本發(fā)明屬于菌類提取物,具體涉及一種桑黃的人工培養(yǎng)方法及桑黃提取物的制備方法和用途。
背景技術(shù):
1、肝病是一種常見的危害性極大的疾病,大量的臨床試驗(yàn)及動(dòng)物研究表明,肝臟中持續(xù)的氧化應(yīng)激對(duì)肝臟疾病的發(fā)生發(fā)展至關(guān)重要,被認(rèn)為是急性和慢性肝病發(fā)病機(jī)制的關(guān)鍵因素。酒精、藥物等因素都是氧化應(yīng)激和ros產(chǎn)生的原因,這些因素可使負(fù)責(zé)ros產(chǎn)生的氧化產(chǎn)物積累,降低cat、sod、gsh-px及gst等抗氧化酶的活性,還可能會(huì)增加errγ和cyp2e1的基因轉(zhuǎn)錄,使脂質(zhì)過氧化水平升高,導(dǎo)致肝臟氧化應(yīng)激,并可能導(dǎo)致肝臟疾病。在氧化應(yīng)激條件下,幾種are基因和酶被激活,抑制氧化應(yīng)激反應(yīng),控制肝臟疾病。
2、桑黃作為一種具有2000多年悠久歷史的中藥,由于其獨(dú)特的藥理作用和較高的安全性,受到了國內(nèi)外學(xué)者的廣泛關(guān)注,多項(xiàng)研究表明桑黃具有抗腫瘤、抗炎、抗傷害和抗氧化等多種活性。大量研究證明,天然植物多糖具有增強(qiáng)肝臟代謝、降低脂質(zhì)過氧化水平和炎癥介質(zhì)表達(dá)、抑制氧化應(yīng)激和組織病理纖維化、誘導(dǎo)肝星狀細(xì)胞凋亡和周期停滯以及提高抗氧化酶活性等作用,可作為保肝劑。liu等人證實(shí),桑黃發(fā)酵液中的胞外多糖通過延長矯正反射持續(xù)時(shí)間、縮短恢復(fù)持續(xù)時(shí)間、降低alt、ast和mda水平,對(duì)小鼠急性肝損傷發(fā)揮保護(hù)作用。chen等人通過降低cyp2e1的表達(dá)和肝臟釋放細(xì)胞因子、提高ii期酶水平、表現(xiàn)出肝臟修復(fù)性能和加速對(duì)乙酰氨基酚的代謝,評(píng)估了分離的桑黃多糖對(duì)小鼠對(duì)乙酰氨基酚刺激的肝損傷的保護(hù)作用,發(fā)現(xiàn)其保肝活性歸因于其抗氧化功能,但對(duì)于桑黃提取物的整體效果研究較少。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、本發(fā)明提供了一種桑黃的人工培養(yǎng)方法及桑黃提取物的制備方法和用途,降低桑黃培養(yǎng)成本,且桑黃提取物具有更高的抗氧化活性,能夠發(fā)揮更好的保肝特性。
2、本發(fā)明提供了一種桑黃的人工培養(yǎng)方法,包括以下步驟:將桑黃接種到液體培養(yǎng)基中進(jìn)行震蕩培養(yǎng),所述震蕩培養(yǎng)的溫度為26~32℃,時(shí)間為7~14d;
3、每l所述液體培養(yǎng)基中包括8~12g玉米秸稈粉和14~18g馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基粉。
4、優(yōu)選的,所述震蕩培養(yǎng)的轉(zhuǎn)速為120~160r/min。
5、本發(fā)明還提供了桑黃提取物的制備方法,包括利用上述人工培養(yǎng)方法培養(yǎng)并干燥的桑黃粉,依次利用體積百分含量為95%的乙醇水溶液和水進(jìn)行超聲輔助提取,合并提取液后離心收集上清液,所述上清液中含桑黃提取物。
6、優(yōu)選的,所述桑黃粉與所述乙醇水溶液和水的質(zhì)量體積比均為0.8~1.5g:100ml;
7、每種提取溶劑均超聲輔助提取3次。
8、優(yōu)選的,每次所述超聲輔助提取的時(shí)間均為1~2h,功率均為180~220w,超聲頻率均為40~60hz,超聲3s間隔1~3s。
9、本發(fā)明還提供了利用上述制備方法得到的桑黃提取物。
10、本發(fā)明還提供了上述桑黃提取物真空冷凍干燥后得到的桑黃提取物干粉。
11、本發(fā)明還提供了上述桑黃提取物或上述桑黃提取物干粉在制備具有肝細(xì)胞損傷保護(hù)作用的食品或藥物中的應(yīng)用。
12、優(yōu)選的,所述肝細(xì)胞損傷保護(hù)作用包括以下至少一種:(1)抗氧化活性;(2)氧化應(yīng)激、炎癥反應(yīng)、細(xì)胞凋亡和線粒體功能障礙的調(diào)節(jié)保護(hù)。
13、本發(fā)明還提供了一種具有肝細(xì)胞損傷保護(hù)作用的食品或藥品,活性成分包括上述桑黃提取物或上述桑黃提取物干粉。
14、有益效果:本發(fā)明提供了一種桑黃的人工培養(yǎng)方法,利用液體培養(yǎng)基對(duì)桑黃進(jìn)行震蕩培養(yǎng),在培養(yǎng)至14d時(shí)即可以進(jìn)行桑黃提取物的制備。本發(fā)明采用人工培養(yǎng)桑黃為原料進(jìn)行制備,相比于野生桑黃顯著降低生產(chǎn)成本,提取后得到桑黃提取物中,經(jīng)檢測含有多糖、黃酮、多酚、三萜等多種活性成分,相較于以往對(duì)于單一組分的研究來說,混合組分能夠發(fā)揮更好的保肝特性,其對(duì)肝細(xì)胞的保護(hù)作用是通過抗氧化性能來實(shí)現(xiàn)的。同時(shí),本發(fā)明制備得到的桑黃提取物還可作為氧化應(yīng)激、炎癥反應(yīng)、細(xì)胞凋亡、線粒體功能障礙的調(diào)節(jié)保護(hù)劑,發(fā)揮肝細(xì)胞保護(hù)特性,為桑黃相關(guān)保肝護(hù)肝產(chǎn)品的開發(fā)奠定基礎(chǔ)。
1.一種桑黃的人工培養(yǎng)方法,其特征在于,包括以下步驟:將桑黃接種到液體培養(yǎng)基中進(jìn)行震蕩培養(yǎng),所述震蕩培養(yǎng)的溫度為26~32℃,時(shí)間為7~14d;
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述人工培養(yǎng)方法,其特征在于,所述震蕩培養(yǎng)的轉(zhuǎn)速為120~160r/min。
3.桑黃提取物的制備方法,其特征在于,包括利用權(quán)利要求1或2所述人工培養(yǎng)方法培養(yǎng)并干燥的桑黃粉,依次利用體積百分含量為95%的乙醇水溶液和水進(jìn)行超聲輔助提取,合并提取液后離心收集上清液,所述上清液中含桑黃提取物。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述制備方法,其特征在于,所述桑黃粉與所述乙醇水溶液和水的質(zhì)量體積比均為0.8~1.5g:100ml;
5.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述制備方法,其特征在于,每次所述超聲輔助提取的時(shí)間均為1~2h,功率均為180~220w,超聲頻率均為40~60hz,超聲3s間隔1~3s。
6.利用權(quán)利要求3~5任一項(xiàng)所述制備方法得到的桑黃提取物。
7.對(duì)權(quán)利要求6所述桑黃提取物真空冷凍干燥后得到的桑黃提取物干粉。
8.權(quán)利要求6所述桑黃提取物或權(quán)利要求7所述桑黃提取物干粉在制備具有肝細(xì)胞損傷保護(hù)作用的食品或藥物中的應(yīng)用。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述應(yīng)用,其特征在于,所述肝細(xì)胞損傷保護(hù)作用包括以下至少一種:(1)抗氧化活性;(2)氧化應(yīng)激、炎癥反應(yīng)、細(xì)胞凋亡和線粒體功能障礙的調(diào)節(jié)保護(hù)。
10.一種具有肝細(xì)胞損傷保護(hù)作用的食品或藥品,其特征在于,活性成分包括權(quán)利要求6所述桑黃提取物或權(quán)利要求7所述桑黃提取物干粉。