本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥領域，具體而言，本發(fā)明涉及一種能夠抑制細胞周期蛋白依賴性激酶4(cdk4)表達的sirna、shrna及其綴合物以及含它們的藥物組合物，以及它們制備方法和應用。

背景技術：

1、細胞分裂失調引起的細胞增殖異常是腫瘤標志性特征之一，因此，識別并阻斷細胞分裂的相關靶點是腫瘤治療的一個重要方向。真核細胞的分裂遵循著一個高度保守的過程，即細胞周期。細胞周期的每一個步驟都必須在相關信號檢查點的控制下依次進行，從細胞周期的一個步驟進行到下一個步驟是由周期蛋白依賴性激酶(cyclin-dependentkinases,cdks)控制的，cdks在與周期蛋白(cyclins)發(fā)生相互作用時被激活。研究發(fā)現(xiàn)敲除cdk4基因可以抑制腫瘤細胞生長，而不會對正常細胞生長造成影響，因此，基于這些特性，使得cdk4成為腫瘤治療極具臨床潛力且安全的靶點。

2、目前，臨床上多種cdk4小分子抑制劑得以使用，如哌柏西利(palbociclib)、瑞博西尼(ribociclib)和阿貝西尼(abemaciclib)等，盡管cdk4抑制劑極大改善了對hr陽性乳腺癌患者的疾病控制，但并非所有患者都對這些藥物有效，而且大多數(shù)癌癥患者在使用cdk4小分子抑制劑后都會出現(xiàn)獲得性耐藥的現(xiàn)象，并且還是有一定的不良反應，包括了中性粒細胞減少癥、血小板減少癥、腹瀉、肝腎損傷、靜脈血栓等。

3、elbashir等人在2001年發(fā)現(xiàn)sirna可特異性的同序列互補的靶mrna結合，并使其降解；同時研究發(fā)現(xiàn)體外化學合成的sirna進入細胞后也同樣發(fā)揮作用，靶mrna進行降解，而且有效降低了長鏈rna引起的免疫反應。目前已有五種sirna獲得歐美市場準入，充分說明了該治療方法的可行性。因此，針對癌癥中過度活躍表達的cdk4設計sirna，特異性降低其mrna的表達，從而恢復腫瘤細胞周期的正常調控，阻斷腫瘤細胞的dna合成和增殖，達到腫瘤治療的效果。

技術實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明提供一種能夠特異性抑制細胞周期蛋白依賴性激酶4(cdk4)表達的sirna、shrna及其綴合物以及它們的鹽，以及其藥物組合物。它們能夠特異性靶向腫瘤細胞，從而實現(xiàn)其的組織特異性遞送，實現(xiàn)腫瘤的治療。

2、一方面，本發(fā)明提供了一種sirna或其鹽，所述sirna含有正義鏈和反義鏈，所述sirna中的每個核苷酸各自獨立地為修飾或未修飾的核苷酸，其中，所述正義鏈含有核苷酸序列i，所述反義鏈含有核苷酸序列ii，所述核苷酸序列i和所述核苷酸序列ii至少部分地反相互補形成雙鏈區(qū)，所述核苷酸序列i和所述核苷酸序列ii選自如下(1)-(60)所示序列中的一組：

3、(1)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:2任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:22任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

4、gaugaagguaauccggaguga(seq?id?no:2)

5、ucacuccggauuaccuucauc(seq?id?no:22)；

6、(2)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:3任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:23任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

7、gaugacuggccucgagaugua(seq?id?no:3)

8、uacaucucgaggccagucauc(seq?id?no:23)；

9、(3)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:4任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:24任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

10、ggacacugagagggcaaucuu(seq?id?no:4)

11、aagauugcccucucagugucc(seq?id?no:24)；

12、(4)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:5任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:25任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

13、ggaucugaugcgccaguuucu(seq?id?no:5)

14、agaaacuggcgcaucagaucc(seq?id?no:25)；

15、(5)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:6任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:26任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

16、gucccuuucccuaccuuuaua(seq?id?no:6)

17、uauaaagguagggaaagggac(seq?id?no:26)；

18、(6)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:7任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:27任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

19、ggcugaaauuggugucggugc(seq?id?no:7)

20、gcaccgacaccaauuucagcc(seq?id?no:27)；

21、(7)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:8任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:28任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

22、guggaaacucugaagccgacc(seq?id?no:8)

23、ggucggcuucagaguuuccac(seq?id?no:28)；

24、(8)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:9任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:29任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

25、gucugugccacaucccgaacu(seq?id?no:9)

26、aguucgggauguggcacagac(seq?id?no:29)；

27、(9)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:10任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:30任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

28、ggcuuugccauugugcgauuu(seq?id?no:10)

29、aaaucgcacaauggcaaagcc(seq?id?no:30)；

30、(10)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:11任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:31任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

31、gccuauaaucccagcacguug(seq?id?no:11)

32、caacgugcugggauuauaggc(seq?id?no:31)；

33、(11)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:12任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:12任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

34、uggcuuugccauugugcgauu(seq?id?no:12)

35、aaucgcacaauggcaaagcca(seq?id?no:32)；

36、(12)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:13任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:33任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

37、auggcacuuacacccgugguu(seq?id?no:13)

38、aaccacggguguaagugccau(seq?id?no:33)；

39、(13)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:14任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:34任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

40、ucccaucagcacaguucguga(seq?id?no:14)

41、ucacgaacugugcugauggga(seq?id?no:34)；

42、(14)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:15任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:35任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

43、cugagaauggcuaccucucga(seq?id?no:15)

44、ucgagagguagccauucucag(seq?id?no:35)；

45、(15)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:16任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:36任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

46、gagaauggcuaccucucgaua(seq?id?no:16)

47、uaucgagagguagccauucuc(seq?id?no:36)；

48、(16)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:17任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:37任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

49、gagcaagacucugugucaaaa(seq?id?no:17)

50、uuuugacacagagucuugcuc(seq?id?no:37)；

51、(17)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:18任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:38任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

52、caggaaaaacaaaacaaagaa(seq?id?no:18)

53、uucuuuguuuuguuuuuccug(seq?id?no:38)；

54、(18)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:19任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:39任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

55、acaggaaaaacaaaacaaaga(seq?id?no:19)

56、ucuuuguuuuguuuuuccugu(seq?id?no:39)；

57、(19)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:20任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:40任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

58、cacuuacacccgugguuguua(seq?id?no:20)

59、uaacaaccacggguguaagug(seq?id?no:40)；

60、(20)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:21任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:41任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

61、guccuuuuuuauacaggaaaa(seq?id?no:21)

62、uuuuccuguauaaaaaaggac(seq?id?no:41)；

63、(21)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:42任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:82任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

64、gcggccugugucuaugguc(seq?id?no:42)

65、gaccauagacacaggccgcdtdt(seq?id?no:82)；

66、(22)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:43任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:83任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

67、ggaccgagcucggguguau(seq?id?no:43)

68、auacacccgagcucgguccdtdt(seq?id?no:83)；

69、(23)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:44任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:84任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

70、ucggguguauggggccgua(seq?id?no:44)

71、uacggccccauacacccgadtdt(seq?id?no:84)；

72、(24)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:45任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:85任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

73、gguguauggggccguagga(seq?id?no:45)

74、uccuacggccccauacaccdtdt(seq?id?no:85)；

75、(25)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:46任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:86任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

76、gcgugagggucucccuuga(seq?id?no:46)

77、ucaagggagacccucacgcdtdt(seq?id?no:86)

78、(26)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:47任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:87任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

79、ugagggucucccuugaucu(seq?id?no:47)

80、agaucaagggagacccucadtdt(seq?id?no:87)；

81、(27)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:48任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:88任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

82、gucucccuugaucugagaa(seq?id?no:48)

83、uucucagaucaagggagacdtdt(seq?id?no:88)；

84、(28)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:49任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:89任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

85、ggcuaccucucgauaugag(seq?id?no:49)

86、cucauaucgagagguagccdtdt(seq?id?no:89)；

87、(29)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:50任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:90任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

88、ugagccaguggcugaaauu(seq?id?no:50)

89、aauuucagccacuggcucadtdt(seq?id?no:90)；

90、(30)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:51任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:91任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

91、gccaguggcugaaauuggu(seq?id?no:51)

92、accaauuucagccacuggcdtdt(seq?id?no:91)；

93、(31)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:52任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:92任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

94、cggugccuaugggacagug(seq?id?no:52)

95、cacugucccauaggcaccgdtdt(seq?id?no:92)；

96、(32)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:53任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:93任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

97、aguguacaaggcccgugau(seq?id?no:53)

98、aucacgggccuuguacacudtdt(seq?id?no:93)；

99、(33)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:54任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:94任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

100、gccacuuuguggcccucaa(seq?id?no:54)

101、uugagggccacaaaguggcdtdt(seq?id?no:94)；

102、(34)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:55任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:95任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

103、ggcccucaagagugugaga(seq?id?no:55)

104、ucucacacucuugagggccdtdt(seq?id?no:95)；

105、(35)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:56任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:96任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

106、gagugugagaguccccaau(seq?id?no:56)

107、auuggggacucucacacucdtdt(seq?id?no:96)；

108、(36)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:57任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:97任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

109、guccccaauggaggaggag(seq?id?no:57)

110、cuccuccuccauuggggacdtdt(seq?id?no:97)；

111、(37)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:58任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:98任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

112、gccuucccaucagcacagu(seq?id?no:58)

113、acugugcugaugggaaggcdtdt(seq?id?no:98)；

114、(38)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:59任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:99任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

115、ucccaucagcacaguucgu(seq?id?no:59)

116、acgaacugugcugaugggadtdt(seq?id?no:99)；

117、(39)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:60任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:100任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

118、cgugagguggcuuuacuga(seq?id?no:60)

119、ucaguaaagccaccucacgdtdt(seq?id?no:100)；

120、(40)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:61任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:101任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

121、uggcuuuacugaggcgacu(seq?id?no:61)

122、agucgccucaguaaagccadtdt(seq?id?no:101)；

123、(41)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:62任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:102任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

124、ggcuuuacugaggcgacug(seq?id?no:62)

125、cagucgccucaguaaagccdtdt(seq?id?no:102)；

126、(42)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:63任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:103任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

127、gcgacuggaggcuuuugag(seq?id?no:63)

128、cucaaaagccuccagucgcdtdt(seq?id?no:103)；

129、(43)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:64任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:104任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

130、acuggaggcuuuugagcau(seq?id?no:64)

131、augcucaaaagccuccagudtdt(seq?id?no:104)；

132、(44)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:65任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:105任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

133、ggcuuuugagcaucccaau(seq?id?no:65)

134、auugggaugcucaaaagccdtdt(seq?id?no:105)；

135、(45)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:66任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:106任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

136、ccaauguuguccggcugau(seq?id?no:66)

137、aucagccggacaacauuggdtdt(seq?id?no:106)；

138、(46)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:67任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:107任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

139、guccggcugauggacgucu(seq?id?no:67)

140、agacguccaucagccggacdtdt(seq?id?no:107)；

141、(47)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:68任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:108任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

142、acccugguguuugagcaug(seq?id?no:68)

143、caugcucaaacaccagggudtdt(seq?id?no:108)；

144、(48)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:69任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:109任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

145、ccugguguuugagcaugua(seq?id?no:69)

146、uacaugcucaaacaccaggdtdt(seq?id?no:109)；

147、(49)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:70任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:110任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

148、ccaggcuugccagccgaaa(seq?id?no:70)

149、uuucggcuggcaagccuggdtdt(seq?id?no:110)；

150、(50)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:71任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:111任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

151、ggcuugccagccgaaacga(seq?id?no:71)

152、ucguuucggcuggcaagccdtdt(seq?id?no:111)；

153、(51)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:72任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:112任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

154、cgaaacgaucaaggaucug(seq?id?no:72)

155、cagauccuugaucguuucgdtdt(seq?id?no:112)；

156、(52)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:73任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:113任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

157、ccaguuucuaagaggccua(seq?id?no:73)

158、uaggccucuuagaaacuggdtdt(seq?id?no:113)；

159、(53)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:74任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:114任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

160、gcaucguucaccgagaucu(seq?id?no:74)

161、agaucucggugaacgaugcdtdt(seq?id?no:114)；

162、(54)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:75任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:115任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

163、ucguucaccgagaucugaa(seq?id?no:75)

164、uucagaucucggugaacgadtdt(seq?id?no:115)；

165、(55)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:76任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:116任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

166、ccgagaucugaagccagag(seq?id?no:76)

167、cucuggcuucagaucucggdtdt(seq?id?no:116)；

168、(56)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:77任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:117任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

169、cgagaucugaagccagaga(seq?id?no:77)

170、ucucuggcuucagaucucgdtdt(seq?id?no:117)；

171、(57)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:78任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:118任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

172、ucugaagccagagaacauu(seq?id?no:78)

173、aauguucucuggcuucagadtdt(seq?id?no:118)；

174、(58)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:79任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:119任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

175、gaagccagagaacauucug(seq?id?no:79)

176、cagaauguucucuggcuucdtdt(seq?id?no:119)；

177、(59)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:80任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:120任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

178、gaacauucuggugacaagu(seq?id?no:80)

179、acuugucaccagaauguucdtdt(seq?id?no:120)；

180、(60)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:81任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:121任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

181、gucaagcuggcugacuuug(seq?id?no:81)

182、caaagucagccagcuugacdtdt(seq?id?no:121)。

183、在一些實施方式中，所述sirna選自以下雙鏈sirna：

184、

185、

186、另一方面，本發(fā)明提供了一種shrna或其鹽，所述shrna含有正義鏈、反義鏈以及分隔所述正義鏈和反義鏈的頸環(huán)序列，所述shrna中的每個核苷酸各自獨立地為修飾或未修飾的核苷酸，其中，所述正義鏈含有核苷酸序列i，所述反義鏈含有核苷酸序列ii，所述核苷酸序列i和所述核苷酸序列ii至少部分地反相互補形成雙鏈區(qū)，所述核苷酸序列i和所述核苷酸序列ii選自如下(1)-(60)所示序列中的一組：

187、(1)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:2任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:22任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

188、gaugaagguaauccggaguga(seq?id?no:2)

189、ucacuccggauuaccuucauc(seq?id?no:22)；

190、(2)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:3任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:23任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

191、gaugacuggccucgagaugua(seq?id?no:3)

192、uacaucucgaggccagucauc(seq?id?no:23)；

193、(3)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:4任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:24任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

194、ggacacugagagggcaaucuu(seq?id?no:4)

195、aagauugcccucucagugucc(seq?id?no:24)；

196、(4)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:5任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:25任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

197、ggaucugaugcgccaguuucu(seq?id?no:5)

198、agaaacuggcgcaucagaucc(seq?id?no:25)；

199、(5)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:6任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:26任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

200、gucccuuucccuaccuuuaua(seq?id?no:6)

201、uauaaagguagggaaagggac(seq?id?no:26)；

202、(6)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:7任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:27任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

203、ggcugaaauuggugucggugc(seq?id?no:7)

204、gcaccgacaccaauuucagcc(seq?id?no:27)；

205、(7)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:8任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:28任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

206、guggaaacucugaagccgacc(seq?id?no:8)

207、ggucggcuucagaguuuccac(seq?id?no:28)；

208、(8)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:9任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:29任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

209、gucugugccacaucccgaacu(seq?id?no:9)

210、aguucgggauguggcacagac(seq?id?no:29)；

211、(9)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:10任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:30任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

212、ggcuuugccauugugcgauuu(seq?id?no:10)

213、aaaucgcacaauggcaaagcc(seq?id?no:30)；

214、(10)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:11任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:31任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

215、gccuauaaucccagcacguug(seq?id?no:11)

216、caacgugcugggauuauaggc(seq?id?no:31)；

217、(11)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:12任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:12任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

218、uggcuuugccauugugcgauu(seq?id?no:12)

219、aaucgcacaauggcaaagcca(seq?id?no:32)；

220、(12)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:13任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:33任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

221、auggcacuuacacccgugguu(seq?id?no:13)

222、aaccacggguguaagugccau(seq?id?no:33)；

223、(13)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:14任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:34任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

224、ucccaucagcacaguucguga(seq?id?no:14)

225、ucacgaacugugcugauggga(seq?id?no:34)；

226、(14)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:15任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:35任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

227、cugagaauggcuaccucucga(seq?id?no:15)

228、ucgagagguagccauucucag(seq?id?no:35)；

229、(15)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:16任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:36任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

230、gagaauggcuaccucucgaua(seq?id?no:16)

231、uaucgagagguagccauucuc(seq?id?no:36)；

232、(16)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:17任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:37任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

233、gagcaagacucugugucaaaa(seq?id?no:17)

234、uuuugacacagagucuugcuc(seq?id?no:37)；

235、(17)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:18任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:38任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

236、caggaaaaacaaaacaaagaa(seq?id?no:18)

237、uucuuuguuuuguuuuuccug(seq?id?no:38)；

238、(18)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:19任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:39任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

239、acaggaaaaacaaaacaaaga(seq?id?no:19)

240、ucuuuguuuuguuuuuccugu(seq?id?no:39)；

241、(19)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:20任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:40任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

242、cacuuacacccgugguuguua(seq?id?no:20)

243、uaacaaccacggguguaagug(seq?id?no:40)；

244、(20)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:21任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:41任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

245、guccuuuuuuauacaggaaaa(seq?id?no:21)

246、uuuuccuguauaaaaaaggac(seq?id?no:41)；

247、(21)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:42任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:82任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

248、gcggccugugucuaugguc(seq?id?no:42)

249、gaccauagacacaggccgcdtdt(seq?id?no:82)；

250、(22)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:43任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:83任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

251、ggaccgagcucggguguau(seq?id?no:43)

252、auacacccgagcucgguccdtdt(seq?id?no:83)；

253、(23)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:44任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:84任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

254、ucggguguauggggccgua(seq?id?no:44)

255、uacggccccauacacccgadtdt(seq?id?no:84)；

256、(24)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:45任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:85任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

257、gguguauggggccguagga(seq?id?no:45)

258、uccuacggccccauacaccdtdt(seq?id?no:85)；

259、(25)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:46任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:86任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

260、gcgugagggucucccuuga(seq?id?no:46)

261、ucaagggagacccucacgcdtdt(seq?id?no:86)

262、(26)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:47任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:87任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

263、ugagggucucccuugaucu(seq?id?no:47)

264、agaucaagggagacccucadtdt(seq?id?no:87)；

265、(27)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:48任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:88任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

266、gucucccuugaucugagaa(seq?id?no:48)

267、uucucagaucaagggagacdtdt(seq?id?no:88)；

268、(28)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:49任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:89任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

269、ggcuaccucucgauaugag(seq?id?no:49)

270、cucauaucgagagguagccdtdt(seq?id?no:89)；

271、(29)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:50任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:90任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

272、ugagccaguggcugaaauu(seq?id?no:50)

273、aauuucagccacuggcucadtdt(seq?id?no:90)；

274、(30)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:51任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:91任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

275、gccaguggcugaaauuggu(seq?id?no:51)

276、accaauuucagccacuggcdtdt(seq?id?no:91)；

277、(31)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:52任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:92任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

278、cggugccuaugggacagug(seq?id?no:52)

279、cacugucccauaggcaccgdtdt(seq?id?no:92)；

280、(32)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:53任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:93任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

281、aguguacaaggcccgugau(seq?id?no:53)

282、aucacgggccuuguacacudtdt(seq?id?no:93)；

283、(33)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:54任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:94任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

284、gccacuuuguggcccucaa(seq?id?no:54)

285、uugagggccacaaaguggcdtdt(seq?id?no:94)；

286、(34)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:55任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:95任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

287、ggcccucaagagugugaga(seq?id?no:55)

288、ucucacacucuugagggccdtdt(seq?id?no:95)；

289、(35)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:56任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:96任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

290、gagugugagaguccccaau(seq?id?no:56)

291、auuggggacucucacacucdtdt(seq?id?no:96)；

292、(36)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:57任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:97任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

293、guccccaauggaggaggag(seq?id?no:57)

294、cuccuccuccauuggggacdtdt(seq?id?no:97)；

295、(37)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:58任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:98任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

296、gccuucccaucagcacagu(seq?id?no:58)

297、acugugcugaugggaaggcdtdt(seq?id?no:98)；

298、(38)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:59任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:99任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

299、ucccaucagcacaguucgu(seq?id?no:59)

300、acgaacugugcugaugggadtdt(seq?id?no:99)；

301、(39)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:60任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:100任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

302、cgugagguggcuuuacuga(seq?id?no:60)

303、ucaguaaagccaccucacgdtdt(seq?id?no:100)；

304、(40)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:61任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:101任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

305、uggcuuuacugaggcgacu(seq?id?no:61)

306、agucgccucaguaaagccadtdt(seq?id?no:101)；

307、(41)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:62任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:102任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

308、ggcuuuacugaggcgacug(seq?id?no:62)

309、cagucgccucaguaaagccdtdt(seq?id?no:102)；

310、(42)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:63任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:103任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

311、gcgacuggaggcuuuugag(seq?id?no:63)

312、cucaaaagccuccagucgcdtdt(seq?id?no:103)；

313、(43)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:64任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:104任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

314、acuggaggcuuuugagcau(seq?id?no:64)

315、augcucaaaagccuccagudtdt(seq?id?no:104)；

316、(44)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:65任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:105任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

317、ggcuuuugagcaucccaau(seq?id?no:65)

318、auugggaugcucaaaagccdtdt(seq?id?no:105)；

319、(45)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:66任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:106任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

320、ccaauguuguccggcugau(seq?id?no:66)

321、aucagccggacaacauuggdtdt(seq?id?no:106)；

322、(46)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:67任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:107任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

323、guccggcugauggacgucu(seq?id?no:67)

324、agacguccaucagccggacdtdt(seq?id?no:107)；

325、(47)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:68任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:108任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

326、acccugguguuugagcaug(seq?id?no:68)

327、caugcucaaacaccagggudtdt(seq?id?no:108)；

328、(48)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:69任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:109任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

329、ccugguguuugagcaugua(seq?id?no:69)

330、uacaugcucaaacaccaggdtdt(seq?id?no:109)；

331、(49)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:70任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:110任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

332、ccaggcuugccagccgaaa(seq?id?no:70)

333、uuucggcuggcaagccuggdtdt(seq?id?no:110)；

334、(50)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:71任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:111任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

335、ggcuugccagccgaaacga(seq?id?no:71)

336、ucguuucggcuggcaagccdtdt(seq?id?no:111)；

337、(51)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:72任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:112任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

338、cgaaacgaucaaggaucug(seq?id?no:72)

339、cagauccuugaucguuucgdtdt(seq?id?no:112)；

340、(52)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:73任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:113任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

341、ccaguuucuaagaggccua(seq?id?no:73)

342、uaggccucuuagaaacuggdtdt(seq?id?no:113)；

343、(53)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:74任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:114任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

344、gcaucguucaccgagaucu(seq?id?no:74)

345、agaucucggugaacgaugcdtdt(seq?id?no:114)；

346、(54)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:75任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:115任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

347、ucguucaccgagaucugaa(seq?id?no:75)

348、uucagaucucggugaacgadtdt(seq?id?no:115)；

349、(55)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:76任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:116任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

350、ccgagaucugaagccagag(seq?id?no:76)

351、cucuggcuucagaucucggdtdt(seq?id?no:116)；

352、(56)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:77任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:117任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

353、cgagaucugaagccagaga(seq?id?no:77)

354、ucucuggcuucagaucucgdtdt(seq?id?no:117)；

355、(57)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:78任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:118任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

356、ucugaagccagagaacauu(seq?id?no:78)

357、aauguucucuggcuucagadtdt(seq?id?no:118)；

358、(58)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:79任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:119任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

359、gaagccagagaacauucug(seq?id?no:79)

360、cagaauguucucuggcuucdtdt(seq?id?no:119)；

361、(59)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:80任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:120任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

362、gaacauucuggugacaagu(seq?id?no:80)

363、acuugucaccagaauguucdtdt(seq?id?no:120)；

364、(60)所述核苷酸序列i包含與seq?id?no:81任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸，以及所述核苷酸序列ii包含與seq?id?no:121任選具有不多于3個(優(yōu)選不多于1個)核苷酸差異的至少15個連續(xù)核苷酸：

365、gucaagcuggcugacuuug(seq?id?no:81)

366、caaagucagccagcuugacdtdt(seq?id?no:121)。

367、在一些實施方式中，本發(fā)明的sirna或shrna中，每個核苷酸各自獨立地為修飾或未修飾的核苷酸。在一些實施方式中，本發(fā)明的sirna或shrna可以包含至少一個修飾的核苷酸和/或至少一個鏈間修飾。

368、在一些實施方式中，正義鏈上全部的核苷酸是修飾的核苷酸。

369、在一些實施方式中，反義鏈上全部的核苷酸是修飾的核苷酸。

370、在一些實施方式中，正義鏈和反義鏈的基本上全部的核苷酸是修飾的核苷酸。

371、在一些實施方式中，正義鏈的全部核苷酸和反義鏈的全部核苷酸是修飾的核苷酸。

372、所述修飾的核苷酸包括但不限于，2’-f、2’-ome、2’-moe、gna、una、pna、5’-vp等修飾的核苷酸。

373、2’-f、2’-ome、2’-moe修飾分別指的是核苷酸的呋喃糖基環(huán)的2′位的羥基被氟(f)、甲氧基(ome)、或甲氧基乙氧基(moe)取代。

374、gna修飾指的是甘油核苷酸，是由甘油(dna與rna為五碳糖)經(jīng)由磷酸酯鍵的連結所組成。

375、una修飾指的是開環(huán)核苷酸，una缺乏rna核糖環(huán)的c2’與c3’化學鍵，但結合到rna雙鏈結構上仍然可以模仿未修飾的rna。

376、pna修飾指的是肽核酸，一類以多肽骨架取代糖磷酸主鏈的dna類似物。

377、5’-vp修飾指的是sirna?5’端經(jīng)由乙烯基-磷酸修飾。

378、所述的鏈間修飾，包括但不限于硫代磷酸、-oet、-ome等修飾。硫代磷酸修飾指的是磷酸骨架上的羥基被巰基取代，-oet修飾指的是磷酸骨架上羥基的氫被乙基取代，-ome修飾指的是磷酸骨架上羥基的氫被甲基取代。

379、再一方面，本發(fā)明提供了上述shrna或sirna的制備方法。

380、本發(fā)明的shrna或sirna可以化學合成，也可以通過一個重組核酸結構里的表達盒轉錄成單鏈rna之后進行制備。sirna或shrna(或含有shrna的構建物或表達載體)等的核酸抑制物，可通過采用適當?shù)霓D染試劑被輸送到細胞內，或還可采用本領域已知的多種技術被輸送到細胞內。

381、又一方面，本發(fā)明提供了一種綴合物，所述綴合物含有：本發(fā)明所述的sirna或shrna或它們的鹽；以及綴合連接至所述sirna或shrna的綴合基團。

382、在一些實施方式中，所述綴合基團包含藥學上可接受的靶向基團和接頭，并且，所述sirna、所述接頭和所述靶向基團依次共價或非共價連接。

383、在一些實施方式中，所述綴合基團可以衍生自組織特異性靶向分子。所述綴合物可以是將組織特異性靶向分子與核酸抑制物通過化學偶聯(lián)的方式形成綴合物。其中能夠靶向不同細胞表面分子的靶向分子包括但不限于，特異性靶向的抗體、抗體片段、多肽、配體、抑制劑等。

384、還一方面，本發(fā)明提供了一種藥物組合物，其包含上述sirna和/或shrna和/或它們的鹽，以及任選的藥學上可接受的載體。

385、如本文所述的“藥學上可接受的載體”指用于治療劑給藥的載體，包括各種賦形劑和稀釋劑。在組合物中藥學上可接受的載體可含有液體，如水、鹽水、緩沖液等。另外，這些載體中還可能存在輔助性的物質，如填充劑、潤滑劑、助流劑、潤濕劑和乳化劑、ph緩沖劑物質等。所述的載體中還可以含有細胞轉染試劑。

386、在一些實施方式中，本發(fā)明的藥物組合物可以采用各種給藥形式，包括但不限于，靜脈給藥、皮下注射、肌肉注射、經(jīng)皮給藥、局部給藥、植入、緩釋給藥等。

387、本發(fā)明中，產(chǎn)品，例如，上述sirna、shrna的鹽例如可以是堿金屬鹽，例如鉀鹽、鈉鹽或鋰鹽，或者可以是銨鹽。特別的，所述鹽是鈉鹽。

388、再一方面，本發(fā)明提供了一種用于治療將從細胞周期蛋白依賴性激酶4(cdk4)表達降低中獲益的受試者的方法，所述方法包括向受試者使用治療有效量的本發(fā)明所述的sirna和/或shrna和/或藥物組合物。

389、在一些實施方式中，所述方法包括向受試者適用固定劑量的約50mg至800mg活性物質的所述的sirna和/或shrna和/或藥物組合物。

390、又一方面，本發(fā)明提供了上述sirna或shrna或它們的鹽或藥物組合物在制備能夠抑制細胞周期蛋白依賴性激酶4(cdk4)基因表達的藥物中的用途。

391、又一方面，本發(fā)明提供了上述sirna或shrna或它們的鹽或藥物組合物在制備預防或治療細胞周期蛋白依賴性激酶4(cdk4)相關疾病或病癥的藥物中的用途。

392、本發(fā)明中，所述細胞周期蛋白依賴性激酶4(cdk4)相關疾病或病癥是由cdk4高表達引起的或與之相關的疾病或病癥。術語“cdk4相關疾病”包括從cdk4基因表達或復制減少中受益的疾病或病癥。cdk4相關疾病的非限制性實例包括腫瘤。所謂腫瘤包括實體瘤和惡性血液瘤。實體瘤包括但不限于頭頸癌、肺癌、間皮瘤、中隔瘤、食道癌、胃癌、胰腺癌、膽管系統(tǒng)癌、小腸癌、結腸癌、結直腸癌、直腸癌、肛門癌、腎癌、尿路癌、膀胱癌、前列腺癌、陰莖癌、睪丸癌、卵巢癌、乳腺癌、內分泌系統(tǒng)腫瘤、皮膚癌、中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤、軟組織和骨肉瘤、皮膚和眼內源性黑色素瘤等。惡性血液瘤包括但不限于兒童白血病和淋巴瘤、霍奇金病、淋巴細胞和皮膚源性淋巴瘤、急性和慢性白血病、漿細胞腫瘤、與艾滋病相關的癌癥等。

393、又一方面，本發(fā)明提供了一種抑制細胞中細胞周期蛋白依賴性激酶4(cdk4)基因表達的方法，該方法包括將有效量的本發(fā)明所述的sirna、shrna、它們的鹽和/或藥物組合物與所述細胞接觸，從而抑制所述細胞中cdk4基因表達。