本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥技術(shù)以及腫瘤診斷，具體涉及ap2s1作為膀胱癌生物標(biāo)志物及其應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、膀胱癌發(fā)病率在我國(guó)泌尿系惡性腫瘤居首且發(fā)病率仍逐年增加，膀胱癌主要的組織學(xué)亞型是尿路上皮癌，占所有膀胱腫瘤的90%，其余為鱗狀細(xì)胞癌、腺癌或神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤。根據(jù)浸潤(rùn)程度，膀胱癌被分為已經(jīng)擴(kuò)散或穿過(guò)逼尿肌的肌肉浸潤(rùn)性膀胱癌（mibc）或僅限于粘膜或粘膜下結(jié)締組織的非肌肉浸潤(rùn)性膀胱癌（nmibc），分別約占新診斷膀胱癌患者的25%和75%。非肌肉浸潤(rùn)性膀胱癌復(fù)發(fā)率高、易進(jìn)展，在經(jīng)尿道膀胱腫瘤切除術(shù)和膀胱內(nèi)化療或卡介苗灌注后，大于50%的患者可能會(huì)復(fù)發(fā)。盡管接受局部治療，10-40%?的高危非肌肉浸潤(rùn)性膀胱癌最終也可能進(jìn)展為肌肉浸潤(rùn)性膀胱癌，導(dǎo)致生存率甚至低于新發(fā)肌肉浸潤(rùn)性膀胱癌的生存率（5?年總生存率分別為?37%?和?49%）。肌肉浸潤(rùn)性膀胱癌患者預(yù)后較差（5年總生存率<50%），在過(guò)去幾十年中沒(méi)有實(shí)質(zhì)性改善。進(jìn)展為轉(zhuǎn)移性腫瘤并定植于遠(yuǎn)處器官的晚期膀胱癌治療手段有限且療效欠佳，由于膀胱癌需要長(zhǎng)時(shí)間的強(qiáng)化治療和監(jiān)測(cè)，給患者衛(wèi)生保健系統(tǒng)帶來(lái)了相當(dāng)大的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，這是一個(gè)重大的臨床挑戰(zhàn)。

2、膀胱癌的早期發(fā)現(xiàn)和治療，是提高患者的生存率的有效手段。因此，尋找一種早期診斷膀胱癌的方法對(duì)膀胱癌的控制和干預(yù)具有重要意義。但現(xiàn)有的膀胱癌腫瘤標(biāo)志物存在敏感度和特異性無(wú)法達(dá)到期望值，單一標(biāo)志物診斷有限等問(wèn)題。因此，尋找一種特異性高、靈敏度好、可用于膀胱癌診斷和預(yù)后判斷的新標(biāo)志物，具有極大的臨床價(jià)值和研究意義。

3、ap2s1是編碼網(wǎng)格蛋白相關(guān)接頭復(fù)合物ap2sigma?1亞基的基因，該亞基對(duì)于網(wǎng)格蛋白介導(dǎo)的質(zhì)膜成分（例如鈣敏感受體）的內(nèi)吞作用至關(guān)重要。據(jù)報(bào)道，鈣信號(hào)傳導(dǎo)可調(diào)節(jié)細(xì)胞因子釋放和腫瘤生長(zhǎng)，但ap2s1在膀胱癌診斷中的作用尚未有報(bào)道。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供了ap2s1基因作為膀胱癌診治靶標(biāo)的應(yīng)用，該ap2s1基因可用于作為診斷膀胱癌分子標(biāo)記物。

2、具體技術(shù)方案如下：

3、本發(fā)明提供了一種膀胱癌腫瘤標(biāo)志物ap2s1及其應(yīng)用，ap2s1基因的編碼序列為seq?id?no?.1所示的dna序列。

4、本發(fā)明通過(guò)tcga數(shù)據(jù)庫(kù)及geo數(shù)據(jù)庫(kù)分析發(fā)現(xiàn)，ap2s1在膀胱癌組織中顯著上調(diào)，同時(shí)在病理分級(jí)較高的病人癌組織中的表達(dá)進(jìn)一步升高，且生存曲線分析發(fā)現(xiàn)ap2s1表達(dá)量與病人的總體生存期(os)及無(wú)病生存期(dfs)呈負(fù)相關(guān)。

5、本發(fā)明通過(guò)臨床標(biāo)本分析發(fā)現(xiàn)，膀胱癌組織中ap2s1?mrna及蛋白水平顯著高于相對(duì)應(yīng)的癌旁組織。

6、本發(fā)明特異性檢測(cè)ap2s1基因或其表達(dá)產(chǎn)物的試劑可用于制備診斷早期膀胱癌的產(chǎn)品，該產(chǎn)品能通過(guò)檢測(cè)ap2s1基因的表達(dá)水平來(lái)診斷是否患膀胱癌。

7、進(jìn)一步地，所述試劑包括通過(guò)rt-pcr、實(shí)時(shí)定量pcr、免疫檢測(cè)、原位雜交或芯片檢測(cè)ap2s1基因或其表達(dá)產(chǎn)物的表達(dá)水平的試劑。通過(guò)rt-pcr、實(shí)時(shí)定量pcr檢測(cè)ap2s1基因或其表達(dá)產(chǎn)物的表達(dá)水平的試劑還包括特異擴(kuò)增ap2s1基因的正向引物和反向引物，正向引物的序列如seq?id?no.2所示，反向引物的序列如seq?id?no.3所示。所述產(chǎn)品包括檢測(cè)芯片或試劑盒。

8、本發(fā)明還提供了ap2s1作為靶標(biāo)在制備治療膀胱癌藥物中的應(yīng)用。

9、進(jìn)一步地，所述治療膀胱癌的藥物包括ap2s1基因和/或其表達(dá)產(chǎn)物的抑制劑；所述抑制劑為抑制ap2s1基因表達(dá)的試劑、或抑制ap2s1基因表達(dá)產(chǎn)物穩(wěn)定性的試劑、或降低ap2s1基因表達(dá)產(chǎn)物活性的試劑、或抑制ap2s1基因表達(dá)產(chǎn)物功能的試劑；所述抑制ap2s1基因表達(dá)的試劑為抑制ap2s1基因轉(zhuǎn)錄的試劑、或抑制ap2s1基因翻譯的試劑、或抑制ap2s1蛋白含量的試劑。

10、本發(fā)明的有益效果：

11、本發(fā)明發(fā)現(xiàn)了一種對(duì)膀胱癌進(jìn)行診斷和預(yù)后判斷的分子標(biāo)記物ap2s1，具有高特異性、高靈敏度，使用該分子標(biāo)記物可以對(duì)膀胱癌的發(fā)生和預(yù)后效果進(jìn)行判斷，同時(shí)聯(lián)合其它腫瘤標(biāo)志物可為膀胱癌的診斷和治療提供新的策略。此外，本發(fā)明為研發(fā)以ap2s1基因及其表達(dá)產(chǎn)物為診治靶標(biāo)的抗膀胱癌的新藥或新技術(shù)提供了依據(jù)。

技術(shù)特征：

1.檢測(cè)ap2s1標(biāo)志物表達(dá)水平的試劑在制備膀胱癌診斷或/和預(yù)后預(yù)測(cè)產(chǎn)品中的應(yīng)用，其特征在于：ap2s1的核苷酸序列如seq?id?no?.1所示。

2.如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于：所述ap2s1在膀胱癌組織中的表達(dá)水平高于癌旁組織。

3.如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于：所述試劑包括通過(guò)rt-pcr、實(shí)時(shí)定量pcr、免疫檢測(cè)、原位雜交或芯片檢測(cè)ap2s1基因或其表達(dá)產(chǎn)物的表達(dá)水平的試劑。

4.如權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于：通過(guò)rt-pcr、實(shí)時(shí)定量pcr檢測(cè)ap2s1基因或其表達(dá)產(chǎn)物的表達(dá)水平的試劑包括特異擴(kuò)增ap2s1基因的正向引物和反向引物，正向引物的序列如seq?id?no.2所示，反向引物的序列如seq?id?no.3所示。

5.如權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于：ap2s1基因的表達(dá)產(chǎn)物為ap2s1?mrna或ap2s1蛋白。

6.如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于：所述產(chǎn)品包括檢測(cè)芯片或試劑盒。

7.ap2s1作為靶標(biāo)在制備治療膀胱癌藥物中的應(yīng)用。

8.如權(quán)利要求7所述的應(yīng)用，其特征在于：所述治療膀胱癌的藥物包括ap2s1基因和/或其表達(dá)產(chǎn)物的抑制劑；所述抑制劑為抑制ap2s1基因表達(dá)的試劑、或抑制ap2s1基因表達(dá)產(chǎn)物穩(wěn)定性的試劑、或降低ap2s1基因表達(dá)產(chǎn)物活性的試劑、或抑制ap2s1基因表達(dá)產(chǎn)物功能的試劑；所述抑制ap2s1基因表達(dá)的試劑為抑制ap2s1基因轉(zhuǎn)錄的試劑、或抑制ap2s1基因翻譯的試劑、或抑制ap2s1蛋白含量的試劑。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥以及腫瘤診斷技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種膀胱癌分子標(biāo)志物及其應(yīng)用，該膀胱癌新腫瘤標(biāo)志物為編碼網(wǎng)格蛋白相關(guān)接頭復(fù)合物AP2sigma?1亞基AP2S1。本發(fā)明通過(guò)生物信息學(xué)分析及臨床驗(yàn)證，探究證實(shí)了AP2S1與膀胱癌具有很好的相關(guān)性，可作為膀胱癌診斷及預(yù)后的一種標(biāo)志物，并作為制備治療膀胱癌藥物的靶標(biāo)，具有重要臨床意義。

技術(shù)研發(fā)人員：楊恩廣,王志平,楊立,董治龍,包軍勝,米軍
受保護(hù)的技術(shù)使用者：蘭州大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/23