本發(fā)明屬于中藥有效成分生物提取技術領域,具體的說涉及從野葛根中提取有效成分葛根素技術。
技術背景
葛根素是近十年來年世界各國廣泛研究和發(fā)展的專供醫(yī)藥工業(yè)用于攻克心腦血管、各種癌癥、眼科雜頑癥的生物原料藥。該產品具有所有化學藥品不可替代的多種優(yōu)點:1、生物藥理有效成份多樣化,主要成份具有防止血管通透性異常升高。迅速抑制病灶細胞和血小板凝集,增加血中氧含量和氧飽和度,改善微循環(huán)和促進血管生成使裂壁得到修復等作用。對閉塞性心腦血管病,中心性視網膜炎、動脈硬化、冠心病、梗塞前綜合癥、血栓性靜脈炎等可以達到多重效果。2、對動物性神經行為很安全。葛根素針劑、片劑作用方式主要是通絡、活血化瘀、降低梗塞動物的血漿內皮素含量,提高血清sod含量,增強肌體的免疫功能,無負作用。3、肌體不易產生抗藥性。中草藥往往含有數(shù)種成份,且作用機理與一般化學藥品截然不同。如:日本從黃豆中提取葛根素針劑治療心腦血管病,經過數(shù)年的臨床實踐,康復率達98%以上,同時,未發(fā)現(xiàn)任何不良反應及副作用。4、對環(huán)境安全,沒有毒廢物殘留。中草藥制劑含有的化學成份是自然畀中具有的天然生理結構,在自然生態(tài)中必然存在降解它的物質基因。因此,在生產過程中無任何累廢積物鏈和殘毒之慮。
日本從黃豆中提取葛根素系列產品,但成本較高,主要因素是原料較貴。國內報道的葛根素提取工藝較復雜,手段落后,收率較低,并對副產品無利用,經過實踐證明不成功。
本申請人在先申請(專利200910022619.1)雖然克服了現(xiàn)有葛根有效成分提取中一些問題,但是對于葛根中有些成分提取不夠充分。由于葛根中提取的葛根黃酮類化合物具有抗氧化、抗腫瘤、防治心腦血管病等藥理作用,近幾年對葛根醫(yī)藥利用更得到重視,因此,葛根黃酮的分離成為最為緊迫的需要。
另外,葛根制劑在腸道吸收和透皮制劑中存在吸收率太低,藥效難以發(fā)揮的缺陷。
技術實現(xiàn)要素:
本發(fā)明目的是提供一種從葛根中萃取高純度葛根素及多種珍稀醫(yī)藥成分的工藝,以提高葛根的綜合利用價值。
從葛根中萃取高純度葛根素及多種珍稀醫(yī)藥成分的工藝,其特征是按照以下步驟實施:
(1)葛根黃酮提?。悍Q取野葛根加適量水潤透,加80%乙醇超聲提取2次,乙醇質量分數(shù)不低于60.0%、提取時間不低于138.0min、液固比至少11.3ml/g、提取溫度70.0℃以下,過濾,合并濾液,70'c以下減壓干燥,得黃褐色粉末;
(2)葛根素和大豆苷元分離:將黃色粉末加入適量湖景成水提取液,將提取液流過h103大孔樹脂床,進行吸附操作;用4倍柱床體積水清洗樹脂床,然后用4倍柱床體積的75%乙醇進行洗脫操作,收集洗脫液,濃縮回收乙醇;往濃縮液中加hcl至hcl濃度為2mrl/l,并在90℃水浴條件下酸解60min;酸解液趁熱過濾,往濾液中加5倍體積水稀釋后流過h103大孔樹脂床,進行吸附操作;用4倍柱床體積水清洗樹脂床,然后用4倍柱床體積的50%乙醇進行洗脫操作,收集洗脫液,并濃縮回收乙醇;濃縮液在4℃條件下貯存24h,收集沉淀得到葛根素;用4倍柱床體積的95%乙醇對樹脂柱進行洗脫操作,收集洗脫液,并濃縮回收乙醇;往濃縮液中加入等體積的水,在4℃條件下貯存24h,收集沉淀得到大豆苷元;
(3)染料木素分離:a)以染料木素分子印跡聚合物微粒為填料制成固相萃取柱;b)對步驟a制備的固相萃取柱進行活化、上樣,然后依次用體積比49-51%水的步驟(2)提取液加入乙腈的溶液、體積比4.9-5.1%水的乙腈溶液對萃取柱進行淋洗,最后用體積比0.18-0.22%tea的甲醇溶液洗脫;洗脫液蒸干得染料木素。
步驟(1)所得葛根黃酮與黃芩、黃連、甘草四味藥物按10-12∶1-2∶1-2∶0.5-1的重量比混合,提取物加入輔料,用于制備治療腹瀉的口服制劑。
步驟(2)中葛根素與?;撬嶂瞥蓮头娇诜苿┯糜诮档脱?,并且加入占總組分0.5-1%的殼聚糖做腸道吸收促進劑。
步驟(2)中葛根素與與銀杏葉提取物配伍用于制備抗衰老外用制劑,并且加入肉桂油和丁香油做作為透皮吸收促進劑。
步驟(1)所得粉末混入山藥、茯苓、淡竹葉、薏苡仁、桑椹、百合中的一種或多種后與山藥、枸杞、麥冬草、牛蒡子組合制成降血糖和血脂的的保健食品。
本發(fā)明采用野葛根提取葛根素,將危害和嚴重影響林木健康生長的野葛藤蔓變害為寶,工藝中的浸取溫度合理,使得葛根素收率較高,生產安全,對設備要求較低,同時尾氣得到回收,廢碴被制成復合飼料,降低了綜合成本。同時,本發(fā)明對葛根中大部分有效成分都分離提純加以利用,大大提高了葛根的綜合利用價值。特別值得一提的是,
本發(fā)明從葛根素中分離了不可利用的劇毒成分3'氰基葛根素,但該成分在國防建設中卻起著工業(yè)味精的作用,其收率3.22%(含量98.1%),本發(fā)明提取了葛根素,大豆苷元,大豆苷,染料木素,β-胡蘿卜苷和芒柄花苷等現(xiàn)有工藝無法分離的成分,大大提高了葛根藥用價值的發(fā)揮。
本發(fā)明工藝可以提取的葛根中有效成分包括:
大豆苷元組分中:①、大豆苷元收率0.58%(含量98.g%);②、大豆苷收率0.49%(含量99.2%);③、染料木苷收率0.46%(含量99.5%);④、葡萄糖大豆苷收率0.25%(含量99.8g%)
尿囊素組分:①、尿囊素牧率0.62%(含量98.87%);②、胡蘿卜素收率0.53%(含量99.8%);③、染料木素收率0.47%(含量95.5g%);④、8.碳一芹糖收率0.42%(含量93.3%);⑤、谷甾醇收率0.288%(含量97.9%)。
葛根素組分:①、葛根素收率6.8%(含量99.8%);②、37-氰基葛根素收率3.22%(含量98.1%);③、芒柄素收率2.56%(含量98.89%);④、大豆素收率2.5%(含量98%)。
特別是本發(fā)明提供的葛根復方制劑采用了腸道促進吸收劑和透皮吸收促進劑,有助于大大提高吸收率并提高功效。
具體實施方式
(1)葛根黃酮提?。悍Q取野葛根加適量水潤透,加80%乙醇超聲提取2次,乙醇質量分數(shù)不低于60.0%、提取時間不低于138.0min、液固比至少11.3ml/g、提取溫度70.0℃以上,過濾,合并濾液,70'c以下減壓千燥,得黃褐色粉末;
(2)葛根素和大豆苷元分離:將黃色粉末加入適量湖景成水提取液,將提取液流過h103大孔樹脂床,進行吸附操作;用4倍柱床體積水清洗樹脂床,然后用4倍柱床體積的75%乙醇進行洗脫操作,收集洗脫液,濃縮回收乙醇;往濃縮液中加hcl至hcl濃度為2mrl/l,并在90℃水浴條件下酸解60min;酸解液趁熱過濾,往濾液中加5倍體積水稀釋后流過h103大孔樹脂床,進行吸附操作;用4倍柱床體積水清洗樹脂床,然后用4倍柱床體積的50%乙醇進行洗脫操作,收集洗脫液,并濃縮回收乙醇;濃縮液在4℃條件下貯存24h,收集沉淀得到葛根素;用4倍柱床體積的95%乙醇對樹脂柱進行洗脫操作,收集洗脫液,并濃縮回收乙醇;往濃縮液中加入等體積的水,在4℃條件下貯存24h,收集沉淀得到大豆苷元;
(3)染料木素分離:a)以染料木素分子印跡聚合物微粒為填料制成固相萃取柱;b)對步驟a制備的固相萃取柱進行活化、上樣,然后依次用體積比49-51%水的步驟(2)提取液加入乙腈的溶液、體積比4.9-5.1%水的乙腈溶液對萃取柱進行淋洗,最后用體積比0.18-0.22%tea的甲醇溶液洗脫;洗脫液蒸干得染料木素。
步驟(1)所得葛根黃酮與黃芩、黃連、甘草四味藥物按10-12∶1-2∶1-2∶0.5-1的重量比混合,提取物加入輔料,用于制備治療腹瀉的口服制劑。
步驟(2)中葛根素與?;撬嶂瞥蓮头娇诜苿┯糜诮档脱牵⑶壹尤胝伎偨M分0.5-1%的殼聚糖做腸道吸收促進劑。
步驟(2)中葛根素與與銀杏葉提取物配伍用于制備抗衰老外用制劑,并且加入肉桂油和丁香油做作為透皮吸收促進劑。
步驟(1)所得粉末混入山藥、茯苓、淡竹葉、薏苡仁、桑椹、百合中的一種或多種后與山藥、枸杞、麥冬草、牛蒡子組合制成降血糖和血脂的的保健食品。