本發(fā)明涉及的是一種甘草烯酸衍生物及其制備方法與作為抗炎的用途，屬于新化合物的提出、制備與應(yīng)用技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

炎癥是免疫系統(tǒng)的基本防御機制，可以防止由有害刺激物(如病原體和毒藥)引起的傷害。然而，炎癥過程本身可能導(dǎo)致組織損傷并導(dǎo)致許多疾病甚至癌癥(r.medzhitov，nature,2008,454,428-435)。炎癥是具有血管系統(tǒng)的活體組織對損傷因子(創(chuàng)傷、感染、缺血、中毒或自身免疫損傷)所發(fā)生的復(fù)雜防御反應(yīng)(hsucc,lienjc.等，biochemicalpharmacology,2013,85,385-395)，適度的炎癥反應(yīng)是宿主防御有害刺激和啟動愈合的重要過程，但急性炎癥可能導(dǎo)致組織損傷、膿毒癥、癌癥和休克等病變(heisse,herhausc.等，jbiolchem,2001,276,32008-32015)。當(dāng)暴露于炎性因子或其他刺激時，單核細(xì)胞轉(zhuǎn)移至血管外組織，分化為巨噬細(xì)胞。激活后，巨噬細(xì)胞會產(chǎn)生一氧化氮(no)、前列腺素e2(pge2)和細(xì)胞因子(如白細(xì)胞介素(il-1β，il-6)和腫瘤壞死因子(tnf-α)等因子)。這些因子大量表達(dá)會對內(nèi)皮細(xì)胞、上皮細(xì)胞產(chǎn)生深刻影響，并在局部微環(huán)境的間充質(zhì)細(xì)胞進行宿主防御、組織重建或修復(fù)等(yonas,jungs.等，curropinhematol,2010,17,53-59)。

非甾體抗炎藥(nsaids)在治療疼痛和炎癥方面占重要地位，但nsaids的長期使用與胃腸道不良事件發(fā)生率高有關(guān)(t.narsinghani,r.sharma，chem.biol.drugdes,2014,84,1-23)。因此，仍然迫切需要尋找具有改善作用的藥物和減少不良反應(yīng)的新型抗炎藥物。由于治療功效和副作用較少，天然產(chǎn)物在許多研發(fā)早期新分子實體(nmes)的藥物中占有重要地位，近一半nmes都是天然產(chǎn)物或其衍生物(e.patridge,p.gareiss.等，drugdiscov,2016,21,204-207)；尋找新型天然產(chǎn)物類抗炎藥物更具有理論價值和實際意義。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是提供一種甘草烯酸衍生物及其制備方法與用途；本發(fā)明的另一個目的是提供一種抗炎藥物，并將其應(yīng)用于治療和預(yù)防急性肺損傷、慢阻肺、膿毒血癥等有關(guān)疾病的藥物或藥物組合物中。

本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的：

提供一種甘草烯酸衍生物，其結(jié)構(gòu)如下列通式(ⅰ)所示：

其中r為含有一個或多個取代基的氨基、醇/酚基、硫醇/硫酚基、肼基，所述取代基選自不同取代的烷基、芳香基、雜環(huán)基的一種或多種。

優(yōu)選地，所述的r為c1～c6單取代/雙取代氨基或肼基、含羥基或鹵素的c1～c6單取代/雙取代氨基、c1～c6取代醇/酚基、c1～c6取代硫醇/硫酚基、含芳基或雜環(huán)的c0～c3取代氨基、c0～c3取代的四氫吡咯基或哌嗪基或高哌嗪基。

本發(fā)明同時提供了上述甘草烯酸衍生物的制備方法，包括以下步驟：

步驟(1)：化合物(ⅰ)和磷?；宜崛阴グ凑漳柋?︰1～2投料反應(yīng)制得化合物(ⅱ)；

反應(yīng)溶劑為非質(zhì)子溶劑；反應(yīng)溫度為-10℃～40℃；

優(yōu)選地，反應(yīng)溶劑為四氫呋喃；反應(yīng)溫度為0℃～30℃。

步驟(2)：化合物(ⅱ)和苛性堿按照摩爾比1︰1～3投料反應(yīng)制得化合物(ⅲ)；

反應(yīng)溶劑為極性偶極溶劑與非質(zhì)子溶劑混合；反應(yīng)溫度為-10℃～100℃；

優(yōu)選地，反應(yīng)溶劑為乙醇、三氯甲烷混合；反應(yīng)催化劑為氫氧化鈉；反應(yīng)溫度為0℃～30℃。

步驟(3)：化合物(ⅲ)和相應(yīng)的胺類、醇類或硫醇類按照摩爾比1︰1～10投料反應(yīng)制得甘草烯酸衍生物(ⅰ)；

反應(yīng)溶劑為非質(zhì)子溶劑；反應(yīng)試劑為縮合劑；反應(yīng)溫度為-20℃～100℃；

優(yōu)選地，反應(yīng)溶劑為二氯甲烷；反應(yīng)試劑為1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺鹽酸鹽(edc·hcl)/1-羥基苯并三唑等縮合劑(hobt)、二環(huán)己基碳二亞胺(dcc)；反應(yīng)溫度為-5℃～30℃。

步驟(4)：化合物(ⅲ)和醇類、硫醇類等反應(yīng)制得甘草酸衍生物按照摩爾比1︰1～10投料反應(yīng)制得甘草烯酸衍生物(ⅰ)；

反應(yīng)溶劑為非質(zhì)子溶劑；反應(yīng)催化劑為脫水催化劑；反應(yīng)溫度為-20℃～100℃；

優(yōu)選地，反應(yīng)溶劑為二氯甲烷；反應(yīng)試劑為濃硫酸、五氯化磷、氯化亞砜、三氟化硼等催化劑；反應(yīng)溫度為-5℃～30℃。

更優(yōu)選地，所述甘草烯酸衍生物的制備方法，包括以下步驟：

步驟(1)：將氫化鈉加入無水四氫呋喃中，0℃～5℃條件下攪拌，氮氣保護，緩慢滴加磷酰基乙酸三乙酯，加完后，繼續(xù)攪拌1小時；將化合物(ⅰ)溶解于thf中，冰浴條件下緩慢滴加到上述混合反應(yīng)液中，室溫攪拌2～3小時，tlc監(jiān)測，待化合物(ⅰ)反應(yīng)完全后，停止反應(yīng)；將反應(yīng)液過濾，乙酸乙酯洗滌兩次，合并濾液，萃取，有機相用水洗滌兩次，無水硫酸鈉干燥，過濾減壓濃縮，乙醇重結(jié)晶得化合物(ⅱ)。

步驟(2)：將化合物(ⅱ)加到反應(yīng)溶劑中，緩慢加入氫氧化鈉水溶液，40℃攪拌2～3小時；tlc監(jiān)測，反應(yīng)完全后，滴加稀鹽酸調(diào)節(jié)ph值至4～5，三氯甲烷萃取兩次，有機相依次用水和飽和氯化鈉洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾減壓濃縮，得化合物(ⅲ)。

步驟(3)：將化合物(ⅲ)加到反應(yīng)溶劑中，依次加入edc·hcl、hobt和相應(yīng)的胺類，攪拌溶解后，加入三乙胺；室溫攪拌過夜，tlc監(jiān)測，待化合物(ⅲ)反應(yīng)完全后，停止反應(yīng)，將反應(yīng)混合液倒入冰水中，攪拌待冰融化，分層，萃取，有機相用水洗滌兩次，無水硫酸鈉干燥；過濾減壓濃縮，乙醇重結(jié)晶，得甘草烯酸衍生物。

步驟(4)：將化合物(ⅲ)加到反應(yīng)溶劑中，加入相應(yīng)醇類或硫醇類，攪拌溶解后，加入氯化亞砜或三氟化硼乙醚溶液；室溫攪拌過夜，室溫攪拌過夜，tlc監(jiān)測，待化合物(ⅲ)反應(yīng)完全后，停止反應(yīng)，將反應(yīng)混合液倒入冰水中，攪拌待冰融化，分層，萃取，有機相用水洗滌兩次，無水硫酸鈉干燥；過濾減壓濃縮，乙醇重結(jié)晶，得甘草烯酸衍生物。

本發(fā)明還公開了所述甘草烯酸衍生物在制備抗炎類藥物或藥物組合物中的應(yīng)用；具體地，是在制備治療和預(yù)防急性肺損傷、慢阻肺、膿毒血癥等有關(guān)的疾病的藥物或藥物組合物中的應(yīng)用。

本發(fā)明相比現(xiàn)有技術(shù)具有以下優(yōu)點：

本發(fā)明所提供的甘草烯酸衍生物具有可逆、選擇性的抗炎活性，具有良好的抑制炎癥信號分子no的產(chǎn)生；其中部分優(yōu)選的甘草烯酸衍生物在40μm的濃度下對no產(chǎn)生的抑制率超過70％，顯示出很強的抑制活性。

附圖說明

圖1為甘草烯酸衍生物的合成路線圖。

圖2為甘草烯酸衍生物的結(jié)構(gòu)式。

圖3為化合物衍生物2～18對raw264.7細(xì)胞中脂多糖(lps)誘導(dǎo)的no釋放的抑制作用。

具體實施方式

下面對本發(fā)明的實施例作詳細(xì)說明，本實施例在以本發(fā)明技術(shù)方案為前提下進行實施，給出了詳細(xì)的實施方式和具體的操作過程，但本發(fā)明的保護范圍不限于下述的實施例。

本發(fā)明具體實施方式中涉及的甘草烯酸衍生物如表1所示：

表1甘草烯酸衍生物的不同基團

實施例1～實施例16

衍生物1～衍生物16的制備(合成路線如圖1所示)

參考文獻(xiàn)(besedai等,bioorg.med.chem.,2010,18(1),433-54)，合成甘草醛。

將80％氫化鈉(6.0mmol)加入無水四氫呋喃(100ml)中，0℃～5℃條件下攪拌，氮氣保護，經(jīng)30分鐘緩慢滴加磷?；宜崛阴?6.0mmol)，加完后，相同條件下攪拌1小時；將所得甘草醛(5.0mmol)溶解于無水四氫呋喃(30ml)中，冰浴條件下經(jīng)30分鐘滴加到上述混合反應(yīng)液中，室溫攪拌2～3小時，tlc監(jiān)測，待甘草醛反應(yīng)完全，停止反應(yīng)；將反應(yīng)液過濾，乙酸乙酯洗滌兩次，合并濾液，萃取，有機相用水洗滌兩次，無水硫酸鈉干燥，過濾減壓濃縮，乙醇重結(jié)晶得甘草烯酸衍生物1；

將所得甘草烯酯(3.2mmol)溶解于乙醇/三氯甲烷(5/1)混合溶劑中，緩慢加入氫氧化鈉溶液(50ml，5％)，室溫攪拌2～3小時；tlc監(jiān)測，待甘草烯酯反應(yīng)完全后，停止反應(yīng)，滴加稀鹽酸調(diào)節(jié)ph值至4～5，三氯甲烷萃取兩次，有機相依次用水和飽和氯化鈉各洗兩次，無水硫酸鈉干燥，過濾減壓濃縮，得甘草烯酸衍生物2；

將甘草烯酸(0.50mmol)加到二氯甲烷(20ml)中，攪拌溶解，依次加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺鹽酸鹽(1.2mmol)、1-羥基苯并三唑(1.2mmol)和相應(yīng)的胺類(1.0mmol，2當(dāng)量)，攪拌溶解后，加入三乙胺(2.0mmol)；室溫攪拌過夜，tlc監(jiān)測，待甘草烯酸反應(yīng)完全后，將反應(yīng)混合液倒入冰水(50ml)，攪拌待冰融化，分層，萃取，有機相用水洗滌兩次，無水硫酸鈉干燥；過濾減壓濃縮，乙醇重結(jié)晶，得甘草烯酸衍生物3～16。

所述甘草烯酸衍生物1～16的波譜分析如下所示：

實施例1

衍生物1：白色粉末，產(chǎn)率為64％，m.p.254-257℃；1h-nmr(300mhz,cdcl3),δ(ppm):6.89(d,1h,j＝16.2hz,h-30),5.79(d,1h,j＝16.2hz,h-31),5.63(s,1h,h-12),4.52(dd,1h,j＝11.4,5.0hz,h-1),4.20(q,2h,j＝7.1hz,och2ch3),2.80(dt,1h,j＝13.5,3.3hz,h-5),2.36(s,1h,h-9),2.05(s,3h,oac),1.38(s,3h,h-27),1.13(s,3h,h-25),1.12(s,3h,h-26),1.00(s,3h,h-23),1.01(s,3h,h-29),0.81(s,3h,h-24),0.80(s,3h,h-28).

實施例2

衍生物2：白色粉末，產(chǎn)率為91％；m.p.259-262℃；1h-nmr(300mhz,cdcl3),δ(ppm):7.00(d,1h,j＝16.2hz,h-30),5.82(d,1h,j＝16.2hz,h-31),5.66(s,1h,h-12),3.73(q,2h,j＝7.0hz),3.24(dd,1h,j＝9.8,6.5hz,h-3),2.79(d,1h,j＝13.5,h-18),2.36(s,1h,h-9),1.38(s,3h,h-27),2.34(s,1h,h-9),1.13(s,3h,h-25),1.12(s,3h,h-26),1.00(s,3h,h-23),1.01(s,3h,h-29),0.81(s,3h,h-24),0.80(s,3h,h-28)；13c-nmr(75mhz,cdcl3),δ(ppm):200.3(c-11),170.43(c-13),169.5(c-32),157.9(c-30),128.3(c-12),119.4(c-31),78.8(c-3),61.8(c-9),58.4(c-22),54.9(c-5),47.4(c-18),45.4(c-8),43.3(c-14),42.8(c-20),39.1(c-4),39.1(c-1),38.0(c-10),37.1(c-19),36.7(c-21),32.7(c-2),32.2(c-7),30.7(c-17),28.4(c-28),28.0(c-23),26.4(c-16),26.3(c-15),23.5(c-20),18.6(c-26),18.4(c-27),17.4(c-6),16.3(c-25),15.5(c-24).

實施例3

衍生物3：白色粉末，產(chǎn)率為67％；m.p.269-271℃；1h-nmr(300mhz,cdcl3),δ(ppm):6.78(d,1h,j＝15.8hz,h-30),5.68(d,1h,j＝15.8hz,h-31),5.55(s,1h,h-12),3.23(dd,1h,j＝10.0,60hz,h-3),2.90(d,3h,j＝4.9hz,nch3),2.79(m,1h,h-18),2.34(s,1h,h-9),1.38(s,3h,h-27),1.13(s,3h,h-25),1.12(s,3h,h-26),1.00(s,3h,h-23),1.01(s,3h,h-29),0.81(s,3h,h-24),0.80(s,3h,h-28).tof-hrms:m/z[m+h]+calcdforc33h52no3:512.7910；found:512.7908.

實施例4

衍生物4：白色粉末，產(chǎn)率為70％；m.p.265-268℃；1h-nmr(300mhz,cdcl3),δ(ppm):6.78(d,1h,j＝15.8hz,h-30),5.68(d,1h,j＝15.8hz,h-31),5.55(s,1h,h-12),3.23(dd,1h,j＝10.0,6.0hz,h-3),2.90(s,2×3h,nch3),2.79(m,1h,h-18),2.34(s,1h,h-9),1.38(s,3h,h-27),1.13(s,3h,h-25),1.12(s,3h,h-26),1.00(s,3h,h-23),1.01(s,3h,h-29),0.81(s,3h,h-24),0.80(s,3h,h-28).tof-hrms:m/z[m+h]+calcdforc34h52no3:524.8180；found:524.8181.

實施例5

衍生物5：白色粉末，產(chǎn)率為60％；m.p.265-269℃；1h-nmr(300mhz,cdcl3),δ(ppm):6.92(d,1h,j＝15.6hz,h-30),6.07(d,1h,j＝15.6hz,h-31),5.55(s,1h,h-12),4.62(d,2h,j＝24.9hz),3.14(m,2h,ch2ch3),2.77(d,1h,h-18),2.34(s,1h,h-9),1.38(s,3h,h-27),1.13(s,3h,h-25),1.12(s,3h,h-26),1.00(s,3h,h-23),1.01(s,3h,h-29),0.81(s,3h,h-24),0.80(s,3h,h-28).tof-hrms:m/z[m+h]+calcdforc34h54no3:524.8049；found:524.8050.

實施例6

衍生物6：白色粉末，產(chǎn)率為50％；m.p.278-281℃；1h-nmr(300mhz,cdcl3),δ(ppm):6.82(d,1h,j＝15.7hz,h-30),5.77(d,1h,j＝15.5hz,h-31),5.59(s,1h,h-12),3.78(m,2h,ch2o),3.52(m,2h,nch2),3.23(m,1h,h-3),2.79(d,1h,j＝13.0hz,h-18),2.34(s,1h,h-9),1.38(s,3h,h-27),1.13(s,3h,h-25),1.12(s,3h,h-26),1.00(s,3h,h-23),1.01(s,3h,h-29),0.81(s,3h,h-24),0.80(s,3h,h-28).tof-hrms:m/z[m+h]+calcdforc34h54no4:539.8048；found:539.8045.

實施例7

衍生物7：白色粉末，產(chǎn)率為60％；m.p.280-284℃；1h-nmr(300mhz,cdcl3),δ(ppm):6.78(d,1h,j＝15.8hz,h-30),6.57(d,1h,nh),5.80(d,1h,j＝15.8hz,h-31),5.62(s,1h,h-17),1.13(s,3h,h-25),1.12(s,3h,h-26),1.00(s,3h,h-23),1.01(s,3h,h-29),0.81(s,3h,h-24),0.80(s,3h,h-28).tof-hrms:m/z[m+h]+calcdforc35h56no4:553.8311；found:553.8315.

實施例8

衍生物8：白色粉末，產(chǎn)率為86％；m.p.254-257℃；1h-nmr(300mhz,cdcl3),δ(ppm):6.78(d,1h,j＝15.8hz,h-30),5.68(d,1h,j＝15.8hz,h-31),5.61(s,1h,h-12),5.58(d,1h,nh),3.23(dd,1h,j＝10.0,6.0hz,h-3),2.90(d,6h,j＝4.9hz,i-pr-ch),2.79(m,1h,h-18),2.34(s,1h,h-9),1.13(s,3h,h-25),1.12(s,3h,h-26),1.00(s,3h,h-23),1.01(s,3h,h-29),0.81(s,3h,h-24),0.80(s,3h,h-28).tof-hrms:m/z[m+h]+calcdforc35h56no3:537.8321；found:537.8320.

實施例9

衍生物9：白色粉末，產(chǎn)率為76％；m.p.264-268℃；1h-nmr(300mhz,cdcl3),δ(ppm):6.78(d,1h,j＝15.8hz,h-30),5.68(d,1h,j＝15.8hz,h-31),5.55(s,1h,h-12),3.94(s,1h,nh),3.23(dd,1h,j＝10.0,6.0hz,h-3),2.90(d,6h,j＝4.9hz,h-33),2.9(d,3h,j＝4.9hz,h-34),2.79(m,1h,h-18),2.34(s,1h,h-9),1.38(s,3h,h-27),1.13(s,3h,h-25),1.12(s,3h,h-26),1.00(s,3h,h-23),1.01(s,3h,h-29),0.81(s,3h,h-24),0.80(s,3h,h-28).tof-hrms:m/z[m+h]+calcdforc35h56no3:537.8321；found:537.8325.

實施例10

衍生物10：白色粉末，產(chǎn)率為67％；m.p.243-246℃；1h-nmr(300mhz,cdcl3),δ(ppm):6.78(d,1h,j＝15.8hz,h-30),5.68(d,1h,j＝15.8hz,h-31),5.55(s,1h,h-12),3.62(t,2h,ch2cl),3.50(m,2h,nch2),3.23(dd,1h,j＝10.0,6.0hz,h-3),2.79(m,1h,h-18),2.34(s,1h,h-9),1.38(s,3h,h-27),1.13(s,3h,h-25),1.12(s,3h,h-26),1.00(s,3h,h-23),1.01(s,3h,h-29),0.81(s,3h,h-24),0.80(s,3h,h-28).tof-hrms:m/z[m+h]+calcdforc35h55clno3:573.2770；found:573.2773.

實施例11

衍生物11：白色粉末，產(chǎn)率為50％；m.p.287-291℃；1h-nmr(300mhz,cdcl3),δ(ppm):7.33(m,2h,h-ar),7.23(m,3h,h-ar),6.80(d,1h,j＝15.8hz,h-30),5.65(d,1h,j＝15.8hz,h-31),5.57(s,1h,h-12),3.61(m,2h,h-n),3.23(dd,1h,j＝10.0,6.0hz,h-3),2.88(t,2h,j＝7.1hz,nch2),2.80(d,1h,h-18),2.34(s,1h,h-9),1.38(s,3h,h-27),1.13(s,3h,h-25),1.12(s,3h,h-26),1.00(s,3h,h-23),1.01(s,3h,h-29),0.81(s,3h,h-24),0.80(s,3h,h-28).tof-hrms:m/z[m+h]+calcdforc40h58no3:600.4490；found:600.4495.

實施例12

衍生物12：白色粉末，產(chǎn)率為70％；m.p.281-285℃；1h-nmr(300mhz,cdcl3),δ(ppm):8.26(s,1h,h-n),7.21-6,87(m,6h,h-ar,nh),6.78(d,1h,j＝15.8hz,h-30),5.80(d,1h,j＝15.8hz,h-31),5.67(s,1h,h-12),4.13(dt,1h,j＝14.4,5.6hz,h-n),3.23(dd,1h,j＝10.0,6.0hz,h-3),2.77(d,1h,h-18),2.34(s,1h,h-9),1.38(s,3h,h-27),1.13(s,3h,h-25),1.12(s,3h,h-26),1.00(s,3h,h-23),1.01(s,3h,h-29),0.81(s,3h,h-24),0.80(s,3h,h-28).tof-hrms:m/z[m+h]+calcdforc38h55n2o3:587.8624；found:587.8620.

實施例13

衍生物13：白色粉末，產(chǎn)率為78％；m.p.254-258℃；1h-nmr(300mhz,cdcl3),δ(ppm):6.84(d,1h,j＝15.7hz,h-30),6.19(d,1h,j＝15.7hz,h-31),5.55(s,1h,h-12),3.64(m,4h,nch2),3.23(dd,1h,j＝10.0,6.0hz,h-3),2.77(d,1h,h-18),2.43(m,4h,nch2),2.33(s,1h,h-9),2.33(s,3h,nch3),1.38(s,3h,h-27),1.13(s,3h,h-25),1.12(s,3h,h-26),1.00(s,3h,h-23),1.01(s,3h,h-29),0.81(s,3h,h-24),0.80(s,3h,h-28)；13c-nmr(75mhz,cdcl3),δ(ppm):200.2(c-11),169.8(c-13),165.5(c-32),152.9(c-30),128.3(c-12),118.3(c-31),78.7(c-3),61.8(c-9),54.9(c-5),47.4(c-18),45.9(2×nch2),45.4(c-8),43.3(c-14),43.0(c-20),39.1(c-4),39.1(c-1),37.7(c-10),37.1(c-19),36.7(c-21),33.8(c-22),33.5(nch3),32.7(c-7),32.3(2×nch2),31.1(c-17),28.5(c-28),28.1(c-23),27.3(c-2),26.4(c-16),26.3(c-15),26.3(c-29),23.5(c-27),18.7(c-26),17.4(c-6),16.3(c-25),15.5(c-24).tof-hrms:m/z[m+h]+calcdforc37h59n2o3:579.8839；found:579.8836.

實施例14

衍生物14：白色粉末，產(chǎn)率為74％；m.p.257-262℃；1h-nmr(300mhz,cdcl3),δ(ppm):6.84(d,1h,j＝15.7hz,h-30),6.19(d,1h,j＝15.7hz,h-31),5.55(s,1h,h-12),3.64(m,4h,nch2),3.23(dd,1h,j＝10.0,6.0hz,h-3),2.77(d,1h,h-18),2.45(m,6h,ch2ch3,nch2),2.34(s,1h,h-9),1.38(s,3h,h-27),1.13(s,3h,h-25),1.12(s,3h,h-26),1.00(s,3h,h-23),1.01(s,3h,h-29),0.81(s,3h,h-24),0.80(s,3h,h-28)；13c-nmr(75mhz,cdcl3),δ(ppm):200.2(c-11),169.8(c-13),165.5(c-32),152.9(c-30),128.3(c-12),118.3(c-31),78.7(c-3),61.8(c-9),54.9(c-5),47.4(c-18),45.9(2×nch2),45.4(c-8),43.3(c-14),43.0(c-20),39.1(c-4),39.1(c-1),37.7(c-10),37.1(c-19),36.7(c-21),33.8(c-22),33.5(ch2ch3),32.7(c-7),32.3(2×nch2),31.1(c-17),28.5(c-28),28.1(c-23),27.3(c-2),26.4(c-16),26.3(c-15),26.3(c-29),23.5(c-27),18.7(c-26),17.4(c-6),16.3(c-25),15.5(c-24),11.8(ch2ch3).tof-hrms:m/z[m+h]+calcdforc38h61n2o3:593.9105；found:593.9103.

實施例15

衍生物15：白色粉末，產(chǎn)率為76％；m.p.265-268℃；1h-nmr(300mhz,cdcl3),δ(ppm):6.78(d,1h,j＝15.8hz,h-30),6.57(d,1h,j＝7.4hz),5.80(d,1h,j＝15.8hz,h-31),5.62(s,1h,h-12),4.13-3.57(m,4h,2×ch2o),3.23(dd,1h,j＝10.0,6.0hz,h-3),2.77(d,1h,h-18),2.34(s,1h,h-9),2.34(s,3h),1.38(s,3h,h-27),1.13(s,3h,h-25),1.12(s,3h,h-26),1.00(s,3h,h-23),1.01(s,3h,h-29),0.81(s,3h,h-24),0.80(s,3h,h-28).tof-hrms:m/z[m+h]+calcdforc36h56no4:566.8421；found:566.8423.

實施例16

衍生物16：白色粉末，產(chǎn)率為56％；m.p.272-276℃；1h-nmr(300mhz,cdcl3),δ(ppm):6.89(d,1h,j＝4.9hz,nh),6.78(d,1h,j＝15.8hz,h-30),5.68(d,1h,j＝15.8hz,h-31),5.55(s,1h,h-12),3.73(m,4h,och2),3.43(m,4h,nch2),3.23(dd,1h,j＝10.0,6.0hz,h-3),2.78(d,1h,h-18),2.49(m,6h,nch2),2.34(s,1h,h-9),1.38(s,3h,h-27),1.13(s,3h,h-25),1.12(s,3h,h-26),1.00(s,3h,h-23),1.01(s,3h,h-29),0.81(s,3h,h-24),0.80(s,3h,h-28)tof-hrms:m/z[m+h]+calcdforc39h63n2o4:623.9220；found:623.9223.

實施例17～18

衍生物17的制備(合成路線如圖1所示)

將甘草烯酸(1.0mmol)加到二氯甲烷(20ml)中，加入相應(yīng)的醇類(10當(dāng)量)，攪拌十分鐘，加入三氟化硼乙醚溶液(2.0mmol)，室溫反應(yīng)24小時；點板檢測，待甘草烯酸反應(yīng)結(jié)束后，停止反應(yīng)；將反應(yīng)液倒入冰水(50ml)中，待冰融化，分層，萃取，有機相用水洗滌兩次，無水硫酸鈉干燥；過濾減壓濃縮，乙醇重結(jié)晶，得甘草烯酸衍生物17～18。

所述甘草烯酸的衍生物17～18的波譜分析如下所示：

實施例17

衍生物17：白色粉末，產(chǎn)率為50％；m.p.273-275℃；1h-nmr(300mhz,cdcl3),δ(ppm):7.00(d,1h,j＝16.2hz,h-30),5.82(d,1h,j＝16.2hz,h-31),5.66(s,1h,h-12),4.25(m,2h,och2ch3),3.73(q,2h,j＝7.0hz),3.24(dd,1h,j＝9.8,6.5hz,h-3),2.80(d,1h,j＝13.5,h-18),2.36(s,1h,h-9),1.38(s,3h,h-27),2.38(s,1h,h-9),1.13(s,3h,h-25),1.11(s,3h,h-26),1.00(s,3h,h-23),1.01(s,3h,h-29),0.80(s,3h,h-24),0.79(s,3h,h-28).

實施例17

衍生物18：白色粉末，產(chǎn)率為48％；m.p.279-281℃；1h-nmr(300mhz,cdcl3),δ(ppm):7.32-7.25(m,5h,ar),6.98(d,1h,j＝16.2hz,h-30),5.80(d,1h,j＝16.2hz,h-31),5.64(s,1h,h-12),4.76(s,2h,och2ph),3.73(q,2h,j＝7.0hz),3.24(dd,1h,j＝9.8,6.5hz,h-3),2.80(d,1h,j＝13.5,h-18),2.36(s,1h,h-9),1.38(s,3h,h-27),2.38(s,1h,h-9),1.13(s,3h,h-25),1.11(s,3h,h-26),1.00(s,3h,h-23),1.01(s,3h,h-29),0.80(s,3h,h-24),0.79(s,3h,h-28).

試驗例1

甘草烯酸的衍生物2～18對no產(chǎn)生抑制活性檢測：

no是一種重要的促炎介質(zhì)。體內(nèi)產(chǎn)生過多的no與炎癥相關(guān)疾病有關(guān)。令大家廣為接受的是，no抑制劑有潛在的可能和機會去尋找新的治療炎癥相關(guān)疾病的方法。為了評價甘草烯酸衍生物的抗炎作用，使用griess試劑檢測raw264.7細(xì)胞中脂多糖(lps)誘導(dǎo)的no釋放水平。將raw264.7細(xì)胞以1×105個細(xì)胞/孔接種在24孔板中并培養(yǎng)20小時；然后用50μm濃度的化合物預(yù)處理細(xì)胞，其在用lps(1μg/ml)刺激之前在無血清培養(yǎng)基中制備2小時；經(jīng)lps刺激24小時后，通過說明書使用griess試劑(beyotime，china)檢測亞硝酸鹽水平來確定no產(chǎn)生的量；然后在微孔板讀數(shù)器(mqx200，bio-tek，usa)中測量樣品在540nm處的吸光度(od540)；no抑制率＝[對照(od540)-化合物(od540)]/[對照(od540)-空白(od540)]×100％；

本發(fā)明所述甘草烯酸的衍生物2～18的mao生物活性檢測的結(jié)果如圖3所示。

圖例說明如下：

(1)^a每個數(shù)值從三實驗平均±sem(n＝3)；

(2)與空白組相比，#p<0.05，##p<0.01，###p<0.001；

(3)與lps刺激組相比*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001。

本發(fā)明的試驗例1的結(jié)果表明：

本發(fā)明提供的甘草烯酸的衍生物具有良好的抗炎活性；

甘草烯酸衍生物可抑制raw264.7細(xì)胞中脂多糖(lps)誘導(dǎo)的no釋放水平；

本發(fā)明涉及的甘草烯酸衍生物2，3～7，13，14和16顯著抑制了lps誘導(dǎo)的no釋放增加；尤其是具有哌嗪取代基的化合物13和14顯示出最強的抑制活性，并且在40μm的濃度下其對no釋放的抑制率超過70％。

應(yīng)用例1

以常規(guī)方式制備下列組成的制劑：

將實施例1～18中制備的甘草烯酸衍生物過120目篩，可壓性淀粉過100目篩；稱取處方量的可壓性淀粉與原料按等量遞增法混勻；羥丙基甲基纖維素和聚乙烯吡咯烷酮溶解在75％乙醇中配成溶液，取上述混粉，用羥丙基甲基纖維素和聚乙烯吡咯烷酮的乙醇溶液作潤濕劑制軟材，30目篩制粒，60℃干燥2～3小時，26目篩整粒；

取以上顆粒，加入處方量的硬脂酸鎂，混勻，測定中間體含量，壓片或灌裝于膠囊，即可。

甘草烯酸衍生物還可以制成緩釋片、滴丸、沖劑、注射劑等。其臨床推薦劑量：30～100mg/天，口服，一日兩次。

上述實施例只為說明本發(fā)明的技術(shù)構(gòu)思及特點，其目的在于讓熟悉此領(lǐng)域技術(shù)的人士能夠了解本發(fā)明內(nèi)容并加以實施，并不能以此限制本發(fā)明的保護范圍。凡根據(jù)本發(fā)明精神實質(zhì)所作的等效變化或修飾，都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護范圍內(nèi)。