本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥，具體涉及chi3l1作為靶點在治療系統(tǒng)性硬化癥中的應用。

背景技術：

1、系統(tǒng)性硬化癥(systemic?sclerosis，ssc)俗稱“硬皮病”，是一種以皮膚及肺等內(nèi)臟多器官纖維化為特點的罕見自身免疫性疾病，因其不可逆的廣泛纖維化使其在所有風濕病中擁有最高的死亡率。據(jù)估計，全球大約有200萬例系統(tǒng)性硬化癥患者，高達90％可能發(fā)展為不同程度的肺部纖維化，而這與極差的預后相關，約占全部死亡病例的35％。

2、長期以來，市場上沒有針對系統(tǒng)性硬化癥的特效治療藥物，臨床主要以治療各器官系統(tǒng)并發(fā)癥和緩解具體癥狀為主。例如使用多種藥劑治療皮膚纖維化，如d-青霉胺，麥考酚酯、秋水仙堿、補骨脂素+紫外線a暴露(puva)、松弛素、環(huán)孢菌素和epa(ω-3油衍生物)等。直到2019年，勃林格殷格翰(boehringer?ingelheim)在研藥物ofev(nintedanib，尼達尼布)在歐盟委員會(ec)和美國食品和藥物管理局(fda)獲批用于治療系統(tǒng)性硬化癥，確定其在治療系統(tǒng)性硬化癥的孤兒藥地位。

3、系統(tǒng)性硬化癥以全身廣泛纖維化為最主要特征，屬于罕見結締組織病，控制甚至逆轉系統(tǒng)性硬化癥纖維化是治療的關鍵目標，但是，目前對于系統(tǒng)性硬化癥中成纖維細胞異?；罨臋C制尚未完全闡明，因此，控制甚至逆轉系統(tǒng)性硬化癥纖維化依然是一個未攻克的技術難題，制備治療系統(tǒng)性硬化癥的藥物依然亟待發(fā)現(xiàn)。

4、chi3l1(chitinase-3-like-1protein，幾丁質酶3樣蛋白1)由多種免疫細胞和結構細胞分泌。大量研究表明，chi3l1在各種炎癥反應、組織重塑和纖維化過程中起著至關重要的作用。本發(fā)明課題組預料不到地發(fā)現(xiàn)chi3l1能夠激活ssc-dfs活化，且chi3l1的缺失或使用chi3l1單抗治療可以使ssc模型小鼠纖維化減輕?；谏鲜龌A研究，本發(fā)明提供一種新的抗系統(tǒng)性硬化癥纖維化的治療思路，同時，為開發(fā)得到治療系統(tǒng)性硬化癥的特效藥物奠定研究基礎。

技術實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的一個目的是提供chi3l1作為生物標志物用于系統(tǒng)性硬化癥的診斷和療效評估；本發(fā)明的第二個目的是提供chi3l1作為靶點在制備治療系統(tǒng)性硬化癥的藥物中的用途，具體的，所述藥物為chi3l1抑制劑，所述藥物能有效控制和/或逆轉系統(tǒng)性硬化癥纖維化。

2、本發(fā)明的目的通過如下技術方案實現(xiàn)：

3、在本發(fā)明的第一方面，本發(fā)明提供一種生物標志物chi3l1和/或檢測chi3l1的物質在如下至少一項中的應用：

4、a1)在制備和/或篩選用于診斷或輔助診斷系統(tǒng)性硬化癥的產(chǎn)品中的應用；

5、a2)在制備和/或篩選用于評估或輔助評估系統(tǒng)性硬化癥治療療效的產(chǎn)品中的應用。

6、所述產(chǎn)品包括但不限于試劑、試劑盒、芯片、試紙、膜條或檢測平臺。

7、所述檢測chi3l1的物質包括通過rtpcr法、rtqpcr法、生物芯片檢測法、dna印跡法、蛋白質印跡法(western?blot)、原位雜交法、免疫組化法(ihc)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(elisa)、空間轉錄組技術檢測chi3l1蛋白表達量或基因表達水平所需的任何試劑。

8、在本發(fā)明的一些實施方案中，所述檢測chi3l1的物質為通過免疫組化法檢測chi3l1蛋白的試劑。

9、在本發(fā)明的一些實施方案中，所述檢測chi3l1的物質為通過蛋白質印跡法(western?blot)檢測chi3l1蛋白的試劑。

10、在本發(fā)明的一些實施方案中，所述檢測chi3l1的物質為通過酶聯(lián)免疫吸附試驗(elisa)檢測chi3l1蛋白的試劑。

11、在本發(fā)明的一些實施方案中，所述檢測chi3l1的物質為檢測與chi3l1蛋白相關的核酸表達量的試劑。所述試劑包括但不限于結合chi3l1蛋白的抗體、多肽、蛋白質或核酸分子。

12、在本發(fā)明的第二方面，本發(fā)明提供一種chi3l1作為靶點在如下至少一項中的應用：

13、b1)在制備和/或篩選用于預防系統(tǒng)性硬化癥的藥物中的應用；

14、b2)在制備和/或篩選用于治療或輔助治療系統(tǒng)性硬化癥的藥物中的應用；

15、b3)在制備和/或篩選用于控制和/或逆轉系統(tǒng)性硬化癥纖維化的藥物中的應用。

16、在本發(fā)明的第三方面，本發(fā)明提供一種chi3l1抑制劑在如下至少一項中的應用：

17、c1)在制備和/或篩選用于預防系統(tǒng)性硬化癥的藥物中的應用；

18、c2)在制備和/或篩選用于治療或輔助治療系統(tǒng)性硬化癥的藥物中的應用；

19、c3)在制備和/或篩選用于控制和/或逆轉系統(tǒng)性硬化癥纖維化的藥物中的應用。

20、在本發(fā)明中，所述chi3l1抑制劑包括降低chi3l1蛋白表達量或chi3l1蛋白含量或蛋白活性的物質，或抑制chi3l1基因表達的物質。所述物質包括但不限于核酸分子、小分子化合物、抗體、多肽、蛋白、基因編輯載體、慢病毒或腺相關病毒中的一種或多種。

21、在本發(fā)明的一些實施方式中，所述chi3l1抑制劑是與chi3l1蛋白結合的分子，如抗體、多肽、小分子中的一種或兩種以上的組合，包括但不限于人源化單克隆抗體、以chi3l1為配體的受體拮抗劑，所述抑制劑能降低chi3l1蛋白含量或活性，或者干擾chi3l1與其受體結合。

22、在本發(fā)明的一些實施方式中，所述chi3l1抑制劑是短發(fā)夾rna(shrna)或小干擾rna(sirna)，所述抑制劑能降低編碼chi3l1蛋白的基因的表達。

23、在本發(fā)明的第四方面，本發(fā)明提供一種藥物組合物，所述藥物組合物中包含有效量的本發(fā)明第三方面所述的chi3l1抑制劑。

24、所述chi3l1抑制劑包括降低chi3l1蛋白表達量或chi3l1蛋白含量或蛋白活性的物質，或抑制chi3l1基因表達的物質。所述物質包括但不限于核酸分子、小分子化合物、抗體、多肽、蛋白、基因編輯載體、慢病毒或腺相關病毒中的一種或多種。

25、在本發(fā)明的一些實施方式中，所述chi3l1抑制劑是與chi3l1蛋白結合的分子，如抗體、多肽、小分子中的一種或兩種以上的組合，所述抑制劑能降低chi3l1蛋白含量或活性，或者干擾chi3l1與其受體結合。

26、在本發(fā)明的一些實施方式中，所述chi3l1抑制劑是短發(fā)夾rna(shrna)或小干擾rna(sirna)，所述抑制劑能降低編碼chi3l1蛋白的基因的表達。

27、在本發(fā)明的一個具體實施方式中，所述chi3l1抑制劑為與chi3l1特異性結合的人源化單克隆抗體。

28、在本發(fā)明的一個具體實施方式中，所述chi3l1抑制劑為以chi3l1為配體的受體拮抗劑。

29、在本發(fā)明的一個具體實施方式中，所述chi3l1抑制劑為抑制chi3l1相關基因表達的小干擾rna(sirna)。

30、進一步的，所述藥物組合物中還包括藥學上可接受的輔料。

31、本發(fā)明所述的“藥學上可接受的”是指物質或組合物必須與包含制劑的其它成分和/或用其治療的哺乳動物化學上和/或毒理學上相容。優(yōu)選的，所述“藥學上可接受的”是指聯(lián)邦監(jiān)管機構或國家政府批準的或美國藥典或其他一般認可藥典上列舉的在動物中、特別是人體中使用的。本發(fā)明所述的藥學上可接受的輔料均可包括任何溶劑、固體賦形劑、稀釋劑或其他液體賦形劑等等，適合于特有的目標劑型。

32、本發(fā)明所述的藥物組合物，可用于疾病的治療，也可用于細胞的體外培養(yǎng)實驗。用于疾病的治療時，藥物組合物通常是指單位劑量形式，并且可以通過制藥領域中熟知的方法的任何一種進行制備。所有的方法包括使活性成分與構成一種或多種附屬成分的輔料相結合的步驟。

33、所述疾病治療是指向有需要的受試者施用治療有效量的本發(fā)明所述的chi3l1抑制劑或藥物組合物。

34、進一步的，所述疾病治療還包括將本發(fā)明所述的chi3l1抑制劑或藥物組合物與其他本領域常規(guī)藥劑或常規(guī)治療方法聯(lián)合施用。

35、本發(fā)明通過科學實驗證實以下結論：1，發(fā)現(xiàn)chi3l1蛋白在ssc患者的皮膚及血清中表達升高，同樣，在博來霉素誘導的ssc小鼠模型的皮膚及血清中也出現(xiàn)表達升高；2，chi3l1重組蛋白能夠刺激ssc-dfs向肌成纖維細胞轉化，增加膠原合成，增加ssc-dfs的遷移及增殖能力；3，在博來霉素誘導的ssc小鼠模型中，通過crispr-cas9基因編輯技術敲除chi3l1基因后，小鼠表現(xiàn)出纖維化程度減輕；4，使用人源化chi3l1單抗對ssc小鼠模型進行治療后出現(xiàn)纖維化程度減輕；5，chi3l1基因的敲除和chi3l1單抗治療不影響組織穩(wěn)態(tài)。

36、所述結果提示chi3l1在促進ssc纖維化發(fā)生過程中有著重要作用，chi3l1可作為生物標志物或靶點用于系統(tǒng)性硬化癥的診斷和治療。并且chi3l1抑制劑可作為有效成分用于治療系統(tǒng)性硬化癥，具體是控制和/或逆轉系統(tǒng)性硬化癥纖維化，具有良好的臨床應用前景。本發(fā)明為治療系統(tǒng)性硬化癥提供新的靶標，為制備抗系統(tǒng)性硬化癥纖維化藥物奠定扎實的研究基礎，以期解決現(xiàn)有技術中缺乏有效的抗系統(tǒng)性硬化癥纖維化治療藥物的問題。