本發(fā)明涉及高分子新材料技術領域，尤其涉及一種氧化響應性peg化脂質(zhì)材料、其制備方法及其應用。

背景技術：

脂質(zhì)體作為一種被動靶向制劑應用于藥物的遞送時，由于血漿中調(diào)理素的識別作用，容易被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)(res)攝取，從而降低其與癌變組織細胞的特異性結合幾率。為了克服這一缺陷，研究人員將具有親水片段的脂質(zhì)體衍生物插入到脂質(zhì)體的雙分子層中，用于增加脂質(zhì)體表面的親水性及空間位阻，達到延長體內(nèi)循環(huán)時間、增加脂質(zhì)體在腫瘤組織或器官的聚集的目的。應用最多的親水片段為聚乙二醇。

傳統(tǒng)的peg-1ipid衍生物如聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(peg-dspe)、聚乙二醇-磷脂酰乙醇胺(peg-pe)和聚乙二醇-膽固醇(peg-chol)等peg化脂質(zhì)材料都可用于延長脂質(zhì)體體內(nèi)循環(huán)時間。但傳統(tǒng)的peg化脂質(zhì)材料可能會在脂質(zhì)體到達靶部位時由于peg鏈仍附著于脂質(zhì)體表面導致載藥納米顆粒不容易被細胞攝取，從而影響藥效。近年來，響應可斷裂的peg化脂質(zhì)材料被不斷研究和應用。該類peg化脂質(zhì)材料具有可以在人體的生理或病理條件下斷裂的性質(zhì)。利用這種響應性peg化脂質(zhì)材料制備的納米藥物，可以在延長脂質(zhì)體體內(nèi)循環(huán)時間的同時，實現(xiàn)在到達靶部位后由于聚乙二醇已經(jīng)從脂質(zhì)體表面脫落，增加細胞對納米藥物的攝取，從而提高所攜載藥物進入細胞的數(shù)量，增強治療效果。目前為止，具有ph響應，還原響應和酶響應的peg化脂質(zhì)材料已有較多報道，然而，具有氧化響應的peg化脂質(zhì)材料卻未見報道。

技術實現(xiàn)要素：

有鑒于此，本發(fā)明的目的在于提供一種peg化脂質(zhì)材料及其制備方法，該脂質(zhì)材料具有氧化響應性，且能作為藥物載體。

本發(fā)明提供了一種peg化脂質(zhì)材料，具有式(i)結構：

其中，10≤m≤500；0≤n≤20。

優(yōu)選地，所述30≤m≤300；3≤n≤15。

本發(fā)明提供了一種上述技術方案所述peg化脂質(zhì)材料的制備方法，包括以下步驟：

在催化劑和溶劑存在下，將具有式(ii)結構的聚乙二醇單甲醚衍生物和具有式(iii)結構的疊氮化雙脂肪酸甘油酯點擊化學反應，得到具有式(i)結構的peg化脂質(zhì)材料；

式(ii)中，10≤m≤500；

式(iii)中，0≤n≤20。

優(yōu)選地，所述具有式(ii)結構的聚乙二醇單甲醚衍生物由以下方法制得：

將末端羧基化的聚乙二醇單甲醚、4-甲酰基苯硼酸頻哪醇酯和異氰基丙炔酰胺在第二溶劑中反應，得到具有式(ii)結構的聚乙二醇單甲醚衍生物。

優(yōu)選地，所述具有式(iii)結構的疊氮化雙脂肪酸甘油酯按照以下方法制得：

將疊氮化甘油與脂肪酸在縮合劑和第三催化劑作用下，在第六溶劑中，縮合反應，得到具有式(iii)結構的疊氮化雙脂肪酸甘油酯。

優(yōu)選地，所述具有式(ii)結構的聚乙二醇單甲醚衍生物和具有式(iii)結構的疊氮化雙脂肪酸甘油酯的物質(zhì)的量比為1.0～1.5。

優(yōu)選地，所述點擊化學反應的溫度為15～80℃；所述點擊化學反應的時間為12～96h。

優(yōu)選地，所述末端羧基化的聚乙二醇單甲醚、4-甲酰基苯硼酸頻哪醇酯、異氰基丙炔酰胺的物質(zhì)的量比為1:1～4:2～10。

優(yōu)選地，所述疊氮化甘油與脂肪酸的物質(zhì)的量比為1:2～1:20。

本發(fā)明提供了一種上述技術方案所述peg化脂質(zhì)材料或上述技術方案所述制備方法制備的peg化脂質(zhì)材料在藥物載體中的應用。

本發(fā)明提供了一種peg化脂質(zhì)材料，具有式(i)結構。該材料具有氧化響應性，且能作為藥物載體。實驗結果表明：該材料具有兩親性，能夠在h2o2存在的環(huán)境中，式(i)結構中苯硼酸酯發(fā)生氧化脫除，進一步發(fā)生quinone-methide重排反應，導致peg化脂質(zhì)材料的親水和疏水鏈段解離；該材料包載塞來昔布自組裝形成納米膠束，納米粒子的粒徑為90nm左右，納米膠束的流體力學半徑為43±1.5nm；包封率為54％，載藥量為5.4％。

附圖說明

圖1為本發(fā)明提供的氧化響應性peg化脂質(zhì)材料的合成路線；

圖2為本發(fā)明實施例7制備的具有式(ii)結構的聚乙二醇單甲醚衍生物的合成路線；

圖3為發(fā)明實施例7制備得到的mpeg2k-pbpe-alkynyl的核磁共振波譜圖；

圖4為發(fā)明實施例7制備得到的mpeg2k-pbpe-alkynyl的基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時間質(zhì)譜圖；

圖5為本發(fā)明實施例7制備得到的mpeg2k-pbpe-alkynyl的凝膠滲透色譜圖；

圖6為本發(fā)明實施例10制備得到的疊氮化甘油的核磁共振波譜圖；

圖7為本發(fā)明實施例12制備得到的疊氮化雙硬脂酸甘油酯的核磁共振波譜圖；

圖8為本發(fā)明實施例18制備得到的mpeg2k-pbpe-dsa的核磁共振波譜圖；

圖9為本發(fā)明實施例18制備得到的mpeg2k-pbpe-dsa的凝膠滲透色譜圖；

圖10為本發(fā)明實施例18制備得到的mpeg2k-pbpe-dsa包載塞來昔布形成的納米膠束的動態(tài)光散射圖；

圖11為發(fā)明實施例18制備得到的mpeg2k-pbpe-dsa包載塞來昔布形成的納米膠束的透射電子顯微鏡圖。

具體實施方式

本發(fā)明提供了一種氧化響應性peg化脂質(zhì)材料，具有式(i)結構：

其中，10≤m≤500；0≤n≤20。

本發(fā)明提供的peg化脂質(zhì)材料在h2o2作用下，苯硼酸酯連接部位發(fā)生化學鍵斷裂，導致親水和疏水鏈段分離，可用作響應性藥物載體材料。

在本發(fā)明中，10≤m≤500，優(yōu)選地，30≤m≤300；0≤n≤20，優(yōu)選地，3≤n≤15。

該peg化脂質(zhì)材料可以在h2o2存在時斷裂成兩部分，其斷裂機理如下路線所示：

本發(fā)明提供了一種上述技術方案所述氧化響應性peg化脂質(zhì)材料的制備方法，包括以下步驟：

在催化劑和溶劑存在下，將具有式(ii)結構的聚乙二醇單甲醚衍生物和具有式(iii)結構的疊氮化雙脂肪酸甘油酯點擊化學反應，得到具有式(i)結構的氧化響應性peg化脂質(zhì)材料；

式(ii)中，10≤m≤500；

式(iii)中，0≤n≤20。

在本發(fā)明中，為了與下述技術方案中的催化劑進行區(qū)分，將具有式(ii)結構的聚乙二醇單甲醚衍生物和具有式(iii)結構的疊氮化雙脂肪酸甘油酯點擊化學反應采用的催化劑命名為第一催化劑。所述第一催化劑優(yōu)選為硫酸銅與抗壞血酸鈉的混合物；所述硫酸銅與抗壞血酸鈉的混合物中硫酸銅與抗壞血酸鈉的摩爾比優(yōu)選為1:2～1:10，更優(yōu)選為1:2～1:5。

為了與下述技術方案中的溶劑進行區(qū)分，將具有式(ii)結構的聚乙二醇單甲醚衍生物和具有式(iii)結構的疊氮化雙脂肪酸甘油酯點擊化學反應采用的溶劑命名為第一溶劑。在本發(fā)明中，所述第一溶劑優(yōu)選為四氫呋喃和水的混合物；所述四氫呋喃和水的體積比優(yōu)選為1:8～8:1，更優(yōu)選為1:2～2:1，最優(yōu)選為1:1～:2:1。

本發(fā)明優(yōu)選將具有式(ii)結構的聚乙二醇單甲醚衍生物和具有式(iii)結構的疊氮化雙脂肪酸甘油酯溶解于第一溶劑中，得到混合物溶液；將第一催化劑溶解于水中，得到第一催化劑溶液；將混合物溶液和第一催化劑溶液混合，用凍融方法除去反應體系中的氧氣，然后攪拌反應；反應結束后，將反應產(chǎn)物溶液透析、凍干，得到具有式(i)結構的氧化響應性peg化脂質(zhì)材料。凍干物優(yōu)選采用過量的無水乙醚沉降，抽干。

在本發(fā)明中，所述具有式(ii)結構的聚乙二醇單甲醚衍生物優(yōu)選按照以下方法制得：

將末端羧基化的聚乙二醇單甲醚、4-甲酰基苯硼酸頻哪醇酯和異氰基丙炔酰胺在第二溶劑中反應，得到具有式(ii)結構的聚乙二醇單甲醚衍生物。

本發(fā)明對所述4-甲?；脚鹚犷l哪醇酯的來源沒有特別限定，采用本領域技術人員熟知的4-甲?；脚鹚犷l哪醇酯即可，如可以采用其市售商品，也可以采用本領域技術人員熟知的制備方法自行制備。

在本發(fā)明中，所述第二溶劑優(yōu)選選自四氫呋喃。

在本發(fā)明中，所述末端羧基化的聚乙二醇單甲醚優(yōu)選按照以下方法制得：

將聚乙二醇單甲醚和丁二酸酐在第三溶劑和第二催化劑的存在下反應，得到末端羧基化的聚乙二醇單甲醚。

在本發(fā)明中，所述第三溶劑優(yōu)選為二氯甲烷；所述第二催化劑優(yōu)選為4-二甲氨基吡啶。所述聚乙二醇單甲醚和丁二酸酐反應的溫度優(yōu)選為20～60℃，更優(yōu)選為25～35℃，最優(yōu)選為30℃；所述聚乙二醇單甲醚和丁二酸酐反應的時間優(yōu)選為36～96h，更優(yōu)選為48～72h，最優(yōu)選為72h。本發(fā)明優(yōu)選將聚乙二醇單甲醚和丁二酸酐反應得到的產(chǎn)物在過量的無水乙醚中沉降三次，抽干，得到末端羧基化的聚乙二醇單甲醚。

在本發(fā)明中，所述異氰基丙炔酰胺優(yōu)選按照以下方法制得：

將異氰基乙酸乙酯和丙炔胺反應至固化，采用第四溶劑溶解，多次沉降，得到異氰基丙炔酰胺。

本發(fā)明優(yōu)選在攪拌的條件下進行異氰基乙酸乙酯和丙炔胺反應，優(yōu)選攪拌至完全固化。在本發(fā)明中，所述異氰基乙酸乙酯和丙炔胺的物質(zhì)的量比優(yōu)選為1:1；所述第四溶劑優(yōu)選為四氫呋喃；所述沉降采用的第五溶劑優(yōu)選為正己烷。所述正己烷與四氫呋喃的體積優(yōu)選為20:1～8:1，更優(yōu)選為10:1～8:1。所述多次沉降的次數(shù)優(yōu)選大于等于3次。

在本發(fā)明中，所述末端羧基化的聚乙二醇單甲醚、4-甲?；脚鹚犷l哪醇酯、異氰基丙炔酰胺的物質(zhì)的量比優(yōu)選為1:1～4:2～10，更優(yōu)選為1:1～4:4～8，最優(yōu)選為1:1.5:8。所述末端羧基化的聚乙二醇單甲醚、4-甲?；脚鹚犷l哪醇酯和異氰基丙炔酰胺在第二溶劑中反應的溫度優(yōu)選為60～100℃,更優(yōu)選為60～80℃，最優(yōu)選為65～70℃；所述末端羧基化的聚乙二醇單甲醚、4-甲?；脚鹚犷l哪醇酯和異氰基丙炔酰胺在第二溶劑中反應的時間優(yōu)選為1～7天，更優(yōu)選為3～5天，最優(yōu)選為3天。本發(fā)明優(yōu)選將末端羧基化的聚乙二醇單甲醚、4-甲酰基苯硼酸頻哪醇酯和異氰基丙炔酰胺在第二溶劑中反應得到的產(chǎn)物在過量的無水乙醚中沉降三次，抽干，得到(ii)結構的聚乙二醇單甲醚衍生物。

在本發(fā)明中，所述具有式(iii)結構的疊氮化雙脂肪酸甘油酯優(yōu)選按照以下方法制得：

將疊氮化甘油與脂肪酸在縮合劑和第三催化劑作用下，在第六溶劑中，縮合反應，得到具有式(iii)結構的疊氮化雙脂肪酸甘油酯；

其中，0≤n≤20。

在本發(fā)明中，所述縮合劑優(yōu)選選自1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺鹽酸鹽；所述三催化劑優(yōu)選為4-二甲氨基吡啶。所述第六溶劑優(yōu)選為二氯甲烷。在本發(fā)明中，所述縮合反應的溫度優(yōu)選為室溫；更優(yōu)選為10～30℃；所述縮合反應的時間優(yōu)選為24～96h，優(yōu)選為48～72h，最優(yōu)選為48h。所述疊氮化甘油與脂肪酸的物質(zhì)的量比優(yōu)選為1:2～1:20，更優(yōu)選為1:4～1:10。

在本發(fā)明中，所述疊氮化甘油優(yōu)選為3-疊氮-1,2-丙二醇；所述脂肪酸優(yōu)選為c2～c30的烷酸；更優(yōu)選為c2～c22的烷酸，最優(yōu)選選自乙酸、丙酸、正丁酸、正戊酸、正己酸、正庚酸、正辛酸、正壬酸、正十烷酸(癸酸)、正十一烷酸、正十二烷酸、正十三烷酸、正十四烷酸、正十五烷酸、正十六烷酸(軟脂酸)、正十七烷酸、正十八烷酸(硬脂酸)、正十九烷酸、正二十烷酸、正二十一烷酸和正二十二烷酸中的一種或多種。在本發(fā)明的具體實施例中，所述烷酸具體為丙酸、硬脂酸或正二十二酸。

具體的，具有式(iii)結構的疊氮化雙脂肪酸甘油酯的制備方法包括：

將3-氯-1,2-丙二醇和疊氮化鈉在水溶液中反應，得到3-疊氮-1,2-丙二醇；

將3-疊氮-1,2-丙二醇和烷酸、縮合劑、第三催化劑，溶解于第六溶劑中，縮合反應，得到具有式(iii)結構的疊氮化雙脂肪酸甘油酯。

本發(fā)明優(yōu)選將3-氯-1,2-丙二醇和疊氮化鈉在60～100℃下攪拌反應24～72h；將得到的反應產(chǎn)物冷卻至室溫，然后依次進行二氯甲烷萃取，飽和食鹽水洗兩次，無水硫酸鈉干燥，過濾、旋干，得到3-疊氮-1,2-丙二醇。所述3-氯-1,2-丙二醇和疊氮化鈉的物質(zhì)的量比優(yōu)選為1:4～20。

本發(fā)明優(yōu)選將3-疊氮-1,2-丙二醇和烷酸、縮合劑、第三催化劑，溶解于第六溶劑中室溫下攪拌反應后，依次進行以下后處理：加入稀鹽酸的飽和食鹽水洗滌兩次，再用飽和食鹽水洗滌一次，無水硫酸鎂干燥；過濾、旋干；過堿性al2o3柱子(有機溶劑沖洗)，以除去烷酸；旋干、抽真空干燥，得到疊氮化雙脂肪酸甘油酯。

在本發(fā)明中，所述聚乙二醇單甲醚衍生物(ii)和疊氮化雙脂肪酸甘油酯(iii)的摩爾比優(yōu)選為1.0～1.5：1，更優(yōu)選為1.2～1.4:1；

在本發(fā)明中，所述點擊化學反應的溫度優(yōu)選為15～80℃，更優(yōu)選為50～80℃，最優(yōu)選為60℃；所述點擊化學反應的時間優(yōu)選為12～96h，更優(yōu)選為12～48h，最優(yōu)選為24h。

具體的，所述peg化脂質(zhì)材料的合成路線，參見圖1，圖1為本發(fā)明提供的氧化響應性peg化脂質(zhì)材料的合成路線；由圖1可知：3-氯-1,2-丙二醇和過量的疊氮化鈉在水中80℃下攪拌反應48h，得到3-疊氮-1,2-丙二醇；3-疊氮-1,2-丙二醇和硬脂酸在干燥的二氯甲烷中，在縮合劑1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺鹽酸鹽和催化劑4-二甲氨基吡啶存在條件下，室溫攪拌反應48h得到疊氮化雙硬脂酸甘油酯；聚乙二醇單甲醚衍生物mpeg2k-pbpe-alkynyl和疊氮化雙硬脂酸甘油酯在四氫呋喃和水中，五水硫酸銅和抗壞血酸鈉作為催化劑，60℃攪拌反應24h，得到氧化響應性peg化脂質(zhì)材料mpeg2k-pbpe-dsa。

本發(fā)明提供了一種上述技術方案所述peg化脂質(zhì)材料或上述技術方案所述制備方法制備的peg化脂質(zhì)材料在藥物載體中的應用。本發(fā)明采用透析法用氧化響應性peg化脂質(zhì)材料包載模型藥物；所述模型藥物優(yōu)選選自塞來昔布。

本發(fā)明提供的peg化脂質(zhì)材料能夠在h2o2存在的環(huán)境中，苯硼酸酯發(fā)生氧化脫除，進一步發(fā)生quinone-methide重排反應，導致peg化脂質(zhì)材料的親水和疏水鏈段解離。因此，該peg化脂質(zhì)材料可用作氧化響應性藥物載體材料。另外，本發(fā)明提供的方法步驟簡單，易于操作，適于工業(yè)化生產(chǎn)。

為了進一步說明本發(fā)明，下面結合實施例對本發(fā)明提供的一種氧化響應性peg化脂質(zhì)材料、其制備方法及其應用進行詳細地描述，但不能將它們理解為對本發(fā)明保護范圍的限定。

實施例1

末端羧基化的聚乙二醇單甲醚的合成

稱取聚乙二醇單甲醚(分子量750)7.5g，丁二酸酐5g，4-二甲氨基吡啶244.3mg,量取二氯甲烷80ml，加入反應瓶中。室溫下攪拌48h。旋蒸掉部分溶劑，用無水乙醚沉降3次，得到mpeg0.75k-cooh。

實施例2：末端羧基化的聚乙二醇單甲醚的合成

稱取聚乙二醇單甲醚(分子量2000)20g，丁二酸酐5g，4-二甲氨基吡啶244.3mg,量取二氯甲烷120ml，加入反應瓶中。室溫下攪拌48h。旋蒸掉部分溶劑，用無水乙醚沉降3次，得到mpeg2k-cooh。

實施例3：末端羧基化的聚乙二醇單甲醚的合成

稱取聚乙二醇單甲醚(分子量5000)25g，丁二酸酐2.5g，4-二甲氨基吡啶122.15mg,量取二氯甲烷120ml，加入反應瓶中。室溫下攪拌48h。旋蒸掉部分溶劑，用無水乙醚沉降3次，得到mpeg5k-cooh。

實施例4：末端羧基化的聚乙二醇單甲醚的合成

稱取聚乙二醇單甲醚(分子量20000)20g，丁二酸酐0.5g，4-二甲氨基吡啶25mg,量取二氯甲烷120ml，加入反應瓶中。室溫下攪拌48h。旋蒸掉部分溶劑，用無水乙醚沉降3次，得到mpeg20k-cooh。

實施例5：異氰基丙炔酰胺的合成

稱取異氰基乙酸乙酯3.1g，丙炔胺1.1g，加入反應瓶中。室溫攪拌反應直至完全固化。所得固體用四氫呋喃溶解，在正己烷中沉降3次，得到的異氰基丙炔酰胺。

實施例6：式(ii)結構的聚乙二醇單甲醚衍生物的合成

稱取實施例1制備的mpeg0.75k-cooh1.5g，4-甲酰基苯硼酸頻哪醇酯666mg，實施例5制備的異氰基丙炔酰胺1.1g，溶解于30ml無水的四氫呋喃中。65℃下攪拌反應3天后，利用過量的乙醚沉降，抽真空干燥，得到mpeg0.75k-pbpe-alkynyl。

對上述得到的mpeg0.75k-pbpe-alkynyl進行檢測，結果表明，該mpeg0.75k-pbpe-alkynyl具有式(ii)結構。

實施例7：式(ii)結構的聚乙二醇單甲醚衍生物的合成

稱取實施例2制備的mpeg2k-cooh4g，4-甲?；脚鹚犷l哪醇酯666mg，異氰基丙炔酰胺1.1g，溶解于30ml無水的四氫呋喃中，65℃下攪拌反應3天后，利用過量的乙醚沉降，抽真空干燥，得到mpeg2k-pbpe-alkynyl。其合成路線見圖2，圖2為本發(fā)明實施例7制備的具有式(ii)結構的聚乙二醇單甲醚衍生物的合成路線。

對上述得到的mpeg2k-pbpe-alkynyl進行檢測，結果表明，該mpeg2k-pbpe-alkynyl具有式(ii)結構；

圖3為本發(fā)明對實施例7制備得到的mpeg2k-pbpe-alkynyl的核磁共振波譜圖；

圖4為本發(fā)明實施例7制備得到的mpeg2k-pbpe-alkynyl的基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時間質(zhì)譜圖；

圖5為本發(fā)明實施例7制備得到的mpeg2k-pbpe-alkynyl的凝膠滲透色譜圖。

實施例8：式(ii)結構的聚乙二醇單甲醚衍生物的合成

稱取mpeg5k-cooh10g，4-甲?；脚鹚犷l哪醇酯666mg，異氰基丙炔酰胺1.1g，溶解于30ml無水的四氫呋喃中，65℃下攪拌反應3天后，利用過量的乙醚沉降，抽真空干燥，得到mpeg5k-pbpe-alkynyl。

對上述得到的mpeg5k-pbpe-alkynyl進行檢測，結果表明，該mpeg5k-pbpe-alkynyl具有式(ii)結構。

實施例9：式(ii)結構的聚乙二醇單甲醚衍生物的合成

稱取mpeg20k-cooh4g，4-甲?；脚鹚犷l哪醇酯7mg，異氰基丙炔酰胺11mg，溶解于30ml無水的四氫呋喃中。65℃下攪拌反應3天后，利用過量的乙醚沉降，抽真空干燥，得到mpeg20k-pbpe-alkynyl。

對上述得到的mpeg20k-pbpe-alkynyl進行檢測，結果表明，該mpeg20k-pbpe-alkynyl具有式(ii)結構。

實施例10：3-疊氮-1,2-丙二醇的合成

稱取3-氯-1,2-丙二醇6.61g,疊氮化鈉6.2g，量取水25ml，加入反應瓶中。80℃下攪拌反應48h。冷卻至室溫，加入飽和食鹽水50ml，用二氯甲烷(80mlx3)萃取，飽和食鹽水洗兩次，無水硫酸鈉干燥。過濾、旋干，得到3-疊氮-1,2-丙二醇。

圖6為本發(fā)明實施例10制備得到的疊氮化甘油的核磁共振波譜圖；

實施例11：疊氮化雙丙酸甘油酯的合成

稱取實施例10制得的3-疊氮-1,2-丙二醇1.5g,丙酸2.1g，1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺鹽酸鹽7.68g，4-二甲氨基吡啶2.44g,溶解于200ml干燥的二氯甲烷中，室溫下攪拌48h后，用加入稀鹽酸的飽和食鹽水洗滌兩次，再用飽和食鹽水洗滌一次，無水硫酸鎂干燥。過濾、旋干。過堿性al2o3柱子(二氯甲烷沖洗)，以除去硬脂酸。旋干、抽真空干燥，得到疊氮化雙丙酸甘油酯。

實施例12：疊氮化雙硬脂酸甘油酯的合成

稱取實施例10制得的3-疊氮-1,2-丙二醇1.5g,硬脂酸8.09g，1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺鹽酸鹽7.68g，4-二甲氨基吡啶2.44g,溶解于200ml干燥的二氯甲烷中，室溫下攪拌48h后，用加入稀鹽酸的飽和食鹽水洗滌兩次，再用飽和食鹽水洗滌一次，無水硫酸鎂干燥。過濾、旋干。過堿性al2o3柱子(二氯甲烷沖洗)，以除去硬脂酸。旋干、抽真空干燥，得到疊氮化雙硬脂酸甘油酯。

圖7為本發(fā)明實施例12制備得到的疊氮化雙硬脂酸甘油酯的核磁共振波譜圖。

實施例13：疊氮化雙二十二酸甘油酯的合成

稱取實施例10制得的3-疊氮-1,2-丙二醇1.5g,正二十二酸9.67g，1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺鹽酸鹽7.68g，4-二甲氨基吡啶2.44g,溶解于200ml干燥的二氯甲烷中，室溫下攪拌48h后，用加入稀鹽酸的飽和食鹽水洗滌兩次，再用飽和食鹽水洗滌一次，無水硫酸鎂干燥。過濾、旋干。過堿性al2o3柱子(二氯甲烷沖洗)，以除去硬脂酸。旋干、抽真空干燥，得到疊氮化雙二十二酸甘油酯。

實施例14：氧化響應性peg化脂質(zhì)材料的合成

稱取240mg實施例6制得的mpeg0.75k-pbpe-alkynyl和78.35mg實施例11制得的疊氮化雙丙酸甘油酯，溶解于5ml四氫呋喃中，稱取5mg五水硫酸銅和8mg抗壞血酸鈉溶解于2.5ml去離子水中，將兩種溶液加入反應瓶中，反復凍融三次除去反應體系中的氧氣，60℃攪拌反應24h。反應結束后，將反應產(chǎn)物溶液然后透析、凍干。凍干物用無水乙醚沉降三次，抽干，得到mpeg0.75k-pbpe-dpa。

本實施例制備的pfg化脂質(zhì)材料具有氧化響應性，且能作為藥物載體，與實施例18的載藥效果類似。

實施例15：氧化響應性peg化脂質(zhì)材料的合成

稱取240mg實施例6制得的mpeg0.75k-pbpe-alkynyl和198mg實施例12制得的疊氮化雙硬脂酸甘油酯，溶解于5ml四氫呋喃中，稱取5mg五水硫酸銅和8mg抗壞血酸鈉溶解于2.5ml去離子水中，將兩種溶液加入反應瓶中，反復凍融三次除去反應體系中的氧氣，60℃攪拌反應24h。反應結束后，將反應產(chǎn)物溶液然后透析、凍干。凍干物用無水乙醚沉降三次，抽干，得到mpeg0.75k-pbpe-dsa。

本實施例制備的pfg化脂質(zhì)材料具有氧化響應性，且能作為藥物載體，與實施例18的載藥效果類似。

實施例16：氧化響應性peg化脂質(zhì)材料的合成

稱取240mg實施例6制得的mpeg0.75k-pbpe-alkynyl和323.22mg實施例13制得的疊氮化雙二十二酸甘油酯，溶解于5ml四氫呋喃中，稱取5mg五水硫酸銅和8mg抗壞血酸鈉溶解于2.5ml去離子水中，將兩種溶液加入反應瓶中，反復凍融三次除去反應體系中的氧氣，60℃攪拌反應24h。反應結束后，將反應產(chǎn)物溶液然后透析、凍干。凍干物用無水乙醚沉降三次，抽干，得到mpeg0.75k-pbpe-dba。

本實施例制備的pfg化脂質(zhì)材料具有氧化響應性，且能作為藥物載體，與實施例18的載藥效果類似。

實施例17：氧化響應性peg化脂質(zhì)材料的合成

稱取500mg實施例7制得的mpeg2k-pbpe-alkynyl和78.35mg實施例11制得的疊氮化雙丙酸甘油酯，溶解于8ml四氫呋喃中，稱取5mg五水硫酸銅和8mg抗壞血酸鈉溶解于4ml去離子水中，將兩種溶液加入反應瓶中，反復凍融三次除去反應體系中的氧氣，60℃攪拌反應24h。反應結束后，將反應產(chǎn)物溶液然后透析、凍干。凍干物用無水乙醚沉降三次，抽干，得到mpeg2k-pbpe-dpa。

本實施例制備的pfg化脂質(zhì)材料具有氧化響應性，且能作為藥物載體，與實施例18的載藥效果類似。

實施例18：氧化響應性peg化脂質(zhì)材料的合成

稱取500mg實施例7制得的mpeg2k-pbpe-alkynyl和198mg實施例12制得的疊氮化雙硬脂酸甘油酯，溶解于8ml四氫呋喃中，稱取5mg五水硫酸銅和8mg抗壞血酸鈉溶解于4ml去離子水中，將兩種溶液加入反應瓶中，反復凍融三次除去反應體系中的氧氣，60℃攪拌反應24h。反應結束后，將反應產(chǎn)物溶液然后透析、凍干。凍干物用無水乙醚沉降三次，抽干，得到mpeg2k-pbpe-dsa。

圖8為本發(fā)明實施例18制備得到的mpeg2k-pbpe-dsa的核磁共振波譜圖；

圖9為本發(fā)明實施例18制備得到的mpeg2k-pbpe-alkynyl和本發(fā)明實施例15制備得到的mpeg2k-pbpe-dsa的凝膠滲透色譜圖；

稱取上述制得的mpeg2k-pbpe-dsa25mg，塞來昔布2.5mg，將二者溶解于2ml四氫呋喃中，將上述混合溶液滴加于15ml去離子水中，攪拌2h。將溶液移至透析袋，用去離子水透析24h，定容，得到mpeg2k-pbpe-dsa包載塞來昔布形成的納米膠束溶液。

利用動態(tài)光散射測量該peg2k-pbpe-dsa包載塞來昔布形成的納米膠束的粒徑，測量儀器為wyattdawneos準彈性光散射儀，光源為垂直偏振的氦-氖激光器，散射角固定在90°，測量結果如圖10所示；圖10為本發(fā)明實施例18制備得到的mpeg2k-pbpe-dsa包載塞來昔布形成的納米膠束的動態(tài)光散射圖；通過圖10可以看出，該納米膠束的流體力學半徑為43±1.5nm。透射電鏡(tem)結果見圖11，圖11為本發(fā)明實施例18制備得到的mpeg2k-pbpe-dsa包載塞來昔布形成的納米膠束的透射電子顯微鏡圖；圖11進一步證明了，所得納米粒子為球形結構，具有比較均一的粒徑，且粒徑大小在90nm左右。

該實施例制備的氧化響應性peg化脂質(zhì)材料的載藥量為5.12％，包封率為54％。

實施例19：氧化響應性peg化脂質(zhì)材料的合成

稱取500mg實施例7制得的mpeg2k-pbpe-alkynyl和323.22mg實施例13制得的疊氮化雙二十二酸甘油酯，溶解于8ml四氫呋喃中，稱取5mg五水硫酸銅和8mg抗壞血酸鈉溶解于4ml去離子水中，將兩種溶液加入反應瓶中，反復凍融三次除去反應體系中的氧氣，60℃攪拌反應24h。反應結束后，將反應產(chǎn)物溶液然后透析、凍干。凍干物用無水乙醚沉降三次，抽干，得到mpeg2k-pbpe-dba。

本實施例制備的pfg化脂質(zhì)材料具有氧化響應性，且能作為藥物載體，與實施例18的載藥效果類似。

實施例20：氧化響應性peg化脂質(zhì)材料的合成

稱取1.25g實施例8制得的mpeg5k-pbpe-alkynyl和78.35mg實施例11制得的疊氮化雙丙酸甘油酯，溶解于15ml四氫呋喃中，稱取5mg五水硫酸銅和8mg抗壞血酸鈉溶解于7.5ml去離子水中，將兩種溶液加入反應瓶中，反復凍融三次除去反應體系中的氧氣，60℃攪拌反應24h。反應結束后，將反應產(chǎn)物溶液然后透析、凍干。凍干物用無水乙醚沉降三次，抽干，得到mpeg5k-pbpe-dpa。

本實施例制備的pfg化脂質(zhì)材料具有氧化響應性，且能作為藥物載體，與實施例18的載藥效果類似。

實施例21：氧化響應性peg化脂質(zhì)材料的合成

稱取1.25g實施例8制得的mpeg5k-pbpe-alkynyl和198mg實施例12制得的疊氮化雙硬脂酸甘油酯，溶解于15ml四氫呋喃中，稱取5mg五水硫酸銅和8mg抗壞血酸鈉溶解于7.5ml去離子水中，將兩種溶液加入反應瓶中，反復凍融三次除去反應體系中的氧氣，60℃攪拌反應24h。反應結束后，將反應產(chǎn)物溶液然后透析、凍干。凍干物用無水乙醚沉降三次，抽干，得到mpeg5k-pbpe-dsa。

本實施例制備的pfg化脂質(zhì)材料具有氧化響應性，且能作為藥物載體，與實施例18的載藥效果類似。

實施例22：氧化響應性peg化脂質(zhì)材料的合成

稱取1.25g實施例8制得的mpeg5k-pbpe-alkynyl和323.22mg實施例13制得的疊氮化雙二十二酸甘油酯，溶解于15ml四氫呋喃中，稱取5mg五水硫酸銅和8mg抗壞血酸鈉溶解于7.5ml去離子水中，將兩種溶液加入反應瓶中，反復凍融三次除去反應體系中的氧氣，60℃攪拌反應24h。反應結束后，將反應產(chǎn)物溶液然后透析、凍干。凍干物用無水乙醚沉降三次，抽干，得到mpeg5k-pbpe-dba。

本實施例制備的pfg化脂質(zhì)材料具有氧化響應性，且能作為藥物載體，與實施例18的載藥效果類似。

實施例23：氧化響應性peg化脂質(zhì)材料的合成

稱取5g實施例9制得的mpeg20k-pbpe-alkynyl和7.05mg實施例11制得的疊氮化雙丙酸甘油酯，溶解于20ml四氫呋喃中，稱取5mg五水硫酸銅和8mg抗壞血酸鈉溶解于10ml去離子水中，將兩種溶液加入反應瓶中，反復凍融三次除去反應體系中的氧氣，60℃攪拌反應24h。反應結束后，將反應產(chǎn)物溶液然后透析、凍干。凍干物用無水乙醚沉降三次，抽干，得到mpeg20k-pbpe-dpa。

本實施例制備的pfg化脂質(zhì)材料具有氧化響應性，且能作為藥物載體，與實施例18的載藥效果類似。

實施例24：氧化響應性peg化脂質(zhì)材料的合成

稱取5g實施例9制得的mpeg20k-pbpe-alkynyl和20mg實施例12制得的疊氮化雙硬脂酸甘油酯，溶解于20ml四氫呋喃中，稱取5mg五水硫酸銅和8mg抗壞血酸鈉溶解于10ml去離子水中，將兩種溶液加入反應瓶中，反復凍融三次除去反應體系中的氧氣，60℃攪拌反應24h。反應結束后，將反應產(chǎn)物溶液然后透析、凍干。凍干物用無水乙醚沉降三次，抽干，得到mpeg20k-pbpe-dsa。

本實施例制備的pfg化脂質(zhì)材料具有氧化響應性，且能作為藥物載體，與實施例18的載藥效果類似。

實施例25：氧化響應性peg化脂質(zhì)材料的合成

稱取5g實施例9制得的mpeg20k-pbpe-alkynyl和1.13g實施例13制得的疊氮化雙二十二酸甘油酯，溶解于20ml四氫呋喃中，稱取5mg五水硫酸銅和8mg抗壞血酸鈉溶解于10ml去離子水中，將兩種溶液加入反應瓶中，反復凍融三次除去反應體系中的氧氣，60℃攪拌反應24h。反應結束后，將反應產(chǎn)物溶液然后透析、凍干。凍干物用無水乙醚沉降三次，抽干，得到mpeg20k-pbpe-dba。

本實施例制備的pfg化脂質(zhì)材料具有氧化響應性，且能作為藥物載體，與實施例18的載藥效果類似。

由以上實施例可知，本發(fā)明提供了一種peg化脂質(zhì)材料，具有式(i)結構。該材料具有氧化響應性，且能作為藥物載體。實驗結果表明：該材料具有兩親性，能夠在h2o2存在的環(huán)境中，苯硼酸酯發(fā)生氧化脫除，進一步發(fā)生quinone-methide重排反應，導致peg化脂質(zhì)材料的親水和疏水鏈段解離；且該材料包載塞來昔布自組裝形成納米膠束，納米粒子的粒徑為90nm左右，納米膠束的流體力學半徑為43±1.5nm；包封率為54％，載藥量為5.4％。

以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實施方式，應當指出，對于本技術領域的普通技術人員來說，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以做出若干改進和潤飾，這些改進和潤飾也應視為本發(fā)明的保護范圍。