實施例1的提高自體脂肪隆胸術(shù)中脂肪細胞生存率的裝置處理脂肪細胞的方法，包括以下步驟：

s1，裝置拆除氣泵，全部濕熱滅菌，連接氣泵；

s2，無菌環(huán)境下，儲液桶中加入過濾除菌的脂肪細胞生存率促進液；

s3，無菌環(huán)境下，打開蓋子和可拆卸攔截網(wǎng)，把無菌的或經(jīng)無菌處理的脂肪細胞放置到固定篩網(wǎng)上；

s4，開啟電源，控制脂肪細胞生存率促進液浸沒、懸浮脂肪細胞，保持10分鐘，然后排出脂肪細胞生存率促進液，間歇5分鐘，重復(fù)5次。

實施例8

實施例1的提高自體脂肪隆胸術(shù)中脂肪細胞生存率的裝置處理脂肪細胞的方法，包括以下步驟：

s1，裝置拆除氣泵，全部濕熱滅菌，連接氣泵；

s2，無菌環(huán)境下，儲液桶中加入過濾除菌的脂肪細胞生存率促進液；

s3，無菌環(huán)境下，打開蓋子和可拆卸攔截網(wǎng)，把無菌的或經(jīng)無菌處理的脂肪細胞放置到固定篩網(wǎng)上；

s4，開啟電源，控制脂肪細胞生存率促進液浸沒、懸浮脂肪細胞，保持6分鐘，然后排出脂肪細胞生存率促進液，間歇2分鐘，重復(fù)3次。

對照例1

與實施例2提高自體脂肪隆胸術(shù)中脂肪細胞生存率的裝置的脂肪細胞生存率促進液的不同之處在于，所述脂肪細胞生存率促進液由脂肪細胞生存促進劑溶解于1ldeme培養(yǎng)基水溶液制成，所述脂肪細胞生存促進劑包括以下原料：0.01mg谷胱甘肽、0.01mg異抗壞血酸、0.1mg乙酰輔酶a、0.01mg轉(zhuǎn)鐵蛋白、100mg精氨酸、0.1mg紅景天甙、0.1mg丹參酮ⅱa。

對照例2

與實施例2提高自體脂肪隆胸術(shù)中脂肪細胞生存率的裝置的脂肪細胞生存率促進液的不同之處在于，所述脂肪細胞生存率促進液由脂肪細胞生存促進劑溶解于1ldeme培養(yǎng)基水溶液制成，所述脂肪細胞生存促進劑包括以下原料：0.001mg堿性成纖維細胞生長因子、0.001mg血管內(nèi)皮生長因子、0.01mg異抗壞血酸、0.1mg乙酰輔酶a、0.01mg轉(zhuǎn)鐵蛋白、100mg精氨酸、0.1mg紅景天甙、0.1mg丹參酮ⅱa。

對照例3

與實施例2提高自體脂肪隆胸術(shù)中脂肪細胞生存率的裝置的脂肪細胞生存率促進液的不同之處在于，所述脂肪細胞生存率促進液由脂肪細胞生存促進劑溶解于1ldeme培養(yǎng)基水溶液制成，所述脂肪細胞生存促進劑包括以下原料：0.001mg堿性成纖維細胞生長因子、0.001mg血管內(nèi)皮生長因子、0.01mg谷胱甘肽、0.01mg異抗壞血酸、0.1mg紅景天甙、0.1mg丹參酮ⅱa。

對照例4

與實施例2提高自體脂肪隆胸術(shù)中脂肪細胞生存率的裝置的脂肪細胞生存率促進液的不同之處在于，所述脂肪細胞生存率促進液由脂肪細胞生存促進劑溶解于1ldeme培養(yǎng)基水溶液制成，所述脂肪細胞生存促進劑包括以下重量的原料：0.001mg堿性成纖維細胞生長因子、0.001mg血管內(nèi)皮生長因子、0.01mg谷胱甘肽、0.01mg異抗壞血酸、0.1mg乙酰輔酶a、0.01mg轉(zhuǎn)鐵蛋白、100mg精氨酸、0.1mg紅景天甙、0.1mg丹參酮ⅱa。

對照例5

與實施例2提高自體脂肪隆胸術(shù)中脂肪細胞生存率的裝置的脂肪細胞生存率促進液的不同之處在于，所述脂肪細胞生存率促進液由脂肪細胞生存促進劑溶解于1ldeme培養(yǎng)基水溶液制成，所述脂肪細胞生存促進劑包括以下重量的原料：0.001mg堿性成纖維細胞生長因子、0.001mg血管內(nèi)皮生長因子、0.01mg谷胱甘肽、0.01mg異抗壞血酸、0.1mg乙酰輔酶a、0.01mg轉(zhuǎn)鐵蛋白、100mg精氨酸、0.1mg丹參酮ⅱa。

對照例6

與實施例2提高自體脂肪隆胸術(shù)中脂肪細胞生存率的裝置的脂肪細胞生存率促進液的不同之處在于，所述脂肪細胞生存率促進液由脂肪細胞生存促進劑溶解于1ldeme培養(yǎng)基水溶液制成，所述脂肪細胞生存促進劑包括以下重量的原料：0.001mg堿性成纖維細胞生長因子、0.001mg血管內(nèi)皮生長因子、0.01mg谷胱甘肽、0.01mg異抗壞血酸、0.1mg乙酰輔酶a、0.01mg轉(zhuǎn)鐵蛋白、100mg精氨酸、0.1mg紅景天甙。

實驗例1對隆胸術(shù)效果的影響

實驗對象：2014.03-2015.12的患者40名，20-56歲的成年女性，術(shù)前胸圍<90cm，所有患者均因自然原因要求整形，排除乳腺創(chuàng)傷、及其他乳腺畸形的情況。所有患者均簽署手術(shù)同意書。

脂肪注射：取10ml注射器進行多點脂肪顆粒注射，單側(cè)乳房注射量200ml，注射點分別為肋骨與胸大肌間隙、胸大肌、乳腺間隙、皮下組織，注射接收后輕柔按摩促進脂肪分布均勻。其中，對照組直接注射顆粒，實驗組注射之前用實施例1的提高自體脂肪隆胸術(shù)中脂肪細胞生存率的裝置按照實施例6-8的方法進行脂肪細胞的預(yù)處理，分別采用實施例2、4、5和對照例1-6脂肪細胞生存率促進液，詳見表1。

表1實驗編號

評價術(shù)后效果兩個指標為胸圍增加值和乳房隆起增加值。胸圍測量指通過乳房外部最大周長。乳房隆起指乳頭根部至胸骨平面的垂直距離。

因為術(shù)后水腫一般在2周內(nèi)可完全消退，所以把術(shù)后2周的測量值作為基準值，并與術(shù)前比較，評價手術(shù)的隆乳效果，結(jié)果見表2。同時對編號為6的4名患者進行了乳房隆起值維持率的追訪，日期分別為術(shù)后的3個月和6個月來考察評價遠期維持率，結(jié)果見表3。

表2隆胸術(shù)效果

*和#符號數(shù)目相同表示沒有顯著性差異，數(shù)目不同表示有顯著性差異(p<0.05)

從表2可以看出，2-11組術(shù)后兩周胸圍增加值和術(shù)后兩周乳房隆起增加值均高于1組，且具有統(tǒng)計學(xué)顯著性差異，這說明注射之前用實施例1的提高自體脂肪隆胸術(shù)中脂肪細胞生存率的裝置進行脂肪細胞的預(yù)處理能夠改善隆胸術(shù)的效果。8組顯著優(yōu)于2-7，說明8組的脂肪細胞生存率促進液能夠提高移植注射后的脂肪細胞的生存率，表明活性成分堿性成纖維細胞生長因子、血管內(nèi)皮生長因子、谷胱甘肽、異抗壞血酸、乙酰輔酶a、轉(zhuǎn)鐵蛋白、精氨酸、紅景天甙和丹參酮ⅱa對于隆胸術(shù)效果的影響具有組合物的協(xié)同作用。

表3手術(shù)效果的持續(xù)性

從表3可以看出，手術(shù)三個月和六個月后，乳房隆起增加值局部減小，但是減小不大，均在患者的可接受范圍之內(nèi)。

盡管本發(fā)明的具體實施方式已經(jīng)得到詳細的描述，本領(lǐng)域技術(shù)人員將會理解。根據(jù)已經(jīng)公開的所有教導(dǎo)，可以對那些細節(jié)進行各種修改和替換，這些改變均在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。本發(fā)明的全部范圍由所附權(quán)利要求及其任何等同物給出。