本發(fā)明涉及抗體，具體而言，涉及一種抗登革病毒或其ns1蛋白的抗體及其應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、登革熱(dengue?fever,df)是由4個(gè)血清型病毒(denv-1、denv-2、denv-3、denv-4)引起的急性蚊媒傳染病,主要通過埃及伊蚊和白紋伊蚊傳播.df是分布最廣，發(fā)病最多，危害較大的一種蟲媒病毒性疾病，廣泛流行于全球熱帶和亞熱帶的非洲、美洲、東南亞和西太平洋地區(qū)的100多個(gè)國家和地區(qū)。

2、在臨床上，df是一種嚴(yán)重的流感樣的疾病。主要表現(xiàn)為起病突然、高熱、劇烈頭痛、眼眶后痛、肌肉和關(guān)節(jié)痛，可伴有皮疹、淋巴腺腫和白血球減少，可波及所有人群，但癥狀可因病人的年齡不同而不同。一般將這種病型稱為古典登革熱，此類型傳播迅速，可引起較大規(guī)模的流行。在登革熱流行期，易感人群的罹患率通常為40％-50％，可高達(dá)80％-90％，但病死率很低。登革熱出血熱是以高熱、出血、肝大，嚴(yán)重病例循環(huán)衰竭為特征，病死率高，是較為嚴(yán)重的一種臨床類型。伴有休克綜合癥的稱為登革休克綜合癥。

3、登革熱沒有特效的治療方法。如果沒有適應(yīng)的治療，登革出血熱的病死率可超過20％，經(jīng)過有效的支持療法，病死率可低于1％。登革熱診斷要點(diǎn)：1)流行病學(xué)資料，發(fā)病關(guān)15天的活動(dòng)情況，有否去過流行區(qū)，蚊蟲叮咬歷；2)臨床特征，突然起病，發(fā)熱，“三痛三紅”，皮診；3)實(shí)驗(yàn)室檢查，白細(xì)胞、血小板下降；檢測血清特性igm陽性；恢復(fù)期igg比急性期有4倍增長；分離到病毒或特異性抗原。

4、目前用于登革病毒的檢測方法有病毒培養(yǎng)、血清學(xué)檢測、免疫檢測法等。病毒分離所需時(shí)間較長，達(dá)不到快速診斷的目的，而常規(guī)的血清學(xué)診斷又因存在廣泛的交叉反應(yīng)而受到干擾。免疫檢測的方法具有快速、簡便、不需要依賴重要裝備、能夠?qū)崿F(xiàn)現(xiàn)場檢測等特點(diǎn)，成為目前傳染病快速診斷中研究的熱點(diǎn)。免疫檢測法的原理是基于抗原抗體反應(yīng)的一種檢測方法。ns1蛋白是登革病毒非結(jié)構(gòu)蛋白中的糖蛋白，抗原性極強(qiáng)且不引發(fā)ade，所以常作為免疫檢測法的靶標(biāo)。

5、免疫檢測法需要針對登革病毒或其ns1蛋白的抗體，因此，本領(lǐng)域?qū)τ谟辛己眯阅艿目沟歉锊《净蚱鋘s1蛋白的抗體存在著強(qiáng)烈的需求。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本申請?zhí)峁┮环N抗登革病毒或其ns1蛋白的抗體或其抗原結(jié)合片段，為登革病毒或其ns1蛋白的檢測提供重要的原料來源，且有良好的活性或親和力。

2、為了實(shí)現(xiàn)上述目的，根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)方面，提供了一種抗登革病毒或其ns1蛋白的抗體或其抗原結(jié)合片段，所述抗體或其抗原結(jié)合片段包含具有氨基酸序列seq?id?no:20的重鏈可變區(qū)的三個(gè)互補(bǔ)決定區(qū)和具有氨基酸序列seq?id?no:22、23、24、25任一輕鏈可變區(qū)的三個(gè)互補(bǔ)決定區(qū)。

3、為了實(shí)現(xiàn)上述目的，根據(jù)本發(fā)明的第二個(gè)方面，提供了一種抗登革病毒或其ns1蛋白的抗體或其抗原結(jié)合片段，所述抗體或其抗原結(jié)合片段包括如下互補(bǔ)決定區(qū)：

4、hcdr1，其包含seq?id?no:1所示的氨基酸序列，或由其組成；

5、hcdr2，其包含seq?id?no:2所示的氨基酸序列，或由其組成；

6、hcdr3，其包含seq?id?no:3所示的氨基酸序列，或由其組成；

7、lcdr1，其包含seq?id?no:4或17所示的氨基酸序列，或由其組成；

8、lcdr2，其包含seq?id?no:5所示的氨基酸序列，或由其組成；和

9、lcdr3，其包含seq?id?no:6所示的氨基酸序列，或由其組成。

10、為了實(shí)現(xiàn)上述目的，根據(jù)本發(fā)明的第三個(gè)方面，提供了一種抗登革病毒或其ns1蛋白的抗體或其抗原結(jié)合片段，包括重鏈可變區(qū)和/或輕鏈可變區(qū)，所述重鏈可變區(qū)氨基酸序列如seq?id?no:20所示；所述輕鏈可變區(qū)氨基酸序列如seq?id?no:22、23、24、25任一所示。

11、為了實(shí)現(xiàn)上述目的，根據(jù)本發(fā)明的第四個(gè)方面，提供了一種抗登革病毒或其ns1蛋白的抗體或其抗原結(jié)合片段，包括重鏈和/或輕鏈，所述重鏈的氨基酸序列如seq?id?no:21所示；所述輕鏈的氨基酸序列如seq?id?no:26、27、28、29任一所示。

12、為了實(shí)現(xiàn)上述目的，根據(jù)本發(fā)明的第五個(gè)方面，提供了一種抗體偶聯(lián)物，所述抗體偶聯(lián)物包括上述的抗體或其抗原結(jié)合片段。

13、為了實(shí)現(xiàn)上述目的，根據(jù)本發(fā)明的第六個(gè)方面，提供了一種試劑或試劑盒，所述試劑或試劑盒包括上述的抗體或其抗原結(jié)合片段或上述的抗體偶聯(lián)物。

14、為了實(shí)現(xiàn)上述目的，根據(jù)本發(fā)明的第七個(gè)方面，提供了一種檢測登革病毒或其ns1蛋白的方法，包括：a)在足以發(fā)生抗體/抗原結(jié)合反應(yīng)的條件下，使上述的抗體或其抗原結(jié)合片段、抗體偶聯(lián)物，或者試劑或試劑盒與待檢測樣品中的登革病毒或其ns1蛋白接觸形成免疫復(fù)合物；和b)檢測所述免疫復(fù)合物的存在，所述復(fù)合物的存在指示所述測試樣品中所述抗原的存在。

15、為了實(shí)現(xiàn)上述目的，根據(jù)本發(fā)明的第八個(gè)方面，提供了一種上述的抗體或其抗原結(jié)合片段、抗體偶聯(lián)物、試劑或試劑盒在制備檢測登革病毒或其ns1蛋白產(chǎn)品中的用途。

16、為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明還提供了一種核酸、一種載體、一種細(xì)胞及一種制備上述抗體或其抗原結(jié)合片段的方法。

技術(shù)特征：

1.一種抗登革病毒或其ns1蛋白的抗體或其抗原結(jié)合片段，所述抗體或其抗原結(jié)合片段包含具有氨基酸序列seq?id?no:20的重鏈可變區(qū)的三個(gè)互補(bǔ)決定區(qū)和具有氨基酸序列seq?id?no:22、23、24、25任一輕鏈可變區(qū)的三個(gè)互補(bǔ)決定區(qū)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗體或其抗原結(jié)合片段，其特征在于，所述可變區(qū)的互補(bǔ)決定區(qū)由kabat、chothia、imgt、abm或contact任意一種系統(tǒng)或多種系統(tǒng)組合定義。

3.一種抗登革病毒或其ns1蛋白的抗體或其抗原結(jié)合片段，其特征在于，所述抗體或其抗原結(jié)合片段包括如下互補(bǔ)決定區(qū)：

4.一種抗登革病毒或其ns1蛋白的抗體或其抗原結(jié)合片段，包含重鏈可變區(qū)和/或輕鏈可變區(qū)，其特征在于，所述重鏈可變區(qū)氨基酸序列如seq?id?no:20所示；所述輕鏈可變區(qū)氨基酸序列如seq?id?no:22、23、24、25任一所示；

5.一種抗登革病毒或其ns1蛋白的抗體或其抗原結(jié)合片段，包括重鏈和/或輕鏈，其特征在于，所述重鏈的氨基酸序列如seq?id?no:21所示；所述輕鏈的氨基酸序列如seq?idno:26、27、28、29任一所示。

6.一種抗體偶聯(lián)物，其特征在于，所述抗體偶聯(lián)物包括權(quán)利要求1至5任一項(xiàng)所述的抗體或其抗原結(jié)合片段；

7.一種試劑或試劑盒，其特征在于，所述試劑或試劑盒包括權(quán)利要求1至5任一項(xiàng)所述的抗體或其抗原結(jié)合片段或權(quán)利要求6所述的抗體偶聯(lián)物。

8.一種檢測登革病毒或其ns1蛋白的方法，其特征在于，包括：

9.權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)所述的抗體或其抗原結(jié)合片段、權(quán)利要求6所述的抗體偶聯(lián)物，或者權(quán)利要求7所述的試劑或試劑盒在制備檢測登革病毒或其ns1蛋白產(chǎn)品中的用途。

10.一種核酸、載體、細(xì)胞或制備權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)所述的抗體或其抗原結(jié)合片段的方法，所述核酸編碼權(quán)利要求1至5任一項(xiàng)所述的抗體或其抗原結(jié)合片段；所述載體含有編碼權(quán)利要求1至5任一項(xiàng)所述的抗體或其抗原結(jié)合片段的核酸；所述細(xì)胞含有上述核酸或載體；所述方法包含上述細(xì)胞。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種抗登革病毒或其NS1蛋白的抗體及其應(yīng)用，涉及抗體領(lǐng)域。本發(fā)明公開的抗登革病毒或其NS1蛋白抗體包括重鏈互補(bǔ)決定區(qū)和輕鏈互補(bǔ)決定區(qū)，該抗體為抗登革病毒或其NS1蛋白的檢測提供了重要的原料來源，且具有良好的親和力或活性。

技術(shù)研發(fā)人員：鐘冬梅,孟媛,梁碧,唐麗娜
受保護(hù)的技術(shù)使用者：東莞市朋志生物科技有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/6