本發(fā)明涉及藥物，具體涉及一種tirzepatide的純化方法。

背景技術：

1、2型糖尿病(t2dm)患者經(jīng)?；加懈鞣N合并癥，包括認知問題，如認知減退、認知損害或癡呆。糖尿病患者出現(xiàn)認知減退、輕度認知損害或癡呆的可能性是未患病人群的1.5至2倍。這種關系不依賴于認知功能障礙的其它危險因素，并在65～74歲糖尿病患者中造成13％的患病率和在75歲或以上的患者中造成24％的患病率。尚未確定糖尿病患者中的認知功能障礙的高風險的單一原因。已經(jīng)提出并且正在研究某些糖尿病療法(包括胰高血糖素樣肽-1(glp-1)受體激動劑)可能對認知功能有益的可能性。

2、2型糖尿病(t2dm)患者具有發(fā)生射血分數(shù)保留型心力衰竭(hfpef)以及射血分數(shù)降低型心力衰竭(hfref)的風險。參見例如j.ho等人,predictors?ofnew-onsetheartfailure；circulation:heartfailure?6:279-286(2013)。目前對hfpef的治療可能包括改變生活方式以引起體重減輕和施用共病狀況的癥狀緩解藥劑。減肥手術對hfpef患者顯示出一些益處。參見例如mikhalkova等人,obesity(2018)。盡管hfpef的發(fā)病率不斷增加，但有效的治療選擇基本不太成功。

3、tirzepatide是一種gip和glp-1雙激動劑，tirzepatide可改善β細胞功能、提高胰島素的敏感性，從而證明了其療效；tirzepatide對初始使用劑量較低且后續(xù)劑量遞增幅度較小的患者顯示出療效和耐受性的雙重改善；使用tirzepatide治療8周后，日本2型糖尿病患者的aic和體重出現(xiàn)明顯降低；tirzepatide可對2型糖尿病患者的非酒精性脂肪性肝炎(nash，肝臟炎癥和肝臟脂肪引起的細胞損傷)的標志物帶來改善?！斑@些新的tirzepatide數(shù)據(jù)是建立在迄今為止對2型糖尿病患者開展的研究的陽性結果之上的，這些結果提供了額外的證據(jù)，證明了tirzepatide對2型糖尿病患者的aic和體重水平可帶來有意義的降低，同時該藥也可治療其他代謝類疾病。

4、現(xiàn)有合成過程中存在的純度低，雜質難以控制在0.10％以下，收率低，操作步驟繁瑣，不利于工業(yè)化生產(chǎn)的問題，所以提供一種新的tirzepatide的純化方法，用于提高了精肽純度，簡化了純化步驟，利于進行工業(yè)化放大生產(chǎn)是非常有必要的。

技術實現(xiàn)思路

1、以上的技術存在純化效果不理想，消旋雜質控制不力，或純化步驟繁瑣等缺點。有鑒于此，本發(fā)明為了解決上述的難題，提供了一種解決方案，通過反相純化1、反相純化2、轉鹽純化和噴霧干燥得到精制的tirzepatide精肽。該方案能夠得到純度≥99.0％，單雜≤0.10％的tirzepatide精肽。且單次上樣量高，生產(chǎn)周期短，廢液量少，有利于環(huán)保。

2、為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術方案如下：

3、本發(fā)明提供一種tirzepatide的純化方法，包括以下步驟：(1)以氨水溶解粗肽并過濾，然后上樣至制備柱中；(2)以流動相a1和流動相b進行一步純化，得到純度＞95％的樣品；其中，所述流動相a1經(jīng)過堿液調節(jié)ph；(3)以流動相a2和流動相b進行二步純化，得到純度＞99％，單雜＜0.10％的樣品；其中，所述流動相a2經(jīng)過堿液調節(jié)ph；(4)以流動相a3和流動相b轉為銨鹽，進行噴霧干燥處理，得到固體的tirzepatide。需要說明的是，在步驟(4)中，轉鹽合格的餾分無需濃縮，直接進行噴霧干燥處理即可得到tirzepatide精品。

4、進一步的，所述制備柱的內裝填料為反相的c18、c8或c4中的任意一種。

5、進一步的，所述制備柱的內裝填料的粒徑為5μm～10μm，填料的孔徑為5nm～30nm。填料的孔徑為5nm～30nm，即

6、進一步的，上樣量為填料質量的0.5％～5.0％；作為優(yōu)選，上樣量為填料重量的1.0％～3.0％。

7、進一步的，步驟(2)～(4)中，所述流動相b為乙腈、甲醇、異丙醇中的一種或多種。

8、進一步的，步驟(2)中，所述流動相a1為tfa(三氟乙酸，trifluoroacetic?acid)鹽緩沖液，所用的tfa的濃度為0.01％～2％；調節(jié)ph的堿液為氫氧化鈉、氫氧化鉀、氨水中的任意一種或多種，調節(jié)ph的范圍為7.0～9.0。

9、進一步的，步驟(3)中，所述流動相a2為醋酸緩沖液，所用的醋酸的濃度為0.01％～2％；調節(jié)ph的堿液為氫氧化鈉、氫氧化鉀、氨水中的任意一種或多種，調節(jié)ph的范圍為7.0～9.0。

10、進一步的，步驟(4)中，所述流動相a3為氨水，所用氨水的濃度為0.01％～2％。

11、相較于現(xiàn)有技術，本發(fā)明提供的技術方案至少具有以下優(yōu)點：

12、本發(fā)明提供一種新的tirzepatide的純化方法，該純化方法在反相色譜上，通過兩步純化即可將單個雜質控制0.10％以內，同時在反相色譜上轉為銨鹽，無需額外的離子交換色譜柱，所使用的溶劑簡單，均在高于tirzepatide等電點的范圍內進行純化，不會因跨越等電點而導致tirzepatide析出。

技術特征：

1.一種tirzepatide的純化方法，其特征在于，包括以下步驟：

2.根據(jù)權利要求1所述的tirzepatide的純化方法，其特征在于，所述制備柱的內裝填料為反相的c18、c8或c4中的任意一種。

3.根據(jù)權利要求1所述的tirzepatide的純化方法，其特征在于，所述制備柱的內裝填料的粒徑為5μm～10μm，填料的孔徑為5nm～30nm。

4.根據(jù)權利要求2或3所述的tirzepatide的純化方法，其特征在于，上樣量為填料質量的0.5％～5.0％；作為優(yōu)選，上樣量為填料重量的1.0％～3.0％。

5.根據(jù)權利要求1所述的tirzepatide的純化方法，其特征在于，步驟(2)～(4)中，所述流動相b為乙腈、甲醇、異丙醇中的一種或多種。

6.根據(jù)權利要求1所述的tirzepatide的純化方法，其特征在于，步驟(2)中，所述流動相a1為tfa(三氟乙酸，trifluoroaceticacid)鹽緩沖液，所用的tfa的濃度為0.01％～2％；

7.根據(jù)權利要求1所述的tirzepatide的純化方法，其特征在于，步驟(3)中，所述流動相a2為醋酸緩沖液，所用的醋酸的濃度為0.01％～2％；

8.根據(jù)權利要求1所述的tirzepatide的純化方法，其特征在于，步驟(4)中，所述流動相a3為氨水，所用氨水的濃度為0.01％～2％。

技術總結
本發(fā)明提供一種Tirzepatide的純化方法，包括以下步驟：(1)以氨水溶解粗肽并過濾，然后上樣至制備柱中；(2)以流動相A1和流動相B進行一步純化，得到純度＞95％的樣品；其中，所述流動相A1經(jīng)過堿液調節(jié)pH；(3)以流動相A2和流動相B進行二步純化，得到純度＞99％，單雜＜0.10％的樣品；其中，所述流動相A2經(jīng)過堿液調節(jié)pH；(4)以流動相A3和流動相B轉為銨鹽，進行噴霧干燥處理，得到固體的Tirzepatide。本發(fā)明提供的純化方法通過反相純化1、反相純化2、轉鹽純化和噴霧干燥得到精制的Tirzepatide精肽。該方案能夠得到純度≥99.0％，單雜≤0.10％的醋酸鹽樣品。且單次上樣量高，生產(chǎn)周期短，廢液量少，有利于環(huán)保。

技術研發(fā)人員：姜緒邦,袁斌,羅兆城,尹傳龍
受保護的技術使用者：深圳翰宇藥業(yè)股份有限公司
技術研發(fā)日：
技術公布日：2025/1/2