本發(fā)明屬于醫(yī)藥領域，具體涉及一種濕法超微粉碎法提取水飛薊籽仁蛋白的方法。
背景技術：
水飛薊(silybummarianum)為菊科草本植物，其籽主要用來提取分離其有效成分水飛薊素。由于水飛薊素主要存在于籽殼中，采用脫殼工藝不僅可使其殼仁分離，便于高純度水飛薊素的高效提取，同時也為籽仁的綜合利用創(chuàng)造了條件。由于籽仁中蛋白質(zhì)的含量較高，因此，有必要深入研究水飛薊蛋白的主要特性與生物活性，為其作為新資源食品的開發(fā)提供理論依據(jù)，也為實現(xiàn)水飛薊資源的綜合利用、提高其附加值提供技術支持。但現(xiàn)有水提堿沉法提取蛋白具有加熱時間長、提取率偏低等缺點。
技術實現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的就是提供一種濕法超微粉碎法提取水飛薊籽仁蛋白的方法，通過濕法超微粉碎減小提取過程中的水飛薊籽仁顆粒度并增加剪切擠壓力，達到縮短提取時間，提高得率的目的。
為實現(xiàn)上述技術目的，本發(fā)明提出來了一種濕法超微粉碎法提取水飛薊籽仁蛋白的方法，包括如下步驟：
(1)將水飛薊籽仁先榨油，然后加入石油醚提取，過濾烘干后得到除油粉，
(2)將得到的除油粉過篩，去適量過篩后的除油粉加入適量水，調(diào)節(jié)ph為7～10，然后進行濕法超微粉碎，然后進行離心，取上清液；
(3)將得到的上清液調(diào)節(jié)ph進行酸沉，然后一次靜置、離心、干燥。
優(yōu)選地，步驟(1)中，石油醚的加入量為為水飛薊籽仁質(zhì)量的的5-10倍，攪拌提取10-12小時。
步驟(1)中，烘干的條件為在50℃下烘干。
優(yōu)選地，所述濕法超微粉碎采用振動磨或者行星磨進行。
更優(yōu)選地，采用振動磨濕法超微粉碎時在水冷的條件下進行。
步驟(2)中，加水量為水飛薊籽仁重量的5-10倍量，濕法超微粉碎時間30-60分鐘，物料粒度下降至100微米以下。
步驟(2)和步驟(3)中的離心條件為5000～6000rpm離心10～15min.
步驟(3)中，酸沉的條件為采用鹽酸調(diào)節(jié)ph為4-5。
步驟(3)中，靜置的時間為0.5-2小時。
步驟(3)中，干燥方法為烘箱烘干、噴霧干燥或者冷凍干燥。
有益效果：傳統(tǒng)堿提預先將植物粉碎至100目，然后加入堿調(diào)ph至堿性，保溫攪拌2～3小時保證蛋白充分提取。本方法將傳統(tǒng)堿提方法的粉碎、保溫、攪拌三個單元合并為濕法超微粉碎一個單元進行，時間從原來的2～3小時縮短至0.5-1小時，提取率較傳統(tǒng)法并無降低，甚至還有升高。濕法超微粉碎過程中的機械擠壓、摩擦以及剪切力不僅使水飛薊籽仁粒度減小，更促進了蛋白等有效成分的溶出速率和效率，使得提取速率與提取效率均有提高。
具體實施例
以下通過具體的實施實例進一步說明本發(fā)明的工藝過程，但本發(fā)明并不僅限于這些實例項。
實施例1
①取水飛薊籽仁榨油，加10倍量石油醚攪拌提取10h，過濾，50℃烘干得除油粉；
②將除油籽后粉碎過100目篩；
③稱取除油籽仁粉10g，加水100ml，用0.1mnaoh調(diào)節(jié)ph＝10；
④在水冷條件下振動磨濕法超微粉碎30min，5000rpm離心10min，取上清液用0.1mhcl調(diào)至ph＝4.5，靜置1小時，5000rpm離心10min，取沉淀烘干稱重，測得率為90.6％。
實施例2
①取水飛薊籽仁榨油，加8倍量石油醚攪拌提取12h，過濾，50℃烘干得除油粉。
②取10g水飛薊除油粉，加80mlnacl溶液(0.1m)，用0.1mnaoh調(diào)節(jié)ph＝9。
③行星式球磨機濕法超微粉碎1小時，5000rpm離心10min，取上清液。
④上清液用0.1mhcl調(diào)至ph＝4，靜置30分鐘小時，5000rpm離心10min，取沉淀，50ml水洗，冷凍干燥24小時干燥稱重，測得率為75.3％。
實施例3
①取水飛薊籽仁榨油，加8倍量石油醚攪拌提取12h，過濾，50℃烘干得除油粉。
②取12g水飛薊除油粉，加100mlnacl溶液(0.1m)，用0.1mnaoh調(diào)節(jié)ph＝10。
③載水冷條件喜愛振動磨濕法超微粉碎1小時，5000rpm離心10min，取上清液；
④上清液用0.1mhcl調(diào)至ph＝4，靜置30分鐘小時，5000rpm離心10min，取沉淀，加入50ml水，噴霧干燥收集固體稱重，測得率為80.0％。
實施例4
①取水飛薊籽仁榨油，加6倍量石油醚攪拌提取11h，過濾，50℃烘干得除油粉。
②取12g水飛薊除油粉，加80mlnacl溶液(0.1m)，用0.1mnaoh調(diào)節(jié)ph＝7。
③在水冷條件下振動磨濕法超微粉碎40min，5000rpm離心10min，取上清液；
④上清液用0.1mhcl調(diào)至ph＝4，靜置30分鐘小時，5000rpm離心10min，取沉淀，加入50ml水，噴霧干燥收集固體稱重，測得率為78.0％。
本發(fā)明的關鍵是采用了濕法超微粉碎步驟，其是通過介質(zhì)(研磨球或者研磨棒)在漿液中對物料施加擠壓、剪切以及摩擦力，這些外加作用力顯著強于傳統(tǒng)提取是的機械攪拌力，在促使物料粉碎(使物料顆粒小于100微米)的同時，極大的增強了漿料內(nèi)部的對流、混合等傳質(zhì)作用，使得原本只依靠濃度梯度相對較慢溶出的蛋白在短時間內(nèi)就達到溶出的效果。