本發(fā)明涉及抗lrg1抗體，更具體地涉及抗lrg1抗體或其抗原結合片段以及其在抑制巨噬細胞激活方面和治療和/或預防巨噬細胞激活相關的疾病方面的應用。

背景技術：

1、lrg1是一種由肝臟分泌的糖蛋白，同時也是富含亮氨酸重復序列(lrr)家族蛋白的高度保守成員之一，主要參與細胞粘附、轉移、信號轉導，是近年來新發(fā)現(xiàn)的促血管生成因子。wang等研究發(fā)現(xiàn)[1]，與正常小鼠相比，lrg1在視網(wǎng)膜新生血管模型中表達顯著升高，lrg1通過結合到其輔助受體eng，激活tgf-β1信號轉導途徑，將tgf-β信號由維持血管穩(wěn)定轉向病理性血管生成狀態(tài)，活化促血管生成信號tβr-ⅱ，進而招募內皮alk-1，啟動轉錄因子smad1/5/8磷酸化，促進vegf轉錄上調、表達增加，進而促進內皮細胞遷移、增殖，發(fā)揮其促進病理性血管新生的作用。因此，lrg1通過調控tgfβ信號轉導通路促進血管新生。目前相關研究證實，lrg1增加是2型糖尿病患者動脈硬度、內皮功能和外周動脈疾病的預測因子。此外，lrg1升高與動脈粥樣硬化顯著相關，為心血管疾病的獨立預測因子。另外，既往研究發(fā)現(xiàn)脂毒性腎小管上皮細胞分泌的富含lrg1的細胞外囊泡可以激活巨噬細胞，然而，lrg1是否通過激活巨噬細胞促進動脈粥樣硬化的進展目前尚無研究。

技術實現(xiàn)思路

1、本申請旨在至少解決現(xiàn)有技術中存在的上述技術問題之一。為此，本發(fā)明的主要目的在于提供一種抗lrg1抗體或其抗原結合片段及其制備方法，所述抗lrg1抗體或其抗原結合片段能夠抑制巨噬細胞激活以及相關的炎癥反應。

2、本發(fā)明的目的還在于提供所述抗lrg1抗體或其抗原結合片段用于抑制巨噬細胞激活的應用。

3、此外，本發(fā)明的目的還在于提供所述抗lrg1抗體或其抗原結合片段在治療和/或預防巨噬細胞激活相關的疾病方面的應用。

4、在一方面，本發(fā)明提供了一種抗lrg1抗體或其抗原結合片段，其中，所述抗lrg1抗體或其抗原結合片段具有包含vhcdr1、vhcdr2和vhcdr3的重鏈可變區(qū)和包含vlcdr1、vlcdr2和vlcdr3的輕鏈可變區(qū)，并且其中，

5、vlcdr1包含seq?id?no.1中第27-37位的氨基酸序列；

6、vlcdr2包含seq?id?no.1中第55-57位的氨基酸序列；

7、vlcdr3包含seq?id?no.1中第94-102位的氨基酸序列；

8、vhcdr1包含seq?id?no.2中第26-33位的氨基酸序列；

9、vhcdr2包含seq?id?no.2中第51-58位的氨基酸序列；和

10、vhcdr3包含seq?id?no.2中第97-117位的氨基酸序列。

11、在另一方面，本發(fā)明提供了本發(fā)明提供了一種多核苷酸，該多核苷酸編碼根據(jù)本發(fā)明所述的抗lrg1抗體或其抗原結合片段。

12、在再一方面，本發(fā)明提供了一種重組表達載體，該重組表達載體包含根據(jù)本發(fā)明所述的多核苷酸。

13、在又一方面，本發(fā)明提供了一種重組細胞，該重組細胞包含根據(jù)本發(fā)明所述的多核苷酸或者包含根據(jù)本發(fā)明所述的重組表達載體。

14、在另一方面，本發(fā)明提供了一種制備根據(jù)本發(fā)明所述的抗lrg1抗體或其抗原結合片段的方法，所述方法包括培養(yǎng)根據(jù)本發(fā)明所述的重組細胞，并且回收得到所述抗體或其抗原結合片段。

15、在再一方面，本發(fā)明提供了一種藥物組合物，該藥物組合物包含根據(jù)本發(fā)明所述的抗lrg1抗體或其抗原結合片段和藥學上可接受的載體。

16、在又一方面，本發(fā)明提供了一種試劑盒，該試劑盒包含根據(jù)本發(fā)明的抗lrg1抗體或其抗原結合片段。

17、在另一方面，本發(fā)明提供了根據(jù)本發(fā)明所述的抗lrg1抗體或其抗原結合片段、多核苷酸、重組表達載體、重組細胞、或藥物組合物在制備用于抑制巨噬細胞激活的藥物中的應用。

18、在再一方面，本發(fā)明提供了根據(jù)本發(fā)明所述的抗lrg1抗體或其抗原結合片段、多核苷酸、重組表達載體、重組細胞、或藥物組合物在制備用于治療和/或預防lrg1相關的疾病的藥物中的應用。

19、在本發(fā)明中，通過使用根據(jù)本發(fā)明所述的抗lrg1抗體或其抗原結合片段，可以顯著抑制巨噬細胞的激活，特別是抑制巨噬細胞向促炎m1型表型的分化，從而可以為抑制巨噬細胞激活、抑制炎癥反應提供新方法，并為針對巨噬細胞激活相關的疾病例如冠心病和動脈粥樣硬化等的藥物開發(fā)提供新思路，使得更多患者能夠早期獲益。

技術特征：

1.一種抗lrg1抗體或其抗原結合片段，其中，所述抗lrg1抗體或其抗原結合片段具有包含vhcdr1、vhcdr2和vhcdr3的重鏈可變區(qū)和包含vlcdr1、vlcdr2和vlcdr3的輕鏈可變區(qū)，并且其中，

2.如權利要求1所述抗lrg1抗體或其抗原結合片段，其中，所述抗lrg1抗體或其抗原結合片段包含序列為seq?id?no.1的輕鏈可變區(qū)和序列為seq?id?no.2的重鏈可變區(qū)。

3.如權利要求1或2所述的抗lrg1抗體或其抗原結合片段，其中，所述抗lrg1或其抗原結合片段選自fab、fab’、f(ab’)2、fv、scfv、雙體、單鏈抗體、融合抗體和完整抗體。

4.一種多核苷酸，該多核苷酸編碼權利要求1至3中任一項所述的抗lrg1抗體或其抗原結合片段。

5.如權利要求4所述的多核苷酸，其中，該多核苷酸包含：

6.如權利要求4或5所述的多核苷酸，其中，該多核苷酸的序列包含序列為seq?id?no.3的編碼所述輕鏈可變區(qū)的核苷酸序列和序列為seq?id?no.4的編碼所述重鏈可變區(qū)的核苷酸序列。

7.一種重組表達載體，該表達載體包含權利要求4至6中任一項所述的多核苷酸。

8.一種重組細胞，該重組細胞包含權利要求4至6中任一項所述的多核苷酸或者權利要求7所述的重組表達載體。

9.一種制備權利要求1至3中任一項所述的抗lrg1抗體或其抗原結合片段的方法，所述方法包括培養(yǎng)權利要求8所述的重組細胞，并且回收得到所述抗lrg1抗體或其抗原結合片段。

10.一種藥物組合物，該藥物組合物包含權利要求1至3中任一項所述的抗lrg1抗體或其抗原結合片段和藥學上可接受的載體。

11.一種試劑盒，該試劑盒包含權利要求1至3中任一項所述的抗lrg1抗體或其抗原結合片段。

12.權利要求1至3中任一項所述的抗lrg1抗體或其抗原結合片段、權利要求4至6中任一項所述的多核苷酸、權利要求7所述的表達載體、權利要求8所述的重組細胞、或權利要求10所述的藥物組合物在制備用于抑制巨噬細胞激活的藥物中的應用。

13.權利要求1至3中任一項所述的抗lrg1抗體或其抗原結合片段、權利要求4至6中任一項所述的多核苷酸、權利要求7所述的表達載體、權利要求8所述的重組細胞、或權利要求10所述的藥物組合物在制備用于治療和/或預防lrg1相關的疾病的藥物中的應用，其中，所述lrg1相關的疾病選自動脈粥樣硬化、冠心病、缺血性腦卒中和外周動脈粥樣硬化性疾病。

技術總結
本發(fā)明涉及抗LRG1抗體及其應用。本發(fā)明提供了一種抗LRG1抗體或其抗原結合片段，其具有包含VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3的重鏈可變區(qū)和包含VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3的輕鏈可變區(qū)。本發(fā)明還提供了所述抗LRG1抗體或其抗原結合片段的制備方法以及其在抑制巨噬細胞激活方面和治療和/或預防巨噬細胞激活相關的疾病方面的應用。

技術研發(fā)人員：王娟,王曉東,劉興鵬,張思韜,陳牧雷,徐立,李惟銘,鐘久昌,王新宇,劉錚,高元豐,張婉菁
受保護的技術使用者：首都醫(yī)科大學附屬北京朝陽醫(yī)院
技術研發(fā)日：
技術公布日：2025/1/2