本發(fā)明涉及果樹遠(yuǎn)源鑒定，具體說是一種快速鑒定果樹遠(yuǎn)源雜種后代的方法。

背景技術(shù)：

1、果樹遠(yuǎn)源雜種后代指的是通過不同品種或種屬間雜交產(chǎn)生的后代，具有雙親的遺傳特征。這類后代在果樹遺傳改良和品種創(chuàng)新中具有重要意義，可以豐富果樹遺傳資源，提高果實(shí)品質(zhì)、產(chǎn)量和抗逆性，然而，當(dāng)前，果樹遠(yuǎn)源雜種后代的鑒定往往依賴單一鑒定方法，而且鑒定時間較長，傳統(tǒng)方法通常需要幾年甚至十幾年的時間才能得出鑒定結(jié)果，不適合早期篩選，鑒定準(zhǔn)確性較低，傳統(tǒng)方法受到環(huán)境、生長條件等多種因素的影響，導(dǎo)致鑒定結(jié)果具有一定的誤差，無法全面反映雜種后代的遺傳多樣性，傳統(tǒng)方法往往只能揭示部分遺傳特征，難以全面評估雜種后代的遺傳背景，勞動強(qiáng)度大：傳統(tǒng)方法需要大量的人工操作，耗費(fèi)大量時間和精力，對此有必要提出一種快速鑒定果樹遠(yuǎn)源雜種后代的方法。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、針對現(xiàn)有技術(shù)中的問題，本發(fā)明提供了一種快速鑒定果樹遠(yuǎn)源雜種后代的方法。

2、本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是：一種快速鑒定果樹遠(yuǎn)源雜種后代的方法，包括形態(tài)特征鑒定模塊、生理特征鑒定模塊和分子標(biāo)記鑒定模塊。

3、所述形態(tài)特征鑒定模塊通過掃描攝像頭對果樹進(jìn)行形態(tài)掃描，通過觀察果樹的外部形態(tài)，可以初步判斷其遺傳特性，果樹遠(yuǎn)源雜種后代的鑒定，主要通過觀察其形態(tài)特征來進(jìn)行，具體包括果實(shí)形態(tài)特征、樹體形態(tài)特征和生長習(xí)性鑒定三個方面；果實(shí)形態(tài)特征的鑒定是判斷果樹遠(yuǎn)源雜種后代的重要方法之一，不同品種的果樹，其果實(shí)大小、形狀、顏色、皮紋等都有明顯的差異，通過對雜種后代的果實(shí)進(jìn)行觀察和比較，可以初步判斷其親本來源，例如，可以將果實(shí)的各個形態(tài)特征與已知親本進(jìn)行比對，計(jì)算其相似度，從而推斷雜種后代的遺傳背景；

4、其次，樹體形態(tài)特征的鑒定也是判斷果樹遠(yuǎn)源雜種后代的重要手段，樹體的形態(tài)特征包括樹形、葉形、花色等，這些特征在很大程度上受到遺傳因素的影響，通過對雜種后代的樹體形態(tài)特征進(jìn)行觀察和比較，可以進(jìn)一步驗(yàn)證其遺傳特性，例如，可以觀察雜種后代的樹形是否介于親本之間，葉形是否呈現(xiàn)出親本的特征，花色是否發(fā)生了變化等；

5、最后，生長習(xí)性的鑒定對于判斷果樹遠(yuǎn)源雜種后代也具有一定的參考價(jià)值。生長習(xí)性包括生長速度、適應(yīng)性、抗病性等，這些特征往往受到親本遺傳特性的影響，通過對雜種后代的生長習(xí)性進(jìn)行觀察和比較，可以間接了解其遺傳特性，例如，可以比較雜種后代與親本在生長速度、適應(yīng)性等方面的相似度，從而推斷其遺傳背景，從而初步推可以較為準(zhǔn)確地判斷果樹遠(yuǎn)源雜種后代的遺傳特性，作為初步判斷依據(jù)。

6、所述生理特診鑒定模塊通過記錄儀器對植株生長進(jìn)行記錄，存儲植株生理數(shù)據(jù)，通過測定果樹的一些生理指標(biāo)，進(jìn)一步判斷其遺傳特性，果樹遠(yuǎn)源雜種后代的鑒定不僅需要形態(tài)學(xué)、分子標(biāo)記等方法，還需要通過生理特性鑒定來進(jìn)一步驗(yàn)證，生理指標(biāo)的測定與分析、果實(shí)品質(zhì)鑒定和抗逆性鑒定是其中三個主要方面，首先，生理指標(biāo)的測定與分析是評估果樹遠(yuǎn)源雜種后代生理狀態(tài)的重要方法，通過測定樹高、地徑、葉面積等生長指標(biāo)，可以了解雜種后代的生長狀況。此外，還可以測定光合速率、呼吸速率等生理參數(shù)，以評估其生理功能，這些指標(biāo)的測定與分析有助于了解雜種后代的生理適應(yīng)性，從而為其栽培管理和繁殖策略提供依據(jù)；

7、其次，果實(shí)品質(zhì)鑒定是評價(jià)果樹遠(yuǎn)源雜種后代經(jīng)濟(jì)價(jià)值的關(guān)鍵，可以通過測定果實(shí)大小、形狀、顏色等外觀指標(biāo)，以及可溶性固形物、維生素c含量、酸度等內(nèi)在品質(zhì)指標(biāo)來評估果實(shí)品質(zhì)，此外，還可以評估果實(shí)的口感、風(fēng)味等感官特性，通過果實(shí)品質(zhì)鑒定，可以篩選出具有優(yōu)良性狀的雜種后代，為果樹產(chǎn)業(yè)的發(fā)展提供優(yōu)質(zhì)資源；

8、最后，抗逆性鑒定是評估果樹遠(yuǎn)源雜種后代適應(yīng)性的重要方面，抗逆性包括抗寒、抗旱、抗病等能力，可以通過人工模擬逆境條件，如低溫、干旱等，觀察雜種后代的生長狀況和生理響應(yīng)，以評估其抗逆性，此外，還可以利用分子標(biāo)記技術(shù)檢測雜種后代的抗逆相關(guān)基因表達(dá)，以深入了解其抗逆機(jī)制，抗逆性鑒定有助于篩選出適應(yīng)性強(qiáng)的雜種后代，提高果樹產(chǎn)業(yè)的穩(wěn)定性，通過生理指標(biāo)的測定與分析、果實(shí)品質(zhì)鑒定和抗逆性鑒定，可以全面評估果樹遠(yuǎn)源雜種后代的生理特性。

9、所述分子標(biāo)記鑒定模塊包括pcr分子標(biāo)記模塊和dna鑒定模塊，分別對果樹進(jìn)行dna提取、分子標(biāo)記和電泳分析對果樹進(jìn)行完整鑒定；所述pcr分子標(biāo)記模塊通過對果樹dna進(jìn)行短時間擴(kuò)增，從而利用生物體外擴(kuò)增特定dna序列進(jìn)行鑒定，通過設(shè)計(jì)特定的引物，pcr技術(shù)可以在短時間內(nèi)大量擴(kuò)增目標(biāo)dna片段，從而便于后續(xù)的檢測和分析，在果樹遠(yuǎn)源雜種后代的鑒定中，可以利用pcr技術(shù)擴(kuò)增特定的dna標(biāo)記位點(diǎn)，通過電泳分析其擴(kuò)增產(chǎn)物的大小，從而判斷雜種后代的遺傳背景；

10、所述dna鑒定模塊通過對生物體的基因組dna進(jìn)行測序，分析其序列信息來鑒定遺傳特征進(jìn)行果樹鑒定，基于dna測序的鑒定方法是通過對生物體的基因組dna進(jìn)行測序，分析其序列信息來鑒定遺傳特征，隨著高通量測序技術(shù)的發(fā)展，基于dna測序的鑒定方法在果樹遠(yuǎn)源雜種后代的鑒定中得到了廣泛應(yīng)用，通過測序分析雜種后代的基因組，可以精確地判斷其遺傳背景，包括父本和母本的遺傳貢獻(xiàn)；所述形態(tài)特征鑒定模塊、生理特征鑒定模塊和分子標(biāo)記鑒定模塊通過對果樹的形態(tài)數(shù)據(jù)、生理數(shù)據(jù)和分子數(shù)據(jù)進(jìn)行快速混合，增加果樹遠(yuǎn)源的整體鑒定效率。

11、一種快速鑒定果樹遠(yuǎn)源雜種后代的方法的使用方法，包括以下步驟：

12、s1：當(dāng)需要對外部果樹進(jìn)行遠(yuǎn)源鑒定的時候，通過形態(tài)特征鑒定模塊中的掃描攝像頭對果樹進(jìn)行形態(tài)掃描，通過觀察果樹的外部形態(tài)，如樹葉、果實(shí)、花朵特征，并將觀測的數(shù)據(jù)進(jìn)行記錄；

13、s2：通過生理特診鑒定模塊配合記錄儀器對植株生長進(jìn)行記錄，存儲植株生理數(shù)據(jù)，通過測定果樹的一些生理指標(biāo)，光合速率、呼吸速率、營養(yǎng)元素含量，進(jìn)一步判斷其遺傳特性，輔助后期進(jìn)行數(shù)據(jù)準(zhǔn)備；

14、s3：此時準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)植物材料，選擇具有代表性的果樹遠(yuǎn)源雜種后代樣本，包括父本、母本和雜種后代，確保樣本新鮮，無病蟲害；然后準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)試劑，包括dna提取試劑盒、pcr擴(kuò)增試劑盒、dna分子量標(biāo)準(zhǔn)品、瓊脂糖；實(shí)驗(yàn)儀器，包括pcr擴(kuò)增儀、凝膠成像系統(tǒng)、高速離心機(jī)、dna電泳儀；

15、s4：按照dna提取試劑盒說明書操作，從準(zhǔn)備的樣品果樹葉片中提取基因組dna,使用紫外分光光度計(jì)檢測提取的dna濃度和純度,選取果樹特異性dna片段，設(shè)計(jì)引物，進(jìn)行pcr擴(kuò)增,反應(yīng)體系為：dna模板1μl，上、下游引物各1μl，dna聚合酶混合液25μl，加ddh2o至50μl,反應(yīng)條件為94℃預(yù)變性5分鐘；94℃變性30秒，55℃退火30秒，72℃延伸30秒，共35個循環(huán)；72℃延伸10分鐘，上述操作完成后進(jìn)行dna分子標(biāo)記，將pcr擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行dna分子標(biāo)記分析，使用凝膠成像系統(tǒng)記錄結(jié)果，根據(jù)形態(tài)數(shù)據(jù)、生理數(shù)據(jù)和分子數(shù)據(jù)進(jìn)行鑒定使用。

16、本發(fā)明的有益效果：

17、本發(fā)明所述的一種快速鑒定果樹遠(yuǎn)源雜種后代的方法，通過設(shè)置形態(tài)特征鑒定模塊、生理特征鑒定模塊和分子標(biāo)記鑒定模塊通過對不同果樹遠(yuǎn)源雜種后代樣本的pcr擴(kuò)增，觀察到清晰、穩(wěn)定的條帶，表明所選分子標(biāo)記適用于果樹遠(yuǎn)源雜種后代的鑒定，對比父本、母本和雜種后代的基因型，可以準(zhǔn)確判斷果樹遠(yuǎn)源雜種后代的基因型，通過快速鑒定，育種者可以早期篩選出具有優(yōu)良性狀的遠(yuǎn)源雜種后代，提高育種效率，有助于了解雜種后代的遺傳背景，為后續(xù)的遺傳改良和品種選育提供有力支持，而且快速鑒定方法可以降低育種成本，縮短育種周期。