本公開總體上涉及抗b7h3抗體或其抗原結(jié)合部分、其制備方法及其用途。

背景技術(shù)：

1、b7h3也稱為cd276和b7rp-2，是b7家族成員并與其他b7家族成員具有20％-27％氨基酸同一性。雖然b7h3轉(zhuǎn)錄物遍在表達(dá)，但它在正常組織和免疫細(xì)胞上有限并維持低水平表達(dá)，并在多種人惡性腫瘤(包括黑色素瘤、乳腺癌、前列腺癌等)中過量表達(dá)。據(jù)報(bào)道，b7-h3在癌細(xì)胞的膜上、細(xì)胞質(zhì)中或細(xì)胞核內(nèi)表達(dá)，但也在腫瘤相關(guān)的脈管系統(tǒng)上表達(dá)。b7h3不在t細(xì)胞、nk細(xì)胞和apc(包括dc和巨噬細(xì)胞)上組成型表達(dá)，但其在apc上的表達(dá)可由gm-csf、ifnγ等誘導(dǎo)。

2、b7-h3是有前景的抗癌靶標(biāo)。b7-h3的確切功能尚不清楚，但已經(jīng)證實(shí)其不同的免疫功能，包括刺激、抑制t-細(xì)胞增殖以及抑制nk細(xì)胞功能。推測(cè)在免疫細(xì)胞上存在不同的受體，這些受體可競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合腫瘤上的b7h3。除了其免疫檢查點(diǎn)功能外，據(jù)報(bào)道b7h3高表達(dá)水平與癌癥的不良預(yù)后相關(guān)，并且還增強(qiáng)細(xì)胞增殖、遷移、侵入、血管生成、轉(zhuǎn)移能力和抗癌藥物耐藥性。

3、與其他b7家族分子類似，b7h3是1型跨膜糖蛋白，其胞外結(jié)構(gòu)域含有igv-igc結(jié)構(gòu)域?qū)ΑＥc只具有單一拷貝igv-igc結(jié)構(gòu)域?qū)Φ男∈骲7h3基因不同，發(fā)現(xiàn)人b7h3具有兩種同種型。一種同種型含有單一拷貝igv-igc結(jié)構(gòu)域?qū)?命名為2igb7h3)，另一種同種型具有兩個(gè)igv-igc結(jié)構(gòu)域?qū)?命名為4igb7h3)，這兩個(gè)結(jié)構(gòu)域?qū)τ苫蛑貜?fù)和差別剪接產(chǎn)生。4igb7h3是在免疫細(xì)胞以及惡性細(xì)胞上表達(dá)的主要同種型，而不是2igb7h3，這表明4igb7h3在腫瘤發(fā)育和癌癥免疫中可能起到顯著的重要作用。

4、由于b7h3在許多腫瘤細(xì)胞上過表達(dá)，因此正在開發(fā)靶向b7h3的治療分子以治療相關(guān)適應(yīng)癥。然而，開發(fā)新型抗b7h3抗體仍然具有改進(jìn)空間和臨床需要。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本公開提供了這些和其他目的，在廣義上涉及提供具有改善療效的抗體的化合物、方法、組合物和制品。本公開提供的有益效果廣泛地適用于抗體治療和診斷領(lǐng)域，并且可以組合與多種靶標(biāo)反應(yīng)的抗體來使用。

2、在一個(gè)方面，本公開提供了特異性結(jié)合b7h3的抗體或其抗原結(jié)合部分。b7h3抗原可以是人b7h3、小鼠b7h3和/或食蟹猴b7h3或其片段(例如胞外結(jié)構(gòu)域)。優(yōu)選地，b7h3抗原是人4igb7h3蛋白質(zhì)或其胞外結(jié)構(gòu)域。

3、在一些實(shí)施方案中，如本文公開的抗體或其抗原結(jié)合部分包含：

4、含有seq?id?no：1的氨基酸序列的重鏈cdr1(hcdr1)；含有seq?id?no：2的氨基酸序列的hcdr2；含有seq?id?no：3的氨基酸序列的hcdr3；以及

5、含有seq?id?no：4或7的氨基酸序列的輕鏈cdr1(lcdr1)；含有seq?id?no：5的氨基酸序列的lcdr2；和含有seq?id?no：6的氨基酸序列的lcdr3。

6、在一些實(shí)施方案中，如本文公開的抗體或其抗原結(jié)合部分包含：

7、含有seq?id?no：1的氨基酸序列的重鏈cdr1(hcdr1)；含有seq?id?no：2的氨基酸序列的hcdr2；含有seq?id?no：3的氨基酸序列的hcdr3；以及

8、含有kssqsllx1ssnqknyla的氨基酸序列的輕鏈cdr1(lcdr1)，其中x1可為除n之外的任何氨基酸；含有seq?id?no：5的氨基酸序列的lcdr2；含有seq?id?no：6的氨基酸序列的lcdr3。

9、優(yōu)選地，如上所述的x1為q，并且lcdr1包含seq?id?no：4的氨基酸序列。

10、在一些實(shí)施方案中，如本文公開的抗體或其抗原結(jié)合部分包含：

11、含有seq?id?no：1的氨基酸序列的重鏈cdr1(hcdr1)；含有seq?id?no：2的氨基酸序列的hcdr2；含有seq?id?no：3的氨基酸序列的hcdr3；以及

12、含有kssqsllnx2snqknyla的氨基酸序列的輕鏈cdr1(lcdr1)，其中x可為除s之外的任何氨基酸；含有seq?id?no：5的氨基酸序列的lcdr2；含有seq?id?no：6的氨基酸序列的lcdr3。

13、優(yōu)選地，如上所述的x2為p，并且lcdr1包含seq?id?no：18的氨基酸序列。

14、在一些實(shí)施方案中，抗體或其抗原結(jié)合部分包含重鏈可變區(qū)(vh)和輕鏈可變區(qū)(vl)，其中vh包含：

15、(a)如seq?id?no：8或10所示的氨基酸序列；

16、(b)與seq?id?no：8或10具有至少85％、至少90％或至少95％同一性的氨基酸序列；或

17、(c)與seq?id?no：8或10相比在構(gòu)架區(qū)中具有一個(gè)或多個(gè)(例如，1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個(gè))氨基酸添加、缺失和/或取代的氨基酸序列；

18、和/或vl包含：

19、(a)如seq?id?no：9或11所示的氨基酸序列；

20、(b)與seq?id?no：9或11具有至少85％、至少90％或至少95％同一性的氨基酸序列；或

21、(c)與seq?id?no：9或11相比在構(gòu)架區(qū)中具有一個(gè)或多個(gè)(例如，1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個(gè))氨基酸添加、缺失和/或取代的氨基酸序列。

22、在一些實(shí)施方案中，抗體或其抗原結(jié)合部分包含在構(gòu)架區(qū)中包含一個(gè)或多個(gè)氨基酸取代的vh和/或vl。在一些實(shí)施方案中，氨基酸取代中的至少一個(gè)氨基酸取代是回復(fù)突變，其中來自人種系序列的氨基酸被親本抗體中對(duì)應(yīng)位置處的不同氨基酸取代。

23、在一些實(shí)施方案中，氨基酸取代中的至少一個(gè)氨基酸取代去除潛在的翻譯后修飾位點(diǎn)或糖基化位點(diǎn)。此類氨基酸修飾可以在cdr區(qū)或構(gòu)架區(qū)。

24、在一些實(shí)施方案中，抗體或其抗原結(jié)合部分是全長(zhǎng)抗體、scfv、fab、f(ab′)2或fv片段。

25、在一些實(shí)施方案中，抗體還包含免疫球蛋白恒定區(qū)，諸如人igg恒定區(qū)，任選地人igg1恒定區(qū)。在一些實(shí)施方案中，igg1恒定區(qū)包含一個(gè)或多個(gè)修飾，諸如lala突變。

26、在一些實(shí)施方案中，抗體或其抗原結(jié)合部分是嵌合抗體或人源化抗體。

27、在一些實(shí)施方案中，抗體或其抗原結(jié)合部分包含：

28、(a)含有seq?id?no：12的氨基酸序列的重鏈和含有seq?id?no：13的氨基酸序列的輕鏈；或

29、(b)含有seq?id?no：14的氨基酸序列的重鏈和含有seq?id?no：15的氨基酸序列的輕鏈。

30、在一個(gè)方面，本公開提供了分離的核酸分子，其包含編碼如上文所定義的抗體或其抗原結(jié)合部分的核酸序列。

31、在一個(gè)方面，本公開提供了包含如上文所定義的核酸分子的載體。

32、在一個(gè)方面，本公開提供了包含如上文所定義的核酸分子或載體的宿主細(xì)胞。

33、在一個(gè)方面，本公開提供了包含如上文所定義的抗體或其抗原結(jié)合部分和藥學(xué)上可接受的載體的藥物組合物。

34、在一個(gè)方面，本公開提供了用于產(chǎn)生如上文所定義的抗體或其抗原結(jié)合部分的方法，該方法包括以下步驟：

35、-在適于表達(dá)抗體或其抗原結(jié)合部分的條件下培養(yǎng)宿主細(xì)胞；以及

36、-從宿主細(xì)胞分離出抗體或其抗原結(jié)合部分。

37、在一個(gè)方面，本公開提供了用于調(diào)節(jié)受試者中b7h3相關(guān)免疫應(yīng)答的方法，該方法包括向受試者施用如上文所定義的抗體或其抗原結(jié)合部分或藥物組合物。

38、在一個(gè)方面，本公開提供了用于預(yù)防或治療受試者中b7h3相關(guān)疾病的方法，該方法包括向受試者施用有效量的如上文所定義的抗體或其抗原結(jié)合部分或藥物組合物。

39、在一些實(shí)施方案中，b7h3相關(guān)疾病選自癌癥、自身免疫性疾病和感染性疾病。所述癌癥可以選自乳腺癌、神經(jīng)腫瘤、黑色素瘤、肺癌、頭頸癌、結(jié)腸直腸癌、胰腺癌、胃癌、腎癌、膀胱癌、前列腺癌、卵巢癌、宮頸癌、成膠質(zhì)細(xì)胞瘤、食道癌、膀胱癌、腎細(xì)胞癌、子宮內(nèi)膜癌、皮膚癌、睪丸癌、甲狀腺癌、尿路上皮癌、淋巴瘤諸如非霍奇金淋巴瘤、慢性淋巴細(xì)胞性白血病、彌漫性大b細(xì)胞淋巴瘤和多發(fā)性骨髓瘤。

40、在一些實(shí)施方案中，抗體或其抗原結(jié)合部分與細(xì)胞免疫療法、化療劑、放射療法、靶向療法和/或用于癌癥免疫療法的其他藥劑聯(lián)合施用。

41、在一個(gè)方面，本公開提供了如上文所定義的抗體或其抗原結(jié)合部分，用于治療或預(yù)防受試者中的b7h3相關(guān)疾病。

42、在一個(gè)方面，本公開提供了如上文所定義的抗體或其抗原結(jié)合部分用于制備治療或預(yù)防受試者中的b7h3相關(guān)疾病的藥物的用途。

43、在一個(gè)方面，本公開提供了包含如上文所定義的抗體或其抗原結(jié)合部分的試劑盒。

44、前述是概述，因此必然包括細(xì)節(jié)的簡(jiǎn)化、概括和省略；因此，本領(lǐng)域技術(shù)人員將理解，該概述僅是例示性的，而不旨在以任何方式進(jìn)行限制。該概述不旨在確定要求保護(hù)的主題的關(guān)鍵特征或必要特征，也不旨在用于幫助確定要求保護(hù)的主題的范圍。