本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥，具體涉及l(fā)in28b基因上游開放閱讀框編碼的蛋白及其應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、目前，現(xiàn)有的非經(jīng)典開放閱讀框(non-canonical?open?reading?frames,orfs)的功能報(bào)道主要集中在長(zhǎng)鏈非編碼rna(lncrna)的orfs，mrna的上游開放閱讀框(uorf)的功能主要作為順式調(diào)節(jié)元件來(lái)抑制下游主開放閱讀框(morf)的翻譯，而mrna的上游開放閱讀框(uorf)編碼的微蛋白的功能報(bào)道較少。

2、多能干細(xì)胞主要存在兩種多能性狀態(tài)，原始態(tài)(naive)和始發(fā)態(tài)(primed)，分別對(duì)應(yīng)體內(nèi)胚胎發(fā)育的不同時(shí)期。相比于primed狀態(tài)的細(xì)胞，naive狀態(tài)的細(xì)胞有胚胎嵌合能力，是未來(lái)異種器官再造種子細(xì)胞的重要來(lái)源。調(diào)控兩種多能性狀態(tài)轉(zhuǎn)變對(duì)于基礎(chǔ)研究和再生醫(yī)學(xué)方面具有重要的研究?jī)r(jià)值?，F(xiàn)有的促進(jìn)不同多能性狀態(tài)轉(zhuǎn)變的有效因子多為轉(zhuǎn)錄因子，且效率較低，對(duì)于uorf編碼的微蛋白調(diào)節(jié)始發(fā)態(tài)和原始態(tài)之間轉(zhuǎn)變的研究還未見報(bào)道。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明旨在至少在一定程度上解決相關(guān)技術(shù)中的技術(shù)問(wèn)題之一。

2、mrna的上游開放閱讀框(uorf)的功能主要作為順式調(diào)節(jié)元件，抑制下游主開放閱讀框(morf)的翻譯，對(duì)于mrna的上游開放閱讀框(uorf)編碼的微蛋白的功能報(bào)道較少。然而，本技術(shù)中，發(fā)明人通過(guò)大量的實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，lin28b?uorf能夠編碼新的微蛋白(命名為85aa/87aa-uorf，其中，人中為87aa，鼠中為85aa)調(diào)控多能干細(xì)胞命運(yùn)，可調(diào)控始發(fā)態(tài)多能干細(xì)胞向原始態(tài)多能干細(xì)胞互相轉(zhuǎn)變，且調(diào)節(jié)效率接近100％，能夠獲得均一化的原始態(tài)或始發(fā)態(tài)的多能干細(xì)胞。

3、為此，在本發(fā)明第一方面，本發(fā)明提出了一種多肽。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，所述多肽具有seq?id?no:2或4所示的氨基酸序列或其保守形式修飾的氨基酸序列。根據(jù)本發(fā)明實(shí)施方案的多肽是由lin28buorf編碼獲得的，所述多肽能夠有效的調(diào)節(jié)多能干細(xì)胞的原始態(tài)和始發(fā)態(tài)，在胚胎著床中起重要作用，可以有效治療胚胎著床缺陷相關(guān)疾病。

4、在本發(fā)明的第二方面，本發(fā)明提出了一種核酸。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，所述核酸編碼第一方面所述的多肽。根據(jù)本發(fā)明實(shí)施方案的核酸編碼的多肽能夠有效的調(diào)節(jié)多能干細(xì)胞的原始態(tài)和始發(fā)態(tài)，可以有效治療胚胎著床缺陷相關(guān)疾病。

5、根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，上述核酸還可以包括下列附加技術(shù)特征中的至少之一：

6、根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，所述核酸具有seq?id?no:1或3所示的核苷酸序列。

7、在本發(fā)明的第三方面，本發(fā)明提出了一種表達(dá)載體。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，所述表達(dá)載體包含第二方面所述的核酸，或表達(dá)第一方面所述的多肽。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，表達(dá)載體攜帶前述的核酸分子。由此，有效實(shí)現(xiàn)前述多肽的表達(dá)，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)前述多肽的體外大量獲得。

8、在本發(fā)明的第四方面，本發(fā)明提出了一種重組細(xì)胞。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，所述重組細(xì)胞攜帶前面所述的核酸或表達(dá)載體，或表達(dá)前面所述的多肽。利用該重組細(xì)胞在適合條件下，能夠在細(xì)胞內(nèi)有效地表達(dá)前述的多肽。

9、根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，上述重組細(xì)胞還可以包括下列附加技術(shù)特征中的至少之一：

10、根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，所述細(xì)胞包括哺乳動(dòng)物的多能干細(xì)胞。

11、根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，所述細(xì)胞包括哺乳動(dòng)物的胚胎干細(xì)胞或誘導(dǎo)多能干細(xì)胞。

12、在本發(fā)明的第五方面，本發(fā)明提出了一種生物模型。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，所述生物模型不表達(dá)或低表達(dá)第一方面所述的多肽。如前所述，根據(jù)本發(fā)明實(shí)施方案的多肽是由lin28b?uorf編碼獲得的，所述多肽能夠有效的調(diào)節(jié)多能干細(xì)胞的原始態(tài)和始發(fā)態(tài)，在胚胎著床中起重要作用，當(dāng)所述生物模型中不表達(dá)或低表達(dá)所述多肽時(shí)，對(duì)于多能干細(xì)胞而言，多能干細(xì)胞會(huì)向原始態(tài)多能干細(xì)胞方向轉(zhuǎn)化，容易產(chǎn)生胚胎著床缺陷，此時(shí)，該生物模型可以為胚胎著床缺陷相關(guān)的生物模型，可以用于后續(xù)的疾病治療研究或者其他科學(xué)研究中。

13、根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，所述生物模型為細(xì)胞模型、類器官模型或者動(dòng)物模型。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以根據(jù)需求，選擇制備細(xì)胞模型、類器官模型或者動(dòng)物模型。

14、細(xì)胞模型指的是把細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和形狀的模式化，為便于明確細(xì)胞間的相互作用以及機(jī)能與結(jié)構(gòu)和形態(tài)間的相互關(guān)系而提出的細(xì)胞的模型、核糖體等具有部分細(xì)胞機(jī)能的人工顆粒，或者在保持參與細(xì)胞運(yùn)動(dòng)的結(jié)構(gòu)(收縮結(jié)構(gòu))與機(jī)能的情況下，將膜結(jié)構(gòu)及細(xì)胞質(zhì)的可溶部分去掉的細(xì)胞。類器官模型是一種通過(guò)細(xì)胞工程技術(shù)構(gòu)建的微型三維結(jié)構(gòu)，它們模擬動(dòng)物或者人體器官的關(guān)鍵功能和微環(huán)境。這些微型器官可以從患者的細(xì)胞培養(yǎng)而來(lái)，能夠復(fù)制器官的生理和病理特征，為研究人員提供了研究復(fù)雜疾病機(jī)理、藥物篩選和治療方法開發(fā)的新工具。動(dòng)物模型是指各種科學(xué)研究中建立的具有人類疾病模擬表現(xiàn)的動(dòng)物。

15、在本發(fā)明的第六方面，本發(fā)明提出了改變多能干細(xì)胞中第一方面所述的多肽的試劑在制備高純度始發(fā)態(tài)多能干細(xì)胞或原始態(tài)多能干細(xì)胞中的用途。如前所述，所述多肽能夠有效的調(diào)節(jié)多能干細(xì)胞的原始態(tài)和始發(fā)態(tài)，所述多肽的表達(dá)被下調(diào)或者被抑制時(shí)，能夠有效促進(jìn)多能干細(xì)胞轉(zhuǎn)化為原始態(tài)多能干細(xì)胞，尤其是可以將始發(fā)態(tài)多能干細(xì)胞轉(zhuǎn)化為原始態(tài)多能干細(xì)胞，過(guò)表達(dá)所述多肽能夠有效的使得多能干細(xì)胞向始發(fā)態(tài)多能干細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)化，其轉(zhuǎn)化效率能夠達(dá)到100％。由此，可以獲得高純度的狀態(tài)統(tǒng)一的原始態(tài)多能干細(xì)胞或者始發(fā)態(tài)多能干細(xì)胞。

16、根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，上述用途還可以包括下列附加技術(shù)特征中的至少之一：

17、根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，所述改變包括使所述多能干細(xì)胞中的所述多肽過(guò)表達(dá)，或者使所述多能干細(xì)胞中的所述多肽的表達(dá)下調(diào)或抑制。

18、根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，所述試劑為基于shrna、反義核酸、核酶、crispr-cas9、crispr-cpf1和鋅指核酸酶至少之一的試劑。

19、根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，所述試劑還包括所述多肽的過(guò)表達(dá)載體或激動(dòng)劑。

20、根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，所述激動(dòng)劑包括小分子、藥物、酶或激素中的至少之一。

21、根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，通過(guò)使所述多能干細(xì)胞中第一方面所述的多肽過(guò)表達(dá)以制備所述始發(fā)態(tài)多能干細(xì)胞。由此，可以獲得高純度的始發(fā)態(tài)多能干細(xì)胞。

22、根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，通過(guò)下調(diào)或抑制所述多能干細(xì)胞中第一方面所述的多肽的表達(dá)以制備所述原始態(tài)多能干細(xì)胞。由此，可以獲得高純度的原始態(tài)多能干細(xì)胞。

23、根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，所述多能干細(xì)胞包括哺乳動(dòng)物的胚胎干細(xì)胞或誘導(dǎo)多能干細(xì)胞。

24、在本發(fā)明的第七方面，本發(fā)明提出了過(guò)表達(dá)多能干細(xì)胞中第一方面所述的多肽的試劑在制備高純度始發(fā)態(tài)多能干細(xì)胞中的用途。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案的所述多肽能夠有效的使得多能干細(xì)胞向始發(fā)態(tài)多能干細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)化，而且，根據(jù)本技術(shù)的實(shí)施例，轉(zhuǎn)化效率能夠達(dá)到100％，因此，過(guò)表達(dá)第一方面所述的多肽能夠有效的制備高純度始發(fā)態(tài)多能干細(xì)胞。

25、根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，所述試劑包括所述多肽的過(guò)表達(dá)載體或激動(dòng)劑。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以理解，能夠使所述多肽過(guò)表達(dá)的任何不影響所述多能干細(xì)胞存活的試劑均可以使用。

26、根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，所述激動(dòng)劑包括小分子、藥物、酶或激素中的至少之一。

27、根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，所述多能干細(xì)胞包括哺乳動(dòng)物的胚胎干細(xì)胞或誘導(dǎo)多能干細(xì)胞。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以理解，任何具有多能性的細(xì)胞均可以應(yīng)用于此。

28、在本發(fā)明的第八方面，本發(fā)明提出了下調(diào)或抑制多能干細(xì)胞中第一方面所述多肽的表達(dá)的試劑在制備原始態(tài)多能干細(xì)胞中的用途。如前所述，所述多肽能夠有效的調(diào)節(jié)多能干細(xì)胞的原始態(tài)和始發(fā)態(tài)，所述多肽的表達(dá)被下調(diào)或者被抑制時(shí)，能夠有效促進(jìn)多能干細(xì)胞轉(zhuǎn)化為原始態(tài)多能干細(xì)胞，尤其是可以將始發(fā)態(tài)多能干細(xì)胞轉(zhuǎn)化為原始態(tài)多能干細(xì)胞，其轉(zhuǎn)化效率能夠達(dá)到100％。由此，可以獲得高純度的狀態(tài)統(tǒng)一的原始態(tài)多能干細(xì)胞。

29、根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，所述試劑為基于shrna、反義核酸、核酶、crispr-cas9、crispr-cpf1和鋅指核酸酶中至少之一的試劑。

30、根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，所述多能干細(xì)胞包括哺乳動(dòng)物的胚胎干細(xì)胞或誘導(dǎo)多能干細(xì)胞。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以理解，任何具有多能性的哺乳動(dòng)物細(xì)胞均可以應(yīng)用于此。

31、在本發(fā)明的第九方面，本發(fā)明提出了一種制備高純度始發(fā)態(tài)多能干細(xì)胞或者原始態(tài)多能干細(xì)胞的方法。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，所述方法包括：將改變第一方面所述多肽的試劑與多能干細(xì)胞進(jìn)行接觸。如前所述，所述多肽能夠有效的調(diào)節(jié)多能干細(xì)胞的原始態(tài)和始發(fā)態(tài)，所述多肽的表達(dá)被下調(diào)或者被抑制時(shí)，能夠有效促進(jìn)多能干細(xì)胞轉(zhuǎn)化為原始態(tài)多能干細(xì)胞，尤其是可以將始發(fā)態(tài)多能干細(xì)胞轉(zhuǎn)化為原始態(tài)多能干細(xì)胞，過(guò)表達(dá)所述多肽能夠有效的使得多能干細(xì)胞向始發(fā)態(tài)多能干細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)化，其轉(zhuǎn)化效率能夠達(dá)到100％。由此，可以獲得高純度的狀態(tài)統(tǒng)一的原始態(tài)多能干細(xì)胞或者始發(fā)態(tài)多能干細(xì)胞。

32、根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，上述方法還可以包括下列附加技術(shù)特征中的至少之一：

33、根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，所述改變包括使所述多能干細(xì)胞中的所述多肽過(guò)表達(dá)，或者使所述多能干細(xì)胞中的所述多肽的表達(dá)下調(diào)或抑制。

34、根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，所述試劑為基于shrna、反義核酸、核酶、crispr-cas9、crispr-cpf1和鋅指核酸酶中至少之一的試劑。

35、根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，所述試劑還包括所述多肽的過(guò)表達(dá)載體或激動(dòng)劑。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以理解，能夠使所述多肽過(guò)表達(dá)的任何不影響所述多能干細(xì)胞存活的試劑均可以使用。

36、根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，所述激動(dòng)劑包括小分子、藥物、酶或激素中的至少之一。

37、根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，所述方法包括：通過(guò)使所述多能干細(xì)胞中第一方面所述的多肽過(guò)表達(dá)或者將所述多能干細(xì)胞與第一方面所述的多肽進(jìn)行接觸以獲得所述始發(fā)態(tài)多能干細(xì)胞。由此，能夠獲得高純度的始發(fā)態(tài)多能干細(xì)胞。

38、根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，所述方法包括：通過(guò)下調(diào)或抑制所述多能干細(xì)胞中第一方面所述的多肽的表達(dá)以獲得所述原始態(tài)多能干細(xì)胞。由此，能夠獲得高純度的原始態(tài)多能干細(xì)胞。

39、根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，所述多能干細(xì)胞包括哺乳動(dòng)物的胚胎干細(xì)胞或誘導(dǎo)多能干細(xì)胞。

40、在本發(fā)明的第十方面，本發(fā)明提出了一種制備高純度始發(fā)態(tài)多能干細(xì)胞的方法。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，所述方法包括：將第一方面所述的多肽與多能干細(xì)胞進(jìn)行接觸，或者將過(guò)表達(dá)第一方面所述多肽的試劑與所述多能干細(xì)胞進(jìn)行接觸。如前所述，所述多肽能夠有效的調(diào)節(jié)多能干細(xì)胞的原始態(tài)和始發(fā)態(tài)，所述多肽的表達(dá)被上調(diào)或者當(dāng)所述原始態(tài)的多能干細(xì)胞與上述多肽進(jìn)行接觸時(shí)，能夠有效促進(jìn)原始態(tài)的多能干細(xì)胞轉(zhuǎn)化為始發(fā)態(tài)多能干細(xì)胞，由此，可以獲得高純度的狀態(tài)統(tǒng)一的原始態(tài)多能干細(xì)胞。

41、根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，所述試劑包括所述多肽的過(guò)表達(dá)載體或激動(dòng)劑。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以理解，能夠使所述多肽過(guò)表達(dá)的任何不影響所述多能干細(xì)胞存活的試劑均可以使用。

42、根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，所述激動(dòng)劑包括小分子、藥物、酶或激素中的至少之一。

43、根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，所述多能干細(xì)胞包括哺乳動(dòng)物的胚胎干細(xì)胞或誘導(dǎo)多能干細(xì)胞。

44、在本發(fā)明的第十一方面，本發(fā)明提出了一種制備高純度原始態(tài)多能干細(xì)胞的方法。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，所述方法包括：將下調(diào)或抑制第一方面所述多肽表達(dá)的試劑與所述多能干細(xì)胞進(jìn)行接觸。如前所述，所述多肽能夠有效的調(diào)節(jié)多能干細(xì)胞的原始態(tài)和始發(fā)態(tài)，所述多肽的表達(dá)被下調(diào)或者被完全抑制時(shí)，能夠有效促進(jìn)始發(fā)態(tài)多能干細(xì)胞轉(zhuǎn)化為原始態(tài)多能干細(xì)胞，由此，可以獲得高純度的狀態(tài)統(tǒng)一的原始態(tài)多能干細(xì)胞。

45、根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，所述試劑為基于shrna、反義核酸、核酶、crispr-cas9、crispr-cpf1和鋅指核酸酶中至少之一的試劑。

46、根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，所述多能干細(xì)胞包括哺乳動(dòng)物的胚胎干細(xì)胞或誘導(dǎo)多能干細(xì)胞。

47、在本發(fā)明的第十二方面，本發(fā)明提出了第五方面所述的生物模型在篩選治療胚胎著床缺陷相關(guān)疾病的藥物中的用途。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，所述疾病包括先兆流產(chǎn)、習(xí)慣性流產(chǎn)、不孕癥、子宮內(nèi)膜異位癥、子宮內(nèi)膜薄弱癥、子宮內(nèi)膜炎、子宮畸形、卵巢多囊癥和黃體功能不全中的至少之一。如前所述，根據(jù)本發(fā)明實(shí)施方案的多肽能夠有效的調(diào)節(jié)多能干細(xì)胞的原始態(tài)和始發(fā)態(tài)，在胚胎著床中起重要作用，當(dāng)所述生物模型中不表達(dá)或低表達(dá)所述多肽時(shí)，對(duì)于多能干細(xì)胞而言，多能干細(xì)胞會(huì)向原始態(tài)多能干細(xì)胞方向轉(zhuǎn)化，容易產(chǎn)生胚胎著床缺陷，此時(shí)，該生物模型為胚胎著床缺陷相關(guān)的生物模型，可以用于后續(xù)的疾病治療研究或者其他科學(xué)研究中，例如篩選藥物。

48、在本發(fā)明的第十三方面，本發(fā)明提出了第一方面所述的多肽、第二方面所述的核酸、第三方面所述的表達(dá)載體或第四方面所述的重組細(xì)胞在制備藥物中的用途。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，所述藥物用于預(yù)防、緩解和/或治療胚胎著床缺陷相關(guān)疾病。如前所述，根據(jù)本發(fā)明實(shí)施方案的多肽能夠有效的調(diào)節(jié)多能干細(xì)胞的原始態(tài)和始發(fā)態(tài)，所述多肽上述原始態(tài)的多能干細(xì)胞進(jìn)行接觸時(shí)，能夠有效促進(jìn)原始態(tài)的多能干細(xì)胞轉(zhuǎn)化為始發(fā)態(tài)多能干細(xì)胞。

49、原始態(tài)多能干細(xì)胞和始發(fā)態(tài)多能干細(xì)胞是兩種不同的干細(xì)胞狀態(tài)，分別對(duì)應(yīng)于胚胎發(fā)育的不同階段。原始態(tài)多能干細(xì)胞具有更強(qiáng)的可塑性，能夠模擬體內(nèi)植入前胚胎發(fā)育的階段，其為小鼠受精卵形成后的第3.5～4.5天，而始發(fā)態(tài)多能干細(xì)胞則對(duì)應(yīng)于植入后胚胎的發(fā)育階段，其為小鼠受精卵形成后的第5.5～7.5天，原始態(tài)多能干細(xì)胞對(duì)應(yīng)于人受精卵形成后的第6～8天，始發(fā)態(tài)多能干細(xì)胞對(duì)應(yīng)于人受精卵形成后的第11～12天，因此，包含前面所述多肽、核酸、表達(dá)載體或重組細(xì)胞的藥物在胚胎著床中起重要作用。

50、根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，所述疾病包括先兆流產(chǎn)、習(xí)慣性流產(chǎn)、不孕癥、子宮內(nèi)膜異位癥、子宮內(nèi)膜薄弱癥、子宮內(nèi)膜炎、子宮畸形、卵巢多囊癥和黃體功能不全中的至少之一。

51、在本發(fā)明的第十四方面，本發(fā)明提出了一種用于預(yù)防、緩解和/或治療胚胎著床缺陷相關(guān)疾病的藥物。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，所述藥物包含第一方面所述的多肽、第二方面所述的核酸、第三方面所述的表達(dá)載體或第四方面所述的重組細(xì)胞。如前所述，所述多肽能夠有效的調(diào)節(jié)多能干細(xì)胞的始發(fā)態(tài)與原始態(tài)轉(zhuǎn)變，從而有利于胚胎著床，因此，與所述多肽相關(guān)的產(chǎn)品，比如所述核酸、表達(dá)載體、重組細(xì)胞均具有與所述多肽相同的治療作用，更進(jìn)一步地，包含上述產(chǎn)品的藥物也能夠用于胚胎著床缺陷相關(guān)疾病。

52、根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，上述藥物還可以包括下列附加技術(shù)特征中的至少之一：

53、根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，所述藥物包括藥學(xué)上可接受的輔料。

54、根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，所述疾病包括先兆流產(chǎn)、習(xí)慣性流產(chǎn)、不孕癥、子宮內(nèi)膜異位癥、子宮內(nèi)膜薄弱癥、子宮內(nèi)膜炎、子宮畸形、卵巢多囊癥和黃體功能不全中的至少之一。

55、在本發(fā)明的第十五方面，本發(fā)明提出了制劑在制備用于預(yù)防、緩解和/或治療胚胎著床缺陷相關(guān)疾病的藥物中的應(yīng)用。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，所述制劑使第一方面所述的多肽在細(xì)胞中過(guò)表達(dá)。如前所述，所述多肽能夠有效的調(diào)節(jié)多能干細(xì)胞的始發(fā)態(tài)與原始態(tài)轉(zhuǎn)變，從而有利于胚胎著床，因此，能夠使得所述多肽過(guò)表達(dá)相關(guān)的制劑能夠促進(jìn)原始態(tài)多能干細(xì)胞向始發(fā)態(tài)進(jìn)行轉(zhuǎn)化，有利于胚胎著床，因此，所述制劑可以用于胚胎著床缺陷相關(guān)疾病。

56、根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，所述細(xì)胞包括哺乳動(dòng)物的多能干細(xì)胞。

57、根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，所述多能干細(xì)胞包括胚胎干細(xì)胞或誘導(dǎo)多能干細(xì)胞。

58、根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，所述制劑包括所述多肽的過(guò)表達(dá)載體或激動(dòng)劑；

59、根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，所述激動(dòng)劑包括小分子、藥物、酶或激素中的至少之一。

60、在本發(fā)明的第十六方面，本發(fā)明提出了檢測(cè)第一方面所述的多肽或編碼第一方面所述多肽的核酸的試劑在制備試劑盒中的用途。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，所述試劑盒用于檢測(cè)胚胎著床缺陷相關(guān)疾病。如前所述，所述多肽能夠有效的調(diào)節(jié)多能干細(xì)胞的始發(fā)態(tài)與原始態(tài)轉(zhuǎn)變，當(dāng)所述多能干細(xì)胞中不表達(dá)或低表達(dá)所述多肽時(shí)，多能干細(xì)胞會(huì)向原始態(tài)多能干細(xì)胞方向轉(zhuǎn)化，例如，由始發(fā)態(tài)多能干細(xì)胞向原始態(tài)多能干細(xì)胞轉(zhuǎn)化，當(dāng)所述多能干細(xì)胞中過(guò)表達(dá)所述多肽時(shí)，多能干細(xì)胞會(huì)向始發(fā)態(tài)進(jìn)行轉(zhuǎn)化，例如，由原始態(tài)多能干細(xì)胞向始發(fā)態(tài)多能干細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)化。因此，檢測(cè)第一方面所述的多肽或與其相關(guān)的產(chǎn)品，例如核酸的試劑，能夠有效的對(duì)多能干細(xì)胞的狀態(tài)進(jìn)行判斷，該試劑盒可以用于科學(xué)研究，例如研究細(xì)胞、組織中的所述多肽或核酸的表達(dá)水平變化，或者對(duì)其進(jìn)行定性或定量檢測(cè)。

61、根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，所述胚胎著床缺陷相關(guān)疾病包括先兆流產(chǎn)、習(xí)慣性流產(chǎn)、不孕癥、子宮內(nèi)膜異位癥、子宮內(nèi)膜薄弱癥、子宮內(nèi)膜炎、子宮畸形、卵巢多囊癥和黃體功能不全中的至少之一。

62、根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，所述試劑包括針對(duì)所述多肽或編碼所述多肽的核酸的抗體、探針、引物及質(zhì)譜檢測(cè)試劑。

63、在本發(fā)明的第十七方面，本發(fā)明提出了一種試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包含檢測(cè)第一方面所述多肽，或者編碼第一方面所述多肽的核酸的試劑。本發(fā)明的試劑盒能夠與所述多肽進(jìn)行特異性結(jié)合，可有效檢測(cè)所述多肽，或者檢測(cè)編碼所述多肽的核酸，從而對(duì)待檢測(cè)樣品中細(xì)胞的狀態(tài)或者是否患病進(jìn)行確定。

64、根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，所述試劑盒包含檢測(cè)第一方面所述多肽的抗體。

65、根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，所述試劑盒還包括擴(kuò)增編碼第一方面所述多肽的核酸的探針、引物和/或質(zhì)譜檢測(cè)試劑。所述試劑盒可以檢測(cè)編碼所述多肽的核酸，本領(lǐng)域技術(shù)人員可知，在檢測(cè)核酸序列時(shí)，需要所述核酸相對(duì)應(yīng)的引物對(duì)所述核酸序列進(jìn)行擴(kuò)增。

66、本技術(shù)的有益效果至少在于：

67、(1)本技術(shù)所述多肽(lin28b?uorf編碼的微蛋白85aa/87aa-uorf，人中為87aa，鼠中為85aa)能夠接近100％的高效調(diào)控多能干細(xì)胞的原始態(tài)和始發(fā)態(tài)，當(dāng)所述多能干細(xì)胞中不表達(dá)或低表達(dá)所述多肽時(shí)，多能干細(xì)胞會(huì)向原始態(tài)多能干細(xì)胞方向轉(zhuǎn)化，例如，由始發(fā)態(tài)多能干細(xì)胞向原始態(tài)多能干細(xì)胞轉(zhuǎn)化，當(dāng)所述多能干細(xì)胞中過(guò)表達(dá)所述多肽時(shí)，多能干細(xì)胞會(huì)向始發(fā)態(tài)進(jìn)行轉(zhuǎn)化，例如，由原始態(tài)多能干細(xì)胞向始發(fā)態(tài)多能干細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)化，從而獲得均一化的原始態(tài)或始發(fā)態(tài)的多能干細(xì)胞；

68、(2)原始態(tài)多能干細(xì)胞和始發(fā)態(tài)多能干細(xì)胞是兩種不同的干細(xì)胞狀態(tài)，分別對(duì)應(yīng)于胚胎發(fā)育的不同階段。原始態(tài)多能干細(xì)胞具有更強(qiáng)的可塑性，能夠模擬體內(nèi)植入前胚胎發(fā)育的階段，而始發(fā)態(tài)多能干細(xì)胞則對(duì)應(yīng)于植入后胚胎的發(fā)育階段，由于所述多肽能夠調(diào)節(jié)多能干細(xì)胞的原始態(tài)和始發(fā)態(tài)，因此，其在胚胎著床中起重要作用，可在相關(guān)領(lǐng)域進(jìn)行科研學(xué)研究、治療以及診斷應(yīng)用。

69、本發(fā)明的附加方面和優(yōu)點(diǎn)將在下面的描述中部分給出，部分將從下面的描述中變得明顯，或通過(guò)本發(fā)明的實(shí)踐了解到。