本發(fā)明屬于微生物菌肥，具體涉及一種防治毛酸漿黑桿病的微生物菌劑及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)：

0、技術(shù)背景

1、毛酸漿(physalispubescens?l.)是茄科(solanaceae)酸漿屬(physalis)一年生草本植物，主要栽培種產(chǎn)區(qū)在我國東北三省及內(nèi)蒙古地區(qū)，生長期較短。成熟時漿果色澤金黃，口感清脆，果實外圍被囊狀花萼包裹，果實含黃酮類、甾體類、苯丙素類、生物堿類、脂肪酸類等多種化學(xué)成分，具有抗腫瘤、抗菌、抗氧化、降血壓、預(yù)防動脈硬化等多種藥理活性。因長期連作，毛酸漿發(fā)生的病害主要有灰霉病、根腐病、黑桿病、葉斑病、黃萎病等，其中黑桿病導(dǎo)致毛酸漿減產(chǎn)最為嚴重，不易防治且連年發(fā)生。該病在吉林、黑龍江等毛酸漿主栽培地5、6月份為高發(fā)期，其主要危害植株莖和葉，影響植株整體生長和果實產(chǎn)量。發(fā)病時莖稈變黑變軟，葉片出現(xiàn)水漬狀斑點，從下到上葉片逐漸變黃萎蔫，底部主莖變黑，致使果實大減產(chǎn)且逐年加重。

2、毛酸漿黑桿病的主要病原菌為鏈格孢菌(alternaria?alternata)，目前尚未有對毛酸漿黑桿病防治的報道，在防治黑桿病時農(nóng)戶常用三唑類殺菌劑如肟菌·戊唑醇、氟唑菌酰胺等，使用易產(chǎn)生殘留且效果不佳，亟需尋找更為有效且環(huán)保的防治手段。

3、綠色木霉(trichoderma?viride)屬于肉座菌科(hypocreaceae)、木霉屬(trichoderma)的真菌，常腐生于木材、種子及植物殘體上，廣泛存在于不同土壤環(huán)境中，是一種高效生防菌和促生菌，被廣泛應(yīng)用于生物肥料及土壤改良劑中。草酸青霉(penicillium?oxalicum)屬半知菌綱(fungi?imperficti)、殼霉目(sphaeropsidales)、杯霉科(discellaceae)，該菌生長速度快，菌落呈綠色絨狀，且具有濃密孢子塊，是一種常見的土壤真菌，具有促進植物生長、解磷等作用。

4、綠色木霉和草酸青霉具有促進植物生長和解磷等作用，目前綠色木霉和草酸青霉主要用于土壤重金屬生物降解領(lǐng)域，未見有文獻和專利報道有關(guān)綠色木霉和草酸青霉聯(lián)用在制備防治毛酸漿黑桿病藥物中應(yīng)用。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、針對現(xiàn)有防治毛酸漿黑桿病采用化學(xué)藥劑防治存在農(nóng)藥殘留及防治效果不佳的問題，未見有文獻和專利報道有關(guān)綠色木霉和草酸青霉聯(lián)用在制備防治毛酸漿黑桿病藥物中應(yīng)用的技術(shù)現(xiàn)狀，本發(fā)明旨在于提供一種防治毛酸漿黑桿病的微生物菌劑及其制備方法和應(yīng)用。

2、為了達到以上技術(shù)效果，本發(fā)明通過如下技術(shù)方案實現(xiàn)。

3、本發(fā)明提供一種防治毛酸漿黑桿病的微生物菌劑，所述微生物菌劑包括草酸青霉(penicillium?oxalicum)和綠色木霉(trichoderma?viride)菌液；所述草酸青霉(penicillium?oxalicum)和綠色木霉(trichoderma?viride)菌液的質(zhì)量比為1～5:1～5。

4、所述微生物菌劑可以是水劑、懸浮劑和可濕性粉劑中任意一種。

5、進一步地，上述草酸青霉(penicillium?oxalicum)和綠色木霉(trichodermaviride)菌液的質(zhì)量比為2:1。

6、上述防治毛酸漿黑桿病的微生物菌劑的制備方法，包括：將保存的草酸青霉(penicillium?oxalicum)和綠色木霉(trichoderma?viride)分別活化，將活化后的菌按質(zhì)量比1～5:1～5混合于發(fā)酵培養(yǎng)基發(fā)酵，獲得防治毛酸漿黑桿病的微生物菌劑。

7、所述活化培養(yǎng)基為：馬鈴薯200g/l，葡萄糖20g/l，瓊脂15～20g/l，ddh2o1000ml，ph＝5.6±0.2。

8、所述活化培養(yǎng)條件為28℃，培養(yǎng)5d～7d。

9、所述發(fā)酵培養(yǎng)基為馬鈴薯200g/l，葡萄糖20g/l，ddh2o?1000ml，ph＝5.6±0.2。

10、所述發(fā)酵條件為：發(fā)酵溫度為26℃～28℃，160r/min，培養(yǎng)6d～8d。

11、上述防治毛酸漿黑桿病的微生物菌劑在制備防治毛酸漿黑桿病藥物中的應(yīng)用。

12、上述防治毛酸漿黑桿病的微生物菌劑在毛酸漿促生中的應(yīng)用。

13、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明取得以下技術(shù)效果：

14、本發(fā)明提供的防治毛酸漿黑桿病的微生物菌劑，該微生物菌劑結(jié)合了草酸青霉和綠色木霉兩種生防菌，將草酸青霉和綠色木霉按照質(zhì)量比為2:1進行混合發(fā)酵獲得的微生物菌劑，抑菌效果最佳，病原菌鏈格孢菌菌落直徑顯著減小(4.47cm)，抑菌率達到53.03％；能夠有效抑制黑桿病病原菌鏈格孢菌的生長，盆栽實驗結(jié)果表明該微生物制劑對毛酸漿黑桿病的防治效果達到了92.26％，相對于市售的微生物制劑“普方生物制劑”和化學(xué)殺菌劑而言，顯著減少了毛酸漿黑桿病的發(fā)生，且無農(nóng)藥殘留，對環(huán)境友好；此外，經(jīng)本發(fā)明微生物菌劑處理，植物促生效果顯著，毛酸漿植株生物量指標(biāo)提升，在地上鮮重、株高、莖粗等指標(biāo)上表現(xiàn)最佳，表明本發(fā)明提供的微生物菌劑在抑菌效果和促生效果上均表現(xiàn)出了顯著的優(yōu)勢，且具有良好的環(huán)保性和生物安全性。

15、本發(fā)明提供的防治毛酸漿黑桿病的微生物菌劑的制備，操作簡便，易于在工業(yè)化生產(chǎn)中實現(xiàn)，確保了微生物的高效生長和代謝產(chǎn)物的積累，提高了菌劑的質(zhì)量和穩(wěn)定性，該微生物菌劑的原料來源于自然，不僅可用于防治毛酸漿黑桿病，還可推廣到其他作物的病害防治和生長促進中，具有廣泛的應(yīng)用前景。

技術(shù)特征：

1.一種防治毛酸漿黑桿病的微生物菌劑，其特征在于，所述微生物菌劑包括草酸青霉(penicillium?oxalicum)和綠色木霉(trichoderma?viride)菌液；所述草酸青霉(penicillium?oxalicum)和綠色木霉(trichoderma?viride)菌液的質(zhì)量比為1～5:1～5。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種防治毛酸漿黑桿病的微生物菌劑，其特征在于，所述微生物菌劑可以是水劑、懸浮劑和可濕性粉劑中任意一種。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種防治毛酸漿黑桿病的微生物菌劑，其特征在于，所述草酸青霉(penicillium?oxalicum)和綠色木霉(trichoderma?viride)菌液的質(zhì)量比為2:1。

4.根據(jù)權(quán)利要求1任意一項所述的一種防治毛酸漿黑桿病的微生物菌劑的制備方法，其特征在于，包括：將保存的草酸青霉(penicillium?oxalicum)和綠色木霉(trichodermaviride)分別活化，將活化后的菌按質(zhì)量比1～5:1～5混合于發(fā)酵培養(yǎng)基發(fā)酵，獲得防治毛酸漿黑桿病的微生物菌劑。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述一種防治毛酸漿黑桿病的微生物菌劑的制備方法，其特征在于，所述活化培養(yǎng)基為：馬鈴薯200g/l，葡萄糖20g/l，瓊脂15～20g/l，ddh2o?1000ml，ph＝5.6±0.2。

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述一種防治毛酸漿黑桿病的微生物菌劑的制備方法，其特征在于，所述活化培養(yǎng)條件為28℃，培養(yǎng)5d～7d。

7.根據(jù)權(quán)利要求4所述一種防治毛酸漿黑桿病的微生物菌劑的制備方法，其特征在于，所述發(fā)酵培養(yǎng)基為馬鈴薯200g/l，葡萄糖20g/l，ddh2o?1000ml，ph＝5.6±0.2。

8.根據(jù)權(quán)利要求4所述一種防治毛酸漿黑桿病的微生物菌劑的制備方法，其特征在于，所述發(fā)酵條件為：發(fā)酵溫度為26℃～28℃，160r/min，培養(yǎng)6d～8d。

9.根據(jù)權(quán)利要求1～4任意一項所述的一種防治毛酸漿黑桿病的微生物菌劑在制備防治毛酸漿黑桿病藥物中的應(yīng)用。

10.根據(jù)權(quán)利要求1～4任意一項所述的一種防治毛酸漿黑桿病的微生物菌劑在毛酸漿促生中的應(yīng)用。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種防治毛酸漿黑桿病的微生物菌劑及其制備和應(yīng)用，屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。該微生物菌劑結(jié)合了草酸青霉和綠色木霉兩種生防菌，將草酸青霉和綠色木霉按照最優(yōu)質(zhì)量比為2:1進行混合發(fā)酵獲得的微生物菌劑，能夠有效抑制黑桿病病原菌鏈格孢菌的生長，對毛酸漿黑桿病的防治效果達到了92.26％，相對于市售的微生物制劑“普方生物制劑”和化學(xué)殺菌劑而言，顯著減少了毛酸漿黑桿病的發(fā)生，而且，經(jīng)本發(fā)明微生物菌劑處理，植物促生效果顯著，毛酸漿植株生物量指標(biāo)提升，在地上鮮重、株高、莖粗等指標(biāo)上表現(xiàn)最佳。結(jié)果表明本發(fā)明提供的微生物菌劑在抑菌效果和促生效果上均表現(xiàn)出了顯著的優(yōu)勢，且具有良好的環(huán)保性和生物安全性。

技術(shù)研發(fā)人員：魏希穎,梁煜,宋樂山,王恪培,李江
受保護的技術(shù)使用者：陜西師范大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/11/4