本發(fā)明公開一般地涉及結(jié)合至α5β1(α5β1)整合素，包括人α5β1整合素的結(jié)合劑，如抗體，和它們的使用方法。

背景技術(shù)：

1、整合素是結(jié)合胞外基質(zhì)(ecm)組分并調(diào)控細胞粘附、遷移和激活的跨膜蛋白。每個整合素由α和β跨膜整合素亞基組成。在人基因組中有18個α整合素亞基和8個β整合素亞基，并且它們組合以產(chǎn)生23種獨特的雜二聚體整合素。這些雜二聚體通過被稱為“由內(nèi)到外”和“由外到內(nèi)”信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的機制調(diào)控細胞行為。前者中，胞內(nèi)蛋白結(jié)合整合素胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域并穩(wěn)定以高親合力結(jié)合胞外配體的構(gòu)象。然后，通過“由外到內(nèi)”信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，配體結(jié)合的整合素刺激調(diào)控細胞行為的胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)級聯(lián)。

2、α5β1整合素由于其對胞外基質(zhì)(ecm)中fn的高親和力而被稱為纖連蛋白(fn)受體。通過α5β1頭盔(headpiece)中的α和β亞基與fn的iii型重復(fù)中精氨酸-甘氨酸-門冬氨酸(rgd)肽基序之間界面處配體結(jié)合位點介導(dǎo)這種結(jié)合。α5β1整合素結(jié)合其它含rgd的蛋白，如骨橋蛋白和肌原纖維蛋白，以及缺少rgd基序的蛋白，包括cd40l、il-1b和tnf-α轉(zhuǎn)化酶adam-17。與其配體的組織分布一致，通過外周組織和中樞神經(jīng)系統(tǒng)(cns)中多種細胞類型，包括內(nèi)皮細胞、肥大細胞和巨噬細胞譜系(例如，小神經(jīng)膠質(zhì)細胞和血管周圍巨噬細胞)表達α5β1。

3、在α5β1整合素與腫瘤血管生成之間建立了良好的聯(lián)系。另外，已證實α5β1存在在腫瘤細胞上。已表明結(jié)合α5β1的抗體不僅抑制血管生成，而且還有助于殺傷α5β1表達腫瘤細胞。還已證實了α5β1整合素與神經(jīng)炎性疾病，包括多發(fā)性硬化(ms)和肌萎縮性側(cè)索硬化(als)之間的聯(lián)系。已表明結(jié)合至α5β1的抗體改善ms的實驗性自身免疫性腦炎(eae)模型和als的sod1g93a轉(zhuǎn)基因模型中的癥狀。盡管α5β1的表達似乎將使其具有成為抗血管生成和癌癥療法以及神經(jīng)炎性疾病療法中的靶標的潛力，但是使用靶向α5整合素的抗體的臨床成功尚未實現(xiàn)。

4、因此，本領(lǐng)域仍需要可以靶向α5β1整合素以治療、預(yù)防或減輕α5-介導(dǎo)的疾病、病癥或病況，包括涉及表達α5β1的細胞，如腫瘤細胞和巨噬細胞的那些的試劑。

技術(shù)實現(xiàn)思路

0、發(fā)明概述

1、本發(fā)明公開提供了α5β1整合素結(jié)合劑，包括人α5β1整合素結(jié)合劑。這些試劑包括結(jié)合至α5β1整合素的抗體，例如，結(jié)合至α5β1整合素的單特異性或多重特異性(例如，雙重特異性)抗體。在一些實施方式中，這些抗體與具有如本文所描述的(例如，表1-6)重鏈可變區(qū)和輕鏈可變區(qū)的抗體競爭性地與人α5β1整合素結(jié)合。

2、本發(fā)明公開還提供了包含α5β1整合素結(jié)合劑的組合物。在一些實施方式中，這些組合物包括結(jié)合至α5β1整合素的抗體，例如，結(jié)合至α5β1整合素的單特異性或多重特異性(例如，雙重特異性)抗體。在一些實施方式中，這些組合物包括與具有本文所描述的(例如，表1-6)重鏈可變區(qū)和輕鏈可變區(qū)的抗體競爭性地與人α5β1整合素結(jié)合的抗體。

3、本發(fā)明公開還提供了治療、預(yù)防或減輕α5β1整合素-介導(dǎo)的疾病、病癥或病況的方法，包括用α5β1整合素結(jié)合劑或者包含所述試劑，包括α5β1整合素結(jié)合劑的組合物或者包含所述試劑的組合物治療、預(yù)防或減輕所述疾病、病癥或病況的一種或多種癥狀的方法。這些組合物包括結(jié)合至α5β1整合素的抗體，例如，結(jié)合至α5β1整合素的單特異性或多重特異性(例如，雙重特異性)抗體。

1.結(jié)合至整合素α5的抗體或其抗原結(jié)合片段，其中所述抗體或其抗原結(jié)合片段包含：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗體或其抗原結(jié)合片段，其中

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的抗體或其抗原結(jié)合片段，其中

4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的抗體或其抗原結(jié)合片段，其中

5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的抗體或其抗原結(jié)合片段，其中

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗體或其抗原結(jié)合片段，其中

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗體或其抗原結(jié)合片段，其中

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗體或其抗原結(jié)合片段，其中

9.綴合物，其包含根據(jù)權(quán)利要求1-8任一項所述的抗體或其抗原結(jié)合片段，其中所述抗體或其抗原結(jié)合片段綴合或重組融合至診斷試劑、可檢測試劑或治療劑，其中所述治療劑任選地是化療劑、細胞毒素或藥物。

10.多核苷酸，其包含根據(jù)權(quán)利要求1-8任一項所述的抗體或其抗原結(jié)合片段。