本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及一類從中藥白土苓中分離得到的結(jié)構(gòu)新穎的2-芐基苯并呋喃類和二芳基丙酮類化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽及其應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、引發(fā)心血管疾病的原因有很多，包括心肌缺血/再灌注損傷，高脂血癥，動(dòng)脈粥樣硬化，腫瘤藥物毒副作用等，由于心血管疾病發(fā)病率高、治愈率低、并發(fā)癥多，因此開發(fā)和研究毒性反應(yīng)小、高效和具有不同作用機(jī)制的心肌保護(hù)藥物至關(guān)重要。

2、傳統(tǒng)中醫(yī)及中藥復(fù)方在心血管疾病治療中具有大量的臨床經(jīng)驗(yàn)，其具有療效好、活性強(qiáng)、毒副作用小的特點(diǎn)。天然化合物可作為治療心血管疾病藥物研發(fā)中先導(dǎo)化合物的重要來源，如冠心丹參方、醋柳黃酮片、銀杏葉片、毛冬青注射液等中藥復(fù)方和一些來自于中草藥的化合物，葛根素、燈盞花素等，均具有很好的心肌保護(hù)活性并在臨床上得到廣泛的應(yīng)用。項(xiàng)目組一直致力于常用中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)及活性先導(dǎo)物的發(fā)現(xiàn)，結(jié)合臨床應(yīng)用、文獻(xiàn)調(diào)研以及實(shí)驗(yàn)室心肌保護(hù)活性篩選，發(fā)現(xiàn)中藥白土苓提取物具有良好的心肌保護(hù)活性。

3、本項(xiàng)目組研究的白土苓是百合科肖菝葜屬植物短柱肖菝葜(heterosmilaxyunnanensis?gagnep.)的干燥根莖，主要分布于陜西、甘肅、安徽、四川、云南各省區(qū)，具有清熱解毒，除濕，通利關(guān)節(jié)等功效，為抗腫瘤中藥復(fù)方苦參注射液中的唯一臣藥，以大極性水部位入藥?；瘜W(xué)成分和藥理活性研究表明，白土苓水部位中含酚酸苷類、黃酮苷類、甾醇苷類、偶氮糖苷類以及一些單酚酸、氨基酸和多糖等化學(xué)成分，具有利尿、抗炎、通利關(guān)節(jié)、抑菌、解毒、鎮(zhèn)痛等藥理活性。但目前對(duì)于白土苓的研究較少，化合物種類和數(shù)量均不夠全面，大極性部位主要以苷類化合物為主，藥理活性研究也主要是以粗提物為主。

4、目前，尚未發(fā)現(xiàn)從中藥白土苓中分離得到上述2-芐基苯并呋喃糖苷類化合物的報(bào)道，也未見上述單體的制備方法和心肌保護(hù)活性的報(bào)道。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、針對(duì)以上技術(shù)現(xiàn)狀，本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供新的2-芐基苯并呋喃類化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽、其藥物組合物以及其在制備心肌保護(hù)藥物中的應(yīng)用。

2、本發(fā)明第一方面提供了一類來源于白土苓的新化合物1～15(1～14:heteryunoside?a～n,15:heteryunoneoside?a)及化合物1～15藥學(xué)上可接受的鹽，其結(jié)構(gòu)如下：

3、

4、本發(fā)明第二方面是提供了白土苓中新的2-芐基苯并呋喃糖苷類及其前體二芳基丙酮化合物的制備方法，其包括以下步驟：白土苓藥材95％、85％、75％乙醇和水回流提取，濃縮后浸膏通過有機(jī)溶劑萃取、85％醇沉、大孔樹脂柱層析、sephadex?lh-20凝膠柱層析及制備型hplc分離純化，得到上述化合物1～15，經(jīng)uv、ir、nmr、ms、ecd等譜學(xué)手段分析鑒定其結(jié)構(gòu)，為一類結(jié)構(gòu)新穎的2-芐基苯并呋喃糖苷類及二芳基丙酮化合物，目前未有上述物質(zhì)的報(bào)道。

5、本發(fā)明第三方面是提供了一種藥物組合物，其含有有效劑量的化合物1～15中的一種或兩種、或兩種以上或其藥學(xué)上可接受的鹽以及藥學(xué)上可接受的載體。

6、本發(fā)明中，作為實(shí)施方案之一，本發(fā)明藥物組合物含有0.1～95％重量的本發(fā)明化合物。在單元?jiǎng)┬椭校景l(fā)明化合物含量一般為0.1～100mg，優(yōu)選的單元?jiǎng)┬秃?～50mg。

7、本發(fā)明中，作為實(shí)施方案之一，藥物組合物的劑型選自片劑、膠囊劑、丸劑、顆粒劑、口服液或混懸劑。

8、本發(fā)明中，作為實(shí)施方案之一，在單元?jiǎng)┬椭斜景l(fā)明化合物一般含量為0.1～100mg，優(yōu)選的單元?jiǎng)┬秃?～50mg。

9、本發(fā)明化合物的藥物組合物可根據(jù)本領(lǐng)域公知的方法制備。用于此目的時(shí)，如果需要，可將本發(fā)明化合物與一種或多種固體或液體藥物賦形劑和/或輔劑結(jié)合，制成可作為人藥或獸藥使用的適當(dāng)?shù)氖┯眯问交騽┝啃问健?/p>

10、本發(fā)明化合物或含有它的藥物組合物可以單位劑量形式給藥，給藥途徑可為腸道或非腸道，如口服、肌肉、皮下、鼻腔、口腔粘膜、皮膚、腹膜或直腸等。

11、本發(fā)明化合物或含有它的藥物組合物的給藥途徑可為注射給藥。注射包括靜脈注射、肌肉注射、皮下注射、皮內(nèi)注射和穴位注射等。

12、給藥劑型可以是液體劑型、固體劑型。如液體劑型可以是真溶液類、膠體類、微粒劑型、乳劑劑型、混懸劑型。其他劑型例如片劑、膠囊、滴丸、氣霧劑、丸劑、粉劑、溶液劑、混懸劑、乳劑、顆粒劑、栓劑、凍干粉針劑等。

13、本發(fā)明化合物可以制成普通制劑、也可以是緩釋制劑、控釋制劑、靶向制劑及各種微粒給藥系統(tǒng)。

14、例如為了將單位給藥劑型制成片劑，可以廣泛使用本領(lǐng)域公知的各種載體。關(guān)于載體的例子是，例如稀釋劑與吸收劑，如淀粉、糊精、硫酸鈣、乳糖、甘露醇、蔗糖、氯化鈉、葡萄糖、尿素、碳酸鈣、白陶土、微晶纖維素、硅酸鋁等；濕潤(rùn)劑與粘合劑，如水、甘油、聚乙二醇、乙醇、丙醇、淀粉漿、糊精、糖漿、蜂蜜、葡萄糖溶液、阿拉伯膠漿、明膠漿、羧甲基纖維素鈉、紫膠、甲基纖維素、磷酸鉀、聚乙烯吡咯烷酮等；崩解劑，例如干燥淀粉、海藻酸鹽、瓊脂粉、褐藻淀粉、碳酸氫鈉與枸櫞酸、碳酸鈣、聚氧乙烯山梨糖醇脂肪酸酯、十二烷基磺酸鈉、甲基纖維素、乙基纖維素等；崩解抑制劑，例如蔗糖、三硬脂酸甘油酯、可可脂、氫化油等；吸收促進(jìn)劑，例如季銨鹽、十二烷基硫酸鈉等；潤(rùn)滑劑，例如滑石粉、二氧化硅、玉米淀粉、硬脂酸鹽、硼酸、液體石蠟、聚乙二醇等。還可以將片劑進(jìn)一步制成包衣片，例如糖包衣片、薄膜包衣片、腸溶包衣片，或雙層片和多層片。

15、例如為了將給藥單元制成丸劑，可以廣泛使用本領(lǐng)域公知的各種載體。關(guān)于載體的例子是，例如稀釋劑與吸收劑，如葡萄糖、乳糖、淀粉、可可脂、氫化植物油、聚乙烯吡咯烷酮、單硬脂酸甘油脂、高嶺土、滑石粉等；粘合劑，如阿拉伯膠、黃蓍膠、明膠、乙醇、蜂蜜、液糖、米糊或面糊等；崩解劑，如瓊脂粉、干燥淀粉、海藻酸鹽、十二烷基磺酸鈉、甲基纖維素、乙基纖維素等。

16、例如為了將給藥單元制成膠囊，將有效成分本發(fā)明化合物與上述的各種載體混合，并將由此得到的混合物置于硬的明膠膠囊或軟膠囊中。也可將有效成分本發(fā)明化合物制成微囊劑，混懸于水性介質(zhì)中形成混懸劑，亦可裝入硬膠囊中或制成注射劑應(yīng)用。

17、例如，將本發(fā)明化合物制成注射用制劑，如溶液劑、混懸劑溶液劑、乳劑、凍干粉針劑，這種制劑可以是含水或非水的，可含一種和/或多種藥效學(xué)上可接受的載體、稀釋劑、粘合劑、潤(rùn)滑劑、防腐劑、表面活性劑或分散劑。如稀釋劑可選自水、乙醇、聚乙二醇、1,3-丙二醇、乙氧基化的異硬脂醇、多氧化的異硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇脂、肪酸酯等。另外，為了制備等滲注射液，可以向注射用制劑中添加適量的氯化鈉、葡萄糖或甘油，此外，還可以添加常規(guī)的助溶劑、緩沖劑、ph調(diào)節(jié)劑等。這些輔料是本領(lǐng)域常用的。

18、此外，如需要，也可以向藥物制劑中添加著色劑、防腐劑、香料、矯味劑、甜味劑或其它材料。

19、為達(dá)到用藥目的，增強(qiáng)治療效果，本發(fā)明的藥物或藥物組合物可用任何公知的給藥方法給藥。

20、本發(fā)明化合物藥物組合物的給藥劑量取決于許多因素，例如所要預(yù)防或治療疾病的性質(zhì)和嚴(yán)重程度，患者或動(dòng)物的性別、年齡、體重、性格及個(gè)體反應(yīng)，給藥途徑、給藥次數(shù)、治療目的，因此本發(fā)明的治療劑量可以有大范圍的變化。一般來講，本發(fā)明中藥學(xué)成分的使用劑量是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的?？梢愿鶕?jù)本發(fā)明化合物組合物中最后的制劑中所含有的實(shí)際藥物數(shù)量，加以適當(dāng)?shù)恼{(diào)整，以達(dá)到其治療有效量的要求，完成本發(fā)明的預(yù)防或治療目的。

21、本發(fā)明技術(shù)方案的第四方面是提供第一方面所述化合物或其藥學(xué)上可接受鹽以及第三方面所述藥物組合物在制備心血管疾病藥物中的用途。

22、本發(fā)明中，作為實(shí)施方案之一，所述心血管疾病包括肺源性心臟病、心力衰竭、心肌缺血、心肌梗塞或心絞痛。

23、本發(fā)明中，作為實(shí)施方案之一，本發(fā)明化合物的每天的合適劑量范圍：本發(fā)明的化合物的用量為0.001～100mg/kg體重，優(yōu)選為0.1～60mg/kg體重，更優(yōu)選為1～30mg/kg體重，最優(yōu)選為2～15mg/kg體重。

24、本發(fā)明中，作為實(shí)施方案之一，成人患者服用的本發(fā)明化合物每日為10～500mg，優(yōu)選為20～100mg，可一次服用或分2～3次服用；

25、本發(fā)明中，作為實(shí)施方案之一，兒童服用的劑量按照每kg體重5～30mg，優(yōu)選為10～20mg/kg體重。

26、上述劑量可以單一劑量形式或分成幾個(gè)，例如二、三或四個(gè)劑量形式給藥，這受限于給藥醫(yī)生的臨床經(jīng)驗(yàn)以及治療手段的給藥方案。本發(fā)明的化合物或組合物可單獨(dú)服用，或與其他治療藥物或?qū)ΠY藥物合并使用。

27、本發(fā)明還提供一種化合物1～15的制備方法，所述方法包括：

28、白土苓(heterosmilax?yunnanensis?gagnep.)藥材95％、85％、75％乙醇和水回流提取，濃縮后浸膏通過有機(jī)溶劑萃取、85％醇沉、大孔樹脂柱層析、sephadex?lh-20凝膠柱層析及制備型hplc分離純化，得到上述化合物1～15。

29、本發(fā)明通過利用langendorff灌流系統(tǒng)分離原代大鼠心肌細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，使用缺氧環(huán)境制備心肌細(xì)胞缺氧模型，陽(yáng)性藥nac和受試化合物處理后，經(jīng)阿爾瑪藍(lán)染色對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，評(píng)價(jià)細(xì)胞損傷情況。

30、結(jié)果表示，缺氧處理組心肌細(xì)胞發(fā)生大量凋亡壞死，給予陽(yáng)性藥nac及受試化合物處理后，部分組別細(xì)胞存活率顯著提高，與缺氧模型組細(xì)胞比較存在顯著性差異。尤其是化合物1的ec50為0.56μm；化合物2、3、4、5、6的ec50分別為1.26μm、9.02μm、2.20μm、2.13μm和9.10μm。

31、本發(fā)明從白土苓中分離得到了一類結(jié)構(gòu)新穎的2-芐基苯并呋喃糖苷類化合物(1～14)及其前體二芳基丙酮化合物(15)，在體外心肌保護(hù)活性評(píng)價(jià)中，化合物1～6對(duì)大鼠心肌細(xì)胞具有顯著的心肌保護(hù)活性。

32、本發(fā)明從白土苓分離出的2-芐基苯并呋喃糖苷類化合物具有體外心肌保護(hù)活性，具有心血管疾病治療的功效。