本發(fā)明屬于培養(yǎng)基領(lǐng)域，具體涉及高效培養(yǎng)雞鼻炎副雞嗜血桿菌培養(yǎng)基，還涉及培養(yǎng)基的制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)：

副雞嗜血桿菌為革蘭氏陰性桿菌，是重要的條件致病菌和醫(yī)源性感染菌之一。由其引起的雞鼻炎副雞嗜血桿菌病是危害雞、火雞和山雞等家禽和野禽的一種接觸性傳染病。該病發(fā)病率和死亡率通常在10～30％，但有的雞場感染雞鼻炎副雞嗜血桿菌的病雞死亡率高達(dá)75％。一旦某地區(qū)的雞群發(fā)生雞鼻炎副雞嗜血桿菌感染，該病就會成為地方性疾病，很難徹底根除，并且經(jīng)常反復(fù)爆發(fā)，帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失。雞鼻炎副雞嗜血桿菌感染以引起慢性萎縮性鼻炎，有惡臭，以及敗血癥、泌尿系感染等為主要病理特征，在病理學(xué)上很難與其它細(xì)菌性鼻炎感染進(jìn)行區(qū)別。所以為了防治副雞嗜血桿菌感染，需要對副雞嗜血桿菌進(jìn)行培養(yǎng)。但是現(xiàn)有的培養(yǎng)雞鼻炎副雞嗜血桿菌培養(yǎng)基，其成分包括價格昂貴且不好制備的無菌雞血清，其制備方法復(fù)雜且成本高。因此，急需一種培養(yǎng)效果好，成本低的培養(yǎng)雞鼻炎副雞嗜血桿菌培養(yǎng)基。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

有鑒于此，本發(fā)明的目的之一在于提供一種高效培養(yǎng)雞鼻炎副雞嗜血桿菌培養(yǎng)基，配方科學(xué)合理，以雞胚尿囊液代替血清，有利于培養(yǎng)雞鼻炎副雞嗜血桿菌培養(yǎng)基的生長；本發(fā)明的目的之二在于提供高效培養(yǎng)雞鼻炎副雞嗜血桿菌培養(yǎng)基的制備方法；本發(fā)明的目的之三在于提供高效培養(yǎng)雞鼻炎副雞嗜血桿菌培養(yǎng)基的應(yīng)用。

為達(dá)到上述目的，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：

1、高效培養(yǎng)雞鼻炎副雞嗜血桿菌培養(yǎng)基，包括如下組分：無菌雞胚尿囊液0.1-2.0g/l，酵母浸粉0.1-2.0g/l，酪蛋白水解物0.1-2.0g/l，溶劑為水，ph值為7.1～7.5。

優(yōu)選的，包括如下組分：無菌雞胚尿囊液0.2g/l，酵母浸粉0.6g/l，酪蛋白水解物0.6g/l，溶劑為水，ph值為7.1。

優(yōu)選的，包括如下組分：無菌雞胚尿囊液0.1g/l，酵母浸粉0.5g/l，酪蛋白水解物0.5g/l，溶劑為水，ph值為7.2。

優(yōu)選的，包括如下組分：無菌雞胚尿囊液1g/l，酵母浸粉1g/l，酪蛋白水解物0.8g/l，溶劑為水，ph值為7.3。

優(yōu)選的，包括如下組分：無菌雞胚尿囊液0.8g/l，酵母浸粉0.9g/l，酪蛋白水解物0.9g/l，溶劑為水，ph值為7.5。

2.所述高效培養(yǎng)雞鼻炎副雞嗜血桿菌培養(yǎng)基的制備方法，包括如下步驟，按配比取酵母浸粉和酪蛋白水解物，然后溶于配比量的水中，混勻，121℃高壓滅菌20-30分鐘，待自然降溫到30℃以下時，無菌條件下按比例加入無菌雞胚尿囊液，調(diào)節(jié)ph值至7.1～7.5。

3.所述高效培養(yǎng)雞鼻炎副雞嗜血桿菌培養(yǎng)基在高效培養(yǎng)雞鼻炎副雞嗜血桿菌中的應(yīng)用。

本發(fā)明的有益效果在于：本發(fā)明公開了高效培養(yǎng)雞鼻炎副雞嗜血桿菌液體培養(yǎng)基及其制備方法和應(yīng)用，該培養(yǎng)基能保證雞鼻炎副雞嗜血桿菌良好生長的條件下，能大大降低成本，配方更簡單、更科學(xué)合理，為高效培養(yǎng)雞鼻炎副雞嗜血桿菌創(chuàng)造了適宜的生長環(huán)境，與市售的其他培養(yǎng)基相比，不僅成本降低20％-30％，而且長出的雞鼻炎副雞嗜血桿菌菌體個數(shù)提高了5％-500％，能夠廣泛用于雞鼻炎副雞嗜血桿菌的培養(yǎng)。

附圖說明

為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案和有益效果更加清楚，本發(fā)明提供如下附圖進(jìn)行說明：

圖1為實施例5培養(yǎng)雞鼻炎副雞嗜血桿菌計數(shù)結(jié)果圖。

圖2為對比實施例1培養(yǎng)雞鼻炎副雞嗜血桿菌計數(shù)結(jié)果圖。

圖3為實施例6培養(yǎng)雞鼻炎副雞嗜血桿菌計數(shù)結(jié)果圖。

圖4為對比實施例1培養(yǎng)雞鼻炎副雞嗜血桿菌計數(shù)結(jié)果圖。

具體實施方式

下面將結(jié)合附圖，對本發(fā)明的優(yōu)選實施例進(jìn)行詳細(xì)的描述。實施例中未注明具體條件的實驗方法，通常按照常規(guī)條件或按照制造廠商所建議的條件。

實施例1

高效培養(yǎng)雞鼻炎副雞嗜血桿菌液體培養(yǎng)基，其配方如下：無菌雞胚尿囊液0.2g/l，酵母浸粉0.6g/l，酪蛋白水解物0.6g/l，溶劑為水。

高效培養(yǎng)雞鼻炎副雞嗜血桿菌液體培養(yǎng)基的制備方法，取0.6g酵母浸粉和0.6g酪蛋白水解物溶解于1l蒸餾水中，混勻，121℃高壓滅菌20-30分鐘，待自然降溫到30℃以下時，無菌加入無菌雞胚尿囊液0.2g，調(diào)節(jié)ph值為7.1。

實施例2

高效培養(yǎng)雞鼻炎副雞嗜血桿菌液體培養(yǎng)基，其配方如下：無菌雞胚尿囊液0.1g/l，酵母浸粉0.5g/l，酪蛋白水解物0.5g/l，溶劑為水。

高效培養(yǎng)雞鼻炎副雞嗜血桿菌液體培養(yǎng)基的制備方法，取0.5g酵母浸粉和0.5g酪蛋白水解物溶解于1l蒸餾水中，混勻，121℃高壓滅菌20-30分鐘，待自然降溫到30℃以下時，無菌加入無菌雞胚尿囊液0.1g，調(diào)節(jié)ph值為7.2。

實施例3

高效培養(yǎng)雞鼻炎副雞嗜血桿菌液體培養(yǎng)基，其配方如下：無菌雞胚尿囊液1g/l，酵母浸粉1g/l，酪蛋白水解物0.8g/l，溶劑為水。

高效培養(yǎng)雞鼻炎副雞嗜血桿菌液體培養(yǎng)基的制備方法，取1g酵母浸粉和0.8g酪蛋白水解物溶解于1l蒸餾水中，混勻，121℃高壓滅菌20-30分鐘，待自然降溫到30℃以下時，無菌加入無菌雞胚尿囊液1g，調(diào)節(jié)ph值為7.3。

實施例4

高效培養(yǎng)雞鼻炎副雞嗜血桿菌液體培養(yǎng)基，其配方如下：無菌雞胚尿囊液0.8g/l，酵母浸粉0.9g/l，酪蛋白水解物0.9g/l，溶劑為水。

高效培養(yǎng)雞鼻炎副雞嗜血桿菌液體培養(yǎng)基的制備方法，取0.9g酵母浸粉和0.9g酪蛋白水解物溶解于1l蒸餾水中，混勻，121℃高壓滅菌20-30分鐘，待自然降溫到30℃以下時，無菌加入無菌雞胚尿囊液0.8g，調(diào)節(jié)ph值為7.5。

實施例5

利用實施例2中制得的高效培養(yǎng)雞鼻炎副雞嗜血桿菌培養(yǎng)基培養(yǎng)雞鼻炎副雞嗜血桿菌，具體步驟如下：

取雞鼻炎副雞嗜血桿菌1ml液體接種于實施例2獲得的高效培養(yǎng)雞鼻炎副雞嗜血桿菌液體培養(yǎng)基中，在30-37℃條件下培養(yǎng)3天后瓊脂平板培養(yǎng)計數(shù)，結(jié)果如圖1所示。結(jié)果顯示，雞鼻炎副雞嗜血桿菌在實施例2制得的培養(yǎng)基中快速繁殖。

對比實施例1

利用市售的雞鼻炎副雞嗜血桿菌液體培養(yǎng)基，各組分及制備方法如下：

牛肉浸出液1000ml，蛋白胨10g，氯化鈉5g和無菌脫纖維羊血或兔血60ml。

按照實施例5的方法培養(yǎng)雞鼻炎副雞嗜血桿菌，結(jié)果如圖2所示。

結(jié)果顯示，利用實施例2制得的培養(yǎng)雞鼻炎副雞嗜血桿菌液體培養(yǎng)基長出的菌落數(shù)高于市售培養(yǎng)基的，高約50％，表明本發(fā)明獲得的培養(yǎng)雞鼻炎副雞嗜血桿菌液體培養(yǎng)基有利于培養(yǎng)雞鼻炎副雞嗜血桿菌的生長，并且成本更低，低20％-30％。

實施例6

利用實施例1中制得的培養(yǎng)雞鼻炎副雞嗜血桿菌液體培養(yǎng)基培養(yǎng)雞鼻炎副雞嗜血桿菌，本實施例使用固體培養(yǎng)基，具體方法如下：

取雞鼻炎副雞嗜血桿菌接種于培養(yǎng)雞鼻炎副雞嗜血桿菌液體培養(yǎng)基，在30-37℃條件下培養(yǎng)3天后瓊脂平板培養(yǎng)計數(shù)，進(jìn)行四區(qū)劃線培養(yǎng)，在20-30℃培養(yǎng)2天，結(jié)果如圖3所示。結(jié)果顯示，雞鼻炎副雞嗜血桿菌在實施例1制得的培養(yǎng)基上長出大量菌落，表明本發(fā)明制得的培養(yǎng)基適合雞鼻炎副雞嗜血桿菌生長。

對比實施例2

利用市售的雞鼻炎副雞嗜血桿菌液體培養(yǎng)基，各組分及濃度如下：牛肉浸出液1000ml，蛋白胨10g，氯化鈉5g，無菌脫纖維羊血或兔血60ml。

按照實施例5的方法培養(yǎng)雞鼻炎副雞嗜血桿菌進(jìn)行計數(shù)，結(jié)果如圖4所示。

結(jié)果顯示，利用實施例1制得的培養(yǎng)雞鼻炎副雞嗜血桿菌培養(yǎng)基長出的菌落數(shù)高于市售培養(yǎng)基，高約10％，表明本發(fā)明獲得的培養(yǎng)雞鼻炎副雞嗜血桿菌培養(yǎng)基有利于雞鼻炎副雞嗜血桿菌培養(yǎng)基的生長，并且成本更低，低20％-30％。

實施例3和4制得培養(yǎng)雞鼻炎副雞嗜血桿菌培養(yǎng)基與實施例1和2相似，菌落數(shù)分別高于市售培養(yǎng)基的8％和12％。

本發(fā)明中，無菌雞胚尿囊液0.1-2.0g/l，酵母浸粉0.1-2.0g/l，酪蛋白水解物0.1-2.0g/l，溶劑為水，ph值為7.1～7.5，均可實現(xiàn)發(fā)明目的。

由此可知，本發(fā)明制得的培養(yǎng)雞鼻炎副雞嗜血桿菌培養(yǎng)基是一個高效低成本的培養(yǎng)基，更有利于培養(yǎng)雞鼻炎副雞嗜血桿菌培養(yǎng)基的生長。

最后說明的是，以上優(yōu)選實施例僅用以說明本發(fā)明的技術(shù)方案而非限制，盡管通過上述優(yōu)選實施例已經(jīng)對本發(fā)明進(jìn)行了詳細(xì)的描述，但本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以在形式上和細(xì)節(jié)上對其作出各種各樣的改變，而不偏離本發(fā)明權(quán)利要求書所限定的范圍。