本發(fā)明涉及微生物發(fā)酵,特別是涉及一種黑曲霉固態(tài)發(fā)酵提高綠豆中多酚含量的方法。
背景技術(shù):
1、綠豆(vignaradiata),豆科班豆屬栽培種,一年生草本植物,在我國已有兩千多年的栽培歷史。綠豆作為重要的食用豆類和傳統(tǒng)功能性食品,富含多種營養(yǎng)成分及生物活性物質(zhì),具有抗氧化、抗菌、抗炎、保護心腦血管、減少膽固醇、保肝等功能。綠豆中酚類化合物含量豐富,綠豆多酚的提取與利用也一直備受關(guān)注。目前為提高綠豆多酚利用率,多采用物理機械處理改進提取方法,提高綠豆多酚的提取率。專利文獻cn105250356a公開了一種微波和超聲波協(xié)同輔助溶劑抽提制綠豆多酚的方法,將綠豆進行粉碎,加入丙酮溶液,在微波和超聲波處理條件下浸漬,后將浸提液進行旋蒸、凍干,得到綠豆多酚。該方法在一定程度上提升了綠豆多酚得率,但對綠豆其他營養(yǎng)物質(zhì)的破壞程度較大,難以進行二次利用,易造成資源浪費,且該方法未能提高綠豆中存在的多酚類物質(zhì)。
2、通過微生物發(fā)酵法提高綠豆營養(yǎng)價值的研究,多以發(fā)酵綠豆作為輔料制作綠豆營養(yǎng)食品,如:綠豆營養(yǎng)面包、餅干、豆乳、飲料、掛面、復合粉、綠豆沙等。專利文獻cn105265894a公開了一種綠豆發(fā)酵營養(yǎng)食品及其制作方法,將綠豆進行浸泡、蒸煮后,浸泡發(fā)酵12~15小時,再次蒸煮殺菌,接入根霉孢子粉,自然發(fā)酵30~40小時后制得營養(yǎng)豐富的綠豆食品。該方法對綠豆進行多次蒸煮,易造成營養(yǎng)成分流失、生物活性功能下降。目前,現(xiàn)有的綠豆發(fā)酵工藝較為復雜,采用菌種雜亂,對綠豆理化性質(zhì)研究較多,而提高的綠豆多酚含量還處于較低水平,未能充分挖掘綠豆的功能活性。
技術(shù)實現(xiàn)思路
1、為了解決上述問題,本發(fā)明提供了一種黑曲霉固態(tài)發(fā)酵提高綠豆中多酚含量的方法。本發(fā)明提供的方法使綠豆中的多酚含量與抗氧化能力均得到提升。
2、為了實現(xiàn)上述目的,本發(fā)明提供如下技術(shù)方案:
3、本發(fā)明提供了一種提高綠豆中多酚含量的方法,包括以下步驟:
4、將綠豆依次進行浸泡、水浴蒸煮和紫外滅菌處理,得到滅菌的綠豆;
5、將所述滅菌的綠豆和黑曲霉種子液混合,進行固態(tài)發(fā)酵,得到發(fā)酵產(chǎn)物;
6、所述滅菌的綠豆和黑曲霉種子液的質(zhì)量體積比為100g:7~9ml;所述黑曲霉種子液中的活菌數(shù)為1×108cfu/ml;所述固態(tài)發(fā)酵的溫度為25~27℃;所述固態(tài)發(fā)酵的時間為10~12d。
7、優(yōu)選的,所述黑曲霉包括能分泌內(nèi)切葡萄糖酶、外切葡萄糖酶和葡萄糖苷酶的黑曲霉。
8、優(yōu)選的,所述黑曲霉的保藏編號為cgmcc?3.3928。
9、優(yōu)選的,所述滅菌的綠豆和黑曲霉種子液的質(zhì)量體積比為100g:7~8ml;所述固態(tài)發(fā)酵的溫度為26~27℃;所述固態(tài)發(fā)酵的時間為10.5~11.5d。
10、優(yōu)選的,所述滅菌的綠豆和黑曲霉種子液的質(zhì)量體積比為100g:7.5ml;所述固態(tài)發(fā)酵的溫度為26.5℃;所述固態(tài)發(fā)酵的時間為11d。
11、優(yōu)選的,所述水浴蒸煮的時間為5~20min。
12、優(yōu)選的,所述紫外滅菌的時間為20~40min。
13、優(yōu)選的,水浴蒸煮后的綠豆在進行紫外滅菌時的平鋪厚度為1~2cm。
14、優(yōu)選的,所述固態(tài)發(fā)酵的環(huán)境濕度為80%~100%。
15、優(yōu)選的,浸泡后的綠豆無白心。
16、有益效果:
17、1、本發(fā)明采用黑曲霉對綠豆進行固態(tài)發(fā)酵,獲得多酚含量顯著提高及抗氧化能力顯著增強的綠豆產(chǎn)品,為綠豆資源附加值的提升以及功能性食品的開發(fā)提供優(yōu)質(zhì)原料及技術(shù)支撐。
18、2、本發(fā)明采用黑曲霉為發(fā)酵菌種,黑曲霉產(chǎn)生的纖維素酶、木聚糖酶、糖化酶等可分解綠豆中的纖維素、果膠、木質(zhì)素等,能夠促進多酚釋放的同時,還可解決豆類不易熟化、口感差的問題。
19、3、本發(fā)明采用固態(tài)發(fā)酵的方法,其發(fā)酵產(chǎn)物易提取,節(jié)約成本。且經(jīng)檢測,固態(tài)發(fā)酵后綠豆中多酚含量可達16~18mg/g,是未發(fā)酵綠豆的4~5倍,dpph清除率可達85~95%,相比于現(xiàn)有技術(shù)綠豆的多酚含量與dpph清除率均有顯著提高。
20、4、本發(fā)明采用水浴蒸煮加紫外照射的滅菌方法,代替?zhèn)鹘y(tǒng)的高壓滅菌方法,既可達到滅菌的目的,又能更大程度的保留綠豆營養(yǎng)成分。
21、5、本發(fā)明對綠豆全籽粒進行發(fā)酵,全面提高綠豆營養(yǎng)價值的同時,不會產(chǎn)生多余廢料,造成資源的浪費。
22、6、本發(fā)明采用響應(yīng)面法優(yōu)化發(fā)酵條件,確定最優(yōu)發(fā)酵條件,確保發(fā)酵工藝的科學性、穩(wěn)定性,為綠豆的發(fā)酵質(zhì)量提供保障和依據(jù)。
23、7、本發(fā)明發(fā)酵方法操作簡單,只需將原料與菌種混合均勻,無需復雜的工藝與昂貴的設(shè)備;且發(fā)酵期間只需保證環(huán)境溫度,無需其他操作與人為看管,具有良好的實用價值及應(yīng)用前景。
1.一種提高綠豆中多酚含量的方法,其特征在于,包括以下步驟:
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述黑曲霉包括能分泌內(nèi)切葡萄糖酶、外切葡萄糖酶和葡萄糖苷酶的黑曲霉。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述黑曲霉的保藏編號為cgmcc3.3928。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述滅菌的綠豆和黑曲霉種子液的質(zhì)量體積比為100g:7~8ml;所述固態(tài)發(fā)酵的溫度為26~27℃;所述固態(tài)發(fā)酵的時間為10.5~11.5d。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或4所述的方法,其特征在于,所述滅菌的綠豆和黑曲霉種子液的質(zhì)量體積比為100g:7.5ml;所述固態(tài)發(fā)酵的溫度為26.5℃;所述固態(tài)發(fā)酵的時間為11d。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述水浴蒸煮的時間為5~20min。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述紫外滅菌的時間為20~40min。
8.根據(jù)權(quán)利要求1或7所述的方法,其特征在于,水浴蒸煮后的綠豆在進行紫外滅菌時的平鋪厚度為1~2cm。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述固態(tài)發(fā)酵的環(huán)境濕度為80%~100%。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,浸泡后的綠豆無白心。